全 文 ：第 ws卷 第 x期
u s s w年 | 月
林 业 科 学
≥≤Œ∞‘׌„ ≥Œ∂ „∞ ≥Œ‘Œ≤„∞
∂²¯1ws o‘²1x
≥ ³¨qou s s w
抗光肩星天牛苏云金芽胞杆菌 …·{{y菌株的分离
及对毒蛋白编码基因的初步鉴定 3
陈 军tl 王学聘wl 卢孟柱xl
k中国林业科学研究院林业研究所 国家林业局林木培育重点实验室 北京 tsss|tl
杜孟芳ul 尹新明vl
k河南农业大学植物保护学院 郑州 wxsssul
摘 要 } 从拟谷盗虫尸中分离到一株对鞘翅目害虫光肩星天牛幼虫毒杀作用明显的 …·菌株 …·{{y ∀幼虫死亡率
高达 ys h o存活者生长明显受到抑制 ∀经过晶体形态特征和杀虫谱分析 o初步确认该菌株属于 χρψv类 ∀比较 χρψv
类基因的保守序列 o利用一对 χρψv特异引物成功地从 …·{{y菌株中克隆到了一段基因片段并克隆至 ³Š∞ p ×载体
上 ∀测序分析发现该片段与 χρψv„¤t基因具有很高的同源性 o确定来自毒蛋白编码基因 ∀ ≥²∏·«¨µ±杂交分析表明该
基因位于该菌株的质粒上 ∀
关键词 } 天牛 o…·菌 o χρψv„基因 o≥²∏·«¨µ±杂交分析
中图分类号 }±z{t 文献标识码 }„ 文章编号 }tsst p zw{{kusswlsx p stv{ p sx
收稿日期 }ussw p sv p s| ∀
基金项目 }国家重点基础研究规划项目k׊t|||stysssl资助 ∀
3 tl !ul !vl !wl !xl为作者排序 o卢孟柱为通讯作者 ∀感谢戴莲韵 !王瑛两位先生在菌株筛选及生测工作上的指导和支持 ∀
Σελεχτιον οφ Βαχιλλυστηυρινγιενσισ Στραιν αγαινστ τηε Λονγηορνεδ Βεετλεσ
ανδ Πρελιµιναρψ Χηαραχτεριζατιον οφ ΙτσΙνσεχτιχιδαλ Γενε
≤«¨ ±∏±tl • ¤±ª÷∏¨³¬±wl ∏  ±¨ª½«∏xl
k Ρεσεαρχη Ινστιτυτε οφ Φορεστρψo ΧΑΦ ΚεψΛαβορατορψοφ Φορεστ Σιλϖιχυλτυρε οφ τηε Στατε Φορεστρψ Αδµινιστρατιον Βειϕινγtsss|tl
⁄∏  ±¨ª©¤±ªul ≠¬± ÷¬±°¬±ªvl
kΧολλεγε οφ Πλαντ Προτεχτιον o Ηεναν Αγριχυλτυραλ Υνιϖερσιτψ Ζηενγζηουwxsssul
Αβστραχτ} „ Βαχιλλυσ τηυρινγιενσισ¶·µ¤¬± …·{{y ·²¬¬¦·² ²±ª«²µ±¨ § …¨ ·¯¨¨ k Ανοπλοπηορα γλαβριπεννισl ¤¯µ√¤¨ º¨ µ¨ ¬¶²¯¤·¨§
©µ²° §¨¤§¥²§¼²© Τριβολιυµ µαχλεβψq׫¨ ¤¯µ√¤¨ ©¨ §º¬·«…·{{y ¬¨«¬¥¬·¨§«¬ª«°²µ·¤¯¬·¼kys h l ¤±§¶¬ª±¬©¬¦¤±·§¨ ¤¯¼¬±ªµ²º·«q
׫¨ ¶«¤³¨ ²©¬·¶¦µ¼¶·¤¯ ¤±§¶³¨¦·µ∏°²©¤©©¨¦·¨§¬±¶¨¦·¶¬±§¬¦¤·¨§·«¤·…·{{y ¦²∏¯§«¤µ¥²µχρψv ¬¯®¨ ª¨ ±¨ ¶q„ ³¤¬µ²©³µ¬°¨ µ¶º¤¶
§¨¶¬ª±¨ §¥¤¶¨§²±·«¨ ¦²±¶¨µ√¤·¬√¨ µ¨ª¬²± ²© χρψv ª¨ ±¨ ¶¤±§¤ ⁄‘„ ©µ¤ª°¨ ±·º¤¶¶∏¦¦¨¶¶©∏¯¯ ¼ ²¥·¤¬±¨ §¥¼ ¤°³¯¬©¬¦¤·¬²±q׫¨
©µ¤ª°¨ ±·º¤¶©∏µ·«¨µ¦¯²±¨ §¬±·²³Š∞ p × ¤±§·«¨ ¶¨ ∏´¨±¦¨ ¤±¤¯¼¶¬¶¶«²º¨ §«¬ª«¯¼ «²°²¯²ª²∏¶·² χρψv„¤t ª¨ ±¨ º¬·«²±¯¼ ²±¨
±∏¦¯¨ ²·¬§¨ §¬©©¨µ¨±¦¨ q׫¨ ©µ¤ª°¨ ±·º¤¶ ²¯¦¤·¨§²± ³¯¤¶°¬§²©…·{{y ¥¼ ≥²∏·«¨µ± ¤±¤¯¼¶¬¶q
Κεψ ωορδσ} ²±ª«²µ±¨ §…¨ ·¯¨¨ o Βαχιλλυστηυρινγιενσισo χρψv„ ª¨ ±¨ o≥²∏·«¨µ± ¤±¤¯¼¶¬¶
天牛是我国林木的主要蛀干害虫之一 o其危害性质严重 o寄主范围广而杂 o给我国人工林建设造成了严
重影响k骆有庆等 ot||| ~张世权 ot||wl ∀在北方的杨树人工林中 o天牛危害是一类毁坏性质极其严重的森
林虫害 ∀对天牛的防治大致经历了化学防治 !种群综合治理以及生物防治等几个阶段 o但是其效果都不佳 o
而且操作难度大k李文杰等 ot||v ~熊善松 ot||x ~黄大庄 ot||yl ∀苏云金芽孢杆菌k Βαχιλλυστηυρινγιενσισl是
一种革兰氏阳性菌 o在芽孢形成过程中产生的伴胞晶体对害虫具有杀虫作用 o被称为 ∆p内毒素或杀虫晶体
蛋白 ∀苏云金芽孢杆菌制剂是目前世界上产量最大的微生物杀虫剂 o广泛用于防治农 !林害虫 ∀苏云金芽孢
杆菌是目前分离抗虫基因的主要来源之一 ∀自 t|{z年比利时植物遗传系统公司首次报道通过转 …·基因已
获得了抗虫转基因植株k≥¦«±¨ ³© ετ αλqot||{l以来 o转 …·基因的烟草k Νιχοτιανα ταβαχυµl !棉花 k Γοσσψπιυµ
ηιρσυτυµl先后经过大田试验后 o进行了推广应用 ∀在林木上 o黑杨 k Ποπυλυσ νιγραl !欧洲落叶松 k Λαριξ
δεχιδυαl !白云杉 k Πιχεα γλαυχαl !核桃 kϑυγλανσ ρεγιαl 等也获得转 …·基因植株k林良斌等 ot||z ~ ¬¦«¤¨¯ ετ
¤¯ qot||u ~崔洪志 ot||y ~吴中心 ot||x ~郭三堆 ot||xl ∀其中转 …·基因的欧洲黑杨 o经过虫试 o发现对舞毒
蛾kΛψµαντρια δισπαρl和春尺蠖 kΑποχηειµα χινεραριυσl的抗虫率达 xs h ∗ tss h k胡建军等 ot|||l o并获得了商
品化许可 ∀但目前林木转基因研究主要针对鳞翅目害虫 o对天牛具有毒杀作用的苏云金芽孢杆菌菌株及相
关基因的研究还未见有报道 ∀本研究旨在从苏云金芽孢杆菌资源库中筛选出对天牛具有毒杀作用的菌株 o
并对其杀虫基因进行初步鉴定 o为进一步分离杀天牛基因 o用于基因工程抗虫育种奠定基础 ∀
t 材料与方法
111 Βτ886菌株的分离与特征观察
将拟谷盗k Τριβολιυµ µαχλεβψl幼虫虫尸置于牛肉膏 p蛋白胨培养基平板上 ovs ε ? t ε 培养 t ∗ u §o待长
出菌苔 o采用划线法进行纯化 o挑取单菌落 o涂片 o碱性复红染色 o显微镜观察 ∀
112 Βτ886菌株对天牛幼虫的室内生物测定
经过对鞘翅目昆虫榆毛胸萤甲k Πψρρηαλτα αενεσχενσl !黄粉甲k Τενιβριο µολιτορl的虫试 o初步确认苏云金芽
孢杆菌菌株 …·{{y作为杀天牛的候选菌株 ∀为进一步鉴定苏云金芽孢杆菌菌株 …·{{y对天牛幼虫的毒杀能
力 o以室内饲养的 u龄光肩星天牛k Ανοπλοπηορα γλαβριπεννισl幼虫为试虫 o对苏云金芽孢杆菌菌株 …·{{y进行
室内生物测定 ∀以产生菱形伴胞晶体的苏云金芽孢杆菌菌株 …·²¯º和水作为对照 ∀采用室内人工饲养的 u
龄光肩星天牛对菌株进行生物活性测定 ∀
以试管斜面培养基上生长 w{ «左右 !生长良好的 …·细菌培养物悬浮于适量的无菌蒸馏水中 o震荡后制
备成均匀的菌悬液为材料 o拌入天牛人工饲料中 o在小塑料瓶中进行毒力测定 o每瓶一头天牛 o每个处理 ts
头 o以清水拌入天牛人工饲料为对照 ∀此外 o为了更为真实地模拟天牛幼虫在自然环境中的取食状态 o尽量
减少其它人为因素的干扰 o本实验还设计了一种新的天牛幼虫生物测定方法 p枝条法 o并进行了小量试验 ∀
即将构树k Βρουσσονετια παπψριφεραl枝条kt1s ∗ t1xl¦° ≅ kz1s ∗ {1sl¦°从中心剖开后 o中间挖槽 o将制备的菌悬
液滴于槽中 o晾干后放入一头幼虫 o合上枝条 o用封口膜缠紧 o然后立于放有滤纸的培养皿中k加水使滤纸保
持潮湿l ∀
113 抗性基因片段引物的设计及扩增
在 Š¨ ±…¤±®数据库检索苏云金芽孢杆菌杀鞘翅目的 χρψv类基因 o用 ≤¯ ∏¶·¤¯ ÷ 软件分析他们的保守区 o并
设计了 w对引物k图 tl ∀
°µ¬° µ¨t } ƒ²µº¤µ§}xχ „Š≤ „Š„ „„Š ×≤„ ××× ×≤Š ׄ„ ××≤vχ
• √¨¨ µ¶¨ }xχ „≤„ ׄ„ ×ׄ ≤≤Š Š„≤ ≤„„ ׄ„ ×׊vχ
°µ¬° µ¨u } ƒ²µº¤µ§}xχ „„≤ „„× ≤Š„ „Š× Š„„ ≤„× ׊„ „≤Švχ
• √¨¨ µ¶¨ }xχ Š„„ Š„≤ Š≤Š ×„× Š„„ „×× ≤„„ ׄ≤vχ
°µ¬° µ¨v } ƒ²µº¤µ§}xχ ׊≤ ×≤× ×≤„ „Š„ Š×„ ׊Š „≤≤ „„≤vχ
• √¨¨ µ¶¨ }xχ Š×× ≤„× ×≤Š ×„× ≤„≤ ≤≤Š „Š„ „≤≤vχ
°µ¬° µ¨w } ƒ²µº¤µ§}xχ „×≤ ≤Š„ „≤„ „×≤ Š„„ Š×Š „„≤ „׊vχ
• √¨¨ µ¶¨ }xχ ׄ„ ×Š× ≤„× ≤×≤ ×≤× Š≤Š „ׄ „≤Švχ
图 t °≤• 引物序列
ƒ¬ªqt ≥¨´ ∏¨ ±¦¨ ²©§¨¶¬ª±¨ §°≤• ³µ¬° µ¨¶
以 …·{{y菌株的质粒k按北京鼎国生物公司质
粒提取试剂盒提取l为模板进行 °≤• 扩增 ∀°≤• 反
应体系为 }在 us ˏ的反应体积中质粒模板 us ±ªo
正反向引物浓度均为 s1{ ³°²¯ #pt ots ÷ 缓冲液
k含 ªun lu ˏou1x °°²¯#pt的 §‘×°¶t ˏoפ´ 酶
t ˜ ∀反应条件 }|w ε 预变性 v °¬±o然后开始 |w ε
变性 t °¬±~xw ε 退火 t °¬±~zu ε 延伸 t1x °¬±的循
环 o共 vs次 ∀产物用 t h琼脂糖凝胶电泳后 o溴化
乙锭染色后观察 ∀
114 克隆载体构建
采用 „°¬¦²± ¬¦µ²¦²±2°≤• ≤ ±¨·µ¬©∏ª¤¯ ƒ¬¯·¨µ⁄¨ √¬¦¨¶k购自 ¬¯¯¬³²µ¨ ≤²µ³¨µ¤·¬²±l对基因保守片段的 °≤• 产物
进行纯化 o并采用 ×w连接酶对纯化好的 °≤• 产物和质粒载体k³Š∞ p ×l进行连接 o转化大肠杆菌 ts|k张
玉静 ousssl ∀
115 序列分析
采用 ×载体 ³Š∞ p ×上的测序引物 ×z和 ≥°y从两端对所克隆的片段进行序列测定 o由上海联合基因
公司完成 ∀
116 Σουτηερν杂交分析
°≤• 产物纯化后采用 ⁄ŒŠ ‹¬ª«°µ¬°¨ ⁄‘„ ¤¥¨ ¬¯±ª¤±§⁄¨ ·¨¦·¬²± Ž¬·Œk≤¯ ²±·¨¦«公司l标记 °≤• 产物作为
|vt 第 x期 陈 军等 }抗光肩星天牛苏云金芽胞杆菌 …·{{y菌株的分离及对毒蛋白编码基因的初步鉴定
探针 o与 …·{{y菌株质粒 ⁄‘„的 Ηινδ ¶完全酶切产物进行了杂交 o具体过程按试剂盒说明书及分子克隆实
验手册上的方法进行k≥¤°¥µ²²® ετ αλqot|{|l ∀
u 结果与讨论
211 菌株培养特征及形态特征
图 u …·{{y杀虫蛋白晶体形态
ƒ¬ªqu Œ±¶¨¦·¬¦¬§¤¯ ³µ²·¨¬± ¦µ¼¶·¤¯ ²© …·{{y
拟谷盗虫尸分离物在牛肉膏 p蛋白胨培养基上菌落培养
特征为圆形 !乳白色 ∀菌落经涂片 !碱性复红染色 !显微镜观察
其形态特征为 }营养体粗壮 !直形杆状 o两端钝圆 o大小为kt1u
∗ t1{lΛ° ≅ kv1s ∗ x1slΛ°∀孢子囊较营养体稍膨胀 o产生卵圆
形孢子 o大小为ks1{ ∗ t1slΛ° ≅ u1sΛ° o同时伴生方形伴孢晶
体 ∀而电镜照片表明 }孢子为卵圆形 o晶体蛋白为方形k图 ul o
具有苏云金芽杆菌的典型特性 ∀
212 天牛虫试
人工饲料法测定结果如表 t所示 ∀菌株 …·{{y对人工饲
养的光肩星天牛 u龄幼虫具毒杀作用 o其死亡率均在 ys h以上
k图 vl ∀未死亡幼虫与对照幼虫相比 o体重明显减轻 ∀与对照
试虫相比 oys §后的试虫体重只占对照的 yt1x h o而且不能正
常取食 !蜕皮和发育 ∀同时 o又采用枝条法对光肩星天牛幼虫进行了虫试 o结果 ts头试虫在第 ts天检查时
已经全部死亡 o死亡率达 tss h o前 w §死亡率为 zs h o所有对照试虫则全部存活 o而且生长健康 ∀这些结果
表明 o…·{{y对天牛幼虫具有较强的杀虫活性 ∀
表 1 Βτ菌株对光肩星天牛幼虫室内生物测定
Ταβ . 1 Βιοασσαψ οφ Β . τηυρινγιενσισστραινστο Α . γλαβριπεννισλαρϖαε
υνδερ τηε χοντρολ χονδιτιον
菌株编号
≥·µ¤¬±
试虫数
ײ·¤¯ ±∏°¥¨µ
²©¬±¶¨¦·¶
死亡虫数
‘∏°¥¨µ²©·«¨
§¨¤§¬±¶¨¦·
死亡率
²µ·¤¯¬·¼Πh
试虫平均重量
„√ µ¨¤ª¨ º ¬¨ª«·²©
¶∏µ√¬√²µ¶Πkª#«¨ ¤§ptl
体重比
•¤·¬²²© º ¬¨ª«·
k≥·µ¤¬±Π≤Žl
…·{{y ts y ys s1vzv s1ytx
…·²¯º ts s s s1x|s s1|zw
≤Žk • ¤·¨µl ts s s s1ysy
213 保守序列片段的 °≤• 扩增
以 …·{{y菌株的质粒 ⁄‘„为
模板 o用 °µ¬°¨ µt !°µ¬°¨ µu !°µ¬°¨ µv !
°µ¬°¨ µw四对保守区序列引物分
别进行 °≤• 扩增 ∀扩增产物用
t h的琼脂糖凝胶电泳检测 o结果
发现第四对引物 °µ¬°¨ µw能从试
验菌株 …·{{y的质粒 ⁄‘„中扩增
出一条约 s1{®¥左右的特异性条
带k见图 wl ∀
变黑的虫尸 ׫¨ ¥¯¤¦® §¨¤§¥²§¬¨¶ 对照幼虫 ≤Ž 健壮幼虫 ≤Ž 变黑的虫尸 ׫¨ ¥¯¤¦® §¨¤§¥²§¬¨¶
¿ ¿ ¿ ¿
枝条法 ƒ¨¨§¬± ¥µ¤±¦«¨¶ 人工饲料法 ƒ¨¨§º¬·«¤µ·¬©¬¦¤¯ ©¨ §¨
图 v 虫试中死亡变黑的虫尸与对照幼虫
ƒ¬ªqv ׫¨ ¥¯¤¦® §¨¤§¥²§¬¨¶¤±§«¨ ¤¯·«¼ ¤¯µ√¤¨ ²© Αq γλαβριπεννισ ¤©·¨µ·«¨ ¥¬²¤¶¶¤¼
swt 林 业 科 学 ws卷
图 x …·{{y扩增片段的序列
ƒ¬ªqx ≥¨´ ∏¨ ±¦¨ ²©·«¨ ¤°³¯¬©¬¨§©µ¤ª° ±¨·©µ²° …·{{y
图 w °µ¬° µ¨w扩增产物电泳结果
ƒ¬ªqw °≤• ³µ²§∏¦·¤°³¯¬©¬¨§¥¼
³µ¬° µ¨w ²± ¤ª¤µ²¶¨ ª¨¯
t !u为 °≤• 产物电泳结果 ¤±¨ ¶t ¤±§
u ¤µ¨ °≤• ³µ²§∏¦·~
v ⁄‘„分子量标准 ⁄‘„ ¶·¤±§¤µ§ ¤µ®¨µq
214 序列分析
克隆的基因片段经纯化后克隆到 ³Š∞
图 y …·{{y质粒k左l及 ≥²∏·«¨µ±k右l杂交结果
ƒ¬ªqy …·{{y ³¯¤¶°¬§¶¤±§≥²∏·«¨µ± ¥¯²·¬±ª¤±¤¯¼¶¬¶
左 t !u泳道为未酶切质粒 o右 t !u泳道为酶解产物 ~泳道 v⁄‘„ ¤µ®¨µ
¨©·}¤±¨ ¶t ¤±§u ¤µ¨ ·«¨ ³¯¤¶°¬§º¬·«²∏·¨ ±½¼°¤·¬¦§¬ª¨¶·¬²±o
•¬ª«·}¤±¨ ¶t ¤±§u ¤µ¨ ³¯¤¶°¬§º¬·« ±¨½¼°¤·¬¦§¬ª¨¶·¬²±o
¤±¨ ¶v ¬¶¶·¤±§¤µ§°¤µ®¨µq
p ×中并进行了测序 ∀该片段长 {tz ¥³k图 xl oŠ≤ 含
量较低 o为 vx1{y h ∀比较 …·{{y片段序列与已发表的
χρψv„¤t基因相应部分的核苷酸序列 o发现一个碱基
不同 o即第 yy{ 个核苷酸在 χρψv„¤基因为 / „0 o在
…·{{y中为/ ×0 ∀
215 杀虫基因定位于质粒上
用 Ηινδ ¶限制性内切酶对从 …·{{y菌株中提取
的质粒进行完全酶切 o并用地高辛标记的保守区片段
为探针进行杂交检测 ∀结果如图 y所示 ∀在 v1s ®¥
处有一条阳性杂交带 o表明该片段中携带编码毒蛋白
的基因 ∀由于 χρψv„ 大小在 u®¥o因此推测在该质粒
上只有一个拷贝 ∀
v 讨论
在以往的研究中 o虽然发现不少对鞘翅目昆虫具
有较高毒性的 …·菌株 o但大多数是针对马铃薯甲虫
和榆毛胸萤叶甲等鞘翅目昆虫 k高梅影等 ot||| ~乐超银等 ousssl ∀目前 o还没有看到有关对天牛害虫具有
较高毒杀力和抑制作用的 …·菌株的报导 ∀本研究分离出了的 …·{{y菌株 o通过天牛虫试 o得到 ys h以上的
死亡率 o说明该菌株对天牛的作用较明显 ∀鉴于本次天牛幼虫数量所限 o没有进行统计分析 ∀将来进一步增
加天牛试虫数 o以提供更有力的证据 ∀
质粒杂交表明该菌株携带 χρψv„¤类基因 o可能以单拷贝位于质粒上 ∀所扩增的 {tz ¥³长的 χρψv„¤基
因片段 o与已报道的相比 o有一对核苷酸发生了改变 o并且位于该基因的结构功能域 ⁄²°¤¬± Œ中 …¯²¦® t与
…¯²¦®u之间k≥¦«±¨ ³© ετ αλqot||{l ∀虽然有报道表明点突变可能导致基因的功能的变化 o并在进化中有一定
的意义k∏µ¤·p ƒ∏¨±·¨¶ ετ αλqousst ~ ¤¶¶²± ετ αλqoussu ~张玉静 ousssl o但要确定该基因的杀天牛活性是否
与碱基突变有关 o尚需对全长基因进行克隆和测序 o分析全长基因的变异 o并进一步通过定点突变进行功能
验证 ∀
参 考 文 献
崔洪志 q我国抗虫转基因棉花研究取得重大进展 q中国农业科学 ot||y ou|ktl }|v
twt 第 x期 陈 军等 }抗光肩星天牛苏云金芽胞杆菌 …·{{y菌株的分离及对毒蛋白编码基因的初步鉴定
高梅影 o李荣森 o戴顺英等 q杀鞘翅目苏云金芽孢杆菌新疆株及其杀虫剂的研究 q微生物学报 ot||| ov|kyl }xtx p xus
郭三堆 q植物 …·抗虫基因工程研究进展 q中国农业科学 ot||x ou{kxl }{ p tv
胡建军 o刘庆一 o王克胜等 q欧洲黑杨转 …·毒蛋白基因植株大田抗虫性测定 q林业科学研究 ot||| otukul }usu p usx
黄大庄 q桑天牛的研究进展 q河北林学院学报 ot||y ottkvl }u|s p u|y
乐超银 o刘子铎 o曾晓慧等 q苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因 χρψv„在鳞翅目特异菌株中的表达及杀虫特性 q微生物学报 ousss owskul }tv|
p twu
李文杰 o邬承先 q杨树天牛综合管理 q北京 }中国林业出版社 ot||v
林良斌 o官春云 q…·毒蛋白与植物抗虫基因工程 q生物工程进展 ot||z ozkul }xt p xx
骆有庆 o李建光 q杨树灾害控制的应用技术和基础研究策略 q北京林业大学学报 ot||| outkwl }y p tu
吴中心 q抗虫基因烟草 ‘¦{|纯合品系的获得及大田抗虫试验 q中国烟草学报 ot||x oukwl }u| p vv
熊善松 q三北防护林地区天牛发生的危害特点及其防治对策 q森林病虫通讯 ot||x ot }us p uu
张世权 q华北天牛及其防治 q北京 }中国林业出版社 ot||w
张玉静 q分子遗传学 q北京 }科学出版社 ousss
∏µ¤·p ƒ∏¨±·¨¶o„§¤±ª  qŒ°³²µ·¤±¦¨ ²© Χρψt∆2 ±¨§²·²·¬± §²°¤¬± µ ²¯²³¶©²µ¥¬±§¬±ª¶³¨¦¬©¬¦¬·¼ ¬± Ηελιοτηισ ϖιρεσχενσ kql q „³³¯ ∞±√¬µ²± ¬¦µ²¥¬²¯ o
usst oyzktl }vuv p vu|
¤¶¶²± oפ¥¤¶«±¬® … ∞o ¤½½¤ „ ετ αλq ∏·¤ª¨ ±¬¦¤±¤¯¼¶¬¶²©¤¦²±¶¨µ√ §¨µ¨ª¬²± ²©§²°¤¬± ¶ ¬±·«¨ χρψt„¦×²¬¬± ²© Βαχιλλυστηυρινγιενσισq „³³¯ ∞±√¬µ²±
¬¦µ²¥¬²¯ oussu oy{ktl }t|w p uss
¬¦«¤¨¯ ° ‹ oƒµ¤±® Š  o¯²¼§× • ετ αλqƒ¬¨ §¯ √¨¤¯∏¤·¬²±²©·µ¤±¶ª¨ ±¬¦·²¥¤¦¦²¦²±·¤¬±¬±ªª¨ ±¨ ¶ ±¨¦²§¬±ª Βαχιλλυστηυρινγγιενσισ∆2∞±§²·²¬¬±²µ¦²º³¨¤·µ¼³¶¬±
¬±«¬¥¬·²µ} ©¨©¬¦¤¦¼ ¤ª¤¬±¶·‹¨¯¬¦²√ µ¨³¤½¨ ¤k¨³¬§²³·¨µ¤}‘²¦·∏¬§¤¨ l q∞¦²± ∞±·²°²¯ ot||u o{xkyl }uxty p uxuu1
≥¤°¥µ²²®oƒµ¬·¶¦« ∞ ƒ o ¤±¬¤·¬¶× q ²¯ ¦¨∏¯¤µ}„ ¤¯¥²µ¤·²µ¼ °¤±∏¤¯ qu±§ §¨q ‘¨ º¼²µ®}≤²¯§≥³µ¬±ª ‹¤µ¥²µ¤¥²µ¤·²µ¼ °µ¨¶¶ot|{|
≥¦«±¨ ³©∞o≤µ¬¦®°²µ¨ ‘q Βαχιλλυστηυρινγιενσι󤱧¬·¶³¨¶·¬¦¬§¤¯ ¦µ¼¶·¤¯ ³µ²·¨¬±¶q ¬¦µ²¥¬²¯ ot||{ oyukvl }zzx p {sy
欢迎订阅 ussx年5木材工业6
ΧΝ 11 − 2726 ΠΙΣΣΝ 1001 − 8654 Π国内外公开发行 Π邮发代号 :2 − 311
中国林业科学研究院院刊 o木材加工领域领先科技期刊 ot|{z年创刊 o全国中文核心期刊 ∀ /中国期刊
全文数据库0 !/中国科学引文数据库0 !/中国学术期刊综合评价数据库0 !/万方数据 ) 数字化期刊群0 !/中文
科技期刊数据库0收录刊物 o并连续多年被英国5林产品文摘6 !美国5林产品杂志6等国际著名刊物收录 ∀
ussu年获林业优秀科技期刊二等奖 ∀
适读对象 }木材加工及相关行业的研究与开发 !企业生产与管理 !技术革新与改造 !教学与咨询 !木材贸
易与营销人员 ∀
主要栏目及内容
研究与开发Π实用技术 各类木质和非木材人造板的制造工艺及表面装饰技术 ~木工胶粘剂 ~木材干燥 !阻
燃 !防腐及改性处理 ~木工机械设计制造与控制 ~节能降耗 !三废治理等领域的最新研究成果 !新产品开发 !先
进实用技术 !企业与生产管理经验 ∀
综合评述Π热点讨论Π专家论坛 评述和探讨国内外木材工业的方针与政策 !现状与水平 !发展趋势 !产品质
量等热点问题 ∀
专访报道Π企业专栏Π技术市场 介绍国内外优秀企业的发展动态 !新技术 !新产品开发及先进的生产管理经
验 ∀
综合信息 报道最新行业动态 !市场动态 ~新产品推介 ~技术转让与招标 ~设备调剂 ~招聘 ~图书出版 !会展快
讯等 ∀
广而告之 彩色和黑白版 o为企事业提供形象与产品宣传 !信息传递服务 ∀
单月末出版 ∀大 ty开 o正文 xy页 o彩页 ww ∗ w{页 ∀每期 {元 o全年 w{元 o全国各地邮局办理订阅ku p
vttl ∀也可向本刊编辑部订购k挂号邮寄 o全年 yy元l ∀
邮局汇款 }tsss|t o北京市颐和园后中国林科院 u|信箱 o5木材工业6编辑部收
银行汇款 }户名 }中国林科院木材所 p编辑部 开户行 }农行海淀支行营业部 帐号 }{zv p usv p xv
电话 }sts p yu{{|wt| 传真 }sts p yu{{|wty ∞p°¤¬¯}¦º¬°¤ªƒ©²µ¨¶·µ¼q¤¦q¦±
uwt 林 业 科 学 ws卷