应用RAPD分子标记手段,研究板栗品种的遗传多样性,建立了板栗品种RAPD标记的标准程序,以及板栗品种的DNA指纹数据库,并为板栗品种鉴别提供了准确、可靠的标准方法。46个板栗品种样品的DNA ,用16个引物进行扩增反应的位点总数为119个,产生69个多态位点。建立了46个板栗品种的DNA指纹数据库,并分析出这些板栗品种分子鉴别的最优化引物组合。对特定的引物组合,计算品种间的遗传距离矩阵,从而确定引物组合对这些品种鉴别的特异性。
The genetic diversity of chestnut was studied by RAPD molecular markers. The RAPD standardized procedure and the fingerprints database of chestnut were established, which was the principal basement of chestnut breeding. The precise and reliable method identified the chestnut variety was supplied. With the 16 primers, 119 bands were produced. The 69 bands out of the 119 were polymorphic(58%). The fingerprints database of 46 varieties was established and the optimal combination of primers for these varieties identification was summarized. It was shown that the four primers, out of the 16 primers which can produced the polymorphic bands, could be used to distinguish the 46 varieties tested effectively. The optimal combimation of polymorphic loci was detected for variety discrimination. In order to summarize the better combination of primers, the genetic distance matrix was calculated so as to indicate the particularity of primers combination.
全 文 : 收稿日期 }usss p sx p tu ∀
3 本文的内外业研究得到江苏省溧阳市龙潭国家板栗良种基地的朱志祥场长 !涂俊林工程师 !尹佟明博士 !沈永宝副教授等的大力
帮助 o谨致谢意 ∀
第 vz卷 第 t期u s s t年 t 月
林 业 科 学
≥≤∞× ≥∂ ∞ ≥≤ ∞
∂ ²¯1vz o ²1t
¤± qou s s t
板栗主要栽培品种的分子鉴别 3
高捍东 黄宝龙
k南京林业大学森林资源与环境学院 南京 utssvzl
摘 要 } 应用 °⁄分子标记手段 o研究板栗品种的遗传多样性 o建立了板栗品种 °⁄标记的标准程序 o
以及板栗品种的 ⁄指纹数据库 o并为板栗品种鉴别提供了准确 !可靠的标准方法 ∀wy个板栗品种样品的
⁄ o用 ty个引物进行扩增反应的位点总数为 tt|个 o产生 y|个多态位点 ∀建立了 wy个板栗品种的 ⁄
指纹数据库 o并分析出这些板栗品种分子鉴别的最优化引物组合 ∀对特定的引物组合 o计算品种间的遗传距
离矩阵 o从而确定引物组合对这些品种鉴别的特异性 ∀
关键词 } 板栗 o品种鉴别 o °⁄分子标记 o指纹图谱
ΓΕΝΕΤΙΧ ΑΝΑΛΨΣΙΣ ΑΝ∆ Ι∆ΕΝΤΙΦΙΧΑΤΙΟΝ ΟΦ ΜΑΙΝ ΧΥΛΤΙς ΑΤΕ∆ ς ΑΡΙΤΙΕΣ
ΟΦ ΧΗΕΣΤΝΥΤ ( ΧΑΣΤΑΝΕΑ ΜΟΛΛΙΣΣΙΜΑ) ΒΨ ΡΑΠ∆ ΜΟΛΕΧΥΛΑΡ ΜΑΡ ΚΕΡΣ
¤² ¤±§²±ª ∏¤±ª
¤²¯²±ª
( Χολλεγε οφ Φορεστ Ρεσουρχεσ ανδ Ενϖιρον µεντ Νανϕινγ Φορεστρψ Υνιϖερσιτψ Νανϕινγutssvz)
Αβστραχτ : ׫¨ ª¨ ±¨ ·¬¦§¬√ µ¨¶¬·¼ ²©¦«¨¶·±∏·º¤¶¶·∏§¬¨§¥¼ °⁄ °²¯ ¦¨∏¯¤µ°¤µ®¨ µ¶q ׫¨ °⁄ ¶·¤±§¤µ§¬½¨ §
³µ²¦¨§∏µ¨ ¤±§·«¨ ©¬±ª¨µ³µ¬±·¶§¤·¤¥¤¶¨ ²©¦«¨¶·±∏·º µ¨¨ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨ §oº«¬¦« º¤¶·«¨ ³µ¬±¦¬³¤¯ ¥¤¶¨ ° ±¨·²©¦«¨¶·±∏·
¥µ¨ §¨¬±ªq׫¨ ³µ¨¦¬¶¨ ¤±§µ¨ ¬¯¤¥¯¨ ° ·¨«²§¬§¨±·¬©¬¨§·«¨ ¦«¨¶·±∏·√¤µ¬¨·¼ º¤¶¶∏³³¯¬¨§q
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©¬±ª¨µ³µ¬±·¶§¤·¤¥¤¶¨ ²©wy √¤µ¬¨·¬¨¶º¤¶ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨ §¤±§·«¨ ²³·¬°¤¯ ¦²°¥¬±¤·¬²±²©³µ¬° µ¨¶©²µ·«¨ ¶¨ √¤µ¬¨·¬¨¶¬§¨±·¬2
©¬¦¤·¬²± º¤¶¶∏°°¤µ¬½¨ §q·º¤¶¶«²º±·«¤··«¨ ©²∏µ³µ¬° µ¨¶o²∏·²©·«¨ ty ³µ¬° µ¨¶º«¬¦«¦¤± ³µ²§∏¦¨§·«¨ ³²¯¼2
°²µ³«¬¦¥¤±§¶o¦²∏¯§¥¨ ∏¶¨§·² §¬¶·¬±ª∏¬¶«·«¨ wy √¤µ¬¨·¬¨¶·¨¶·¨§ ©¨©¨¦·¬√¨¯¼ q ׫¨ ²³·¬°¤¯ ¦²°¥¬°¤·¬²± ²©³²¯¼2
°²µ³«¬¦¯ ²¦¬º¤¶§¨·¨¦·¨§©²µ√¤µ¬¨·¼ §¬¶¦µ¬°¬±¤·¬²±q± ²µ§¨µ·²¶∏°°¤µ¬½¨ ·«¨ ¥¨··¨µ¦²°¥¬±¤·¬²± ²©³µ¬° µ¨¶o·«¨
ª¨ ±¨ ·¬¦§¬¶·¤±¦¨ °¤·µ¬¬ º¤¶¦¤¯¦∏¯¤·¨§¶²¤¶·²¬±§¬¦¤·¨·«¨ ³¤µ·¬¦∏¯¤µ¬·¼ ²©³µ¬° µ¨¶¦²°¥¬±¤·¬²±q
Κεψ ωορδσ: ≤«¬±¨ ¶¨ ¦«¨¶·±∏·o ∂¤µ¬¨·¼¬§¨±·¬©¬¦¤·¬²±o °⁄ °²¯ ¦¨∏¯¤µ°¤µ®¨ µ¶oƒ¬±ª¨µ³µ¬±·¶
板栗是经济价值很高的经济树种 o栽培历史悠久 o资源丰富 ∀传统的板栗品种划分方法主要依据
其形态学特征 !生物学特性和经济性状 o其中又以经济性状为主 o即以花序 !总苞和果实的形态为主要
依据 o难以准确鉴别一些形态相近的品种 ∀木本植物结实周期长 o仅仅依据营养器官的形态特征难以
在早期准确地鉴定品种 o生产上因伪劣品种或品种混杂造成损失的现象时有发生 o因此准确鉴别品种
显得尤为重要和迫切 o同时对新品种的审定 !注册 !保护和管理 o建立准确 !可靠的品种特异性检测方
法 o具有一定的理论意义和较高的实践价值 ∀
与其它分子标记方法相比 o此方法具有独到的优点 ∀应用 °⁄分析农作物品种纯度的研究十分
活跃 o被广泛应用于玉米 !大豆 !小麦 !棉花 !水稻和红三叶种子的品种鉴定k傅家瑞 ot||w ~李文彬 o
t||x ~余四斌等 ot||y ~陈 洪等 ot||yl ∀
园艺学上也用 °⁄标记进行品种鉴定 o已报道的蔷薇属k ¬¯¯¤± ετ αλ. ot||yl !梅k≥«¬°¤§¤ ετ
αλ. ,t||w ~t||y ~刘青林 ot|||l !洋李kµ¨ª²µot||wl !百合属k • ¬¯®¬¨ ετ αλ. ot||vl !柿k罗正荣等 ot||xl !
茶叶k陈 亮等 ot||{l等等 ∀
°⁄研究也被广泛应用于美洲黑杨无性系鉴定k阿根廷 ≥¬¯√¬¤ ≤²µ·¬½² ετ αλ. ,t||y) !构建马尾松
的分子标记连锁图k尹佟明 ot||zl !尾叶桉和细叶桉无性系研究k甘四明等 ot|||l !芒果品种鉴定k§¤2
·² ετ αλ. ot||x ~徐碧玉 ot||{l ∀
本研究应用 °⁄分子标记手段 o从 ⁄ 水平上研究板栗品种的遗传多样性 o建立了板栗品种
°⁄标记的标准程序 o以及板栗品种的 ⁄ 指纹数据库 o为板栗育种提供理论依据 o并为板栗品种
鉴别提供了准确 !可靠的标准方法 ∀
t 材料与方法
111 实验材料
wy个板栗品种的带叶幼枝采自江苏省溧阳市龙潭林场国家林业局板栗良种基地 o冰冻保存 o供提
取 ⁄用 ∀该基地地处 vtβtsχuxδ ∗ vtβtzχuwδ~tt|βutχt{δ ∗ tt|βvuχsyδ∞之间 o已建立品种收集圃 !
良种采穗圃 !良种繁育圃 !丰产示范园 !良种对比试验园 ∀各品种名称及产地见图 u ∀
112 设备 !试剂和方法
⁄扩增仪为美国珀金 ) 埃尔默k°∞ 2∞ ∞ l公司生产的 uwss型 ∀
用于扩增反应的 ts ° µ¨引物为 ≥系列 ≥t ∗ ≥tss o共 tss种 ∀引物及 §×°kts °°²¯l购自加拿大
≥¤±ª²±独资上海分公司 ∀标准分子量标记ktss ¥³ ⁄ ¤§§¨µ°¯ ∏¶l由立陶宛生产 ∀ פ´ 酶购自南京
生达生物工程中心 ∀ts ≅ °≤ 缓冲液等试剂均自行配置 ∀ ⁄ 的提取与纯化采用 ∏µµ¤¼等kt||sl
提出的 ≤ ×
法加以改进 ∀采用标准 Κ⁄凝胶比色法测定样品 ⁄的浓度 o并调节样品 ⁄浓度
于 v ∗ vs ±ªr°o一般为 tx ±ªr°∀ °≤ 反应体系为 }总体积为 us Λ∀组成是 }模板 ⁄k⁄ ·¨°2
³¯¤·¨lu Λ~引物k³µ¬° µ¨ots ³°²¯lu Λ~缓冲液k
∏©©¨µotss Λ°²¯r×µ¬¶2≤¯³{ qvl oxss °°²¯ ≤¯otx
°°²¯ ª≤ u¯lu Λ~重蒸水k§§ultt Λ~酶稀液 u Λ~s1u Λפ´ ⁄聚合酶kפª ⁄ °²¯¼° µ¨¤¶¨ o
t单位l ∀采用 uss Λ薄壁反应管 ~扩增反应程序为 }|w ε 预变性 u °¬±o然后执行 v{个扩增循环 o每个
循环中 o|w ε 变性 vs¶ows ε 复性k退火lvs¶ozu ε 延伸 |s¶o最后 zu ε 延伸 z °¬±∀扩增产物的检测采用
t h琼脂糖凝胶板 o点样后在 t倍 ×
∞缓冲液中电泳 o电压 tss∂ k电流约为 x °l ∀凝胶两侧同时加有
标准分子量的标记k⁄ ¤§§¨µ¤µ®¨ µl o用以确定各分子标记的分子量大小 ∀
图 t 应用引物 ≥u{扩增的 wy个板栗品种 °⁄谱带
ƒ¬ªqt °⁄©¬±ª¨µ³µ¬±·¶²©wy ¦«¨¶·±∏·√¤µ¬¨·¬¨¶ª¨ ±²°¬¦
⁄ ¤°³¯¬©¬¨§ º¬·«≥u{ ³µ¬° µ¨
上下两行最右一条为标准分子量标记ktss ¥³ ⁄ ¤§§¨µ°¯ ∏¶l ~其余从右上方自右
向左依此为 t ∗ wy号样品的谱带 ∀
׫¨ µ¬ª«·¨¶·¯¤±¨ ¬±∏³¤±§ ²¯º ¬¯±¨ ¶¬¶·«¨ ¶·¤±§¤µ§°²¯ ¦¨∏¯¤µ°¤µ®¨ µktss ¥³⁄ ¤§§¨µ
°¯ ∏¶l q ׫¨ ©¬±ª¨µ³µ¬±·¶µ¨©¨µ·²√¤µ¬¨·¬¨¶t ·²wy ©µ²° ∏³µ¬ª«··²¯¨©·q
电泳凝胶经溴化乙锭k∞
l染色后 o在紫外透射分析仪上观察谱带 o采用快速成像系统摄影 ∀快速
成像相纸为 °²¯¤µ²¬§ k≥ vsssr
vyβl ∀
113 数据处理
由各品种 ⁄ 扩增产物谱带 o
记录多态性谱带的 °⁄标记数
据 o根据 ¨¬. ¶kt|zu ot|z{l的方法 o
计算各品种间的遗传距离k ±¨¨ ·¬¦
§¬¶·¤±¦¨l ∀根据 ⁄扩增结果的多
态性谱带数据 o用 ° ≠°kv1x 版
本l的 ∞
程序改进软件计
算品种间的相似性 o并建立 °
k ±º ¬¨ª«·¨§ °¤¬µ µ²∏³ ¤¨±¶
±¤¯¼¶¬¶l系统分类树 ∀
u 结果与分析
211 扩增结果
wy个板栗品种样品的 ⁄ o用
经筛选后能产生特异谱带的 ty 个
xy 第 t期 高捍东等 }板栗主要栽培品种的分子鉴别
引物进行扩增反应 o位点总数为 tt|个 o产生 y|个多态位点 ∀板栗品种 °⁄分析所用引物及其扩增
谱带数如表 t ∀各品种的基因组 ⁄ 扩增的具有特异谱型 o即品种指纹 ∀其中 o应用引物 ≥u{扩增的
wy个板栗品种 °⁄谱带见图 t ∀
表 1 板栗品种 °⁄分析所用引物及其扩增谱带数
Ταβ .1 Πριµερσ υσεδ φορ ΡΑΠ∆ αναλψσισ οφ χηεστνυτ ανδ νυµ βερσ
οφ αµ πλιφιεδ βανδσανδ πολψµορπηιχ βανδσ
引物
名称
°µ¬° µ¨
核苷酸序列
¬¥²±∏¦¯ ²¨·¬§¨
¶¨ ∏´¨ ±¦¨
扩增位点总数
°³¯¬©¬¨§ °⁄
²¯¦¬
多态性位点数
°⁄ ³²¯¼°²µ³«¬¦
²¯¦¬
≥z × ≤ ≤ { w
≥{ × ≤ ≤ ≤ ≤ { v
≥tt × ≤ ≤≤ × { {
≥tu ≤≤ × × ≤ ≤ z u
≥tw × ≤≤ ≤ × ≤ × | y
≥us ≤≤ ≤ × × ≤ y t
≥uy × ≤ ≤≤ × ≤ { z
≥uz ≤ × | w
≥u{ × ≤ × { {
≥vs × × ≤ ≤ y u
≥v{ × ≤≤ × { v
≥xx ≤ × ≤≤ × ≤ × y w
≥x| ≤ × ≤ × × y v
≥yu × ≤ × ≤ z y
≥{z ≤≤ × ≤ { y
≥|u ≤ ≤ × ≤ ≤ z u
合 计
ײ·¤¯
±∏°¥¨µ
ty tt| y|kx{ h l
212 品种的分子鉴别
wy个品种用 ty个引物随机扩增的 y|个特
异位点的谱型 o即为品种的 ⁄指纹 o据此可以
从分子水平上作品种真实性鉴定 ∀
为采用最少的引物组合 o即最优化的特异位
点 o来准确有效地鉴定品种 ∀为此对特定的引物
组合 o计算品种间的遗传距离 o从而确定这些引
物组合对某一品种鉴别的特异性 ∀逐步分析结
果发现 ty个引物标记中 o采用引物 ≥u{ !≥{z !≥tt
这 v个引物与 ≥x| !≥uz或 ≥vs之一的引物组合 o
便可准确鉴定所研究的 wy个板栗品种 ∀品种指
纹库如表 u ∀
213 遗传距离和聚类分析
品种间遗传距离最大值为 s1{sst o即品种
us与品种 vuk品种代号及名称详见图 ul o亦即安
徽舒城的粘板底与河北的西沟 u号 ∀品种间遗
传距离最小值为 s1s|ts o为品种 {与品种 | o即
江苏宜兴的薄壳与江苏吴县西山的稀刺薄壳 o据
漂阳市龙潭林场进行的初步生物学观察 o这两个
品种差别很微小 o只是稀毛薄壳的栗蒲外生刺密
度稍稀 o尚待进一步分析其密度的数量指标差
异 ∀
根据 ⁄随机扩增结果的多态性谱型分析数据 o基于品种间的 ¨¬氏遗传距离 o构建品种间的
° 系统分类树 o如图 u ∀具有相同起源和分布的品种 o如安徽宁国的九月寒和油栗子 !安徽舒城
的粘底板和蜜蜂球 !山东郯城的郯城 usz和江苏赣榆的黑林 t号都被聚类到一起 o归入相应的一类 ∀
其中也有相似经济性状的品种被聚成一类 o如浙江诸暨的短刺板红与湖北的浅刺大板栗 ∀
v 结论
ktl本研究发现各品种在分子水平上差异很大 ∀ °⁄分析快速 !相对简便 !可靠性极高 ∀品种
⁄指纹数据库及其标准化是品种审定 !特异性检验 !新品种专利保护和利用的重要依据 ∀这些研究
方法和结果对植物种质资源遗传多样性的分析 !植物新品种保护 !以及种苗质量促裁检验等具有理论
意义和实践价值 ∀
kul本研究发现分子分类能够有效地揭示形态相似 !经济性状相近或部分地理种源相同的品种间
的近缘关系 ∀但与传统分类方法中按板栗栽培的地理区域划分的 y大品种群并不完全一致 ∀其原因
主要是 o一方面由于本研究所采用的 wy个品种主要来自长江流域品种群 o这是本研究取样方面的局
限 ∀另一方面 o板栗品种存在同名异物现象 o特别是近 ts多年来各地相互引种 o存在品种溯源不清的
现象 ∀这种现象使得分子分类的部分结果有待进一步分析它们的形态特长和经济性状 ∀
yy 林 业 科 学 vz卷
) wx
ws
大底青 ⁄¤§¬´¬±ª江苏溧阳 ¬¼¤±ªo¬¤±ª¶∏
vz
tz
蜜蜂球 ¬©¨ ±ª´¬∏安徽舒城 ≥«∏¦«¨ ±ªo ±«∏¬
粘底板 ¬¤±§¬¥¤±安徽舒城 ≥«∏¦«¨ ±ªo ±«∏¬
鲁 vx ∏ ²qvx 山东泰安 פ¬¤± o≥«¤±ª§²±ª
ww
wu
红 栗 ²±ª¯¬山东泰安 פ¬¤± o≥«¤±§²±ª
v|
黑林 t号 ¬¨¯¬± ²qt 江苏赣榆 ¤±¼∏o¬¤±ª¶∏
郯城 uszפ±¦«¨ ±ª ²qusz山东郯城 פ±¦«¨ ±ªo≥«¤±§²±ª
wv
短 扎 ⁄∏¤±½¤江苏宜兴 ≠¬¬¬±ªo¬¤±ª¶∏
wt
vt
青毛早 ±¬±ª°¤²½¤²湖北京山 ¬±ª¶«¤±o ∏¥¨¬
大红袍 ⁄¤«²±ª³¤²江苏宜兴 ≠¬¬¬±ªo¬¤±ª¶∏
v{
vy
tv
油栗子 ≠²∏¯¬½¬湖北罗田 ∏²·¬¤±o ∏¥¨¬
九月寒 ¬∏¼∏¨ «¤±湖北罗田 ∏²·¬¤±o ∏¥¨¬
u{
ux
早 庄 ¤²½«∏¤±ª江苏南京 ¤±¬±ªo¬¤±ª¶∏
明 栗 ¬±ª¯¬河北迁西 ±¬¤±¬¬o ¥¨¨¬
us
大板栗 ⁄¤¥¤±¯¬河南高店 ¤²§¬¤±o ±¨¤±
ty
{
焦 札 ¬¤²½¤江苏宜兴 ≠¬¬¬±ªo¬¤±ª¶∏
处暑红 ≤«∏¶«∏«²±ª江苏宜兴 ≠¬¬¬±ªo¬¤±ª¶∏
沭河 t号 ≥«∏«¨ ²qt 江苏沭河 ≥«∏«¨ o¬¤±ª¶∏
vx
vu
小果油栗 ÷¬¤²ª∏²¼²∏¯¬湖南绥宁 ≥∏¬±¬±ª ∏±¤±
uw
桔红皮 ∏«²±ª³¬浙江诸暨 «∏¬o«¨¬¤±ª
tx
双季栗 ≥«∏¤±ª¬¯¬江西德安 ⁄¨ ¤± o¬¤±ª¬¬
泰安薄壳 פ¬¤±¥¤²®¨ 山东泰安 פ¬¤± o≥«¤±§²±ª
vw
vs
|
短刺板红 ⁄∏¤±¦¬¥¤±«²±ª浙江诸暨 «∏¬o«¨¬¤±ª
浅刺大板栗 ±¬¤±¦¬§¤¥¤±¯¬湖北 ∏¥¨¬
uv
沅陵 t号 ≠∏¤±¯¬±ª ²qt 湖南南陵 ¤±¯¬±ªo ∏±¤±
t|
大桂花栗 ⁄¤ª∏¬«∏¤¯¬江苏虞山 ≠∏¶«¤±o¬¤±ª¶∏
ts
青球早 ±¬±ª´¬∏½¤²湖北罗田 ∏²·¬¤±o ∏¥¨¬
二新早 ∞µ¬¬±½¤²安徽 ±«∏¬
vv
u|
uy
tw
v
羊毛栗 ≠¤±ª°¤²¯¬湖北罗田 ∏²·¬¤± o∏¥¨¬
薄 壳
¤²®¨ 江苏宜兴 ≠¬¬¬±ªo¬¤±ª¶∏
西沟 u号 ÷¬ª²∏ ²qu 河北 ¥¨¨¬
辐射 v号 ƒ∏¶«¨ ²qv 山东泰安 פ¬¤± o≥«¤±§²±ª
尖顶油栗 ¬¤±§¬±¼²∏¯¬山东郯城 פ±¦«¨ ±ªo≥«¤±§²±ª
uz
z
金华 t号 ¬±«∏¤ ²qt 浙江金华 ¬±«∏¤o«¨¬¤±ª
w
金 丰 ¬±©¨ ±ª山东 ≥«¤±§²±ª
u
金刚栗 ¬±ª¤±ª¯¬湖南长沙 ≤«¤±ª¶«¤o ∏±¤±
柞水 tt号 «¤¶«∏¬²qtt 陕西柞水 «¤¶«∏¬o≥«¤¤±¬¬
uu
ut
t
稀刺薄壳 ÷¬¦¬¥¤²®¨ 江苏吴县 • ∏¬¬¤± o¬¤±ª¶∏
薄 壳
¤²®¨ 江苏宜兴 ≠¬¬¬±ªo¬¤±ª¶∏
tt
大红袍 ⁄¤«²±ª³¤²陕西柞水 «¤¶«∏¬o≥«¤¤±¬¬
黄栗蒲 ∏¤±ª¯¬³∏安徽宁国 ¬±ªª∏²o±«∏¬
t{
猪嘴蒲 «∏½∏¬³∏江苏溧阳 ¬¼¤±ªo¬¤±ª¶∏
tu
赣农 zz2ty¤±±²±ªzz2ty 江西南昌 ¤±¦«¤±ªo¬¤±ª¬¬
y
香栗子 ÷¬¤±ª¯¬½¬湖北罗田 ∏²·¬¤±o ∏¥¨¬
x
魁 栗 ∏¬¯¬浙江上虞 ≥«¤±ª¼∏o«¨¬¤±ª
小金漆栗 ÷¬¤²¬± ¬´¯¬江苏吴县 • ∏¬¬¤± o¬¤±ª¶∏
图 u wy个板栗品种的系统聚类图
ƒ¬ªqu ° §¨ ±§µ²ªµ¤°¶²©wy ¦«¨¶·±∏·√¤µ¬¨·¬¨¶¥¤¶¨§²±·«¨ °⁄¥¤±§³¤··¨µ± §¤·¤
zy 第 t期 高捍东等 }板栗主要栽培品种的分子鉴别
表 2 46 个板栗品种 ⁄随机扩增特异谱型
Ταβ .2 Φινγερπριντσ οφ 46 χηεστνυτ ϖαριετιεσαµ πλιφιεδ βψ γενοµιχ ∆ΝΑ
序
号
²q
品种名称
∂¤µ¬¨·¬¨
±¤°¨
特征分子标记 ≤«¤µ¤¦·¨µ¬¶·¬¦°²¯ ¦¨∏¯¤µ°¤µ®¨µ¶
≥z ≥{ ≥tt ≥tu ≥tw ≥us
tsvt |ss {ss wss txss tuss tsvt vsss usss txss tuss tsvt {ss xss wss {ss zss txss tuss tsvt {ss zss yss zss
t 沭河 t号 t s s t s t t t t s t s s s t t t t t t s t t s
u 猪嘴蒲 s s t t s t t s t s s t t t t t t t t t t t t s
v 黄栗蒲 t t t s s t t t s s s t s t t t t t t t s t t s
w 青球早 t t t s s t t s s s t t s t t t t s s s t t t s
x 大红袍 s t s t s s t s s t s t s t t t t s s s s t t t
y 明栗 t s t s s s t s s s t s s t t t t s s s s t s s
z 尖顶油栗 t t t s t t t t s s t t s s t s t t t s t t t t
{ 薄壳 t t s s s t t t s s s t s t t s t t t t s t t t
| 稀刺薄壳 t t s s s t t t s s s t s t t s t t t t s t t t
ts 短刺板红 t t s s t t t s t s t t s s t t t s s s t t t t
tt 短扎 t t s s t t t t s s t t s t t t t t t t t t t s
tu 辐射 v号 t s t s s s s s s s s s s s s t t s s s s s s t
tv 处暑红 t s t s s s t t s s t t s t t t t t t t s t t s
tw 鲁 vx s t s s s s s s s s t t s t s t t s s s s t t t
tx 小金漆栗 t t s s s t t s s t s t s t t t t t t t t t t s
ty 柞水 tt号 t t s s t t t t t s t t s t t t t t t t t t t t
tz 金刚栗 t s s s t s t s s s t t s t t t t t t t t t t t
t{ 金丰 t t s s t t t s s s s t s t s t t s s t t t t t
t| 沅陵 t号 t t s s s t t t t s t t s t t s t s s t s t s s
us 粘底板 s t s t t s s s s s s t s t s t t s s s s t t s
ut 九月寒 t t s s s t t s s s t t s t s t t s s s s t t s
uu 郯城 usz t s s s s s t s s s t t s t t s t s t t t t s s
uv 蜜蜂球 t t s s t s s s s s t t s s s t t s s s s s s s
uw 大底青 t s s s s s s s s s s t s s s t t t t s s s s s
ux 赣农zz2ty t t s s s t t s t s s t s t t t t t t t s t s t
uy 浅刺大板栗 t t s s t t t s t s t s s s t t t s s t t t s t
uz 红栗 s s t s s s t s s s s s t s s t s s t t s s t s
u{ 小果油栗 t s s s s t t t s t s s t t t t t s s t s s s t
u| 油栗子 t s s s s t t s t s s t s t s t t s s t s s t s
vs 二新早 t t s s s t t s t s t t s t t t t s s t t t t t
vt 金华 t号 s s s s t t t s s s t t s t t t t s t s s t t t
vu 西沟 u号 t s t s s t t t t t t s s s t t t t t t t t s s
vv 薄壳 t s t s t t t t s s t t s s t t t t t t t t t s
vw 焦扎 t t s s s t t s t s t s s s t t t t t t s t t t
vx 大桂花栗 t t t s s t t t s t t s s t t t t s s s t t t s
vy 桔红皮 t s t t s t t s s t t s s t t t t s s t s t t s
vz 薄壳 t t s s s t t s s s t s s t t t t s s t s t t t
v{ 魁栗 t t s s s t t t t s t t s t t t t t t t t t t s
v| 香栗子 t t s s s t t s s s t t s t t t t t t t t t t s
ws 青毛栗 t t s s s t t s t t t t s t t t t s s s t t t t
wt 羊毛栗 t s t t t t t t s s s t s t t t t t t t t t t s
wu 双季栗 t s s s s t t s s s t t t t t t t s s t t t t t
wv 大红袍 t t t t s t t s t s t s s t t t t t t t s t t t
ww 早庄 s s t t s t t s s s t t s t t t t t t s t s s s
wx 大板栗 t s s s s t t s t s t s s t t t t t t t t t t t
wy 黑林 t号 s s s s s s s s t s s t t t s t t s s t t t t s
{y 林 业 科 学 vz卷
k续表 ul
序
号
²q
品种名称
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u 猪嘴蒲 t t s s t s s s s t t s s s t s t t s t t t t t
v 黄栗蒲 t t t s t s s s s t t t t t s s s s s t t t s t
w 青球早 s t s s t t s s t t t s s s s t s t s s t t t t
x 大红袍 t t s t t t t s s t t s s s t s s t s s t s t t
y 明栗 s t s s t t t s s s t s t s t s s t s s t t t t
z 尖顶油栗 t t s s t s t t t t t t s t t s s t t s t t t t
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| 稀刺薄壳 t t t s t s t t t t t t t t s s s s t s t t t t
ts 短刺板红 t t t t t s s s s t t s s t t s s t s t t t t t
tt 短扎 s s s s t s t s s t s s s s s s s s s s s s s t
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tz 金刚栗 t t s s t s t s t t t s s t s s s t s t t t t t
t{ 金丰 t t s s t s t s t t t t s t s s s t s t t t t t
t| 沅陵 t号 s t s s t t t s t t t t s s t s s t s t t t t t
us 粘底板 t t s s t s s s s s t s s s t s t t s s t s s t
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vv 薄壳 t t s t t s t s s t t t s t t s s s s t t t s t
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vy 桔红皮 s t s t t s s s t t t t s t t s s s s s t t t t
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|y 第 t期 高捍东等 }板栗主要栽培品种的分子鉴别
k续表 ul
序
号
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品种名称
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u 猪嘴蒲 t t t t t t t t t t t t t t t t t s t t t
v 黄栗蒲 t t t t t t s t t t t t s s t t t t t t s
w 青球早 s t t t t t s t t t s t t t t t s s t t t
x 大红袍 s s t t t t s t t t s t t t t s s t t t t
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vt 金华 t号 s s t t t t s t t t t t t t t t t s s t t
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vy 桔红皮 s t t t t t t t t t t t t s t t s t t t t
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v| 香栗子 t t t t t t s t t t s t t t t t t s t t t
ws 青毛栗 s s t t s t t t s t t t t t t s t t t t t
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wu 双季栗 t t t t t t t t t t t t t t t t s s t t t
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ww 早庄 s t t t t t t t t t t t s t t t t t t t t
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wy 黑林 t号 s s s s s s s s s t t t t s t s s s t t t
sz 林 业 科 学 vz卷
参 考 文 献
陈 洪 q杂交水稻汕优 yv杂种纯度的 °⁄鉴定 o科学通报 ot||y owtk|l
陈 亮等 qtx个茶叶品种遗传多样性的 °⁄分析 q茶叶科学 ot||{ ot{ktl }ut ∗ uz
傅家瑞 q利用 °⁄分析技术鉴定品种纯度的研究 q种子 ot||wkuul
甘四明 o施季森 o白嘉雨等 q尾叶桉和细叶桉无性系的 °⁄指纹图谱构建 q南京林业大学学报 ot||| ouvktl }tt ∗ tw
李文彬 o周小梅 o张 健等 q水稻三系及其杂种的 ⁄指纹图谱分析 q农业生物技术学报 ot||x ovkul
刘青林 o陈俊愉 q梅花亲缘关系 °⁄研究初报 q北京林业大学学报 ot||| outkul }{t ∗ {x
罗正荣 o光森敬三 o杉浦明 q应用 °⁄技术进行柿种类和品种鉴定 q日本园艺学会杂志 ot||x oyw }xvx ∗ xwt
苏晓华 q用 °⁄技术估测柳树种及无性系的变异 q林业科学 ot||x ovtkvl }utt ∗ utw
徐碧玉 o金志强 o彭世清等 q海南主栽芒果品种基因组 ⁄的 °⁄分析 q热带作物学报 ot||{ ot|kvl }vv ∗ vz
尹佟明 o黄敏仁 o王明庥等 q利用 °⁄标记和单株树大配子体构建马尾松的分子标记连锁图谱 q植物学报 ot||z ov|kzl }ysz ∗ ytu
余四斌 o徐才国 q用 °⁄鉴定水稻种子纯度的初探 q种子 ot||y ox }xy ∗ xz
§¤·² o≥«¤µ²± ⁄o¤µ¬ q ³³¯¬¦¤·¬²± ²© ⁄ ©¬±ª¨µ³µ¬±·¶©²µ¬§¨ ±·¬©¬¦¤·¬²± ¤±§ª¨ ±¨ ·¬¦¤±¤¯¼¶¬¶²© ¤±ª² k Μανγιφερα ινδιχα Λ . ª¨ ±²2
·¼³¨¶qq ° µ¨q ²µ·q≥¦¬qt||x otuskulux| ∗ uyw
µ¨ª²µ⁄o ¤µ·°¤± • o≥·²¶¶¨µ q ≤∏¯·¬√¤µ¬§¨ ±·¬¦¤·¬²±¬± Πρυνυσ δοµεστιχα ∏¶¬±ª ° ⁄q¦·¤ ²µ·¬¦ot||w ovx| }vv ∗ ww
¬¯¯¤± × o ¶∏±¤ ƒ o≤²¥²¶≥ ετ αλ. ¶¬±ª °⁄≥ ·²¶·∏§¼ ³«¼¯ ²ª¨ ±¨ ·¬¦µ¨ ¤¯·¬²±¶«¬³¶¬± Ροσα . × ot||y o|ukul }uzv ∗ uzz
¨¬¤¶¤·²¶¬¬q ±¨¨ ·¬¦§¬¶·¤±¦¨ ¥¨·º¨¨ ± ³²³∏¯¤·¬²±¶q ׫¨ ° µ¨¬¦¤± ±¤·∏µ¤¯¬¶·ot|zu o∂ ²¯ qtsy ²q|w|
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5杉木林可持续经营的研究6评介
杉木是我国南方重要的速生 !丰产用材树种 o从 xs年代起大量栽植 o纯林面积逐年上升 o连栽面积
也迅速扩大 o杉木人工林生产力下降和土壤肥力衰退日趋严重 o引起了人们的极大关注 ∀目前有关杉
木人工林地力衰退机制及采取有效措施维持人工林立地长期生产力的研究 o不但是林学界的研究热点
之一 o也是营林生产上急待解决的关键问题 ∀国内在该领域亦有不少成果报道 o由中国林业出版社出
版 !杨玉盛教授等著的5杉木林可持续经营的研究6一书在同类研究的基础上 o对这一问题进行了系统 !
全面的分析研究 o从而使该领域的研究上升到一个新的水平 ∀在国家攻关及省科委重大项目等的支持
下 o以作者为主的课题组 o通过选择有较大代表性的福建省闽北杉木中心产区 o经过不懈努力和不断探
索 o历经 ts余年 o完成了对/杉木林可持续经营0课题的研究 ∀部分研究成果曾获国家和省部级科技进
步奖 o同时在全国性核心期刊上发表了大量学术价值较高的研究论文 ∀
5杉木林可持续经营的研究6一书内容从严格选择标准地入手 o以可持续经营思想为指导 o采用先
进的科技手段 o对可比性较强的 t ∗ v代杉木近熟林的生产力 !生长特性 !土壤肥力 !养分循环等进行了
较系统全面的分析研究 o揭示杉木人工林地力衰退特征 o并从群落结构 !营林措施干扰 !树种生物学特
性 !土壤生态系统的脆弱性等方面对影响杉木人工林地力衰退的因素进行探讨 o在此基础上对杉木人
工林地力衰退的机制进行了深入的分析 ~同时对南方杉木林区目前维持地力较好的杉农复合经营 !杉
阔轮栽 !留杉栽阔 !栽杉留阔 !人工促进天然更新 !多代连栽地营造杉阔混交林等几种模式进行了较深
入的研究 o为杉木林的可持续经营措施采取指明途径 ∀该书在内容上很有特色 o部分观点或结论新颖 !
独到 o有较大创新性 o填补了以往研究的空白 ∀书中应用了大量翔实可靠的数据 o论据充分 o具有较强
的逻辑性和说服力 o为我国人工林地力衰退研究提供了大量真实 !宝贵的资料 ∀
该书理论与实践紧密结合 o针对性 !实践性 !科学性较强 ∀这是一部学术水平和应用价值都较高的
专著 ∀该书的面世对我国人工林立地长期生产力维持的研究 !人工林栽培制度的变革 !经营水平的提
高起到有力的促进作用 o并为继续探求我国人工林可持续发展道路提供了重要的理论和实践参考 ∀
k南京林业大学 黄宝龙l
tz 第 t期 高捍东等 }板栗主要栽培品种的分子鉴别