全 文 ：园艺学报，2016，43 (2)：337–346.
Acta Horticulturae Sinica
doi：10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0331；http：//www. ahs. ac. cn 337
收稿日期：2015–09–23；修回日期：2016–01–27
基金项目：陕西省科技统筹创新工程计划项目（2015KTZDNY02-03-01，2016YFXX0021）；陕西省自然科学基础研究计划项目
（2014JM3077）；国家国际科技合作专项项目（2015DFA30400）
* E-mail：zxxjzb520@gmail.com；Tel：029-85534416
猕猴桃 SRAP-PCR 体系的建立及品种资源亲缘
关系研究
井赵斌 1,3,*，徐 明 1,3，雷玉山 1,2,3
（1 陕西省农村科技开发中心，西安 710054；2 陕西省西安猕猴桃试验站，西安 710054；3 陕西省汉中猕猴桃研究
所，陕西汉中 723500）
摘 要：以猕猴桃属（Actinidia Lindl.）不同种幼嫩叶片为材料，建立了基因组 DNA 提取的改良 SDS
法，在此基础上采用正交试验设计和单因素分析相结合的方法，建立了适合猕猴桃 SRAP 分析的优化体
系，即在 20 μL 总的反应体系中包括：DNA（40 ng · μL-1）1 μL、Taq DNA 酶（5 U · μL-1）0.2 μL、dNTPs
（2.5 mmol · L-1) 1.4 μL、引物（10 μmol · L-1）各 1.5 μL、Mg2+（25 mmol · L-1）2.0 μL、10× 缓冲液 2.5 μL、
ddH2O 9.9 μL。利用该体系对 32 份猕猴桃品种资源进行遗传多样性和亲缘关系分析，结果表明 14 条引物
共扩增出 275 个多态性位点，多态性百分率为 100%，SRAP 可以作为猕猴桃资源亲缘关系研究的有效标
记；在遗传相似系数 0.73 水平处，供试材料可区分为 4 组，分别是中华猕猴桃、美味猕猴桃、黑蕊猕猴
桃和毛花猕猴桃组。聚类结果表明中华猕猴桃与美味猕猴桃有着非常近的亲缘关系，毛花猕猴桃与中华
猕猴桃之间的亲缘关系较远，黑蕊猕猴桃与美味猕猴桃之间亲缘关系可能较近。
关键词：猕猴桃；SRAP 标记；体系建立；亲缘关系
中图分类号：S 663.4 文献标志码：A 文章编号：0513-353X（2016）02-0337-10

Construction and Application of SRAP-PCR System to Analyze Genetic
Relationship of Actinidia
JING Zhao-bin1,3,*，XU Ming1,3，and LEI Yu-shan1,2,3
（1Shaanxi Rural Science and Technology Development Center，Xi’an 710054，China；2Xi’an Kiwifruit Experiment Station
of Shaanxi Province，Xi’an 710054，China；3Hanzhong Kiwifruit Research Institute of Shaanxi Province，Hanzhong，Shaanxi
723500，China）
Abstract：An improved SDS method，suitable for extracting genomic DNA of Actinidia young
leaves，was established. Based on this result，an orthogonal design and a factor analysis method were
combined to optimize the SRAP-PCR reaction system of Actinidia. The results indicated that the optimum
concentrations of each component in the 20 μL reaction system included：DNA（40 ng · μL-1）1 μL，Taq
Polymerase（5 U · μL-1）0.2 μL，dNTPs（2.5 mmol · L-1）1.4 μL，primer（10 μmol · L-1）1.5 μL，Mg2+
（25 mmol · L-1）2.0 μL，10× Buffer 2.5 μL，ddH2O 9.9 μL. The genetic diversity and relationships of 32
kiwifruit varieties were analyzed based on this PCR reaction system. Fourteen SRAP primer combinations

Jing Zhao-bin，Xu Ming，Lei Yu-shan.
Construction and application of SRAP-PCR system to analyze genetic relationship of Actinidia.
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generating a total of 275 bands，and the polymorphic bands were 100% for all primer sets. The results
showed that SRAP could be as an efficient technique to assess genetic diversity for Actinidia. The
dendrogram showed that all varieties could be divided into four clusters at the similarity level of 0.73，that
including A. chinensis，A. deliciosa，A. melanandra，and A. eriantha. The relationship between A. chinensis
and A. deliciosa，A. deliciosa and A. melanandra is close，whereas A. chinensis and A. eriantha is distant.
Key words：Actinidia；SRAP marker；system construction；genetic relationship

猕猴桃属（Actinidia）有 54 个种、21 个变种，共计 75 个分类单元，其中中国有 52 种，73 个
分类单元（黄宏文，2013a）。中国作为猕猴桃的原生地，先后育成了美味猕猴桃、中华猕猴桃、软
枣猕猴桃和毛花猕猴桃优良品种或品系 148 个（黄宏文，2013b）。这些资源对猕猴桃品种更新换代
做出了很大的贡献，但也存在一些问题，如现有品种虽存在较高的杂合度，但其遗传基础较狭窄，
特别是国外野生资源较少（Datson & Ferguson，2011）；近年来栽培品种大面积替代地方品种使得品
种遗传多样性下降，这在气候变化和病害（如溃疡病）爆发时是很危险的（Vanneste，2012）。因此，
加强对现有猕猴桃品种资源遗传多样性的评价十分必要。传统上一般基于植物表型性状对种质资源
进行遗传多样性评价，而这些表型性状往往受环境或表型可塑性的影响很大（Zhe et al.，2010）。DNA
分子标记技术因其可靠、重复性高等特点被用于植物遗传多样性和亲缘关系研究中（Kalia et al.，
2011）。目前已有许多分子标记技术成功应用于猕猴桃属物种遗传多样性和亲缘关系研究中
（Crowhurst et al.，1990；Testolin et al.，2001；Huang et al.，2002；邹游 等，2008；Zhou et al.，
2011；汤佳乐 等，2014）。研究表明，相比 SSR、ISSR、RAPD 和 AFLP 标记，SRAP 分子标记可
以提供更高的多态性信息，因而具有更强的鉴别能力（Budak et al.，2004；井赵斌 等，2012；Jing et
al.，2013a）。
在建立猕猴桃 SRAP-PCR 反应体系的基础上，对中国主栽中华猕猴桃和美味猕猴桃品种和部分
雄株资源进行遗传多样性和亲缘关系分析，为种质资源的利用和育种亲本的选择提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
本研究中所用的猕猴桃品种（表 1）均保存于陕西省猕猴桃创新园和陕西省西安猕猴桃试验站
种质资源圃，位于陕西周至县九峰镇，地理位置 34°3′49.54′′N，108°26′41.44′′E，年平均气温 13.2 ℃，
年均降水量 660 mm，年日照时数 1 867.5 h，属暖温带大陆性季风气候。室内分析在西北农林科技
大学园艺学院完成。
1.2 DNA 提取与质量检测
2014 年 6 月中旬采集材料幼嫩叶片，先后参考井赵斌等（2012）的 CTAB 法和邹游（2007）的
SDS 方法略作修改后提取基因组 DNA。分别用 0.8%的琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测 DNA
质量和浓度后，稀释工作液浓度至 40 ng · μL-1，保存母液和工作液于–20 ℃冰箱中备用。
1.3 SRAP-PCR 反应体系的建立与优化
SRAP 引物参考井赵斌等（2012）的序列，共 17 条正向引物和 21 条反向引物，由北京奥科生
井赵斌，徐 明，雷玉山.
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物工程公司合成。用于体系优化的引物组合为 Me4 + Em3 和 Me3 + Em3，材料分别为表 1 中所有中
华猕猴桃和美味猕猴桃品种各自的 DNA 混合液。

表 1 试验材料
Table 1 Materials used in this study
性别
Sex
所属种
Species
编号
Code
品种
Cultivar
来源
Origin
雌 Female 中华猕猴桃 A. chinensis ZH-1 豫皇 2 号 Yuhuang 2 河南 Henan
ZH-2 豫皇 1 号 Yuhuang 1 河南 Henan
ZH-3 金农 Jinnong 湖北 Hubei
ZH-4 金艳 Jinyan 湖北 Hubei
ZH-5 Hort16A 新西兰 New Zealand
ZH-6 红阳 Hongyang 四川 Sichuan
ZH-7 华优 Huayou 陕西 Shaanxi
ZH-8 金早 Jinzao 湖北 Hubei
ZH-9 金桃 Jintao 湖北 Hubei
ZH-10 脐红 Qihong 陕西 Shaanxi
ZH-11 楚红 Chuhong 湖南 Hunan
美味猕猴桃 A. deliciosa MM-1 华美 2 号 Huamei 2 河南 Henan
MM-2 秦美 Qinmei 陕西 Shaanxi
MM-3 金硕 Jinshuo 湖北 Hubei
MM-4 秋明 Qiuming 陕西 Shaanxi
MM-5 哑特 Yate 陕西 Shaanxi
MM-6 金魁 Jinkui 湖北 Hubei
MM-7 翠香 Cuixiang 陕西 Shaanxi
MM-8 晨光 Chenguang 陕西 Shaanxi
MM-9 徐香 Xuxiang 江苏 Jiangsu
MM-10 海沃德 Hayward 新西兰 Newsland
MM-11 海艳 Haiyan 江苏 Jiangsu
MM-12 贵长 Guichang 贵州 Guizhou
雄 Male 黑蕊猕猴桃 A. melanandra XZ-1 黑蕊 Heirui 陕西 Shaanxi
美味猕猴桃 A. deliciosa XZ-2 K56 陕西 Shaanxi
毛花猕猴桃 A. eriantha XZ-3 超红 Chaohong 湖北 Hubei
中华猕猴桃 A. chinensis XZ-4 红阳雄 Hongyangxiong 陕西 Shaanxi
毛花猕猴桃 A. eriantha XZ-5 毛花–1 Maohua-1 湖北 Hubei
毛花猕猴桃 A. eriantha XZ-6 毛花–2 Maohua-2 湖北 Hubei
中华猕猴桃 A. chinensis XZ-7 磨山 4 号 Moshan 4 湖北 Hubei
美味猕猴桃 A. deliciosa XZ-8 秦美雄 Qinmeixiong 陕西 Shaanxi
美味猕猴桃 A. deliciosa XZ-9 美味雄 Meiweixiong 陕西 Shaanxi

PCR 反应程序采用复性变温法：94 ℃预变性 5 min；前 5 个循环为 94 ℃变性 1 min，35 ℃退火
1 min，72 ℃延伸 1 min；后 35 个循环仅将复性温度变为 50 ℃；循环结束后，72 ℃延伸 10 min，4 ℃
保存。PCR 扩增在 Eppendorf PCR 仪上进行。
SRAP-PCR 反应体系的建立与优化参考井赵斌等（2012）的方法，采用 L16（45）正交试验设
计，对影响 SRAP-PCR 反应的主要 5 个因子：DNA、Taq 酶、dNTPs、Mg2+和引物进行 5 因素 4 水
平的优化筛选试验，重复 2 次（即用 2 对引物组合和 2 组材料分别筛选 1 次），各反应组分的因素水
平正交试验表参考井赵斌等（2012）的设计。在正交试验选出最优体系的基础上，采用单因素筛选
试验，然后对 5 个主要因子设置 8 个不同的浓度梯度处理，在其他因子浓度保持不变的情况下按照
8 个梯度变化单个因子，逐个筛选出各个因子的最佳反应浓度。
根据正交试验和单因素筛选试验建立的最优反应体系，随机选取中华猕猴桃、美味猕猴桃和毛
花猕猴桃各两个品种和 4 对随机引物组合进行体系验证。扩增产物用 6%的非变性聚丙烯酰胺凝胶
电泳检测，银染显影，照相统计结果。
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1.4 引物筛选和遗传多样性分析
根据建立的最优反应体系进行引物筛选，从 357 对引物组合中共筛选出多态性高、条带清晰的
引物组合 14 对，材料分别为中华猕猴桃、美味猕猴桃、毛花猕猴桃和雄株所有品种组成的混合液，
共 4 个材料。筛选的引物序列见表 2。利用筛选出的 14 对引物组合（表 3）对所有供试材料进行遗
传多样性分析。

表 2 筛选出的 SRAP 多态性引物序列
Table 2 The primer sequences selected in SRAP analysis
引物编号
Primer code
正向引物（5′–3′）
Forward primer（5′–3′）
引物编号
Primer code
反向引物（5′–3′）
Reverse primer（5′–3′）
ME1 TGA GTC CAA ACC GGATA EM2 GAC TGC GTA CGA ATT TGC
ME2 TGA GTC CAA ACC GGAGC EM3 GAC TGC GTA CGA ATT GAC
ME3 TGA GTC CAA ACC GGAAT EM4 GAC TGC GTA CGA ATT TGA
ME4 TGA GTC CAA ACC GGACC EM5 GAC TGC GTA CGA ATT AAC
ME5 TGA GTC CAA ACC GGAAG EM6 GAC TGC GTA CGA ATT GCA
ME6 TGA GTC CAA ACC GGACA EM8 GAC TGC GTA CGA ATT CAC
ME9 TGA GTC CAA ACC GGAGG EM10 GAC TGC GTA CGA ATT CAT
ME10 TGA GTC CAA ACC GGAAA EM12 GAC TGC GTA CGA ATT CTC
ME11 TGA GTC CAA ACC GGAAC EM15 GAC TGC GTA CGA ATT GAT
ME12 TGA GTC CAA ACC GGAGA EM16 GAC TGC GTA CGA ATT GTC

1.5 数据分析
SRAP-PCR 最优反应体系建立与优化结果分析方法采用直观法和统计分析法。按同一迁移位置
上扩增位点的有无进行统计，即扩增位点在相同迁移位置有带赋值为“1”，无带赋值为“0”，在 Excel
中建立二元数据矩阵。遗传多样性数据分析参考 Jing 等（2013b）的方法：即根据二元矩阵，利用
POPGEME 1.32 软件计算扩增产物的位点总数、多态性位点数和多态性位点百分率（Yeh et al.，
1999）。采用 NTSYS-pc2.1e 软件根据非加权配对平均法（UPGMA）进行聚类分析，构建聚类图。
计算平均多态性信息含量（PIC）（Powell et al.，1996）。
2 结果与分析
2.1 SRAP-PCR 最优体系的建立
参考井赵斌等（2012）的 CTAB 法和邹游（2007）的 SDS 法提取基因组 DNA。经琼脂糖电泳
检测 CTAB 法提取的 DNA 拖尾现象严重，说明 DNA 杂质较多，降解严重；而 SDS 法提取的 DNA
条带整齐，没有拖尾现象出现，说明质量较高（图 1）。经紫外分光光度计检测 DNA 质量和浓度，
SDS 法提取的 DNA 浓度较 CTAB 法提取的高，且纯度高（OD260/OD280 介于 1.8 ~ 2.0 之间），可以
满足试验要求。
经过正交和单因素试验建立的适合猕猴桃 SRAP 分析的 PCR 反应体系，20 μL 总反应体系中包
括：DNA（40 ng · μL -1）1 μL、Taq DNA 酶（5 U · μL-1）0.2 μL、dNTPs（2.5 mmol · L-1）1.4 μL、
引物（10 μmol · L-1）各 1.5 μL、Mg2+（25 mmol · L-1）2.0 μL、10× 缓冲液 2.5 μL、ddH2O 9.9 μL。


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图 1 基因组 DNA 琼脂糖电泳检测结果
Fig. 1 Agarose gel electrophoresis of genomic DNA

2.2 SRAP 标记的遗传多样性分析
2.2.1 SRAP标记的多态性
利用 14 对多态性引物对中华猕猴桃、美味猕猴桃、毛花猕猴桃和黑蕊猕猴桃种共 32 份品种资
源进行遗传多样性分析，共扩增出总位点 275 个，其中多态性位点数为 275 个，平均多态性百分率
为 100%。
引物组合 ME5 + EM4 扩增的位点数最多，为 25 条，ME4 + EM3 扩增的条带最少，为 13 条，
平均为 19.64 条（表 3）。多态性扩增产物在 100 ~2 000 bp 之间。多态性信息含量范围在 0.23 ~ 0.34
之间，其中引物组合 ME12 + EM16 最高（为 0.34），引物组合 ME11 + EM15 最低（为 0.23）。

表 3 14 对 SRAP 引物组合及其多态性分析
Table 3 The fourteen SRAP primer pairs used for this study and their polymorphic
引物组合
Primer combination
总位点数
Number of total loci
多态性位点数
Number of polymorphic loci
多态性百分率/%
Percentage of polymorphic
loci
多态性信息含量
Polymorphism information
content
ME1 + EM13 22 22 100 0.27
ME2 + EM8 17 17 100 0.29
ME3 + EM3 18 18 100 0.25
ME4 + EM3 13 13 100 0.27
ME4 + EM6 16 16 100 0.27
ME5 + EM4 25 25 100 0.31
ME5 + EM5 21 21 100 0.27
ME6 + EM2 24 24 100 0.25
ME9 + EM12 16 16 100 0.26
ME10 + EM16 21 21 100 0.32
ME11 + EM4 22 22 100 0.28
ME11 + EM10 23 23 100 0.26
ME11 + EM15 19 19 100 0.23
ME12 + EM16 18 18 100 0.34
总的 Total 275 275 100 3.87
平均 Mean 19.64 19.64 100 0.28

图 2 是引物组合 ME2 + EM8 扩增的部分材料结果。

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图 2 引物组合 ME2 + EM8 对部分材料的扩增结果
Fig. 2 The SRAP amplification profile of primer combination ME2 + EM8
M：DL 2000 marker.

2.2.2 聚类分析
32 个资源的遗传相似性系数范围在 0.484 ~ 0.902 之间。其中遗传相似性系数最高的中华猕猴桃
品种为豫皇 1 号和豫皇 2 号（0.902），美味猕猴桃品种为华美 2 号和秦美（0.896）；遗传相似性系
数最低的中华猕猴桃品种为豫皇 2 号和楚红（0.713），美味猕猴桃品种为哑特和贵长（0.705）。
聚类分析结果（图 3）表明，在遗传相似性系数 0.73 处，32 个猕猴桃品种资源可以区分为 4 组，
其中Ⅰ组包括中华猕猴桃品种豫皇 2 号、豫皇 1 号、金农、金艳、Hort16A、红阳、华优、金早、















图 3 32 份猕猴桃品种资源聚类图
资源编号同表 1。
Fig. 3 Dendrogram showing relationships among 32 kiwifruit varieties and resources using UPGMA analysis
The number is the same as in Table 1.
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金桃和脐红，美味猕猴桃品种海艳和贵长，中华猕猴桃雄株红阳雄和磨山 4 号；Ⅱ组包括美味猕猴
桃品种华美 2 号、秦美、金硕、秋明、哑特、金魁、翠香、晨光、徐香和海沃德，中华猕猴桃品种
楚红，美味猕猴桃雄株 K56 和秦美雄；Ⅲ组仅有雄株猕猴桃黑蕊；Ⅳ组为 3 个毛花猕猴桃雄株超红、
毛花–1 和毛花–2。
主成分分析可以在二维水平进一步分析不同材料之间的遗传变异规律，基于遗传相似性系数矩
阵的主成分分析结果（图 4）表明，主成分分类与聚类分析结果一致，也是将 32 个材料分为 4 组，
第一、二坐标分别解释总变异的 16.17%和 28.09%。

















图 4 32 份猕猴桃品种资源二维主成分分析图
编号同表 1。
Fig. 4 Two-dimensional plot of the principal component analysis of 32 varieties and resources
The number is the same as in Table 1.
3 讨论
高质量的 DNA 是保证 PCR 扩增反应成败的关键因素，目前关于植物基因组 DNA 提取的方法
已有许多报道（井赵斌 等，2012）。猕猴桃基因组 DNA 提取的方法也较多，本试验中先参考井赵
斌等（2012）的 CTAB 法提取猕猴桃 DNA，该 CTAB 法已经成功的应用于葡萄、扁桃、柿子和本
氏针茅的 DNA 提取（井赵斌 等，2012；Jing et al.，2013a，2013b；Jing & Wang，2013）。经 PCR
检测部分材料可成功扩增出条带，也有大部分材料无扩增产物。用紫外分光光度计检测 DNA 浓度
和质量，结果 260 nm/280 nm 处的 OD 值均低于 1.8，说明 DNA 中蛋白质污染，260 nm/230 nm 处
的 OD 值均低于 2.0，说明溶液中残存的盐类和小分子杂质过多（井赵斌 等，2012），进一步纯化后
PCR 扩增，仍然无扩增产物。猕猴桃因含有丰富的多糖、果胶及酚类物质，且酶活性较高，极易发
生氧化褐变，DNA 提取十分困难，一般方法在猕猴桃属植物中效果不一定理想（李作洲，2006）。
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采用植物 DNA 提取试剂盒（天根公司）对无扩增产物的材料重新提取，经琼脂糖检测，DNA 浓度
太低，几乎无条带。为排除材料的问题，之后参考邹游（2007）描述的 SDS 法进行改进，包括用鲜
样时增加提取液到 800 μL，其他试剂用量相应增加；修改为 10 000 r · min-1 离心 10 min；在氯仿/异
戊醇抽提前用酚氯仿抽提以减少粘稠度；70%乙醇漂洗时室温下静置 5 ~ 10 min。最终得到了高质量
的 DNA，该方法具有提取 DNA 质量好（条带无杂质拖尾），浓度高（平均浓度 > 200 ng · μL-1），
时间短（无需进一步纯化）等优点。SRAP-PCR 扩增和聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明，用改良的 SDS
法提取的基因组 DNA 完全可以满足遗传多样性分析的要求。
PCR 反应体系直接影响 PCR 扩增多态性位点的数量及遗传多样性结果的正确性，建立适宜的
PCR 反应体系是进行遗传多样性研究的首要条件。正交试验设计因省时和低成本已被广泛的应用于
各植物物种和不同分子标记 PCR 体系的优化，而正交试验设计和单因素试验设计相结合进行体系优
化的研究相对较少。特别是在猕猴桃中，目前仅有利用均匀设计优化猕猴桃 SRAP 体系的研究（王
卫 等，2013）。仅用正交试验设计或是单因素试验设计都存在一定的缺点，两者结合可以解决正交
试验中存在的结果评价主观性和单因素试验中各因子相互作用的缺失的问题。另外，在体系建立中
材料应该以不同种和较多材料的 DNA 混合池为模板 DNA，这样更具有代表性。本试验中利用同一
对引物和相同的材料对王卫等（2013）建立的体系和本研究中的最优体系进行了比较试验，结果存
在差异，本试验建立的体系多态性位点较多，这可能与本研究中材料的广泛性和 DNA 混合池有关。
该体系在其他猕猴桃物种中也具有通用性，如网脉猕猴桃（A. cylindrica var. reticulata）、软枣猕猴
桃（A. arguta）、葛枣猕猴桃（A. polygama）、阔叶猕猴桃（A. latifolia）等。
评价猕猴桃品种和种质资源的遗传多样性和遗传分化模式，为培育具有优异农艺性状的杂交后
代提供特异亲本材料，为育种过程中遗传多样性的丧失提供保护策略中具有重要的作用（Ferguson，
2007；Frankham，2010；Glaszmann et al.，2010），因此本研究中对育成的部分中华猕猴桃和美味猕
猴桃品种进行遗传多样性分析具有重要的意义。已有多种分子标记应用于猕猴桃遗传多样性分析中，
本研究中用 SRAP 标记获得的平均多态性位点百分率为 100%，均高于前人报道的 RAPD、ISSR 和
AFLP 标记，如邹游（2007）利用 RAPD 和 ISSR 对 11 个猕猴桃品种遗传多样性分析中获得的平均
多态性位点百分率分别为 74.29%和 82.41%；汤佳乐等（2014）利用 SSR 对 70 份野生毛花猕猴桃分
析中得到了 96.21%的平均多态性位点百分率；Li 等（2014）用 AFLP 分析了 115 份不同倍性猕猴桃
品种和资源的遗传多样性，结果表明平均多态性位点百分率二倍体为 58.70%，四倍体为 76.35%，
六倍体为 68.8%。本结果表明 SRAP 标记可以提供更多的遗传变异信息，也与前人在其他植物中（葡
萄、扁桃和柿子）的研究结果（Budak et al.，2004；井赵斌 等，2012； Jing et al.，2013a，2013b；
Jing & Wang，2013）一致，SRAP 可以作为一种猕猴桃遗传多样性分析中更加有效的标记。本研究
中发现现有品种虽存在较高的杂合度，但其遗传基础非常狭窄，而野生资源具有较高的遗传多样性
（Datson & Ferguson，2011）。本研究中各猕猴桃品种资源之间的遗传相似性系数在 0.484 ~ 0.902 之
间，魏艳霞（2008）利用 RAPD 标记对野生猕猴桃资源遗传分析发现各材料遗传相似性系数较高，
在 0.14 ~ 0.85 之间，因此应该加强野生资源的收集和利用研究。
研究种质资源之间的遗传关系和遗传距离有助于发展新的育种策略（Rajapakse，2003）。中华
猕猴桃是包含多个变种的近缘类群复合体，原变种中华猕猴桃与美味猕猴桃变种有着非常近的亲缘
关系（黄宏文，2013a）。从聚类结果可以发现，第Ⅰ组主要为中华猕猴桃品种资源，而美味猕猴桃
品种海艳和贵长也聚在一起，第Ⅱ组主要为美味猕猴桃品种资源，而中华品种楚红也聚在一起，这
进一步验证了前人的观点：美味猕猴桃作为中华猕猴桃的变种，具有很近的亲缘关系（Ferguson，
井赵斌，徐 明，雷玉山.
猕猴桃 SRAP-PCR 体系的建立及品种资源亲缘关系研究.
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2007；Huang & Ferguson，2007；黄宏文，2013a）。关于毛花猕猴桃与中华猕猴桃的关系存在争议，
主要存在两种观点：近缘或不近缘（黄宏文，2013a）。本研究中发现毛花猕猴桃与中华猕猴桃之间
的亲缘关系较远，支持后一种观点。种间杂交育种是多年生果树品种改良的主要方法之一，本研究
中发现黑蕊猕猴桃与美味猕猴桃之间亲缘关系可能较近，在明确其倍性的基础上，可尝试利用黑蕊
作父本和特定美味品种进行杂交育种。亲缘关系近的雌、雄珠进行杂交更易获得优良后代。从聚类
结果可以发现与雄株亲缘关系近的品种，如磨山 4 号、红阳雄和贵长、徐香和 K56 等亲缘关系较近，
在育种配置杂交组成中可优先考虑。本研究结果可为猕猴桃育种提出理论基础。

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