全 文 :园 艺 学 报 , (增刊): 2011 38 2475 http: // www. ahs. ac. cn
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自交亲和/不亲和杏花柱发育过程中差异表达蛋
白分析
曹晓艳,冯建荣*,王大江,孙军利,刘怀锋
(石河子大学农学院,新疆石河子 832003)
从蛋白质组水平探索杏树自交(不)亲和的分子遗传机制,找出可能与杏自交不亲和表达相关
的蛋白,为探索杏花柱与花粉亲和与不亲和相互作用的机制提供捷径,并为更完整地揭示果树自交
不亲和性的本质提供参考。
分别采集‘新世纪’和‘凯特’杏小蕾期、大蕾期、自花及异花授粉(授粉品种均为‘巴旦水
杏’)后 24 h的花柱,采用双向差异凝胶电泳技术,Cy3,Cy5 标记其花柱蛋白,Cy2标记内标,
内标为 4个样品的等量混合物。蛋白表达差异值经统计学分析(t检验),挑选出蛋白表达平均量
(AR)> 1.5 的差异蛋白质点(P < 0.01)进行质谱检测。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
(MALDI-TOF-MS)分析获得肽指纹图谱(Peptide Mass Fingerprint)数据以及MALDI串联飞行时
间质谱(MALDI-TOF/TOF)分析获得MS-MS数据,用MASCOT软件搜索 NCBInr数据库鉴定蛋
白。
在‘新世纪’杏的小蕾期、大蕾期、自花授粉后 24 h、异花授粉后 24 h的花柱中共检测到约
1 500 个蛋白点,其中有 66 个差异表达的蛋白点;在‘凯特’杏的小蕾期、大蕾期、自花授粉后
24 h、异花授粉后 24 h的花柱中共检测到约 1 600个蛋白点,其中有 143个差异表达的蛋白点。在
自交不亲和杏‘新世纪’中,异花授粉后 24 h花柱中特异表达的蛋白点 1个,表达丰度明显升高的
蛋白点 4个,表达丰度明显降低的蛋白点 29个;质谱分析只有 13个蛋白质点得到归属鉴定;而在
自交亲和杏‘凯特’中,自花授粉后花柱中特异表达的蛋白点 3个,异花授粉后表达丰度明显升高
的蛋白点 5个,表达丰度明显降低的蛋白点 13个,质谱分析只有 7个蛋白质点得到归属鉴定。明确
‘新世纪’和‘凯特’杏花柱对自体与异体花粉感应在蛋白质组水平上有差异。
关键词:杏;花柱蛋白;蛋白质组
中图分类号:S 662.2 文献标识码:A 文章编号:0513-353X(2011)S-2475-01
收稿日期:2011–07–12
基金项目:国家‘863’计划项目(2008AA10Z109);教育部新世纪优秀人才支持计划项目(NCET-08-0918)
* 通信作者(E-mail:fengjr102@126.com)