全 文 ：园 艺 学 报 2011，38（增刊）：2555 http: // www. ahs. ac. cn
Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com

收稿日期：2011–08–01
基金项目：国家自然科学基金项目（30771475）；国家‘863’计划项目（2006AA10Z1A6，2009AA10Z104）；农业部园艺作物遗传改良
重点开放实验室项目
* E-mail：lfzcaas@126.com；Tel：010-82105948
茄子单性结实抑制差减文库的构建及相关基因
的克隆
刘富中*，张 映，周亚君，陈钰辉，连 勇
（中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京 100081）
茄子单性结实性能克服低温引起的落花、落果障碍，增强坐果能力，显著提高产量，同时还可改
进果实品质，降低栽培成本。本研究旨在构建茄子单性结实果实差异表达基因的抑制性差减 cDNA
文库，分离获得茄子单性结实相关基因，研究茄子单性结实形成的分子机制。
以茄子单性结实品系 D-10和非单性结实品系 03-2的子房 cDNA分别作为实验组（Tester）和对
照组（Driver），进行抑制差减杂交，构建差减 cDNA 文库。对阳性克隆测序、BLAST 比对分析、
GO（gene ontology）功能注释及分类和荧光定量 PCR分析。通过 RACE技术获得与茄子单性结实
相关的基因。
通过抑制差减杂交技术（SSH）构建了茄子单性结实相关基因的正反 4个 SSH-cDNA文库，包
含 2 943个克隆，通过对阳性克隆测序、序列拼接后，获得 1 632个 Unique ESTs，其中 647个 ESTs
为已知功能的基因，另外 275个 ESTs代表了新基因。在功能已知的 ESTs中，包括一些与果实生长
发育相关的基因，如生长素增长启动子蛋白基因和扩张蛋白基因；与花器官发育相关的基因，如转
录因子 MADS-box家族和锌指蛋白基因等；信号传导相关基因，如 MAPKK基因和WRKY转录因
子基因等；以及环境响应因子，如组蛋白等。分析表明，茄子单性结实果实的差异主要发生在细胞
内部，涉及多个生理途径，单性结实性状的表达可能受到一些因子和激酶的调控。获得可能与茄子
单性结实相关的 ESTs有 10条，包括生长素增长蛋白、MADS-box转录因子、果实膨大相关基因等。
通过 RACE 技术成功克隆了 2 条差异基因 cDNA 全长，分别命名为 SmMsrA 和 SmERF。
SmMsrA为甲硫氨酸亚砜还原酶 A基因，cDNA全长序列 934 bp ，基因编码区共 600 bp，编码 199
个氨基酸。荧光定量 PCR研究表明：在不同结实性的子房和果实发育过程中 SmMsrA基因都有表达，
单性结实品系在低温条件下开花当天子房中的 SmMsrA的表达量最高。分析表明，茄子单性结实可
能受茄子甲硫氨酸亚砜还原酶（SmMsrA）的调控。
SmERF为乙烯响应因子，cDNA全长序列 1 342 bp，基因编码区共 723 bp，编码 240个氨基酸，
具有 AP2/EREBP 基因家族结构域。蛋白多序列比对和进化树分析表明，SmMsrA 与烟草乙烯响应
因子的同源性最高（81%），进化距离最近。正在对 SmMsrA和 SmERF基因的生物学功能进行研究。

关键词：茄子；单性结实；抑制差减文库；基因分离
中图分类号：S 641.1 文献标识码：A 文章编号：0513-353X（2011）S-2555-01