全 文 ：园 艺 学 报 ， （增刊）： 2011 38 2474 http: // www. ahs. ac. cn
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桃‘豫农矮砧 1 号’叶片愈伤组织诱导的研究
谭 彬，郑先波，熊明国，连晓东，李 靖，冯建灿*
（河南农业大学园艺学院，郑州 450002）
桃‘豫农矮砧1号’是1992年在毛桃实生后代中发现的矮化变异，其成年树冠不到毛桃成年树
冠的1/2，用其作砧木嫁接品种后，成年树冠仅为对照的2/3，是理想的矮化砧木；但因其不能结实，
无法获得种子，阻碍了在生产中应用。本试验中以‘豫农矮砧1号’幼嫩叶片为外植体，探讨稳定、
高效获得愈伤组织的诱导与增殖条件，为其离体快繁及体胚发生机理研究提供理论依据和试验基础。
以‘豫农矮砧 1号’幼嫩叶片为外植体进行了以下试验。（1）灭菌条件：灭菌剂为爱尔施牌消
毒片（有效氯含量 50 mg · g-1），选取不同浓度（4.0、5.0、6.0 g · L-1）和灭菌时间（5、8、10 min）
进行 2因素 3水平完全设计，共 9个处理。灭菌叶片接种于MS培养基，培养 7 d后统计污染率。（2）
2,4-D浓度：将灭菌叶片接种至添加不同浓度 2,4-D（0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mg · L-1）的MS培养基
上，以不添加的为对照，4周后统计愈伤组织诱导率。（3）光/暗条件：将灭菌叶片接种于附加 2.0
mg · L-1 2,4-D的MS培养基中，分别置于黑暗（培养箱）和光照（光照强度 2 000 lx，光/暗周期 16 h /8
h）下培养，4 周后统计愈伤组织诱导率并观察愈伤组织状态。（4）叶片愈伤组织诱导培养 30 d后，
选取生长状态良好的愈伤组织，以MS和WPM为基本培养基（附加 0、1.0、2.0 mg · L-12,4-D），在光
照条件下进行交替培养，每种培养基上培养 25 d后观察愈伤组织增殖及生长状态。
试验结果表明：（1）5.0 g · L-1消毒片处理 8 min，灭菌效果最好。培养 7 d后统计污染率，4.0 g · L-1
消毒片处理的叶片污染率明显高于 5.0和 6.0 g · L-1消毒片处理的叶片污染率。其中 5.0 g · L-1处理 8
或 10 min，6.0 g · L-1处理 5或 10 min的污染率较低，但 4个处理间差异不显著。考虑到高浓度、长
时间的消毒处理对外植体的毒害作用，确定最适的灭菌处理为 5.0 g · L-1消毒液处理 8 min。（2）附
加 2.0 mg · L-1 2,4-D的MS培养基愈伤组织诱导率最高。2,4-D在 0.5 ~ 2.0 mg · L-1范围内，随着浓度
的增加，愈伤组织诱导率也随之增加，2.0 mg · L-1时达到最大，为 83.3%，且愈伤组织生长状态良
好；当 2,4-D浓度超过 2.0 mg · L-1时，诱导率反而下降为 66.7%。（3）黑暗条件更有利于高质量愈伤
组织的产生。接种于附加 2.0 mg · L-1 2,4-D的MS培养基上叶片在黑暗条件下培养 4周后愈伤组织诱
导率高达 86.7%，且愈伤组织多为淡黄色，疏松，生长状态良好；而在光照条件下愈伤组织诱导率
仅为 66.7%，且愈伤组织多呈淡绿色或绿色的硬块状。（4）附加 1.0 mg · L-1 2,4-D的MS和WPM培养
基交替培养可实现愈伤组织的长期继代保存，增殖快，产生大量生长旺盛的愈伤组织，且很少发生
褐变；而当MS和WPM培养基不附加 2,4-D时，交替培养中愈伤组织生长缓慢，且很快硬化并褐化；
当附加 2,4-D提高到 2.0 mg · L-1时，在MS培养基中培养 25 d后，愈伤组织增殖较快，生长良好，而
随后转入附加 2.0 mg · L-1 2,4-D的WPM培养基后，愈伤组织逐渐褐化。
关键词：桃；愈伤组织
中图分类号：S 662.1 文献标识码：A 文章编号：0513-353X（2011）S-2474-01

收稿日期：2011–07–28
基金项目：河南省教育厅自然科学研究计划项目（2011B210021）
* 通信作者（E-mail：jcfeng@henau.edu.cn；Tel：0371-63579621）