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Research on in Vitro Culture for Plant Regenera tion and Cultivation ofOrnamenta l of Melastoma dodecandrum

地菍离体培养植株再生及其栽培试验



全 文 :© 1994-2009 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net
园  艺  学  报  2007, 34 (3) : 787 - 790
Acta Horticulturae Sinica
收稿日期 : 2006 - 11 - 06; 修回日期 : 2007 - 04 - 02
地菍离体培养植株再生及其栽培试验
蒋道松 1 , 李 玲 1 , 熊碧罗 2 , 李 娈 1
(1湖南农业大学生物科学技术学院 , 长沙 410128; 2 长沙市园林管理局 , 长沙 410011)
摘  要 : 地菍叶片离体培养研究结果表明 : 诱导愈伤组织最佳的培养基为 MS + 1 mg·L - 1 2, 42D + 012
mg·L - 1 62BA + 5%蔗糖 + 016%琼脂和 MS + 2 mg·L - 1 2, 42D + 012 mg·L - 1 62BA + 5%蔗糖 + 016%琼脂 ; 丛
生芽分化增殖最佳培养基为 MS + 2 mg·L - 1 62BA + 013 mg·L - 1 NAA + 5%蔗糖 + 016%琼脂 ; 生根最佳培养
基为 1 /2MS + 115 mg·L - 1 NAA + 015 mg·L - 1 2, 42D + 5%蔗糖 + 0. 6%琼脂和 MS + 015 mg·L - 1 62BA + 2
mg·L - 1 NAA + 5%蔗糖 + 016%琼脂。栽培观赏研究表明 : 盆栽最佳温度为 28~32℃; 最佳基质为泥炭土 +
蛭石 (2 ∶1) 和腐殖土 +蛭石 (2 ∶1) ; 坪栽最佳肥料配比为 N ∶P ∶K = 114 ∶112 ∶1, 最佳土壤为腐殖土。
关键词 : 地菍 ; 离体培养 ; 植株再生 ; 栽培 ; 观赏植物
中图分类号 : S 68  文献标识码 : A  文章编号 : 05132353X (2007) 0320787204
Research on in V itro Culture for Plan t Regenera tion and Cultiva tion of
O rnam en ta l of M elastom a dodecandrum
J IANG Dao2song1 , L IL ing1 , X IONG B i2luo2 , and L ILuan1
(1 College of B ioscience and Technology, Hunan A gricultural U niversity, Changsha 410128, Ch ina; 2 Garden M anagem ent B ureau
of Changsha C ity, Changsha 410007, China)
Abstract: In vitro culture and p lant regeneration of M elastom a dodecandrum by tissue culture using its
blade were studied. The results showed that the op timum medium for callus induction isMS supp lemented with
2, 42D 1 mg·L - 1 , 62BA 012 mg·L - 1 , 5% sucrose and 016% agar , orMS with 2, 42D 2 mg·L - 1 , 62
BA 012 mg·L - 1 , 5% sucrose and 016% agar. The op timum medium for the formation and growth of cluster
buds isMS with 62BA 2 mg·L - 1 , NAA 013 mg·L - 1 , 5% sucrose and 016% agar. The op timum medium
for rooting is 1 /2MS with NAA 115 mg·L - 1 , 2, 42D 015 mg·L - 1 , 5% sucrose and 016% agar, or MS
with 62BA 015 mg·L - 1 , NAA 2 mg·L - 1 , 5% sucrose and 016% agar. The cultivation for ornamental of
test2tube p lantlets was also studied. The op timum temperature is 28 - 32℃. The op timum medium is 2 /3 peat
soil and 1 /3 verm iculite, or 2 /3 humus and 1 /3 verm iculite for pot cultivation. The best p roportion of N, P
and K is 114 ∶112 ∶1. The op timum soil is humus. The test2tube p lantlets can be cultivated as a pot flower
and ornamental lawn with high ornamental value.
Key words: M elastom a dodecandrum ; In vitro culture; Regeneration; Cultivation; O rnamental
地菍 (M elastom a dodecandrum Lour. ) 为野牡丹科半灌木 , 分布于长江以南各省区 (中科院植物
研究所 , 1987; 夏汉平 等 , 2002 ) , 极具观赏价值 , 并具药用 (张超 等 , 2002; 张超和方岩雄 ,
2003)、食用 (石东梅 等 , 2000, 2002) 及环保价值。但其种子微小 , 发芽率极低 , 繁殖速度缓慢
(漆萍 等 , 2005) ; 植株不直立 , 在城市环境中生长不良。为获得大量适应城市环境生长的优质种苗 ,
将其开发为一种新型盆栽花卉及观赏草坪植物 , 作者首次对其进行了离体培养植株再生及栽培研究。
1 材料与方法
地菍引种自湖南祁阳县。9月上旬 , 取地菍嫩叶置于 011% HgCl2溶液中 5 m in, 无菌水冲洗 , 切
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园   艺   学   报 34卷
成 015~110 cm见方小块 , 分别接种于添加不同浓度 2, 42D、62BA和 NAA的 MS、1 /2MS诱导培养
基 (pH 518~610, 蔗糖 5% , 琼脂 016% )。温度 (26 ±2) ℃, 光照 2 000 lx, 16 h /d。
培养箱盆栽试验 : 3月上旬 , 当试管苗根长达 3~5 cm时 , 移植于灭菌的泥炭土 +蛭石 (2∶1)
基质中炼苗 ; 4月上旬 , 将成活的试管苗植于相同基质花盆中 , 分置于光照培养箱 (3 000 lx、14 h /
d, 相对湿度 85% ) 6个温度梯度 (18、23、28、32、37、42℃) 下培养 40 d, 观测生长发育情况。
温室盆栽试验 : 4月中旬 , 在自然光照、控温 32℃温室中 , 取炼苗成活的试管苗 , 20株 1组 ,
分植于 9种基质花盆中 , 观测成苗率及长势。栽培基质见表 2。
露地坪栽试验 : (1) 肥料配比试验。5月初 , 取炼苗成活的试管苗 , 分植于 2 m ×4 m大田中 ,
株行距 20 cm ×20 cm , 土壤为改良后的红壤 , 上盖一层 5 cm腐殖土。设置 5种 N ∶P ∶K配比 (表
3) , 进行生物学特性及其物候观察。 ( 2) 土壤对比试验。设置 5种土壤类型 (表 4) , 土层厚度 20
cm, 进行生长发育观察与统计分析。
以上试验均重复 2次。
2 结果与分析
211 不同植物生长调节剂组合对地菍叶片愈伤组织诱导的影响
将地菍的叶片接种在诱导培养基中培养 6~8 d后 , 切口处可见淡黄色和乳白色的愈伤组织。培
养 30 d左右 , 愈伤组织开始分化出绿色芽点 (图版 , 1) , 继续培养可分化出幼苗。对 8种配方培养
材料的分化和诱导情况进行分析比较和优化组合 , 筛选出最佳诱导培养基配方为 MS + 110 mg·L - 1
2, 42D + 012 mg·L - 1 62BA和 MS + 2 mg·L - 1 2, 42D + 012 mg·L - 1 62BA , 24 d出愈率均达 100%。
212 不同植物生长调节剂组合对地菍丛生芽继代增殖的影响
将带芽愈伤组织转入分化培养基 , 30 d后形成大量不定芽 (图版 , 2)。对 4种培养基配方的分
化率、增殖系数及芽的长势比较和优化组合后 , 筛选出丛生芽分化增殖最佳培养基为 MS + 210
mg·L - 1 62BA + 013 mg·L - 1 NAA , 平均获得芽 57个 /块 , 增殖系数 1910, 芽体粗壮 , 玻璃化苗少。
213 不同培养基对地菍试管苗生根的影响
将高 2~3 cm的芽从丛生芽块上单个切下 , 转入生根培养基 , 10~15 d陆续长根 , 根尖白色或略
呈紫红色。最佳生根培养基为 1 /2MS + 115 mg·L - 1 NAA + 015 mg·L - 1 2, 42D, 其次为 MS + 015
mg·L - 1 62BA + 210 mg·L - 1 NAA, 生根率分别达 100%和 95%。当苗长至 4~5 cm, 根 5~8 cm时即
可移栽 (图版 , 3~5)。
214 不同温度对盆栽地菍生长的影响
由表 1得知 : 平均株高、分枝数及花蕾数均随温度的增高而增加 , 28℃时生长发育较好 ; 32℃时
植株长势最旺盛 , 分枝数及花蕾数多。推测 28~32℃为地菍试管苗的最佳培养温度 (图版 , 6)。
表 1 不同温度对地菍试管苗盆栽生长发育的影响
Table 1 Effects of d ifferen t tem pera tures on growth and developm en t of M. dodecandrum
温度
Temperature (℃)
植株高
Height ( cm)
分枝数
B ranches
花蕾数
Flower buds
长势
Growth
盆栽至开花天数
Planting - flowering( d)
18 15. 51 8. 75 2. 12 瘦弱 ,肉质 ,较矮 Slender, fleshy, shorter 45
23 16. 63 13. 51 4. 23 较健壮 ,草质 ,中等 Vigorous, herbaceous, medium height 43
28 21. 35 15. 53 6. 68 健壮 ,草质 ,较高 V igorous, herbaceous, higher 42
32 22. 24 16. 67 7. 12 健壮 ,草质 ,高 V igorous, herbaceous, highest 40
37 18. 12 11. 47 7. 89 基部木质化 ,较粗矮 Stocky, lignification 38
42 6. 50 5. 33 - 矮小 ,木质化 ,多萎蔫死亡 -
Shortest, lignification, most are withered and dying
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 3期 蒋道松等 : 地菍离体培养植株再生及其栽培试验  
215 温室盆栽基质对地菍生长的影响
从表 2可知 , 最佳基质为泥炭土 +蛭石 (2 ∶
1) 和腐殖土 +蛭石 (2 ∶1) , 最差基质为红壤。
移栽 50 d左右 , 陆续开花 , 并随后挂果。
216 露地坪栽肥料及土壤对地菍生长发育的影响
  表 3表明 , 地菍试管苗在长沙地区露地栽培能
正常开花结果 (图版 , 5、6) , 但不同肥料配比下
生长发育状况不同。以观叶、观花及观果综合考
虑 , N ∶P ∶K = 114 ∶112 ∶1的肥料配比较为理想 :
植株长势旺盛 , 始花期早 , 花期和果期较长 , 枯萎
期较晚。露地栽培时 , 株高明显降低 , 呈匍匐状 ,
叶片变厚 , 发亮 , 角质层加厚 , 植株纤维化、木质
化程度增高。腐殖土对地菍试管苗的生长最为适
合 , 其次为菜园土 , 红壤最差 (表 4)。
表 2 不同基质对地菍成苗率和生长的影响
Table 2 Effects on growth and surv iv ing ra te of M.
dodecandrum in d ifferen t types of substra tes
基质类型
Type of substrate
成苗率
Surviving rate (% )
长势
Growth
红壤 Red clay soil 65 差 Worse
沙土 Sandy soil 70 中等 Commonly
泥炭土 Peat soil 85 较好 Better
腐殖土 Humus soil 90 较好 Better
红壤∶蛭石 = 1∶2 85 中等 Commonly
Red soil∶Verm iculite = 1∶2
沙土∶蛭石 = 1∶1 75 中等 Commonly
Sandy soil∶Verm iculite = 1∶1
泥炭土∶蛭石 = 2∶1 95 好 Best
Peat soil∶Verm iculite = 2∶1
腐殖土∶蛭石 = 2∶1 95 好 Best
Humus∶Verm iculite = 2∶1
椰壳∶蛭石 = 3∶1 80 较好 Better
Coco pericarp∶Verm iculite = 3∶1
表 3 不同肥料配比对地菍生长和发育的影响
Table 3 Effects of d ifferen t proportion s of N, P, K on growth and developm en t of M. dodecandrum
N∶P∶K 株高
Height ( cm)
匍匐枝长度
Stolon length ( cm)
花蕾数
Flower bud
花期 (M2D)
Florescence
果期 (M2D)
Fruiting period
枯萎期 (M2D)
W ithering period
长势
Growth
1∶1∶1 8115 15145 12117 05212 - 11215 05220 - 12201 11215 差 Worse
2∶1∶1 12131 22157 6145 05228 - 10226 05223 - 11212 12210 较好 Better
2∶1∶2 11152 18121 8176 05220 - 11206 05226 - 11221 12201 中等 Commonly
2∶2∶1 11114 20112 9112 05218 - 11202 05223 - 11217 11226 较好 Better
114∶112∶1 10164 19109 10154 05208 - 11212 05213 - 11227 12205 好 Best
表 4 不同土壤类型对地菍生长和发育的影响
Table 4 Effects of d ifferen t tem pera tureon s growth and developm en t of M. dodecandrum
土壤类型
Type of soil
株高
Height ( cm)
匍匐枝长
Stolon length ( cm)
分枝数
B ranch
花蕾数
Flower bud
长势
Growth
红壤 Red earths 5146 15159 8187 6145 差 Worse
沙土 Sandy soil 7122 17198 9176 7155 中等 Commonly
腐殖土 Humus 12137 23132 18113 12134 好 Best
稻田土 Paddy soil 10124 20188 12176 8113 中等 Commonly
菜园土 Garden soil 11103 21179 14177 9197 较好 Better
地菍试管苗耐高温与干旱瘠薄能力差 , 喜肥沃 , 保水排水与通气良好的土壤 (如腐殖土 )。苗期
应施全素肥料并多施氮肥 ; 孕蕾期、花果期以施磷肥为主适当加施钾肥 , 以促进花大籽壮及提早开
花 ; 坐果初期适当控制施肥 , 以利于坐果。
盆栽的地菍试管苗 , 直立或披散状 , 花大而艳丽 , 花瓣大小均匀 , 开放时呈含笑状 ; 花期长 (5
~11月 ) , 单花期长达 10~15 d; 叶片在一年中可呈现嫩绿、绿、深绿、粉红、紫红等色彩变化 , 叶
脉弧形 , 叶面凹凸有致 ; 果实呈少见的壶状 , 从结实到成熟呈现绿、红、紫红、紫黑等色彩变化。露
地坪栽时枝叶浓密 , 能形成平整致密的地被覆盖层 (图版 , 7、8) , 耐压性好 , 且无需修剪。
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图版说明 : 1. 叶片诱导形成愈伤组织分化出幼芽 ; 2. 丛生芽的增殖 ; 3. 植株形成不定根 ; 4. 完整的再生植株 ; 5. 移栽成活的试
管苗 ; 6. 盆栽开花的试管苗 ; 7. 露地坪栽开花的再生植株 ; 8. 果期的观赏草坪。
Explana tion of pla tes: 1. Callus reduced from blade differentiating buds; 2. Multip lication of cluster shoots; 3. Adventitious roots formed from
young p lantlets; 4. Test2tube p lantlets with all organs; 5. Survived seedling; 6. Flowering p lant in pot; 7. Flowering regeneration p lants culti2
vated in field; 8. O rnamental lawn of regeneration p lants with fruits.
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