全 文 ：园 　艺 　学 　报 　2002 , 29 (6) : 587
Acta Horticulturae Sinica
收稿日期 : 2002 - 04 - 23 ; 修回日期 : 2002 - 10 - 29
基金项目 : 农业部作物种质资源与生物技术重点实验室项目 ; 中国农业科学院西部大开发项目3 通讯作者 Author for correspondence
哈密瓜杂交种纯度的 AFLP 指纹鉴定
翟文强1 　田清震2 　贾继增2 　董玉琛2 3
(1 新疆维吾尔自治区农业科学院园艺作物研究所 , 乌鲁木齐 830000 ;　2 中国农业科学院作物品种资源研究所 , 北京 100081)
摘 　要 : MseI/ Pst I引物 M21P69 对哈密瓜一代杂种‘雪里红’及其父母本 , M17P35 对哈密瓜一代杂种
‘9818’和‘9321’和各自的父母本间扩增的 AFLP 指纹 , 可清楚地表明一代杂种与其父母本之间的遗传关
系 , 并可作为杂交种纯度鉴定的依据。
关键词 : 哈密瓜 ; 杂交种 ; 纯度鉴定 ; AFLP指纹
中图分类号 : S 652. 1 　　文献标识码 : A 　　文章编号 : 05132353X (2002) 0620587202
1 　材料与方法
试材为哈密瓜 ( Cucumis melo L. ) 3 个一代杂种‘雪里红’、‘9818’和‘9321’及其各自的父本和
母本。取二叶一心的幼苗真叶 2 片 , 提取 DNA →稀释至 300 ng/μL →MseI , PstI 双酶切 →连接 MseI 接
头 , PstI接头 →预扩增 →选择性扩增 →变性 →5 %聚丙烯酰胺凝胶 85W 恒功率电泳 →银染法检测。
2 　结果
图 1 显示引物M21P69 对‘雪里红’一代杂种、父本和母本所产生的 3 个扩增多态性标记 , 在 260
bp 和 190 bp 处一代杂种和父本各有一条强扩增带 , 而母本在这两个位置上无扩增带 ; 在 185 bp 处一
代杂种和母本各有一条弱扩增带 , 父本无扩增带。在这 3 个多态性标记位点上 , 一代杂种兼具其父本
和母本的带型 , 而其父本和母本的带型则各有缺失。图 2 显示引物 M17P35 分别对一代杂种‘9818’
和‘9321’及其父本和母本的扩增多态性 , 图 2 (左) ‘9818’一代杂种和父本在 110 bp 和 105 bp 之
间各有一条强扩增带 , 其母本无带 ; 在约 105 bp 处‘9818’一代杂种和母本各有一条强扩增带 , 其父
本无带。图 2 (右) ‘9321’一代杂种和母本在 110 bp 和 105 bp 之间各有一条强扩增带 , 其父本无带 ;
在约 105 bp 处‘9321’一代杂种和父本各有一条强扩增带 , 其母本无带。在 2 个扩增多态性位点上 ,
‘9818’和‘9321’一代杂种都兼具了父本和母本的扩增带型。
本试验结果说明 AFLP 指纹可明确表达哈密瓜杂交种的真伪 , 其指纹多态性还可作为杂交种纯度
鉴定的依据。
图 1 　M21P69 产生的‘雪里红’及其亲本
的 AFLP指纹
Fig. 1 　AFLP fingerprint of‘Xue lihong’and its
parents detected by the primer combination M21P69
图 2 　M17P35 产生的‘9818’(左) 、‘9321’(右) 及其
亲本的 AFLP指纹
Fig. 2 　AFLP fingerprint of ‘9818’( Left) , ‘9321’( Right)
and their parents detected by primer combination M17P35
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是显著的。进一步分析表明不论何种光照条件均以 GA3 处理孢子萌发成苗效果最好 , 0. 2 mg/ L GA3
(B1 处理) 的成苗率较 62BA 和腐殖酸处理高 5. 6 %～13. 5 % , 较单纯营养液处理高 22. 7 %。这充分说
明 GA3 能够促进孢子萌发生长 , 为受精成苗奠定了基础 , 这与张金文等〔4〕的研究结果相一致。其次 ,
400 倍液腐殖酸 (D0 处理) 对孢子萌发成苗效果较好 , 能够提前成苗 , 但此浓度是否最佳浓度有待于
进一步研究。
参考文献 :
1 　郝丽珍 , 邓俊玲 , 皇甫武威 , 等. 蕨菜孢子萌发及生育进程与诸因素关系研究. 内蒙古农牧学院学报 , 1998 , 19 (6) : 75～80
2 　李兆亮 , 原永兵 , 曹宗巽. 藻类植物和藻类植物有性生殖的细胞学和生物化学研究现状. 植物学通报 , 1995 , 12 (20) : 1～8
3 　Douglas G E. A new technique for the culture of fern gametophytes. Plant Cell Reports , 1990 , 8 (10) : 632～634
4 　张金文 , 牛俊义. 培养基质 , GA3 和硼对蕨菜孢子萌发成苗影响的研究. 草业学报 , 1999 , 8 (1) : 62～68
Effect of Illumination and Exogenous Substance on Spore Germination and
Seedling Survival of Pteridium aquilinum
Niu Junyi1 , Li Sheng1 , Xu Zuomi2 , Qin Shuhao1 , and Lian Rongfang3
(1 Gansu Agricultural University , Lanzhou 730070 , China ;　2 Agricultural Research Institute of Linxia Prefecture of Gansu Province ,
Linxia 731100 , China ;　3 Rainfed Agricultural Research Center of Dingxi Prefecture of Gansu Province , Dingxi 743000 , China)
Abstract : This experiment was conducted to study the effect of the different illumination intensities and
exogenous substance ( GA3 , 62BA , humic acid) on pteridium aquilinum’s spore germination and seedling
survival . The results showed that the illumination intensity had a direct bearing on the germination percentage and
the growing rate of pteridium aquilinum’s spore. There was a remarkable effect on spore germination and seedling
survival under the treatment of 1 800 lx and continuous lighting , and when illumination intensity was below
1 000 lx , the spores germinated very slowly and could not survive ; the spores couldn’t germinate under darkness.
There was a significant promotion effect for spore germination , growth and development of survived seedling if the
culture was treated by GA3 , and the survival rate was the highest (61. 42 %) when treated by 0. 2 mg/ L GA3 .
The significant mutual effect was not found between illumination intensity and exogenous substance.
Key words : Pteridium aquilinum ; Spore cultivation ; Illumination intensity ; GA3 ; 62BA ; Humic acid
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Identif ication of Purity of Hami Melon Hybrid with AFLP Fingerprint
Zhai Wenqiang1 , Tian Qingzhen2 , Jia Jizeng2 , and Dong Yuchen2
(1 Institute of Horticultural Science , Xinjiang Academy of Agricultural Science , Urumchi 830000 , China ; 2 Institute of Crop Germplasm
Resource , Chinese Academy of Agricultural Science , Beijing 100081 , China)
Abstract : Two pairs of MseI/ PstI primer combinations of M21P69 and M17P35 produced polymorphic bands
among three Hami Melon hybrids and their parents respectively , which clearly revealed the genetic relationship a2
mong hybrid and their parents and can be as the basis of purity identification for Hami Melon hybrid.
Key words : Hami Melon ; hybrid ; Purity identification ; AFLP fingerprint
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