全 文 ：第２０卷　第１期
　Ｖｏｌ．２０　 Ｎｏ．１
草　地　学　报
ＡＣＴＡ　ＡＧＲＥＳＴＩＡ　ＳＩＮＩＣＡ
　　　２０１２年　 １月
　 Ｊａｎ．　　２０１２
ＮａＣｌ胁迫下紫花苜蓿幼苗抗氧化酶活性的研究
龙明秀１，许岳飞１，何学青１，廖允成２＊
（１．西北农林科技大学动物科技学院，陕西 杨凌　７１２１００；
２．西北农林科技大学农学院，陕西 杨凌　７１２１００）
摘要：以紫花苜蓿品种金皇后（Ｍｅｄｉｃａｇｏ　ｓａｔｉｖａ　Ｌ．‘Ｇｏｌｄｅｎ　Ｅｍｐｒｅｓｓ’）为试验材料，用不同浓度ＮａＣｌ（０，４０，８０，１２０
和１６０ｍｍｏｌ·Ｌ－１）对其幼苗进行胁迫处理，分别对叶片和根部的超氧阴离子自由基（Ｏ２－·）、丙二醛（ＭＤＡ）、过氧
化物酶（ＰＯＤ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）、抗坏血酸（Ｖｃ）和总抗氧化能力（Ｔ－ＡＯＣ）等指标进行测
定，旨在揭示紫花苜蓿幼苗地上、地下部分对盐胁迫的反应及抗氧化防御机制，为苜蓿耐盐性评价及新品种选育提
供理论依据。结果表明：随着ＮａＣｌ盐浓度增加，苜蓿根中Ｏ２－·和Ｖｃ先增加后减少，ＭＤＡ含量和ＰＯＤ活性增加，
ＳＯＤ，ＣＡＴ和Ｔ－ＡＯＣ活性减少；苜蓿叶片中 Ｏ２－·先增加后减少，ＭＤＡ，Ｖｃ含量和ＳＯＤ活性增加，ＰＯＤ，ＣＡＴ和
Ｔ－ＡＯＣ活性减少。综合表明，相对于地上部分来说，盐对苜蓿幼苗根系的伤害更大。
关键词：紫花苜蓿；盐胁迫；抗氧化作用；调节机制
中图分类号：Ｑ９４５．７８　　　　文献标识码：Ａ　　　　　文章编号：１００７－０４３５（２０１２）０１－００８３－０５
Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　Ｅｎｚｙｍｅｓ　Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃａｇｏ　ｓａｔｉｖａ　Ｌ．Ｓｅｅｄｌｉｎｇ　ｕｎｄｅｒ　Ｓａｌｔ　Ｓｔｒｅｓｓ
ＬＯＮＧ　Ｍｉｎｇ－ｘｉｕ１，ＸＵ　Ｙｕｅ－ｆｅｉ　１，ＨＥ　Ｘｕｅ－ｑｉｎｇ１，ＬＩＡＯ　Ｙｕｎ－ｃｈｅｎｇ２＊
（１．Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ａｎｉｍａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ　Ａ＆Ｆ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｌｉｎｇ，Ｓｈａａｎｘｉ　Ｐｒｏｖｎｉｃｅ　７１２１００，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ａｇｒｏｎｏｍｙ，Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ　Ａ＆Ｆ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｌｉｎｇ，Ｓｈａａｎｘｉ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ　７１２１００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ　ｅｘｐｌｏｒｅ　ｔｈｅ　ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ　ｏｆ　ａｌｆａｌｆａ（Ｍｅｄｉｃａｇｏ　ｓａｔｉｖａ　Ｌ．‘Ｇｏｌｄｅｎ　Ｅｍｐｒｅｓｓ’）ｔｏ　ｓａｌｔ　ｓｔｒｅｓｓ，ｐｒｏ－
ｖｉｄｅ　ｔｈｅ　ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｌｆａｌｆａ　ｓａｌｔ　ｔｏｌｅｒａｎｃｅ，ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ｄｅｆｅｎｓｅ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｏｆ　ａｌｆａｌｆａ　ｓｅｅｄｌｉｎｇ
ｗｅｒｅ　ｔｒｅａｔｅｄ．Ｔｈｅ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ｅｎｚｙｍｅｓ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ（Ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ，ＭＤＡ，ＰＯＤ，ＳＯＤ，ＣＡＴ，Ｖｃ　ａｎｄ　Ｔ－ＡＯＣ）
ｉｎ　ａｌｆａｌｆａ　ｌｅａｖｅｓ　ａｎｄ　ｒｏｏｔｓ　ｕｎｄｅｒ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ＮａＣｌ　ｓｔｒｅｓｓ（０，４０，８０，１２０ａｎｄ　１６０ｍｍｏｌ·Ｌ－１）ｗｅｒｅ　ｍｅａｓ－
ｕｒｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｂｏｔｈ　ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ　ａｎｄ　Ｖｃ　ｌｅｖｅｌｓ　ｉｎｉｔｉａｌｙ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｔｈｅｎ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｗｈｉｌｅ　ＭＤＡ　ａｎｄ
ＰＯＤ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｂｕｔ　ＳＯＤ，ＣＡＴ　ａｎｄ　Ｔ－ＡＯＣ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｉｎ　ａｌｆａｌｆａ　ｒｏｏｔ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ　ｌｅｖｅｌｓ　ｉｎｉｔｉａｌｙ
ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｔｈｅｎ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ，ＭＤＡ，Ｖｃ　ａｎｄ　ＳＯＤ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ，ＰＯＤ，ＣＡＴ　ａｎｄ　Ｔ－ＡＯＣ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｉｎ　ｌｅａｖｅｓ　ｏｆ　ａｌ－
ｆａｌｆａ　ｕｎｄｅｒ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ＮａＣｌ　ｓｔｒｅｓｓ．Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｒｏｏｔｓ　ｏｆ　ａｌｆａｌｆａ　ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ　ｅｘｐｅｒｉ－
ｅｎｃｅｄ　ｍｏｒｅ　ｓｅｒｉｏｕｓ　ｓａｌｔ　ｄａｍａｇｅ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｔｏ　ａｂｏｖｅｇｒｏｕｎｄ　ｐａｒｔｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ａｌｆａｌｆａ；Ｓａｌｔ　ｓｔｒｅｓｓ；Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ；Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ
　　紫花苜蓿（Ｍｅｄｉｃａｇｏ　ｓａｔｉｖａ　Ｌ．）以“牧草之王”
著称，不仅产量高，且富含蛋白质，是“三聚氰胺事
件”后我国畜牧业特别是奶业发展的重要饲料蛋白
来源。优质牧草品种的抗逆性是决定一个品种在某
个地方能否成功生存和发挥优势生产潜力的重要评
价指标［１］，一般包括品种的抗旱、抗寒、耐盐碱、抗病
虫害等能力。王榕楷等［３］认为，植物的耐盐性随个
体的发育阶段而变化，在萌发及幼苗期耐盐性最差，
其次是生殖期，而其他发育阶段对盐胁迫相对不敏
感［４～６］。可见，研究盐胁迫对紫花苜蓿萌发早期幼
苗生长的影响，以及其幼苗期的抗盐性，为建植优良
的人工草地提供重要指导作用。
本研究在紫花苜蓿幼苗期进行不同浓度 ＮａＣｌ
处理，分别测定盐胁迫下地上部分和地下部分的各
项生理生化指标，旨在揭示紫花苜蓿幼苗地上和地
下各器官生理指标对盐胁迫的反应及抗氧化防御机
制，为更好地开发利用苜蓿资源提供科学依据，同时
为苜蓿耐盐性评价及新品种选育提供理论依据。
收稿日期：２０１１－０８－０９；修回日期：２０１１－１１－１１
基金项目：国家科技支撑计划项目（２０１１ＢＡＤ１７Ｂ０５）；国家公益性行业（农业）科技项目（２００９０３０６０）；西北农林科技大学唐仲英育种基金
（Ａ２１２０２０９０１）；陕西省农业攻关项目（２０１１Ｋ０１－０６）资助
作者简介：龙明秀（１９７１－），女，陕西宁强人，副教授，博士研究生，主要从事牧草栽培生理研究，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｏｎｇｍｉｎｇｘｉｕ＠ｎｗｓｕａｆ．ｅｄｕ．ｃｎ；＊通
信作者Ａｕｔｈｏｒ　ｆｏｒ　ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅｎｃｅ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｕｎｃｈｅｎｇｌｉａｏ＠１６３．ｃｏｍ
草　地　学　报 第２０卷
１　材料与方法
１．１　试验材料及处理
供试材料为紫花苜蓿品种金皇后（Ｍｅｄｉｃａｇｏ
ｓａｔｉｖａ　Ｌ．‘Ｇｏｌｄｅｎ　Ｅｍｐｒｅｓｓ’），引自美国，初始发芽
率为９０％，由陕西杨凌金道种子公司提供。苜蓿种
子用９８％浓硫酸处理１ｈ，５％ ＮａＣｌＯ溶液消毒５
ｍｉｎ，去离子水清洗５次后，选取１００粒籽粒饱满的
种子置于铺有双层滤纸的直径９ｃｍ培养皿中，在人
工气候箱内（２０±２）℃条件下暗培养３ｄ，期间根据
种子吸胀情况适当补加蒸馏水。
在营养钵（底内径７ｃｍ，高９ｃｍ）内装满细沙，
浇透水后将发芽好的幼苗用镊子小心取出栽于营养
钵中（３株／盆），隔天浇一次１／４Ｈｏａｇｌａｎｄ营养液，
培养５０ｄ后将其分为５组，分别用０（ＣＫ），４０，８０，
１２０和１６０ｍｍｏｌ·Ｌ－１的 ＮａＣｌ（分析纯）溶液进行
处理，每处理重复５次。依据前人研究方法，分别于
ＮａＣｌ处理１０ｈ后小心取出幼苗［７］，冲洗残留泥沙，
分离叶片和根，准确称取０．５ｇ，存放于－８０℃冰箱
中保存备用。
１．２　苜蓿叶片和根测定指标及方法
膜质过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）采用硫代巴比
妥酸法测定，称取剪碎的植物组织０．５ｇ，加入２ｍＬ
１０％三氯乙酸（ＴＣＡ）和少量石英砂，研磨至匀浆，
再加８ｍＬ　ＴＣＡ进一步研磨，匀浆离心（４０００×ｇ）
１０ｍｉｎ，上清液为样品提取液。吸取离心的上清液
２ｍＬ（对照加２ｍＬ蒸馏水），加入２ｍＬ　０．５％硫代
巴比妥酸（ＴＢＡ）溶液，混匀物于水浴锅的沸水浴中
反应３０ｍｉｎ，迅速冷却。在４℃，３０００×ｇ再离心１０
ｍｉｎ。然后，取上清液测定５３２ｎｍ，６００ｎｍ和４５０
ｎｍ波长下的吸光值［８］。
超氧阴离子自由基（Ｏ２－·）产生速率采用Ｅｌｓｔ－
ｎｅｒ等［９］的方法测定，取１．０ｇ植物叶片置入冰浴的
研钵中，加入５０ｍｍｏｌ·Ｌ－１磷酸缓冲液（ｐＨ７．８）５
ｍＬ，研磨成匀浆，在１０００×ｇ，４℃下离心１０ｍｉｎ，取
上清液再以１５０００×ｇ，４℃下离心２０ｍｉｎ，第２次上
清液即为样品提取液。取提取液０．５ｍＬ，然后加入
５０ｍｍｏｌ·Ｌ－１磷酸缓冲液０．５ｍＬ，１ｍｍｏｌ·Ｌ－１盐
酸羟胺１ｍＬ，混匀，置于２５℃下１ｈ后，各管再加入
１７ｍｍｏｌ·Ｌ－１对氨基苯磺酸１ｍＬ和７ｍｍｏｌ·Ｌ－１
α－萘胺１ｍＬ，混匀，置于２５℃显色２０ｍｉｎ，在５３０ｎｍ
波长处测定吸光度值。
取１．０ｇ植物组织，在４℃用５ｍＬ预冷的磷酸
缓冲液（５０ｍｍｏｌ·Ｌ－１，ｐＨ７．８，含１ｍｍｏｌ·Ｌ－１
ＥＤＴＡ，０．１％苯ＰＭＳＦ，１％ ＰＶＰ）在研钵中研磨至
匀浆，匀浆液于４℃，１５０００×ｇ离心２０ｍｉｎ。取上
清液用于测定抗氧化酶粗提液，样品的蛋白质按照
Ｂｒａｄｆｏｒｄ［１０］的方法测定，以牛血清蛋白（ＢＳＡ）为标
准蛋白。总抗氧化能力（Ｔ－ＡＯＣ）测定采用ＦＲＡＰ
法测定［１１］；抗坏血酸（Ｖｃ）采用二氯靛酚法测定［１２］；
过氧化物酶（ＰＯＤ）活性采用愈创木酚法测定［１３］；超
氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性采用氮蓝四唑法测定［１４］；
过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性采用紫外分光光度法测
定［１５］。
１．３　数据分析
本试验的测定指标值均以５次重复的平均值±
ＳＥ表示；数据使用ＳＰＳＳ　１５．０统计软件处理，采用
ｏｎｅ－ｗａｙ　ＡＮＯＶＡ进行单因素方差分析，应用Ｄｕｎ－
ｃａｎ法对平均值进行多重比较，用Ｓｉｇｍａｐｌｏｔ　１０．０
软件作图。
２　结果与分析
２．１　不同浓度ＮａＣｌ胁迫下苜蓿植株体内Ｏ２－·和
ＭＤＡ含量的变化
超氧阴离子属于活性氧的一种，有强氧化作用
和细胞毒害作用，植物体内大量聚集会对植物生长
发育产生伤害作用，严重时可以导致植物死亡。由
图１可知，苜蓿叶片中的Ｏ２－·水平随着盐胁迫浓度
的增加呈现先增加后减少的变化，８０，１２０和１６０
ｍｍｏｌ·Ｌ－１处理与对照相比均达到显著水平（Ｐ＜
０．０５），其中８０ｍｍｏｌ·Ｌ－１盐浓度处理下较对照高，４０
ｍｍｏｌ·Ｌ－１盐浓度与对照差异不显著（Ｐ＞０．０５）。
根和叶中Ｏ２－·变化趋势相似，与对照相比均达显著
水平（Ｐ＜０．０５），但叶片中含量明显低于根中。
植物器官衰老或在逆境下遭受伤害，往往发生
膜脂过氧化作用，ＭＤＡ是膜脂过氧化的最终分解
产物，其含量可以反映植物遭受逆境伤害的程度。
盐胁迫下，苜蓿叶片和根中的ＭＤＡ含量随着盐浓度
的增加而增加，４０，８０，１２０和１６０ｍｍｏｌ·Ｌ－１处理下叶
中含量分别比对照增加１３．３２％，３０．４３％，３３．４２％
和４２．３９％（Ｐ＜０．０５）。但叶片中 ＭＤＡ含量较低，
而根中水平较高，与超氧阴离子变化趋势一致。
４８
第１期 龙明秀等：ＮａＣｌ胁迫下紫花苜蓿幼苗抗氧化酶活性的研究
图１　不同盐浓度下苜蓿叶片和根系中超氧阴离子产生速率和 ＭＤＡ含量变化
Ｆｉｇ．１　Ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ａｎｄ　ＭＤＡ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ａｌｆａｌｆａ　ｌｅａｖｅｓ　ａｎｄ　ｒｏｏｔｓ　ｕｎｄｅｒ　ｓａｌｔ　ｓｔｒｅｓｓ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ
２．２　不同浓度 ＮａＣｌ胁迫下苜蓿植株体内ＰＯＤ，
ＣＡＴ和ＳＯＤ活性的变化
由图２可知，０～１６０ｍｍｏｌ·Ｌ－１盐胁迫下，苜
蓿叶片中ＳＯＤ活性随着盐浓度的增加而增加，与对
照相比差异显著（Ｐ＜０．０５），１６０ｍｍｏｌ·Ｌ－１处理
下比对照增加了２７．０％。而根中的ＳＯＤ活性随着
盐浓度增加反而减少，与对照相比差异达到显著水
平（Ｐ＜０．０５），盐浓度达到１６０ｍｍｏｌ·Ｌ－１时，根中
ＳＯＤ的活性比对照下降了３８．９４％，且叶片中ＳＯＤ
活性明显低于根系中。
随着盐浓度的增加，苜蓿幼苗叶片中的 ＣＡＴ
活性变化，除了１６０ｍｍｏｌ·Ｌ－１处理与对照相比达
显著水平外（Ｐ＜０．０５），其余均不显著。而根中的
ＣＡＴ活性随着盐浓度增加反而减少，与ＳＯＤ下降
趋势相同，表明盐对苜蓿幼苗根系的伤害较大。同
样，苜蓿地上部叶片中的ＣＡＴ活性低于地下根中
的活性（图２）。
过氧化物酶（ＰＯＤ）的主要作用是与ＳＯＤ，ＣＡＴ
和ＡＰＸ协同清除细胞中产生的活性氧，提高植物
的抗性。由图２可知，盐胁迫下苜蓿叶片中的ＰＯＤ
活性随着盐浓度的增加而增加，４０，８０，１２０和１６０
ｍｍｏｌ·Ｌ－１处理分别比对照增加３３．３４％，５３．８％，
７７．４％和７８．１２％（Ｐ＜０．０５）。与此不同的是，盐胁
迫下苜蓿根中 ＰＯＤ 的活性变化不显著，除１６０
ｍｍｏｌ·Ｌ－１处理与对照相比活性降低３２．９４％外
（Ｐ＜０．０５），其余３个处理与对照相比差异不显著。
２．３　不同浓度 ＮａＣｌ胁迫下苜蓿植株体内 Ｖｃ和
Ｔ－ＡＯＣ活性的变化
本试验结果表明（图３），苜蓿幼苗叶片中的Ｖｃ
含量随着盐浓度的增加而增加，其中处理１２０和
１６０ｍｍｏｌ·Ｌ－１与对照相比分别增加６９．３９％和
８６．８６％（Ｐ＜０．０５），而４０和８０ｍｍｏｌ·Ｌ－１盐浓度
处理与对照相比差异不显著；４种盐胁迫下，苜蓿幼
苗根中的Ｖｃ含量随着盐浓度的增加变化规律不尽
相同，但与对照相比变化均达到显著水平（Ｐ＜
０．０５）；８０ｍｍｏｌ·Ｌ－１处理下 Ｖｃ含量比对照增加
１９３．０８％，１２０和１６０ｍｍｏｌ·Ｌ－１处理下反而减少。
总抗 氧 化 能 力 （ｔｏｔａｌ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ｃａｐａｃｉｔｙ，
Ｔ－ＡＯＣ）是有机体内所有抗氧化物质抗氧能力的总
和，植物在正常代谢过程中不同的抗氧化体系之间
相互起到协同作用、代谢补偿作用以及依赖作用。
盐胁迫下，叶片中的 Ｔ－ＡＯＣ活性随着盐浓度的增
加而减少，处理１２０和１６０ｍｍｏｌ·Ｌ－１分别比对照
减少 １９．８３％ 和 ４２．２４％（Ｐ＜０．０５）。根中的
Ｔ－ＡＯＣ活性随着盐浓度的增加也呈显著下降趋势
（Ｐ＜０．０５）（图３）。
３　讨论与结论
钠盐是影响植物生长和产量的主要环境因子之
一，在盐胁迫下，植物的生长以及生理生化反应，诸
如光合作用、蛋白合成及降解、能量和脂类代谢等都
会受到抑制。活性氧 （ｒｅａｃｔｉｖｅ　ｏｘｙｇｅｎ　ｓｐｅｃｉｅｓ，
ＲＯＳ）包括过氧化氢（Ｈ２Ｏ２），超氧阴离子（Ｏ２－·），单
线氧（Ｏ１２）等，这些活性氧不能被及时清除，就会破坏
细胞的完整性，造成细胞内大量 ＭＤＡ积累，ＭＤＡ是
膜脂过氧化的最终分解产物，其含量可以反映植物遭
受逆境伤害的程度［１６］。本研究发现，苜蓿叶片中的
超氧阴离子水平随着盐浓度的增加而减少，而且
５８
草　地　学　报 第２０卷
ＭＤＡ积累随着盐浓度增加而不断增加，可能原因是
当处于低浓度盐胁迫时，苜蓿的抗氧化物酶活性较
强，当盐浓度超过４０ｍｍｏｌ·Ｌ－１时植物抗性减弱，
ＭＤＡ含量上升，这与前人研究结果相吻合［７］。
　　植物在长期进化过程中，逆境适应机制比较完
善，主要包括植物体内ＰＯＤ，ＳＯＤ和ＣＡＴ等抗氧
化物酶类和抗氧化物质抗坏血酸、谷胱甘肽等物质。
而不同植物对致死盐浓度的耐受水平和生长降低率
不同。在同一浓度 ＮａＣｌ处理下，盐不敏感谷子
（Ｓｅｔａｒｉａ　ｉｔａｌｉｃａ）幼苗中ＳＯＤ酶的活性随盐浓度的
升高而升高，而盐敏感谷子幼苗中总ＳＯＤ的活性逐
渐下降［１７］。当植物生长的环境盐分超过植物所能
忍受的含量时，盐可能对植物生长和发育产生抑制，
甚至毒害或死亡。盐胁迫常导致植物体内大量氧自
由基积累，导致膜结构完整性被破坏、叶绿素降解、
蛋白变性甚至细胞死亡［１８，１９］。植物对盐胁迫的抗
６８
第１期 龙明秀等：ＮａＣｌ胁迫下紫花苜蓿幼苗抗氧化酶活性的研究
逆表现为激活抗氧化酶的活性，及时清除活性氧，保
护细胞膜的完整性［２０，２１］。
ＳＯＤ是一种诱导酶，受底物的诱导，盐胁迫促
进Ｏ２－·产生，诱导ＳＯＤ活性显著升高。盐胁迫后，
紫花苜蓿抗氧化物酶ＰＯＤ，ＳＯＤ和ＣＡＴ等清除和
分解活性氧的酶活性显著增加，提高清除活性氧防
御系统的防御能力，从而缓解了盐胁迫对紫花苜蓿
的氧化伤害作用。本研究发现，盐胁迫下，苜蓿幼苗
叶片中ＳＯＤ活性随着盐浓度增加而增加，而根中的
ＳＯＤ活性则逐渐降低。可能的原因是，叶片当中猝
灭活性氧的能力强，而根中受盐胁迫较重，自由基产
生速率超过系统清除能力，细胞受到伤害较重，引起
根中ＳＯＤ活性下降［２２］。植物中ＣＡＴ是清除Ｈ２Ｏ２
的关键酶，能催化 Ｈ２Ｏ２ 转变为 Ｈ２Ｏ。本试验结果
表明，叶片中ＣＡＴ活性伴随盐浓度增加而降低，可
能原因是，虽然ＣＡＴ是一种清除过氧化氢的酶，但
是对过氧化氢的亲和力较低，且容易光失活或分
解［２３，２４］。ＰＯＤ在植物体内对清除活性氧有重要的
作用。紫花苜蓿受到逆境胁迫后，叶片当中ＰＯＤ活
性增加，可清除活性氧，保护细胞的完整性，减少细
胞损伤，也有一些研究认为ＰＯＤ活性与植物抗盐性
无关［２５］。
总之，盐胁迫下，紫花苜蓿叶片和根中超氧阴离
子水平和膜质过氧化产物 ＭＤＡ增加，抗氧化物酶
ＰＯＤ，ＳＯＤ和ＣＡＴ活性和抗氧化物质 Ｖｃ的含量
也随之增加。另外，紫花苜蓿叶片总抗氧化能力在
低浓度盐胁迫下变化不显著，根中的抗氧化能力随
着盐浓度的升高而下降。
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ｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｉｃｒｏｇｒａｍ　ｑｕａｎｔｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｕｔｉｌｉｚｉｎｇ　ｔｈｅ　ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ　ｏｆ
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ｐｅｐｔｉｄｅ　ｆｒｏｍＣｈｌａｍｙｓ　ｆａｒｒｅｒｉ　ｏｎ　ｈａｉｒｌｅｓｓ　ｍｉｃｅ　ｄａｍａｇｅｄ　ｂｙ　ｕｌ－
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（责任编辑　李美娟）
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