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Monitoring Chlorophyll and Nitrogen Contents in Cotton Leaf Infected by Verticillium wilt with Spectra Red Edge Parameters

利用光谱红边参数监测黄萎病棉叶叶绿素和氮素含量


以黄萎病胁迫下棉花叶片为试验材料, 分析感染病害棉叶叶绿素(Chl)含量和氮素含量(LNC)与光谱红边参数间的关系, 建立病害棉叶Chl含量和LNC的光谱红边参数诊断模型。结果表明:(1)随着病情加重, 棉叶Chl aChl bChl a+bLNC逐渐减小, 其中Chl a下降最快, Chl b下降最慢;(2)黄萎病叶片光谱反射率在可见光区(400~700 nm), 近红外光区(700~1300 nm)和短波红外光区(1300~2500 nm)呈现逐渐上升趋势, 520~680 nm间达极显著(P<0.01);光谱吸收率在可见光区和短波红外光区呈现逐渐下降的趋势, 达极显著(P<0.01), 在近红外光区呈现先升后降的趋势。(3)病害棉叶红边位置(REP)、红边振动幅(Dr)、红谷位置(Lo)、红边深度(Depth672)和红边面积(Area672)的值均减小, 红边宽度(Lwidth)的值增加, Area672减小的幅度最大, Dr减小的幅度最小, Lwidth增加的幅度较大;(4)病害棉叶Chl a含量、Chl b含量、Chl a+b含量和LNC均与红边参数REPLoDepth672Area672呈极显著正相关, Lwidth呈极显著负相关, Dr未达显著相关;(5)利用红边参数建立的棉叶Chl含量和LNC的诊断模型均达极显著(P<0.01), 其中以Area672为自变量建立的病害棉叶Chl aChl a+bLNC的诊断模型和Lo为自变量建立的Chl b诊断模型的精度最高, 能很好的诊断病害棉叶Chl含量和LNC

The relationship between chlorophyll (Chl) content, leaf nitrogen content (LNC) and red edge parameters were analyzed, and diagnose models of spectra red edge parameters were established for cotton leaf infected by Verticillium wilt. Results showed that: (1) Chl a, Chl b, Chl a+b, and LNC decreased with increasing in severity level (SL) of Verticillium wilt in cotton leaves, in which Chl a showed the highest and Chl b showed the lowest decrement rate, respectively. (2) Spectrum reflectance increased with increasing severity of Verticillium wilt in the visible region (400–700 nm), near-infrared region (700–1300 nm) and short infrared region (1300–2500 nm), and significantly higher increment was detected in 525–680 nm region


全 文 :作物学报 ACTA AGRONOMICA SINICA 2013, 39(2): 319329 http://www.chinacrops.org/zwxb/
ISSN 0496-3490; CODEN TSHPA9 E-mail: xbzw@chinajournal.net.cn

本研究由国家自然科学基金项目(41161068, 30860139, 31071371)和新疆农垦科学院科技引导计划项目(YYD201102)资助。
第一作者联系方式: E-mail: zyrcb@126.com
Received(收稿日期): 2012-06-20; Accepted(接受日期): 2012-11-16; Published online(网络出版日期): 2012-12-11.
URL: http://www.cnki.net/kcms/detail/11.1809.S.20121211.1614.009.html
DOI: 10.3724/SP.J.1006.2013.00319
利用光谱红边参数监测黄萎病棉叶叶绿素和氮素含量
陈 兵 1 韩焕勇 1 王方永 1 刘 政 1 邓福军 1 林 海 1 余 渝 1
李少昆 2,3 王克如 2,3 肖春华 2,3
1新疆农垦科学院棉花研究所 / 农业部西北内陆区棉花生物学与遗传育种重点实验室 / 国家棉花改良中心新疆生产建设兵团分中心,
新疆石河子 832003; 2中国农业科学院作物科学研究所 / 农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程, 北京 100081; 3新疆兵团绿
洲生态农业重点开放实验室 / 石河子大学, 新疆石河子 832000
摘 要: 以黄萎病胁迫下棉花叶片为试验材料, 分析感染病害棉叶叶绿素(Chl)含量和氮素含量(LNC)与光谱红边参
数间的关系, 建立病害棉叶 Chl含量和 LNC的光谱红边参数诊断模型。结果表明: (1)随着病情加重, 棉叶 Chl a、Chl
b、Chl a+b和 LNC逐渐减小, 其中 Chl a下降最快, Chl b下降最慢。(2)黄萎病叶片光谱反射率在可见光区(400~700 nm),
近红外光区(700~1300 nm)和短波红外光区(1300~2500 nm)呈现逐渐上升趋势, 在 520~680 nm 间达极显著(P<0.01);
光谱吸收率在可见光区和短波红外光区呈现逐渐下降的趋势, 达极显著(P<0.01), 在近红外光区呈现先升后降的趋
势。(3)病害棉叶红边位置(REP)、红边振动幅(Dr)、红谷位置(Lo)、红边深度(Depth672)和红边面积(Area672)的值均
减小, 红边宽度(Lwidth)的值增加, 且 Area672减小的幅度最大, Dr减小的幅度最小, Lwidth增加的幅度较大。(4)病
害棉叶 Chl a含量、Chl b含量、Chl a+b含量和 LNC均与红边参数 REP、Lo、Depth672和 Area672呈极显著正相关,
与 Lwidth呈极显著负相关, 与 Dr未达显著相关。(5)利用红边参数建立的棉叶 Chl含量和 LNC的诊断模型均达极显
著(P<0.01), 其中以 Area672为自变量建立的病害棉叶 Chl a、Chl a+b和 LNC的诊断模型和 Lo为自变量建立的 Chl b
诊断模型的精度最高, 能很好的诊断病害棉叶 Chl含量和 LNC。
关键词: 棉花; 病害胁迫; 高光谱; 叶绿素含量; 氮素含量; 诊断模型
Monitoring Chlorophyll and Nitrogen Contents in Cotton Leaf Infected by Ver-
ticillium wilt with Spectra Red Edge Parameters
CHEN Bing1, HAN Huan-Yong1, WANG Fang-Yong1, LIU Zheng1, DENG Fu-Jun1, LIN Hai1, YU Yu1, LI
Shao-Kun2,3, WANG Ke-Ru2,3, and XIAO Chun-Hua2,3
1 Cotton Institute, Xinjiang Academy Agricultural and Reclamation Science / Northwest Inland Region Key Laboratory of Cotton Biology and Genetic
Breeding, Ministry of Agriculture / Xinjiang Production & Construction Corps Subcenter of National Cotton Improvement Center, Shihezi 832000,
China; 2 National Key Facility for Gene Resources and Genetic Improvement / Institute of Crop Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences,
Beijing 100081, China; 3 Key Laboratory of Oasis Ecology Agriculture of Xinjiang Corps / Shihezi University, Shihezi 832003, China
Abstract: The relationship between chlorophyll (Chl) content, leaf nitrogen content (LNC) and red edge parameters were ana-
lyzed, and diagnose models of spectra red edge parameters were established for cotton leaf infected by Verticillium wilt. Results
showed that: (1) Chl a, Chl b, Chl a+b content, and LNC decreased with increasing in severity level (SL) of Verticillium wilt in
cotton leaves, in which Chl a showed the highest and Chl b showed the lowest decrement rate, respectively. (2) Spectrum reflec-
tance increased with increasing severity of Verticillium wilt in the visible region (400–700 nm), near-infrared region (700–1300
nm) and short infrared region (1300–2500 nm), and significantly higher increment was detected in 525–680 nm region (P<0.01).
Spectrum absorption decreased significantly with increasing SL of Verticillium wilt in the visible region and short infrared region
(P<0.01), and which increased first and then decreased in near-infrared region. (3) Decrease of REP, Dr, Lo, Depth672, Area672
and increase of Lwidth was detected among red edge parameters, in which Area672 showed the highest and Dr showed the
Lowest decrement rate, respectively. (4) There was significantly positive correlation between Chl a, Chl b, Chl a+b, LNC of
cotton leaves and REP, Lo, Depth672, Area672 of red edge parameters, significantly negative correlation was found for Lwidth of
red edge parameter, while no significant correlation was found for Dr of red edge parameter. (5) Diagnose models of Chl a, Chl a+b,
320 作 物 学 报 第 39卷

edge parameter, while no significant correlation was found for Dr of red edge parameter. (5) Diagnose models of Chl a, Chl a+b, and
LNC for Verticillium wilt in cotton leaves with the independent variables Area672, and Chl b with the independent variables Lo
reached the best estimated precision (P<0.01). This could diagnose severity level of Verticillium wilt in cotton leaves effectively.
Keywords: Cotton; Disease stress; Hyper spectra; Chlorophyll content; Nitrogen content; Diagnose models
黄萎病是棉花的主要病害, 主要在作物生长季
节致使叶片变黄或焦枯, 严重的棉株, 几乎整个病
叶变黄或焦枯甚至脱落死亡。因为黄萎菌能产生大
量的黄萎菌孢子, 这些病菌孢子可产生毒素或大量
繁殖阻塞纤维素导管, 导致植物体内水分运输受阻,
植物不能正常生长甚至死亡。该病流行时可大大地
降低作物的产量, 因此, 在棉花生长的早期定期监
测和预测黄萎病非常重要[1]。
叶片叶绿素和氮素是表征作物健康状况的主要
生理指标, 叶绿素是作物进行光合作用的重要物质,
氮素是影响作物生长最重要的营养元素, 因此, 叶
绿素和氮素含量的变化能直接和间接地反映作物生
长好坏, 最终影响作物的产量与品质[2-3]。由于叶绿
素和氮素含量与作物营养、长势等指标密切相关 ,
并与作物光合能力、发育阶段又有较好的相关性 ,
所以它们通常被认为是作物胁迫、光合作用能力和
作物发育阶段的指示器[4]。光谱红边是由作物叶片
叶绿素在红光波段对光的强烈吸收与叶片内部组织
在近红外波段对光的多次散射形成的强反射造成的,
范围一般在 680~750 nm之间。由于光谱红边主要依
据作物的营养状况、生物量和物候期而发生变化 ,
作物的叶片组织发生变化时也会引起光谱红边的相
应变化, 尤其当作物受到各种胁迫时, 作物的红边
特征常发生显著的变化[5-6], 因此, 常被用来指示作
物生长的好坏。最近的研究已经显示: 作物叶片因
病虫害导致其细胞结构、色素、水分、营养元素及
外部形状等发生变化, 其中叶绿素和氮素含量的变
化尤为显著, 从而引起光谱的变化, 尤其是光谱红边
的变化[1,7]。前人利用光谱特征对作物叶绿素和氮素含
量的监测进行了大量研究。例如, Broge等[8]、Ponzoni
等[9]和 Schlemmer 等[10]直接采用光谱反射率监测植株
叶绿素和氮素含量, Blackburn等[11]和 Yoder等[12]利用
对数形式的作物指数监测植株叶绿素和氮素含量 ,
Haboudance等[13]和Errmann等[14]利用不同敏感波段构
建不同植被指数监测植株叶绿素和氮素含量。在利用
光谱红边参数监测植被叶绿素和氮素含量方面, 众多
学者也提出了不同的监测方法: 有直接采用单一方法
计算某一红边参数对植株叶绿素和氮素含量进行监测
的[15-16], 有改进或创建新的红边参数对植株叶绿素和
氮素含量进行监测的[17-18], 有利用不同算法计算同一
光谱红边参数对植株叶绿素和氮素含量进行监测
的[19-22], 也有采用两种或两种以上不同红边参数对植
株叶绿素和氮素含量进行监测的[23-26], 而利用红边参
数对黄萎病病害胁迫下棉叶叶绿素和氮素含量的监测
研究未见有系统报道。
本文拟以病害胁迫下棉花叶片为材料, 调查不
同棉花品种不同生育期田间病害, 借助光谱分析叶
绿素和氮素含量与光谱红边参数间的关系, 建立叶
片叶绿素和氮素含量的反演模型, 以期用简便、无
损的遥感技术监测病害棉叶叶绿素和氮素含量, 为
大面积遥感监测棉花病害及长势监测、估产提供理
论依据。
1 材料与方法
1.1 试验地及种植情况
试验于 2005—2011年在中国新疆石河子棉区
进行。以小区试验为主, 大田试验为辅。小区试验
设在石河子大学新疆作物高产研究中心试验站和新
疆农垦科学院棉花研究所黄萎病病圃田, 2个试验点
土壤特性相近, 土壤表层 0~20 cm 均为壤质灰漠土
带有 10%~15%的黏性, 有机质含量 19%~22%。土层
的主要成分为含碱解氮 77~82 mg kg–1、速效磷
93~97 mg kg–1、速效钾 300~315 mg kg–1, 前茬均为
棉花。2005—2009年在石河子大学新疆作物高产研
究中心试验站种植新陆早 6 号、新陆早 7 号、新陆
早 13、新陆早 24、新陆早 33、中棉所 36、新彩 5
号和新海 21。小区面积为 42.5 m2, 随机区组设计, 3
个重复, 密度均为 24 万株 hm–2。2005—2006 年为
60 cm + 30 cm宽窄行设计, 2007—2009年为 15 cm +
50 cm 宽窄行设计。分别在每年的 4月中下旬左右
覆宽膜种植, 膜上点播, 膜下滴灌, 灌水量为 3300
m3 hm–2, 施肥量为纯氮 300 kg hm–2, P2O5 150 kg
hm–2和 K2O 75 kg hm–2。全生育期灌溉 11次, 从 6
月 12日开始到 8月 24日结束, 灌溉周期为每 8 d一
次。磷、钾和 1/3 的氮肥被用做基肥, 2/3 的氮肥用
做追肥, 其中 2005—2007年于每年的 6月 28日和 7
月 26日分 2次随水施入, 2008—2009年按比例每次
灌水时随水滴施。其他按当地高产栽培模式管理。
第 2期 陈 兵等: 利用光谱红边参数监测黄萎病棉叶叶绿素和氮素含量 321


2010—2011年在新疆农垦科学院棉花研究所黄萎病
病圃田种植新陆早 8号和新陆早 33。小区设置和管
理均与石河子大学新疆作物高产研究中心试验站基
本相同 , 每小区种植密度为 26万株 hm–2, 配置为
40 cm+20 cm宽窄行。
大田试验分别设在石河子 143团 19连 19#地和
14 连 8#地、147 团种子站 2#地、148 团 11 连 28#
地常年大面积暴发黄萎病的棉田。3个地区的土壤
均是黏壤土, 含有机质 1.2%~1.5%、碱解氮 70~75
mg kg–1、速效磷 80~90 mg kg–1、速效钾 290~310 mg
kg–1。试验区品种除与试验田保持一致外, 还包括惠
远 602 和新陆早 42。每年 4 月中下旬播种, 小区划
分大小和设计同第一个试验保持一致, 其他栽培措
施也按当地高产栽培模式管理。
1.2 取样及病害分级
在病害发生高峰期调查病害严重度, 选用不同
病害级别棉株相邻或相近叶位叶片为样叶, 每小区
内取棉株 3 株(包括正常和病害棉株), 每株取不同
严重度棉叶 5 片(包括正常叶)。样叶被迅速放入自
封袋中 , 立刻带回实验室进行光谱及理化参数测
试。参照病害分级标准[27], 按棉叶受害枯黄面积占
整个叶片面积百分数的可视化症状, 将发病程度分
为 5 级 , 即正常 (b0): 无症状 ; 轻度 (b1): 症状
(0~25%); 中度(b2): 症状(25%~50%); 严重(b3): 症
状(50%~75%); 极严重(b4): 症状(75%~100%)。
1.3 叶片光谱和理化参数测定
1.3.1 高光谱数据获取 单叶光谱采用美国
ASD Field spec Pro FR 2500便携式光谱仪与 ASD
Leaf Clip测试夹耦合测定。单叶光谱测试夹本身带
有模拟光源, 测试视场范围直径 2.5 cm, 可在密闭
环境下测定, 没有外界光源和环境的干扰。Pro FR
2500 便携式光谱仪有 512 个光谱波段, 波段范围为
350~2500 nm, 光谱分辨率在 350~1000 nm为 3 nm,
1000~2500 nm为 10 nm。将小区试验田和大田取回
的不同严重度棉叶立即测试, 测试时对每片样叶分
中上部、左基部和右基部各测 2 次, 每次测定 2 条
光谱曲线, 每条光谱曲线扫描时间 0.2 s, 取平均值
作为该叶片的光谱反射值。每次测量前均用 ASD
Leaf Clip 内置标准参考白板进行校正, 之后先黑板
做底板测反射率值 , 再白板做底板测透反射率值 ,
最后计算吸收率值。吸收率值的计算公式如下:
吸收率=1–反射率–透射率 (1)
分别在每年的盛蕾期、盛花期、盛铃期和吐絮期对
样叶进行光谱和理化参数测试。
1.3.2 叶片叶绿素含量测定 将测定光谱的叶片
用半径为 0.3 cm的打孔器取下 0.2 g左右, 置于 95%
乙醇中避光浸提 24 h, 用分光光度计测定 665、649
和 470 nm处的 OD值并计算叶片叶绿素密度[28], 包
括叶绿素 a (Chl a)、叶绿素 b (Chl b)和叶绿素 a+b
(Chl a+b)的单位面积含量(mg cm–2)。叶绿素密度计
算公式如下:
2. ( /10) 1000
C VChl D
N R
   稀释倍数 (2)
式中, C为色素浓度(mg L–1), V为提取液体积(mL),
N为打孔叶片数, R (cm)为打孔器半径。
1.3.3 叶片氮素含量测定 将测试光谱后的不同
严重度叶片在 105℃杀青 30 min, 80℃烘干至恒重,
称取 0.2 g粉碎过 100目筛后的样品用瑞士 BUCHI
公司产全自动 B-339 凯氏定氮仪测定叶片全氮含量
[leaf nitrogen content, LNC (mg g–1)][29]。
1.4 数据分析
用 ASD 公司提供的 ViewSpec Program 软件处
理得到不同严重度样叶的原始反射光谱数据和光谱
反射率曲线。再采用光谱归一化微分分析技术, 在
Matlab 7.01软件中对反射光谱数据进行一阶微分处
理, 得到微分光谱, 其近似计算方法如下[30]:
        
1 1
1 1
i i
i
i i
      
 
 
     (3)
式中, λi为波段 i波长值; ρ (λi)为波长 λi的光谱反射
率值; ρ (λi)为波段 i的一阶微分值。并进一步提取红
边特征参数。包括: 红边位置(REP)为在 680~750 nm
范围内光谱反射率的一阶微分值达到最大时所对应
的波长; 红谷位置(Lo)为在 680~750 nm范围内光谱
反射率的一阶微分值达到最小时所对应的波长; 红
边宽度(Lwidth)为吸收谷深度一半处的宽度 ; 红边
振幅(Dr)为红边区域内一阶微分光谱值的最大值 ;
红边深度(Depth672)为 672 nm处的吸收深度; 红边
面积(Area672)为 680~750 nm 红边范围内光谱一阶
微分值的和。用 SPSS 10.0软件分析, 2005—2007年
的 90 个样本用于建模, 2008—2011 年的 80 个样本
用于模型检验。
2 结果与分析
2.1 不同严重度病害棉叶叶绿素(Chl)含量和氮
素含量(LNC)变化
从图 1 可以看出, 随着病害严重度的增加, 病
322 作 物 学 报 第 39卷

害棉叶 Chl a、Chl b、Chl a+b和 LNC逐渐减小, 其
中 Chl a的下降最快, Chl b下降最慢, 并且差异极显
著(P<0.01)。此外, Chl a减小的幅度最大(F=190.96>
F0.01), Chl a+b 次之 (F=176.81>F0.01), LNC 再次
(F=63.696>F0.01), Chl b最小(F=48.94> F0.01)。幅度减
小的顺序是: Chl a>Chl a+b>LNC>Chl b。说明叶片
Chl含量和 LNC的变化与黄萎病病害发生的情况基
本一致。

图 1 不同严重度黄萎病害棉叶叶绿素和氮素含量变化
Fig. 1 Changes of chlorophyll and nitrogen content for cotton leaf infected by Verticilliun wilt in different severities
b0: 无症状; b1: 轻度症状(0~25%); b2: 中度症状(25%~50%); b3: 严重症状(50%~75%); b4: 极严重症状(75%~100%)。图柱上不同小写
和大写字母分别表示在 0.05和 0.01水平差异显著。
b0: healthy cotton, no symptoms; b1: slight Verticillium symptom (0–25% yellow and scorched), b2: moderate Verticillium symptoms
(25%–50% yellow and scorched); b3: severe Verticillium symptoms (50%–75% yellow and scorched); b4: very severe Verticillium symptoms
(75%–100% yellow and scorched). Bars with superscripts of different small letters and capital letters indicate significant levels at 0.05 and
0.01, respectively.

2.2 不同严重度病害棉叶光谱曲线特征
图 2 可知, 黄萎病叶片光谱反射率和吸收率均
随病情加重呈现明显的变化规律。图 2-a表明, 随病
情加重, 黄萎病叶片平均光谱反射率均在可见光区
(400~700 nm), 近红外光区(700~1300 nm)和短波红
外光区 (1300~2500 nm)呈现逐渐上升趋势 , 在
520~680 nm波段范围内尤为显著(P<0.01)。即正常
叶片(b0)的平均光谱反射率最低, 极严重叶片(b4)的
平均光谱反射率最高。此外, 随发病程度增加, 病叶
同正常叶之间的平均光谱反射率差值逐渐加大, 当
病叶严重度为 b1 时, b1 和 b2 之间的平均光谱反射
率仅在可见光区开始达到极显著水平(P<0.01), 而
当病叶严重度为 b2 时, b1 和 b2 之间的平均光谱反
射率不仅在可见光区达到极显著水平(P<0.01), 而
且在近红外光区和短波红外光区也开始到达极其显
著的水平(P<0.01)。图 2-b 表明, 随病情加重, 黄萎
病叶片平均光谱吸收率均在可见光区和短波红外光
区呈现逐渐下降的趋势 , 且达到极显著(P<0.01);
在近红外光区变化较复杂 , 呈现先升后降的趋势 ,
即不同严重度叶片平均吸收率在 700~1200 nm波段

图 2 棉花黄萎病不同严重度叶片平均光谱曲线
Fig. 2 Average spectra of cotton leaf infected by Verticilliun wilt in different severities
b0: 无症状; b1: 轻度症状(0~25%); b2: 中度症状(25%~50%); b3: 严重症状(50%~75%); b4: 极严重症状(75%~100%)。
b0: healthy cotton, no symptoms; b1: slight Verticillium symptom (0–25% yellow and scorched), b2: moderate Verticillium symptoms
(25%–50% yellow and scorched); b3: severe Verticillium symptoms (50%–75% yellow and scorched); b4: very severe Verticillium symptoms
(75%–100% yellow and scorched).
第 2期 陈 兵等: 利用光谱红边参数监测黄萎病棉叶叶绿素和氮素含量 323


范围内逐渐上升, 1200~1300 nm波段范围内逐渐下
降。总体而言, 可见光波段和短波红外波段病害叶
片光谱特征规律明显, 近红外波段存在差异。说明
光谱在可见光和短波红外光对病害棉叶不同严重度
的识别能力好于近红外。
2.3 不同严重度病害棉叶光谱红边参数特征
对不同病害严重度棉叶的一阶微分光谱的
均值分析后发现 , 所有的试验品种的一阶微分
平均值变化最大的波段位于红边区域 (680~750
nm)(图 3)。与正常叶片的红边相似, 棉花黄萎病
不同严重度叶片光谱的红边均具有“单峰”现象 ,
且单峰逐渐降低。此外, 红边位置明显向短波方
向移动。即红边振幅减小 , 红边位置发生 “蓝
移”。
进一步对棉叶受黄萎病胁迫后不同严重度的 6
个光谱红边参数分析后发现, 病害胁迫导致光谱红
边位置(REP)、红谷位置(Lo)、红边振幅(Dr)、红边
宽度 (Lwidth)、红边深度 (Depth672)和红边面积
(Area672)的值均发生了很大变化(表 1)。

图 3 不同严重度棉花黄萎病叶片平均红边光谱曲线
Fig. 3 Red edge spectra curve of cotton leaf infected by
Verticillium wilt in different severities
b0: 无症状; b1: 轻度症状(0~25%); b2: 中度症状(25%~50%);
b3: 严重症状(50%~75%); b4: 极严重症状(75%~100%)。
b0: healthy cotton, no symptoms; b1: slight Verticillium symptom
(0–25% yellow and scorched), b2: moderate Verticillium symptoms
(25%–50% yellow and scorched); b3: severe Verticillium symptoms
(50%–75% yellow and scorched); b4: very severe Verticillium
symptoms (75%–100% yellow and scorched).

表 1 不同严重度黄萎病棉叶光谱红边参数统计值
Table 1 Statistics value of severity for cotton leaf infected by Verticilliun wilt with spectral red edge parameters
统计值 Statistics value 统计值 Statistics value 参数
Parameter
处理
Treatment Mean Min. Max. SE
参数
Parameter
处理
Treatment Mean Min. Max. SE
b0 709 707 712 0.35 b0 24.29 20.11 27.00 0.41
b1 706 702 710 0.50 b1 26.44 22.29 32.38 0.64
b2 703 696 709 0.91 b2 30.58 21.14 36.79 0.93
b3 697 685 707 1.37 b3 39.14 30.78 52.98 1.34
REP
b4 688 679 711 2.10
Lwidth
b4 50.13 38.92 62.44 1.50
b0 685 682 690 0.53 b0 0.80 0.70 0.86 0.01
b1 680 675 685 0.77 b1 0.76 0.69 0.82 0.01
b2 673 664 685 1.36 b2 0.69 0.50 0.80 0.02
b3 658 632 670 2.14 b3 0.56 0.33 0.76 0.03
Lo
b4 639 627 656 2.00
Depth672
b4 0.42 0.15 0.66 0.04
b0 1.11 0.96 1.24 0.02 b0 97.16 81.93 108.04 1.56
b1 1.05 0.83 1.16 0.02 b1 85.33 71.07 97.85 1.77
b2 0.10 0.78 1.27 0.04 b2 70.55 43.91 90.63 2.99
b3 0.96 0.48 1.36 0.06 b3 48.01 30.54 72.95 3.00
Dr (*100)
b4 0.99 0.28 1.35 0.08
Area672
b4 27.90 5.52 53.30 3.14
b0: 无症状; b1: 轻度症状(0~25%); b2: 中度症状(25%~50%); b3: 严重症状(50%~75%); b4: 极严重症状(75%~100%)。Mean: 平
均值; Min.: 最小值; Max.: 最大值; SE: 标准误。
b0: healthy cotton, no symptoms; b1: slight Verticillium symptom (0–25% yellow and scorched), b2: moderate Verticillium symptoms
(25%–50% yellow and scorched); b3: severe Verticillium symptoms (50%–75% yellow and scorched); b4: very severe Verticillium symptoms
(75%–100% yellow and scorched). Mean: mean value; Min.: minimum value; Max: maximum value; SE: standard error.

表 1 表明, 随黄萎病棉叶病情严重度的增加,
REP 和 Lo 均减小, 且明显向短波方向移动, 与图 3
的结果具有很好的一致性 , 且 Dr、Depth672 和
Area672均减小, 而 Lwidth增加。进一步分析可知,
在减小的红边参数中, Area672的值减小的幅度最大,
平均值由 97.16 减小到 27.90, 最小值由 81.93 减小
324 作 物 学 报 第 39卷

到 5.52, 最大值由 108.04 减小到 53.30, 标准误由
1.56 增加到 3.14, Dr 减小的幅度最小, 平均值由
1.11%减小到 0.99%, 最小值由 0.96%减小到 0.28%,
最大值由 1.24%增加到 1.35%, 标准误由 0.02%增加
到 0.08%。Lo、Depth672和 Area672 的值减小的幅
度居中。在增加的红边参数中, 红边参数 Lwidth的
值增加的幅度较大, 平均值由 24.29 增加到 50.13,
最小值由 20.11 增加到 38.92, 最大值由 27.00 增加
到 62.44, 标准误由 0.41增加到 1.50。光谱红边参数
的变幅大小顺序是 : Area672>Lo>Lwidth>REP>
Depth672>Dr。综合分析以上内容可知, 棉叶受黄萎
病病害胁迫后不同严重度光谱红边参数发生了相应
的变化, 表现出了黄萎病叶片特有的光谱特征。
2.4 病害棉叶 Chl 含量和 LNC 与红边参数间的
相关性
由不同严重度棉叶 Chl和 LNC的变化和棉叶光
谱红边参数特征可知, 黄萎病使得棉叶 Chl 和 LNC
及光谱红边参数 REP、Lo、Dr、Lwidth、Depth672
和 Area672 的值均发生了较大的变化。为更好地分
析病害发生后叶片 Chl和 LNC与光谱红边参数的关
系, 我们对两者进行了相关分析(表 2)。表 2表明, 病
害棉叶 Chl a、Chl b、Chl a+b和 LNC均与红边参数
REP、Lo、Dr、Depth672和 Area672呈极显著正相
关, 与红边参数 Lwidth 呈极显著负相关, 与红边参
数 Dr未达显著相关。在极显著相关范围内, 整体上
Chl a+b含量与红边参数的显著性最好, Chl a含量其
次, LNC再次, Chl b含量较好。其中, Chl a、Chl a+b
和 LNC均与红边参数 Area672的相关性最好, 相关
系数分别是 0.896、0.906和 0.886; Chl b含量与红边
参数 Lo 的相关性最好, 相关系数为 0.765; Chl a、
Chl b和 Chl a+b与红边参数 Depth672的相关性最差,
相关系数分别是 0.772、0.649和 0.788; LNC与 REP
的相关性最差, 相关系数为 0.800。对 Chl a 和 Chl
a+b 而言 , 红边参数相关性顺序是 Area672>Lo>
Lwidth>REP>Depth672>Dr; 对 Chl b 而言, 红边参
数相关性顺序是 Lo>Area672>Lwidth>REP>Depth672
>Dr; 对 LNC而言, 红边参数相关性顺序是 Area672>
Lo>Lwidth>Depth672>REP>Dr。由于不同严重度病
害棉叶 Chl和 LNC与光谱红边参数具有很好的相关
性, 同时棉叶 Chl和 LNC与光谱红边参数的变化规
律具有很好的一致性。因此, 可利用光谱红边参数
对病害棉叶 Chl和 LNC进行诊断。

表 2 黄萎病棉叶叶绿素(Chl)含量和氮素含量(LNC)与高光谱参数间的相关性
Table 2 Correlation between chlorophyll and nitrogen contents of cotton leaf infected and hyper spectral parameters
红边参数 Red edge parameter 生理参数
Physiological parameter REP Lo Dr Lwidth Depth672 Area672
Chl a 0.826** 0.882** 0.234 –0.830** 0.772** 0.896**
Chl b 0.712** 0.765** 0.100 –0.723** 0.649** 0.740**
Chl a+b 0.827** 0.889** 0.241 –0.841** 0.788** 0.906**
LNC 0.800* 0.885** 0.255 –0.866** 0.819** 0.886**
*表示达 0.05显著水平; **表示达 0.01显著水平。
* Significant at the 0.05 probability level; ** Significant at the 0.01 probability level. LNC: leaf nitrogen content.

2.5 黄萎病棉花叶片 Chl含量和 LNC诊断模型
在综合分析相关分析结果的基础上 , 以
2005—2007 年的样本数据作为训练样本, 选择与黄
萎病叶片 Chl和 LNC相关性最好的不同红边参数分
别建立叶片 Chl和 LNC的诊断模型。其中, 以红边
参数 Area672为自变量, 以 Chl a、Chl a+b和 LNC
为因变量, 建立棉花黄萎病叶片 Chl a、Chl a+b 和
LNC的诊断模型; 以红边参数 Lo为自变量, 以 Chl
b含量为因变量, 建立棉花黄萎病叶片 Chl b含量的
诊断模型(表 3)。分析表 3可得, 建立的所有 Chl和
LNC诊断模型的决定系数均通过了 0.01的极显著相
关, 只是不同红边参数建立的诊断模型精度不同。
以红边参数 Area672 为自变量建立的棉花黄萎病叶
片 Chl a、Chl a+b和 LNC诊断模型的 R2均超过了
0.6, 总体上精度高于以红边参数 Lo 为自变量建立
Chl b含量的诊断模型, 以红边参数 Area672为自变
量建立的 Chl a+b 含量诊断模型的精度最高, 最高
R2超过了 0.86, 以红边参数 Lo为自变量建立的 Chl
b 含量的诊断模型的精度最低, 最低 R2低于 0.57。
模型精度的大小顺序是: Chl a+b>Chl a>LNC>Chl b,
与 Chl和 LNC的变化, Chl和 LNC与红边参数相关
性分析的结果具有很好的一致性。
由于最佳诊断模型的标准是既要相关系数通
过 0.01 极显著检验水平, 又要其 F 值最大 [32]。因
第 2期 陈 兵等: 利用光谱红边参数监测黄萎病棉叶叶绿素和氮素含量 325


此, 在相同自变量建立的 Chl 和 LNC 的不同类型
诊断模型的相关系数均通过 0.01 极显著检验水平
且差别不大时, F值最大的即为该病害叶片 Chl和
LNC 的最佳诊断模型。基于此, Chl a、Chl b 和 Chl
a+b 的最佳诊断模型类型是指数函数, LNC的最佳
诊断模型是线性函数, 模型表达式分别如表 3中加
粗部分所示。
为考察诊断模型的精度, 利用 2008—2011年独
立试验数据对建立的棉花黄萎病叶片 Chl和 LNC诊
断方程进行检验。以叶片 Chl和 LNC的实测值为横
坐标 x, 红边参数 Area672 和 Lo 算出的预测值为纵
坐标 y作散点图, 并对其进行趋势线拟合(图 4)。

表 3 黄萎病棉叶叶绿素(Chl)含量和氮素含量(LNC)的光谱红边参数诊断模型
Table 3 Models between chlorophyll and nitrogen contents of cotton leaf infected by Verticilliun wilt and hyper spectral parameters
模型因变量(y)
Independent of model
模型自变量(x)
Dependent of model
诊断模型
Diagnosing models
决定系数(R2)
Determinative coefficient
F值
F-valve
Chl a Area672 y = 0.0004x – 0.0063 0.803 ** 276.501
y = 0.0175 ln x – 0.0481 0.609 ** 106.046
y = 410–6 x2 –210–5 x + 0.0047 0.842 ** 178.965
y = 0.0002 x1.0906 0.752** 206.120
y = 0.0034e0.0254x 0.840 ** 355.903
Chl b Lo y = 0.0002x – 0.1272 0.583** 95.200
y = 0.1342 ln x – 0.8638 0.580 ** 93.874
y = 310–6 x2 – 0.0037x + 1.1711 0.616 ** 53.623
y = 310–56 x 18.9126 0.660 ** 131.828
y = 3.610–11e0.0287x 0.660 ** 132.015
Chl a+b Area672 y = – 0.0006x + 0.0080 0.822 ** 313.355
y = – 0.0247 ln x – 0.0670 0.632 ** 117.001
y = 510–6 x2 + 310–5 x + 0.0061 0.856 ** 198.353
y = 4104 x 1.0534 0.782** 244.485
y = 0.0053e0.0244x 0.861 ** 421.988
LNC Area672 y = 0.0333x + 0.3941 0.784** 247.352
y = 1.4095 ln x–3.1157 0.682** 146.056
y = –0.00003x2 + 0.0369x + 0.3098 0.785** 122.148
y = 0.1254x0.7208 0.724** 178.439
y = 0.7969e0.0162x 0.755** 209.564
表中加粗部分表示棉花黄萎病叶片 Chl a、Chl b、Chl a+b和 LNC的最佳诊断模型.
The bold parts indicated best diagnosis models for Chl a, Chl b, Chl a+b, Chl a+b, and LNC of cotton leaf infected by Verticilliun wilt.

考虑到建立模型时氮素模型的最佳模型是线性,
叶绿素的最佳模型是指数, 而检验模型是在建立的
模型基础上求得预测值后以线性模型的最终形式体
现的, 造成了叶绿素模型中间存在着模型转化问题,
降低了 R2。因此, 为避免单一利用 R2检验模型精度
不准确, 本文用了 3 个指标综合评价模型精度 , 分
别是决定系数(R2)、均方根误差(RMSE)和相对误差
(RE)。图 4 可知, 4 个拟合方程的 R2均超过 0.5, 分
别为 0.718、0.502、0.740和 0.754, RMSE均小于 0.6,
分别为 0.009、0.004、0.013和 0.600, RE均小于 0.08,
分别为 0.088、0.070、0.044 和 0.007。综合分析 3
个指标可知, 虽然氮素检验模型 R2大于 Chl a、Chl b
和 Chl a+b, RE小于 Chl a、Chl b和 Chl a+b, 然而值
却很接近, 但氮素检验模型的 RMSE 明显大于 Chl
a、Chl b和 Chl a+b, 且差值很大。因此, 总体上氮
素模型的检验精度小于 Chl a 和 Chl a+b, 大于 Chl
b。对方程的系数和截距而言, Chl a、Chl a+b和 LNC
方程的系数均接近 1, Chl a、Chl b和 Chl a+b方程的
截距均接近 0, 表明利用光谱红边参数 Area672 和
Lo 建立的方程来诊断棉花黄萎病叶片叶绿素和氮
素含量的准确性较高, 稳定性较好, 表现较为优秀。
3 讨论
本文首先将不同时期不同品种的病害棉叶 Chl
含量和 LNC进行平均, 再与不同病害严重度平均值
进行组合分析了不同病害严重度棉叶 Chl和 LNC变
326 作 物 学 报 第 39卷


图 4 黄萎病棉叶叶绿素和氮素含量红边参数诊断模型的预测值与实测值拟合
Fig. 4 Comparison of chlorophyll and nitrogen content of cotton leaf infected by Verticilliun wilt between the actual values and the
estimated values from different diagnosis models of red edge parameters

化情况。同时对不同时期不同品种的病害棉叶光谱
反射率和吸收率进行了平均并作了进一步分析。由
于叶片光谱在可见光区主要受 Chl和 LNC影响, 在
近红外和短波红外光区主要受 Chl、LNC、叶片厚
度、水分和干物质等影响[31-32]。另一方面, 病菌侵
染叶片后大量分生孢子和菌丝体不断繁殖阻碍了棉
花体内水分运输, 降低了叶片蒸腾, 同时它们产生
的各种毒素不断地对叶片各个细胞器产生毒害, 导
致叶片内部细胞结构发生显著变化, 叶绿体和蛋白
质体等受到破坏, Chl和 LNC不断下降[1], 叶片变黄
干枯, 导致黄萎病发生后叶片光谱在可见光区、短
波红外光区反射率逐渐增加, 吸收率逐渐减小, 近
红外光区反射率逐渐增加, 吸收率先升后降, 而红
光波段处的 REP、Lo、Dr、Depth672和 Area672迅
速减小, 而 Lwidth 增加。此外, 由于红边参数均是
从叶片一阶导数光谱中提取出来的, 而导数运算往
往会引入一定的噪声, 使得红边常会出现单峰、双
峰或者多个极值等现象[5,7,19], 对红边参数准确性有
一定的影响。同时不同红边参数计算方法和表示的
意义不同, 受到的影响因子不同, 值的大小和变幅
也不相同[5]。在红边参数中, Area672由于覆盖了较
多波段, 包含了更多光谱反射能量和信息, 同时也
包含了较多的非敏感波段, 抗干扰能力差, 稳定性
差, 变幅最大, 差异很明显; REP、Lo和 Lwidth所
包含的波段数少, 同时受测试环境不确定因素的影
响较大, 抗干扰能力较差, 稳定性较弱, 变幅较大,
差异明显; Depth672和 Dr密切相关, Dr往往只覆盖
一个或几个较少的波段, 受测试环境等不确定因素
的影响较小, 抗干扰能力好, 稳定性好, 变幅最小,
差异较明显。
由于叶片不同组分对光谱不同波段和参数敏感
性不同[1,33], 导致病害棉叶 Chl 和 LNC 对不同红边
参数的响应不同。前人的研究表明虽然红边参数很
多, 同一参数也有不同的算法, 但真正能用来监测
叶片理化参数的并不多, 最常用且相关性较好的主
要有 REP、Lo、Dr、Depth672、Area672 和 Lwidth
六个红边参数。因此, 本文并未对所有的红边参数
进行分析, 也未对同一红边参数运用不同算法计算
的差异进行分析, 而是在前人的研究基础上选择了
这 6个红边参数和常用最优的计算方法 , 通过对 6
第 2期 陈 兵等: 利用光谱红边参数监测黄萎病棉叶叶绿素和氮素含量 327


个光谱红边参数分析后发现, 病害胁迫导致 6个光
谱红边参数的值均发生了很大变化, 且和病害严重
度均有很好的相关性。 基于相关性的不同选择与黄
萎病叶片 Chl 和 LNC 相关性最好的 2 个红边参数
Area672 和 Lo 分别建立了叶片 Chl 和 LNC 的诊断
模型。其中, 以红边参数 Area672 为自变量建立的
叶片 Chl a、Chl a+b和 LNC诊断模型和以红边参数
Lo为自变量建立的叶片 Chl b含量的诊断模型均具
有很高的精度, 能很好地诊断黄萎病棉花叶片 Chl
和 LNC。与正常的作物叶片 Chl和 LNC监测结果进
行比较, 与前人的相关探究具有很好的一致性, 例
如, 刘炜等 [5]研究表明基于红边面积尤其是改进红
边面积可以更准确地指示夏玉米 Chl 含量的变化,
黄春燕等[23]研究表明红边面积与 Chl 密度的相关性
最好, 能准确地估算棉花叶片 Chl密度, 因此, 可以
使用统一的光谱红边参数 Area672 监测正常和病害
条件下的 Chl和 LNC。但也有一些不同之处, 例如,
卢艳丽等[34]的研究表明红边参数 Lo 与冬小麦冠层
不同叶位 LNC的相关性最好, 谭昌伟等[24]的研究表
明利用红边参数 REP 来反演夏玉米叶片 Chl a,
Area672来反演 Chl b, Chl a+b能达到最好的效果。
可能的原因是不同作物类型对光谱红边参数的响应
不同, 不同病虫等胁迫的致病因子不同, 对叶片 Chl
和 LNC的迫害机理不同所致。因此, 考虑到各种条
件下监测的准确性和精度差异, 建议在监测的准确
性和精度要求不高的情况下可以通用, 在要求较高
的条件下各自选用各自最优参数。此外, 值得说明
的是本文提出运用红边参数 Area672 为自变量建立
的叶片 Chl a、Chl a+b和 LNC诊断模型, 由于叶片
Chl 和 LNC 之间本身具有很好的相关性, 所以可以
同时进行 Chl a、Chl a+b和 LNC监测, 但是由于运
用红边参数 Area672 为自变量建立 Chl a、Chl a+b
和 LNC 的最佳模型类型和方程(包括方程的各个系
数)是不同的, 在具体应用的时候仍需根据具体需要
选择不同的方程。
在不同病害严重度下光谱红边参数对 Chl 等参
数反演结果的影响分析中, 本文重点研究不同红边
参数对 Chl 等参数反演结果的准确性和精确性。因
为在研究中不同严重度作为中间桥梁将光谱红边参
数和 Chl等参数联系起来, 使得光谱红边参数和 Chl
等理化参数一一对应 , 严重度并不直接参与建模 ,
所以不会对反演结果产生影响。由于病害发生后首
先在叶片水平有所表现, 进而发展到冠层水平, 而
冠层的光谱特征最主要是由叶片表现, 在冠层的光
谱构成中, 叶片占有最为重要的贡献, 所以叶片水
平的研究是基础, 在研究病害发生后对棉花生化组
分的影响也应先从叶片着手。当然冠层水平的研究
也很重要, 但由于冠层水平的研究受到取样数量和
时间的限制, 开展的较晚也较少, 仍需不断的开展,
在本文不再作细致的讨论。另一方面本文利用红边
特征监测病害叶片 Chl和 LNC也为冠层叶片 Chl和
LNC 的监测提供了理论基础, 而卫星影像监测时所
包含的部分波段也存在于红边范围内, 通过对病害
冠层叶片 Chl和 LNC的监测实现病害的监测, 为卫
星影像监测病害提供了可能。在卫星影像监测中 ,
虽然监测的是发病叶片与非发病叶片和土壤背景等
的混合象元, 但由于病害监测时, 冠层覆盖度已经
很高, 尤其病害高峰期时正处在棉花铃期, 覆盖度
通常在 90%以上, 土壤背景的影响很小, 而且可通
过遥感方法再次消除土壤的影响, 至于监测的混合
象元中包括发病叶片与非发病叶片, 在进行地面病
害单叶和冠层监测时同样存在, 也正是如此, 才能
将病害分成不同的严重度进行不同层面病害叶绿素
和氮素的监测, 所以卫星影像的监测结果应该和地
面监测冠层的结果一致, 只是精度略低。因此, 本研
究的结果可为卫星影像监测病害提供理论依据, 具
有很好的实用性。
此外, 前人已利用红边参数对作物 Chl 和 LNC
等组分的监测做了大量研究, 在研究过程中所采取
的方法基本相同。另一方面, 虽然病害发生会导致
植物叶片 Chl和 LNC变化, 至于一些年份可能在黄
萎病发生的同时还存在枯萎病等其他病害, 或者水
分胁迫、氮素胁迫等可能导致植物叶片 Chl和 LNC
减小, 但导致植物叶片 Chl和 LNC变化的原因是不
同的, 即机制是不同的。黄萎病胁迫下棉叶 Chl 和
LNC减小是由于病菌侵染植株后病菌大量繁殖和产
出大量有毒物质, 堵塞了导管并破坏了植株内部结
构所致, 枯萎病胁迫下棉叶 Chl和 LNC减小与黄萎
病胁迫下的变化具有相似性, 而水分胁迫, 氮素胁
迫下的叶片 Chl和 LNC减小是由于植株本身养分供
应不足所致, 所以在今后的研究中应首先明确 Chl
和 LNC是由哪种胁迫引起的, 并针对不同的胁迫条
件进行分析。由于病害发生后叶片内部生理生化反
应是个复杂的过程, 还伴随着叶片水分、叶厚、叶
内各种酶的变化等, 必将对叶片光谱红边产生一定
的影响, 这些参数的变化如何, 它们和红边参数的
328 作 物 学 报 第 39卷

关系如何 , 能否用相应的红边参数对其进行诊断 ,
将是今后研究的主要内容。
4 结论
利用光谱红边参数对黄萎病棉叶 Chl 含量和
LNC的监测探讨了黄萎病棉叶光谱反射率和光谱吸
收率在可见光区、近红外光区和短波红外光区的变
化规律 , 明晰了黄萎病棉叶红边特征 , 红边参数
REP、Lo、Dr、Depth672、Area672 和 Lwidth 的变
化规律, 并通过分析黄萎病棉叶 Chl和 LNC与红边
参数的相关性, 建立了病害棉叶 Chl和 LNC的红边
参数诊断模型, 实现了棉花黄萎病叶片 Chl 和 LNC
的光谱定量反演, 为黄萎病棉叶的生理变化特征监
测及光谱特征监测机制研究提供了理论基础。
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