全 文 ：武汉植物学研究 , 一!∀# ∃ % & !一 &
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柱胞鱼腥藻原生质球自发融合的研究 ‘
陈贤均’ ‘ 郭厚良
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关键词 柱胞鱼腥藻 , 原生质球 , 融合
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早在 Σ 年 , 细菌就实现 ∗原生质体融合杂交 〔, 〕 。 同样是原核生物 , 蓝藻原生质球融合及细胞杂交
至今没有任何报道 。 究其原因 , 首先是由于蓝藻原生质球再生技术长期不过关 。近年来 , 蓝藻原生质球再
生虽有若干报道 〔, 一 # 〕 , 但再生技术还不够成熟 Τ 另一方面 , 很早就通过电镜检查发现 , 采用溶菌酶处理形
成的蓝藻原生质球还保留了较多细胞壁 〔! ’“〕 , 因此 , 人们对蓝藻原生质球能否融合持怀疑态度 。 由干 卜述
原因 , 有关蓝藻细胞杂交的工作还完 全没有开展 。 经 ϑ 余年的努力 , 我们逐步在这方面取得进展 , 终于
首先在蓝藻的一个代表种一一 丝状固氮蓝藻柱胞 鱼腥藻实现了频率高 、重复性好的原生质球再生 〔, 。 为
了进一步开展细咆杂交 , 我们进行 一Υ’原生质球融合试验 。 结果证明 , 柱胞鱼腥藻原生质球可以不经特殊
诱导自发融合 。
材料与方法
· 材杆
本试验所用柱胞负腥藻 ∀> 二Θ、。 4Μ −, ,山 3, ∃引自中国科学院水生生物研究所 , 材料的培养及原
生质球的制备参 见文献〔ς〕。
Ω 8 方法
川 原生质球融合观察 % 原生质球制备处理结束后 , !ϑ 。 % Ξ Ψ 3+ 离心 & Ψ 3+ , 弃去含酶溶液 , 加 入不
含酶的原生质球制备液 , 置于显微镜 卜检查 , 观察原生质球融合过程 , 并直接统计融合率 。
收稿 日 % Σ & , 修 回日 % −洲 ∀∃− 8 。 第 一作者 % 男 , & ! 岁 , 副教授 。
国家白然科学 基金资助课题 。
“ 现工作单位 % 湖北咸宁医学院 。
第 # 期 陈贤均等 % 柱胞鱼腥藻原生质球自发融合的研究
蓝藻原生质球不经明显的诱导处理而发生频率比较高的融合 , 这 一试验结果出乎意料 。 推测这种现
象的发生与蓝藻特殊的细胞结构有关 , 即细胞壁和 原生质膜紧密连结 , 即使在高渗溶液中也不发生质壁
分离〔Κ ∋ 。 蓝藻细胞壁 和原生质膜在结构 卜的这种连续性 , 给原生 质球的制备和培养再生带来了很大困
难 , 但这一点成为细胞融合的有利因素 。 即壁降解引起原生质膜受损害 , 可能在原生质球表面形成 一种
创伤面 , 使原生质球容易互相粘连和 融合 。
在本试验里 , 原生质球 自发融合是指没有 : ? Ε 和电激这样的诱导因子 。 实际 Ζ [ , 必须经离心使原生
质球 互相挤压方能发生融合 , 如不作离心处理 , 原生质球很难互相融合 。 悬浮中的原生质球如进行 :? Ε
和电激处理 , 融合率可大大提高 。 但只需离心处理便使原生质球融合 , 这为细胞融合操作带来了很大的
方便 。
参 考 文 献
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孔繁翔 , 黎尚豪 Ω 蓝藻球形体的分离 、培养及再 生 Ω 水 生生物学报 , , ! % 一 8Σ
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郭厚 良 Ω 丝状固氮蓝藻柱 胞负腥藻原尘质球 的培养再生 Ω 植物学报 , Σ , &ς % Σ& 一 Σ #ϑ
郭厚 良 Ω 青霉素 溶菌酶法分离 蓝藻原生质球 Ω 植物学报 , ”。 , &8 % & ϑ 一 & &
黄有馨 , 刘志礼 Ω 固氮蓝藻Ω 北京 % 农业 出版社 , ς, Ω ! Σ一 Σ&