全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 2期 2016年 1月

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甘草次酸类脂囊泡的制备及处方工艺优化
李喜香 1，张亚会 2，刘效栓 1，包 强 1，钱梦茹 2
1. 甘肃省中医院，甘肃 兰州 730050
2. 甘肃中医药大学，甘肃 兰州 730000
摘 要：目的 以非离子表面活性剂为载体材料进行甘草次酸（GA）类脂囊泡（GA-NI）的制备，并对其进行质量评价研
究。方法 采用薄膜分散-超声法建立 GA-NI的制备方法；采用反透析法和紫外分光光度法测定包封率；通过单因素、星点
设计-响应面法优化制备工艺及处方；并对最佳处方类脂囊泡的形态学、平均粒径、Zeta电位及包封率等性质进行考察。
结果 最佳处方工艺为司盘 80-胆固醇 2∶1，水合温度为 70 ℃、水合时间为 51 min、超声时间为 60 min，其预测包封率为
80.66%，预测值与理论值的偏差 4.95%，二项式拟合复相关系数 0.989 9。结论 采用星点设计-效应面法优选的 GA-NI制备
工艺稳定可行、精密度高、可预测性好。
关键词：甘草次酸；薄膜分散-超声法；类脂囊泡；星点设计-响应面法；非离子表面活性剂
中图分类号：R283.6 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2016)02 - 0240 - 06
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.02.011
Preparation of glycyrrhetinic acid niosomes and optimization of its prescription
process
LI Xi-xiang1, ZHANG Ya-hui2, LIU Xiao-shuan1, BAO Qiang1, QIAN Meng-ru2
1. Gansu Province Hospital of Chinese Medicine, Lanzhou 730050, China
2. Gansu University of Chinese Medicine, Lanzhou 730000, China
Abstract: Objective With nonionic surfactants as the carrier material to prepare glycyrrhetinic acid (GC) niosomes (NI) and to
evaluate the quality. Methods The thin film dispersion-ultrasound method was used for establishing the preparation process of GC -
NI, reverse dialysis method and ultraviolet spectrophotometer method were used to determine the encapsulation efficiency (EE), the
prescription and preparation process were optimized through single factor and central composite design-response surface methodology
(CCD-RSM), and the properties of morphology, particle size, Zeta potential, and EE in optimized NI were investigated. Results The
optimum prescription process as Span 80-cholesterol was 2∶1, hydration temperature was 70 ℃, hydration time was 51 min,
ultrasonic time was 60 min, its forecast EE was 80.66%, bias between the observed and predicted values was 4.95%, and regression
coefficient of binomial fitting complex model was as high as 0.989 9. Conclusion CCD-RSM is used to optimize the preparation,
which has the stable, feasible, high precision, and good predictability advantage.
Key words: glycyrrhetinic acid; thin film dispersion-ultrasonic method; niosomes; central composite design-response surface
methodology; nonionic surfactants

甘草为豆科（Fabaceae）甘草属 Glycyrrhiza L.
植物甘草 Glycyrrhiza uralensis Fisch.、胀果甘草
Glycyrrhiza inflata Bat. 或光果甘草 Glycyrrhiza
glabra L. 的干燥根及根茎[1]，别名甜草根、红甘草、
国老等，有调节机体免疫功能[2]、抗菌、抗炎、抗
病毒、抗氧化之功效。其主要化学成分有甘草酸、
甘草甜素、甘草次酸（glycyrrhetinic acid，GA）、甘
草皂苷、甘草苷元、异甘草苷、异甘草苷元及甘草
利酮、刺芒柄黄花素、甘草素等。其中，GA 对致
癌性的病毒如肝炎病毒及艾滋病病毒均有抑制作
用[3]，临床上常用来治疗慢性肝炎及肝癌。GA在水
中溶解度小，平衡溶解度仅为 6.32 mg/mL，油水分

收稿日期：2015-08-22
基金项目：甘肃省科技支撑计划——甘草次酸口服囊泡包裹的纳米载体构建及肝靶向特性研究（1204FKCA183）
作者简介：李喜香（1968—），女，主任中药师，硕士生导师，主要从事药物传统剂型的改进及新剂型的研究。
Tel: 15002550389 E-mail: LixiXiang929@163.com
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配系数 P＝48 978（lgP 4.69），口服基本不吸收，普
通注射剂的生物利用度低，严重影响其临床疗效的
充分发挥[4-5]。
囊泡主要有脂质囊泡与类脂囊泡（niosomes，
NI），类脂囊泡由非离子型表面活性剂自组装形成，
具有闭合的双分子膜结构，又称为非离子表面活性
剂囊泡（non-ionic surfactant-based elastic vesicle），
是第 2代柔性囊泡。与脂质囊泡一样具有组织相容
性和细胞透过性，但不像脂质囊泡易受氧化或水解，
也不易泄漏药物。药物被聚合物囊泡包封后，可以
起到增效、减毒、缓释、增加药物稳定性和靶向性
等作用[6]。类脂囊泡还具有稳定性高、成本低、表
面活性剂类型多且易得[7]等优点。通过类脂囊泡制
备技术，GA 在包封的状态下，可以增加药物的溶
解性，改变其体内分布以提高靶向性。本实验以单
因素实验联合星点设计响应面法对 GA 类脂囊泡
（GA-NI）的制备方法及处方进行了初步筛选。
1 仪器与材料
Zetasizer Nano 3600 激光动态散射仪，英国
Malvern公司；TECNAI2 G2 F30透射电子显微镜，
荷兰 Phlips-FEI 公司；RE-3000 旋转蒸发器，上海
亚荣生化仪器厂；UV-1800 紫外分光光度仪，
Shimadzu公司；HJ-6多头磁力搅拌器，巩义市予华
仪器有限责任公司；SB-3200D 超声波清洗机，宁
波新芝生物科技股份有限公司；CP225D电子天平，
德国赛多利斯公司。
GA样品（批号BW20121209Q），质量分数98%，
西安富捷药业有限责任公司；GA 对照品，质量分
数为 98.5%，批号 110723-201413，中国食品药品检
定研究院；司盘 60（批号 201304291）、司盘 80（批
号 201305151）、聚山梨酯 80（批号 201302151），
成都艾科达化学试剂有限公司；胆固醇，国药集团
化学试剂有限公司，批号 20120329；透析袋，截留
相对分子质量 8 000～14 000，北京博奥拓达科技有
限公司；水为超纯水；其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 GA-NI的制备
以非离子表面活性剂和胆固醇为囊材，采用薄
膜分散-超声法制备 GA-NI，即先称取适量的 GA，
非离子表面活性剂与胆固醇分别溶于氯仿-乙醇
（4∶1）混合液中，加入圆底烧瓶中，减压蒸发至瓶
内壁上形成均匀透明一层薄膜，加入一定量的超纯
水，使薄膜溶胀水合后超声 40 min，即得乳白色的
GA-NI混悬液。
2.2 分析方法的建立
2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取 GA 对照品
2.0 mg，置于 100 mL量瓶中，用甲醇溶解并定容至
刻度。
2.2.2 供试品溶液的制备 按“2.1”项下方法制备
质量浓度为 1 mg/mL的 GA-NI混悬液，精密吸取 1
mL的GA-NI混悬液，置于 10 mL量瓶中，加入 15%
乙醇定容至刻度，即得供试品溶液。
2.2.3 波长的确定 取“2.2.1”项下对照品溶液与
“2.1”项下制备工艺制备的不含药物的空白囊泡溶
液，经破乳处理，采用紫外分光光度法，在 200～
400 nm波长扫描。结果显示，对照品最大吸收波长
为 250 nm，空白囊泡的辅料及溶剂在 250 nm处无
吸收，表明该波长处对药物的检测无干扰，故可以
选择 250 nm为 GA-NI的测定吸收波长。
2.2.4 线性关系的考察 精密称取 GA对照品 16.0
mg，用甲醇定容至 1 000 mL，配成 16 μg/mL的母
液，用甲醇稀释成质量浓度分别为 0.4、0.8、2.0、
4.0、8.0、16.0 μg/mL 的系列对照品溶液。在波长
250 nm下，测吸光度（A）值，并以 A值对质量浓
度（C）进行线性回归，得回归方程：A＝0.019 2 C＋
0.066 1，r＝0.996，表明 GA在 0.4～16 μg/mL与 A
值呈良好的线性关系。
2.2.5 精密度试验 分别取“2.2.4”项下低、中、
高（0.4、8.0、16.0 μg/mL）3个质量浓度的 GA对
照品溶液 3 mL，平行取样 6份，在波长 250 nm处
测定，每天测 6次，连续测定 6 d，计算日内与日间
精密度。结果显示，低、中、高 3个质量浓度的日
内、日间精密度的 RSD分别为 0.31%、0.54%、0.81%
和 0.92%、1.34%、1.58%，表明紫外分光光度法测
定 GA，其精密度符合方法学要求。
2.2.6 稳定性试验 取“2.2.2”项下质量浓度为 1
mg/mL的供试品溶液 1份，在 250 nm波长处，分
别于 0、4、8、12、18、24 h进行测定，其 RSD为
1.41%，结果表明，供试品溶液在常温条件下 24 h
内稳定。
2.2.7 重复性试验 取“2.2.2”项下同一批次供试
品溶液 6份，按“2.2.4”项下方法测定，记录 A值，
GA-NI的 RSD为 1.36%，说明该方法重复性良好。
2.2.8 回收率试验 分别吸取 20 mL的空白囊泡溶
液 6份，置于 20 mL量瓶中，分别加入 GA对照品
20 mg，超声即得样品溶液，计算其回收率，结果
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平均回收率为 97.43%，RSD为 1.12%。
2.3 包封率的测定
采用反透析法测定包封率，精密量取 3 mL的
GA-NI溶液，置于 100 mL量瓶中，用 95%乙醇定
容至 100 mL，转移至锥形瓶中。再量取 95%乙醇 6
mL，置于已处理的透析袋中，两端扎紧，室温下磁
力搅拌。在 8 h时吸取透析袋内的透析液，测定其
质量浓度，计算游离药物的质量（m1），按公式计
算包封率（包封率＝1－m1/m，其中 m 为药物的总
量）。
2.4 预实验
2.4.1 反透析时间的确定 精密量取 3 mL 的
GA-NI溶液，置于 100 mL量瓶中，用 95%乙醇定
容至 100 mL，转移至锥形瓶中。再量取 95%乙醇 6
mL，置于已处理的透析袋中，两端扎紧，室温下磁
力搅拌。在透析过程中，分别于 1、2、4、6、8、
10 h吸取透析袋内的透析液 3 mL，测定其游离的药
物质量浓度，同时在透析袋内补充 3 mL 95%乙醇，
结果包封率分别为 7.61%、19.83%、35.57%、55.60%、
80.90%、80.90%。采用反透析法在 8 h时达到平衡，
且在 10 h内不发生渗漏现象。故本实验采用反透析
法[8]测 GA-Ni的包封率，选择 8 h作为透析时间。
2.4.2 表面活性剂的确定 固定 GA 质量浓度 0.6
mg/mL，司盘 60质量浓度 0.1 mg/mL，司盘 80质
量浓度 0.1 mg/mL，聚山梨酯 80 质量浓度 0.1
mg/mL，胆固醇质量浓度 0.1 mg/mL，表面活性剂-
胆固醇 1∶1，GA-胆固醇 1∶1，水-胆固醇 2∶1，
考察不同表面活性剂（司盘 60，司盘 80，聚山梨酯
80，司盘 60-聚山梨酯 80 1∶2、2∶3、1∶1、3∶2、
2∶1，司盘 80-聚山梨酯 80 1∶2、2∶3、1∶1、3∶
2、2∶1）对 GA-NI 包封率的影响。结果包封率分
别为 49.17%、75.62%、66.80%、36.80%、21.81%、
40.33%、22.69%、15.64%、4.17%、57.97%、30.63%、
40.33%、12.10%。由此可知，司盘 60 作为表活制
备的 GA-NI包封率低，司盘 80与聚山梨酯 80制备
的 GA-NI的包封率接近，但司盘 80制备的 GA-Ni
混悬液均匀且无白色沉淀。司盘 60 与聚山梨酯 80
的不同比例以及司盘 80与聚山梨酯 80的不同比例
制备得到的 GA-NI 的包封率均比较低且形成的混
悬液不均匀。故选择司盘 80作为表面活性剂。
2.5 单因素考察
2.5.1 GA 质量浓度 固定司盘 80 质量浓度 0.1
mg/mL，胆固醇质量浓度 0.1 mg/mL，胆固醇溶液-
水 1∶2，GA溶液-水 1∶2，水合温度 55 ℃，水合
时间 40 min，超声时间 40 min，考察 GA质量浓度
分别为 0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mg/mL对 GA-NI包
封率的影响。结果平均包封率分别为 32.04%、
75.67%、63.45%、39.89%、37.28%（n＝3），结果
表明GA质量浓度在 0.2～1.0 mg/mL均能形成类脂
囊泡，随着 GA质量浓度的增大，包封率先增大后
减小。静置 24 h后，GA-NI的乳浊液无变化，稳定
性好。本实验选择 GA质量浓度为 0.6 mg/mL。
2.5.2 司盘 80 溶液与胆固醇溶液的体积比 固定
GA 质量浓度 0.6 mg/mL，司盘 80 质量浓度 0.1
mg/mL，胆固醇质量浓度 0.1 mg/mL，胆固醇溶液-
水 1∶2，GA溶液-水 1∶2，考察司盘 80溶液与胆
固醇溶液的体积比分别为 1∶3、1∶2、1∶1、2∶1、
3∶1 对 GA-NI 包封率的影响。结果 GA 平均包封
率分别为 50.36%、59.88%、69.41%、72.34%、62.08%
（n＝3）。结果表明司盘 80溶液与胆固醇溶液的体积
比在 1∶3～3∶1均能形成类脂囊泡，随着二者体积
比增大，包封率先增大后减小。静置 24 h后，GA-NI
的乳浊液无变化，稳定性好。司盘 80溶液与胆固醇
溶液的体积比以 3∶2 为中心点作为星点设计试验
因素水平。
2.5.3 胆固醇溶液与水溶液的体积比 固定 GA质
量浓度 0.6 mg/mL，司盘 80质量浓度 0.1 mg/mL，
胆固醇质量浓度 0.1 mg/mL，胆固醇溶液-水 1∶2，
GA 溶液-水 1∶2，水合温度 55 ℃，水合时间 40
min，超声时间 40 min，考察胆固醇与水的体积比
分别为 1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5 对 GA-NI
包封率的影响。结果平均包封率分别为 34.16%、
64.28%、80.40%、65.74%、40.10%（n＝3）。结果
表明胆固醇溶液与水的体积比在 1∶2～1∶5 均能
形成类脂囊泡，随着二者体积比增大，包封率先增
大后减小；胆固醇溶液与水的体积比为 1∶1时，在
旋转蒸发过程中，圆底烧瓶瓶壁上的薄膜分散不均
匀，水合后出现片状漂浮物，静置 24 h后产生沉淀。
本实验选择胆固醇溶液与水的体积比为 1∶3。
2.5.4 水合温度 固定 GA质量浓度 0.6 mg/mL，
司盘 80质量浓度 0.1 mg/mL，胆固醇质量浓度 0.1
mg/mL，胆固醇溶液-水 1∶2，GA 溶液-水 1∶2，
水合时间 40 min，超声时间 40 min，考察水合温度
分别为 25、40、55、70 ℃对 GA-NI包封率的影响。
结果平均包封率分别为 34.97%、48.89%、64.28%、
73.07%（n＝3）。结果表明水合温度在 25～70 ℃均
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能形成类脂囊泡，随着水合温度升高，包封率呈增
大趋势，静置 24 h无变化。本实验选择水合温度以
62.5 ℃为中心点作为星点设计因素水平。
2.5.5 水合时间 固定 GA质量浓度 0.6 mg/mL，
司盘 80质量浓度 0.1 mg/mL，胆固醇质量浓度 0.1
mg/mL，胆固醇溶液-水 1∶2，GA 溶液-水 1∶2，
水合温度 55 ℃，超声时间 40 min，考察水合时间
分别为 10、40、70、100、130 min对 GA-NI包封
率的影响。结果平均包封率分别为 58.20%、84.06%、
79.66%、60.87%、62.34%（n＝3）。结果表明水合
时间 10 min形成的乳浊液不均匀、稳定。40～70 min
均能形成类脂囊泡，随着水合时间增大，包封率呈
减小趋势，静置 24 h无变化。本实验选择水合时间
以 55 min为中心点作为星点设计因素水平。
2.5.6 超声时间 固定 GA质量浓度 0.6 mg/mL，
司盘 80质量浓度 0.1 mg/mL，胆固醇质量浓度 0.1
mg/mL，胆固醇溶液-水 1∶2，GA 溶液-水 1∶2，
水合温度 55 ℃，水合时间 40 min，考察超声时间
分别为 20、40、60、80、100 min对 GA-NI包封率
的影响。结果平均包封率分别为 58.20%、78.41%、
91.39%、63.86%、79.80%（n＝3）。结果表明超声
时间 40～60 min均能形成类脂囊泡，随着超声时间
增大，包封率呈先增大后减小再增大趋势，静置 24
h无变化。因 100 min耗费时间且包封率不是最优，
故本实验选择超声时间以 50 min 为中心点作为星
点设计因素水平。
2.6 处方工艺优化
综合单因素考察的结果，选取司盘 80溶液与胆
固醇溶液体积比（A）、水合温度（B）、水合时间（C）、
超声时间（D）作为考察因素，根据单因素实验结
果选取水平，以包封率为评价指标，采用星点设计-
效应面法[9]优化实验，实验设计及结果见表 1。
2.7 实验结果分析
2.7.1 方差分析结果 对实验结果进行方差分析，
模型显著性检验 P＜0.01，其中，1次项自变量 A、
C、D，2 次项 AD、BC、BD、A2、B2、C2、D2显
著（P＜0.05），表明该模型具有统计学意义。失拟
项 P＝0.252 2＞0.05，说明无失拟因素存在，该模
型可以用来代替真实的实验点结果进行分析；校正
系数 R2＝0.989 9，变异系数为 4.95%，表明该模型
变异小，模型拟合优度好。
2.7.2 响应面回归分析结果 以 A、B、C、D为自
变量，以包封率为因变量进行多元二次响应面回归
分析，回归模型数据的分布见图 1。
由图 1可知，实验实测值和预测值分布线性明
显，参数的正态分布基本在一条直线上，没有出现
异常的数据点，说明可用来对此制备工艺研究进行
分析和预测。回归方程为包封率＝82.89＋6.86 A－
1.74 B－3.20 C＋4.95 D＋3.35 AB－0.48 AC－4.89
AD＋2.93 BC＋15.23 BD－1.98 CD－14.22 A2－
8.89 B2－5.97 C2－2.48 D2，通过等高线和三维响应
曲面分析 A、B、C、D对包封率的影响情况，如图
2所示。
从图 2可以直观地看出 2种因素相互作用，均
能出现最优值，表明采用薄膜分散超声法在制备
GA-NI 时，4 种因素对其包封率均影响较大。以包
封率达到最高为选择条件，得到的最佳拟合方案只
有 1种：司盘 80溶液-胆固醇溶液 2∶1，水合温度

表 1 实验设计及结果
Table 1 Design and results of experiment
试验号 A B/℃ C/min D/min 包封率/% 试验号 A B/℃ C/min D/min 包封率/%
1 3∶2 62.50 55.00 50 80.52 12 2∶1 55.00 40.00 60 50.81
2 3∶2 62.50 80.23 50 63.85 13 3∶2 62.50 55.00 33.18 68.03
3 3∶2 62.50 29.77 50 69.15 14 1∶1 70.00 70.00 60 61.21
4 1∶1 70.00 40.00 60 67.04 15 3∶2 62.50 55.00 50 81.38
5 3∶2 62.50 55.00 66.82 84.68 16 2∶1 70.00 40.00 40 44.09
6 3∶2 49.89 55.00 50 61.16 17 1∶1 55.00 40.00 40 59.44
7 3∶2 62.50 55.00 50 82.21 18 2∶1 70.00 70.00 40 44.26
8 1∶1 55.00 70.00 40 49.81 19 3∶2 62.50 55.00 50 87.32
9 7∶3 62.50 55.00 50 54.67 20 3∶2 62.50 55.00 50 81.92
10 2∶1 55.00 70.00 60 31.33 21 3∶5 62.50 55.00 50 31.61
11 3∶2 75.11 55.00 50 55.32
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图 1 薄膜分散超声法回归模型数据点的分布图
Fig. 1 Distribution of data points of regression model of thin film dispersion ultrasonic method




图 2 薄膜分散超声法中因素对包封率影响的响应面
Fig. 2 Response surface of factors affecting EE of thin film dispersion ultrasonic method

69.35 ℃，水合时间 51.19 min，超声时间 60 min，
包封率 80.66%。
通过实验分析及结果，最终选择薄膜分散法制
备GA-NI的最佳制备工艺为司盘 80溶液-胆固醇溶
液 2∶1，水合温度为 69.35 ℃，水合时间为 51.19
min、超声时间为 60 min，其预测包封率为 80.66%。
结合实际生产考虑，对各因素条件取整，确定最佳
提取工艺为司盘 80溶液-胆固醇溶液 2∶1，水合温
度为70 ℃、水合时间为51 min、超声时间为60 min。
2.8 形态观察
取少量 GA-NI混悬液，用 15%乙醇稀释 10倍，
滴至有碳膜的铜网上，稍干后用滤纸吸干边缘混悬
液于透射电子显微镜下观察 GA-NI的形态。透射电
镜照片见图 3。可见 GA-NI呈圆形或类圆形、分布
较均匀。
2.9 平均粒径及 Zeta电位图
取适量 GA-NI溶液，用激光粒度分析仪测定囊

图 3 囊泡的透射电镜图 (A) 和单个囊泡透射电镜图 (B)
Fig. 3 Transmission electron microscopy of vesicles (A) and
a single vesicle (B)

泡平均粒径为粒径 200 nm，Zeta 电位为（−25.1±
3.4）mV，其粒径及 Zeta电位图如图 4所示。
2.10 GA-NI稳定性考察
将制备得到的 GA-NI 置于 4 ℃与室温（温度
范围为 18～25 ℃）下保存，在 0、24 h及 15、30 d
取样，观察GA-NI的外观形态。结果表明，低温 4 ℃
条件下，在 24 h无变化，15 d出现分层的现象；室
温条件下，0～30 d其外观无变化，仍为乳白色的均
匀混悬液。因此，GA-NI可保存于室温条件下，以便
用于后期实验制备类脂囊泡包裹的壳聚糖纳米粒。
正
态
概
率
%

残差的正态概率分布图 实际实验值与方程预测值对应关系图
方
程
预
测
值

99
95
90
80
70
50
30
20
10
5
1
90

80

70

60

50

40

30
−2 −1 0 1 2
内学生化残差
30 40 50 60 70 80 90
实际实验值
包
封
率
/%

90
60
30
45
55
D/min
1.2∶1
1.8∶1 A 64 46
包
封
率
/%

包
封
率
/%

90
70
50
C/min
1.2∶1
1.8∶1 A
100
40
70
1.8∶1
1.2∶1 A 67
58
B/℃
60
90
30 包
封
率
/%

包
封
率
/%

包
封
率
/%

64
46
67
58 B/℃ B/℃
C/min
100
40
70
46
64
55
45
D/min
C/min
100
70
40
67
58 55
45
D/min
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 2期 2016年 1月

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图4 优化工艺制备的GA-NI粒径图 (A) 和Zeta电位图 (B)
Fig. 4 Diagram of size (A) and Zeta potential (B) in GA-NI
prepared by optimization process

3 结论
非离子表面活性剂囊泡的制备方法有注入法、
薄膜法、超声振荡法、逆向蒸发法、高压乳化法、
反向蒸发法[10]等，其中薄膜分散超声法具有包封率
最高，且制得的囊泡粒径小且均匀[11]的优点，因此，
本实验采用薄膜分散超声法制备。其制备原理是将
表面活性剂及脂溶性药物分别溶于有机溶剂中，然
后再减压旋转下除去溶剂，使表面活性剂在器壁形
成薄膜，水合一定时间后，超声减小粒径从而得到
类脂囊泡。
类脂囊泡的包封率是评价药物传递系统的重要
参数之一，类脂囊泡包封率的测定方法有葡聚糖凝
胶柱色谱法、超速离心法、透析法等。凝胶柱分离
样品时对样品的稀释性大、用时长，凝胶色谱不易
使粒径较小的类脂囊泡与游离药物分离，且难溶于
水的药物在介质中多以晶体形式存在，不适用于该
方法[12]。超速离心法则是利用游离药物与类脂囊泡
的重力差异进行分离，适用于亚微米级粒子，可用
于样品浓缩。但该方法成本高，常需离心 1 h以上，
且各批样品间重现性差，药物的包封率低，原因可
能是由于离心过程中速度过大一部分类脂囊泡或药
物渗漏丢失[13]。而透析法需要较大量的透析液和较
长的时间，并且不断需要更换透析液，还需要考虑
透析膜对药物的吸附性[12]。而采用反透析法，透析
袋内放入透析介质，囊泡周围的游离药物稀释倍数
较小避免了动态平衡的破坏且透析袋价廉、节省成
本[14]。本实验采用反透析法测定 GA-NI的包封率，
结果满意。且实验发现，表面活性剂与胆固醇的比
例、水合温度、水合时间、超声时间对包封率也均
有一定影响，这与相关研究结论基本一致[15]。本实
验制得的类脂囊泡通过电镜观察，其形状规则近似
球形，粒径 200 nm，较理想。Zeta电位为（−25.1±
3.4）mV，表明类脂囊泡表面带负电荷，这在一定
程度上阻止了类脂囊泡的聚集[16]，保证了混悬液的
稳定性，显示优化工艺可行。
总之，本实验制备的 GA-NS 形态圆整、包封
率稳定，为进一步制备类脂囊泡包裹的壳聚糖纳米
粒及其他内容提供方法学和相关实验依据。
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10 100 1 000
平均粒径/nm
−100 −50 0 50
Zeta电位/mV
A B