全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 18期 2015年 9月

·2674·
• 化学成分 •
徐长卿逆转肿瘤多药耐药活性部位化学成分研究
褚文希，刘小红，刘 坤，霍立娜，姚慧丽，高 琪，高 华，王 威*
青岛大学药学院，山东 青岛 266021
摘 要：目的 研究徐长卿 Cynanchum paniculatum 逆转肿瘤多药耐药活性部位的化学成分。方法 MTT 法评价徐长卿提取
物分离部位逆转 3 种人肿瘤耐药细胞株对临床常用化疗药物的耐药作用，采用 ODS 柱色谱和制备 HPLC 等技术方法对活性
部位进行分离，运用理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果 徐长卿提取物分离部位显著逆转人胃癌耐药细胞株
SGC-7901/VCR 和人结肠癌耐药细胞株 HCT-8/VCR 对 5-氟尿嘧啶（5-FU）的耐药作用。从活性部位中分离得到 9 个化合物，
分别鉴定为华北白前苷元 B 3-O-β-D-吡喃夹竹桃糖苷（1）、3β,14-二羟基-14β-孕甾-5-烯-20-酮（2）、新白薇苷元 F（3）、白
前苷元 A（4）、白前苷元 C（5）、新白薇苷元 F 3-O-β-D-吡喃夹竹桃糖苷（6）、白前苷元 C 3-O-β-D-吡喃黄花夹竹桃糖苷（7）、
白前苷元 A 3-O-β-D-吡喃夹竹桃糖苷（8）、20-羟基-4,6-二烯-孕甾-3-酮（9）。结论 化合物 1为新化合物，命名为徐长卿苷
D；徐长卿 C21 甾体化合物具有潜在的逆转肿瘤多药耐药作用。
关键词：徐长卿；肿瘤多药耐药；C21甾体化合物；华北白前苷元 B 3-O-β-D-吡喃夹竹桃糖苷；徐长卿苷 D
中图分类号：R284.1 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2015)18 - 2674 - 06
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.18.002
Chemical constituents from active fraction in roots and rhizomes of Cynanchum
paniculatum with reversal activity of multidrug resistance
CHU Wen-xi, LIU Xiao-hong, LIU Kun, HUO Li-na, YAO Hui-li, GAO Qi, GAO Hua, WANG Wei
College of Pharmacy, Qingdao University, Qingdao 266021, China
Abstract: Objective To investigate the chemical consituents from the active fraction in the roots and rhizomes of Cynanchum
paniculatum with reversal activity of multidrug resistance. Methods The active fraction was evaluated for reversing activities toward
three human drug-resistance cell lines to clininally common used anticancer chemotherapeutic drugs. The compounds were isolated
and purified by chromatography on ODS and preparative HPLC. Their structures were elucidated on the basis of chemical and
spectroscopic methods, including MS, 1D, and 2D NMR spectral techniques. Results The active fraction exhibited the significant
effects in sensitization of human drug-resistance on gastric carcinoma cell line SGC-7901/VCR and human drug-resistance on colonic
carcinoma cell line HCT-8/VCR to fluorouracil (5-FU). Nine compounds were isolated and identified as hancogenin B 3-O-β-D-
oleandropyranoside (1), 3β,14-dihydroxy-14β-pregn-5-en-20-one (2), neocynapanogenin F (3), glaucogenin A (4), glaucogenin C (5),
neocynapanogenin F 3-O-β-D-oleandropyranoside (6), glaucogenin C 3-O-β-D-thevetoside (7), glaucogenin A 3-O-β-D-
oleandropyranoside (8), and 20-hydroxypregna-4,6-dien-3-one (9). Conclusion Compound 1 is a new steroidal saponin named
paniculatumoside D. C21 Steroids isolated from the active fraction in the roots and rhizomes of C. paniculatum have the potential value
as multidrug resistance reversing agents.
Key words: Cynanchum paniculatum (Bge.) Kitag.; multidrug resistance; C21 steroids; hancogenin B 3-O-β-D-oleandropyranoside;
paniculatumoside D

化疗是恶性肿瘤综合疗法的方法之一，广泛用
于术前、术中和术后，但肿瘤多药耐药（multdrug
resistance，MDR）现象严重影响化疗对恶性肿瘤的
疗效。克服肿瘤的 MDR，恢复耐药肿瘤对药物的
敏感性，寻找高效低毒的肿瘤 MDR 逆转剂是当前
肿瘤治疗药物的研究方向[1-4]。徐长卿 Cynanchum

收稿日期：2015-06-24
基金项目：国家自然科学基金资助项目（81273396）；山东省高等学校科技计划项目（J15LM12）
作者简介：褚文希（1988—），女，硕士研究生，研究方向为天然产物活性成分研究。
*通信作者 王 威（1972—），男，教授，博士研究生导师。Tel: (0532)82991172 E-mail: w.w.wangwei@263.net
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 18期 2015年 9月

·2675·
paniculatum (Bge.) Kitag. 为萝摩科鹅绒藤属多年生
草本植物，其干燥根和根茎入药，味辛、性温，归
肝、肾经，具有祛风化湿、止痛止痒的功能，用于
治疗风湿痹痛、胃痛胀满、牙痛、腰痛、跌打伤痛、
风疹、湿疹等症[5]。其主要成分丹皮酚具有抗炎镇
痛、抗病毒、抗菌、抗蛇毒、免疫调节、抗肿瘤、
保护心血管等作用[6]。C21甾体化合物为徐长卿化学成
分类型之一，但未见其生物活性的相关研究报道[7-9]。
为探讨不同结构类型C21甾体化合物逆转肿瘤MDR
构效关系，选择徐长卿作为研究对象，采用 MTT
法评价徐长卿提取物分离部位逆转人胃癌耐药细胞
株 SGC-7901/VCR、人结肠癌耐长春新碱耐药株
HCT-8/VCR 和人肺癌紫杉醇耐药株 A549/T 对 4 种
常用肿瘤化疗药物注射用盐酸多柔比星（ADM）、
顺铂（DDP）、5-氟尿嘧啶（5-FU）、紫杉醇（PAC）
耐药作用。结果表明分离部位显著逆转人胃癌耐药
细胞株 SGC-7901/VCR 和人结肠癌耐药细胞株
HCT-8/VCR 对 5-FU 耐药作用。采用 ODS 柱色谱和
制备 HPLC 等手段对活性部位化学成分进行了研
究，从中分离鉴定了 9 个 C21 甾体化合物，分别为
华 北 白 前 苷 元 B 3-O-β-D- 吡 喃 夹 竹 桃 糖 苷
（hancogenin B 3-O-β-D-oleandropyranoside，1）、
3β,14-二羟基-14β-孕甾-5-烯-20-酮（3β,14-dihydroxy-
14β-pregn-5-en-20-one ， 2 ）、 新 白 薇 苷 元 F
（neocynapanogenin F，3）、白前苷元 A（glaucogenin
A，4）、白前苷元 C（glaucogenin C，5）、新白薇苷
元 F 3-O-β-D-吡喃夹竹桃糖苷（neocynapanogenin F
3-O-β-D-oleandropyranoside，6）、白前苷元 C 3-O-β-
D-吡喃黄花夹竹桃糖苷（glaucogenin C 3-O-β-D-
thevetoside，7）、白前苷元 A 3-O-β-D-吡喃夹竹桃
糖苷（glaucogenin A 3-O-β-D-oleandropyranoside，
8）、20-羟基-4,6-二烯-孕甾-3-酮（20-hydroxypregna-
4,6-dien-3-one，9）。其中化合物 1为新化合物，命
名为徐长卿苷 D；徐长卿 C21 甾体化合物具有潜在
逆转肿瘤 MDR 作用。
1 仪器与材料
Bruker AV-500 型核磁共振波谱仪（德国 Bruker
公司）；Bruker micro TOFQ 飞行时间质谱仪（德国
Bruker 公司）；NP 7005C 制备液相色谱输液泵（江
苏汉邦科技有限公司）；Shodex RI-102 制备液相色
谱示差折光检测器（日本昭光电工株式会社）；
MCO-18AIC（UV）型二氧化碳培养箱（日本三洋
电机株式会社）；Dmilled 型倒置生物显微镜（德国
徕卡公司）；DM2500 正置生物显微镜（德国徕卡公
司）；Sigma 3-18K 型台式高速离心机（德国 Sigma
公司）；S70-CD-1FD 型单人超净工作台（上海博讯
实业有限公司）；ST-360 型酶标仪（上海科华实验
系统有限公司）；AL104 型分析天平（瑞士梅特勒-
托利多国际股份有限公司）。
盐酸维拉帕米注射液（上海禾丰制药有限公
司，批号 120904）；ADM（深圳万乐药业有限公司，
批号 1212E1）；5-FU 注射液（天津金耀氨基酸有
限公司，批号 1310261）；DDP 注射液（云南个旧
生物药业有限公司，批号 130701）；PAC 注射液（江
苏奥赛康药业股份有限公司，批号 D131101）；
RPMI 1640 培养基（美国 Gibco 公司，批号
1256837）；胎牛血清（FBS，杭州四季青生物工程
材料有限公司，批号 120626）；噻唑蓝（美国
Genview 公司，批号 46170204106）；胰蛋白酶（北
京鼎国昌盛生物技术有限责任公司，批号
09R10380）；人胃癌耐药细胞株 SGC-7901/VCR（上
海天呈科技有限公司）；人结肠癌耐药细胞株
HCT-8/VCR 和人肺癌耐药细胞株 A549/T（上海博
谷生物科技有限公司）；Megres C18色谱柱（250 mm×
10 mm，5 μm，江苏汉邦科技有限公司）；柱色谱
用大孔吸附树脂 HPD-100（河北沧州宝恩化工有限
公司）；柱色谱用脱色树脂 D941（山东鲁抗医药股
份有限公司）；柱色谱用 ODS（日本 YMC 株式会
社）；薄层色谱用 ODS 板（RP18 F254，德国默克公
司）；色谱用甲醇（美国天地公司）；水为重蒸馏水；
其他试剂均为分析纯。
徐长卿药材2014年3月购于安徽亳州敬德药业
有限责任公司，经大连大学冯宝民教授鉴定为萝藦
科鹅绒藤属植物徐长卿 Cynanchum paniculatum
(Bge.) Kitag. 的根和根茎，标本（CPXCQ-2014-03）
存放于青岛大学药学院。
2 方法与结果
2.1 药材提取与分离部位制备
徐长卿干燥根和根茎 10 kg，切段，加 5 倍量
90%乙醇回流提取 2 次，每次 1.5 h，分次滤过，合
并滤液，减压回收乙醇得乙醇提取物 1.5 kg。取乙
醇提取物 1.2 kg，加水使溶解，经 HPD-100 大孔树
脂柱色谱，依次用水和 30%、70%、95%乙醇洗脱
至近无色，收集 70%乙醇洗脱液，经 D941 脱色树
脂柱色谱，用 95%乙醇洗脱至近无色，收集洗脱液，
减压回收乙醇得分离部位 15 g。
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 18期 2015年 9月

·2676·
2.2 分离部位对MDR细胞株耐药性的逆转作用
取 对 数 生 长 期 的 人 胃 癌 耐 药 细 胞 株
SGC7901/VCR、人结肠癌耐药细胞株 HCT-8/VCR
和人肺癌耐药细胞株 A549/T，用含 10% FBS 的
RPMI 1640 培养液调整细胞浓度至 1×105 个/mL，
接种于 96 孔细胞培养板中，每孔 100 μL，置于含
有 5% CO2的 37 ℃恒温培养箱中培养 24 h 后，在
各孔中分别加入 50 μL 含不同浓度分离部位或盐酸
维拉帕米（8 μg/mL）的培养基和 50 μL 含有不同浓度
化疗药物的培养基，另设溶剂对照组（细胞和培养液）
和空白对照组（培养液），每组均设 4 个复孔，加药
后继续培养 48 h 后，在各孔中加入 5 mg/mL 的 MTT
20 μL，继续培养 4 h，吸弃培养液，在各孔中加入
DMSO 150 μL，经微量混合振荡器振荡 10 min 后，全
自动酶联免疫检测仪于 570 nm 处测定吸光度值，计
算抑制率。应用对数回归分析法计算各组半数抑制浓
度（IC50），计算逆转倍数（RF），RF＝化疗药 IC50
均值/(化疗药＋逆转剂) IC50均值。结果表明：（1）
分离部位显著逆转人胃癌耐药细胞株SGC7901/VCR
对 5-FU 的耐药作用，单独 5-FU IC50＝（29.63±
0.83）μg/mL，5-FU 联合分离部位（50 μg/mL）IC50＝
（1.67±1.53）μg/mL，RF 为 17.86 倍，5-FU 联合盐
酸维拉帕米（8 μg/mL）IC50＝（10.54±2.68）μg/mL，
RF 为 2.83 倍；（2）分离部位显著逆转人结肠癌耐
药细胞株 HCT-8/VCR 对 5-FU 的耐药作用，单独
5-FU IC50＝（31.87±1.49）μg/mL，5-FU 联合分离
部位（50 μg/mL）IC50＝（0.37±0.06）μg/mL，RF
为 86.14 倍，5-FU 联合盐酸维拉帕米（8 μg/mL）
IC50＝（10.44±1.23）μg/mL，RF 为 3.05 倍。
2.3 活性部位化学成分分离
取活性分离部位 11 g，经 ODS 柱色谱，以甲醇-
水（3∶7、4∶6、5∶5、6∶4、7∶3、8∶2）洗脱
得 16 个组分 Fr. 1～16。Fr. 12 经制备 HPLC（甲醇-
水 52∶48）得化合物 1（4.13 mg）和 2（2.59 mg）；
Fr. 10 经制备 HPLC（甲醇-水 45∶55）得化合物 3
（37.74 mg）和 4（8.84 mg）；Fr. 13 经制备 HPLC（甲
醇-水 55∶45）得化合物 5（47.84 mg）；Fr. 14 经制
备 HPLC（甲醇-水 60∶40）得化合物 6（27.66 mg）、
7（3.94 mg）、8（13.31 mg）和 9（4.29 mg）。
2.4 结构鉴定
化合物 1：白色无定形粉末（甲醇），Libermann-
Burchard 和 Keller-Kiliani 反应阳性，HR-ESI-MS 谱
显示准分子离子峰 m/z: 559.252 3 [M＋Na]+，结合
1H-NMR (500 MHz, C5D5N) 和 13C-NMR (125 MHz,
C5D5N) 谱数据推测分子式为C28H40O10（C28H40O10Na，
计算值 559.251 9）。NMR 谱显示为 13,14:14,15-双
裂环孕甾烷母核特征：1H-NMR 谱显示 2 个角甲基
质子信号 δ 0.96 (3H, s, H-19) 和 1.78 (3H, s, H-21)，
2 个烯质子信号 δ 5.49 (1H, brd, J = 4.8 Hz, H-6) 和
6.68 (1H, s, H-18)，3 个与氧相连的次甲基质子信号
δ 3.65 (1H, m, H-3), 4.06 (1H, m, H-2) 和 6.02 (1H,
dd, J = 9.0, 7.4 Hz, H-16)，1 个与氧相连的亚甲基质
子信号 δ 4.02 (1H, dd, J = 9.2, 9.0 Hz, H-15β) 和
4.33 (1H, dd, J = 9.2, 7.4 Hz, H-15α)；13C-NMR 谱显
示 2 个角甲基碳信号 δ 19.0 (C-19) 和 20.7 (C-21)，
1 个与氧相连的亚甲基碳信号 δ 67.3 (C-15)，3 个与
氧相连的次甲基碳信号 δ 70.0 (C-2), 82.1 (C-16) 和
85.2 (C-3)，1 个与氧相连的季碳信号 δ 92.5 (C-17)，
4 个烯碳信号 δ 119.0 (C-13), 120.9 (C-6), 139.7
(C-5), 144.7 (C-18)，1 个缩酮碳信号 δ 119.8 (C-20)
和 1 个羰基碳信号 δ 175.5 (C-14)。综合解析以上数
据并与文献对照[10]，鉴定化合物 1的苷元为华北白
前苷元 B。1H-NMR 谱显示糖端基质子信号 δ 4.85
(1H, dd, J = 8.4, 1.6 Hz, H-1′)、1 个甲基质子信号 δ
1.55 (3H, d, J = 6.0 Hz, H-6′)、1 个甲氧基质子信号 δ
3.48 (3H, s, 3′-OCH3)；13C-NMR 谱显示一组糖基碳
信号 δ 99.3 (C-1′), 37.3 (C-2′), 81.5 (C-3′), 76.1
(C-4′), 73.2 (C-5′), 18.4 (C-6′) 和 57.1 (3′-OCH3)，结
合糖端基质子耦合常数和 C-2 化学位移并与文献对
照[11-12]，推测结构中存在 β-D-吡喃夹竹桃糖基。与
华北白前苷元 B 比较，C-2、C-3 和 C-4 的苷化位移
分别为−2.7、8.2 和−4.2，HMBC 谱显示夹竹桃糖端
基质子 δH 4.86 与华北白前苷元 B 的 3 位碳 δC 85.2
远程相关信号，推测夹竹桃糖基的 C-1 位与华北白
前苷元 B 的 C-3 位相连。综合解析以上数据，鉴定
化合物 1结构为华北白前苷元 B 3-O-β-D-吡喃夹竹
桃糖苷（图 1）。该化合物未见文献报道，为新化合
物。化合物 1的数据归属见表 1。

O
HO
O
O
O
O
HO
OHO
H3CO
图 1 化合物 1的结构
Fig. 1 Structure of compound 1
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 18期 2015年 9月

·2677·
表 1 化合物 1的 1H-NMR (500 MHz, C5D5N)、13C-NMR (125 MHz, C5D5N) 和 HMBC数据
Table 1 1H-NMR (500 MHz, C5D5N), 13C-NMR (125 MHz, C5D5N), and HMBC data of compound 1
碳位 δH δC HMBC
1 1.27 (m), 2.52 (m) 44.9 C-2, 3, 9, 10, 19
2 4.06 (m) 70.0
3 3.65 (m) 85.2 C-2, 1′
4 2.49 (m), 2.60 (m) 37.5 C-2, 3, 5, 6, 10
5 — 139.7
6 5.49 (brd, J = 4.8 Hz) 120.9 C-4, 7, 8, 10
7 2.18 (m), 2.71 (m) 28.6
8 2.56 (m) 40.3 C-9, 14
9 1.41 (m) 52.8 C-1, 8, 10, 11, 12
10 — 39.6
11 1.60 (m), 2.24 (m) 30.7
12 1.85 (m), 2.46 (m) 20.8
13 — 119.0
14 — 175.5
15 4.02 (dd, J = 9.2, 9.0 Hz), 4.33 (dd, J = 9.2, 7.4 Hz) 67.3 C-16, 17, 20
16 6.02 (dd, J = 9.0, 7.4 Hz) 82.1 C-13, 14, 15, 20
17 — 92.5
18 6.68 (s) 144.7 C-13, 17, 20
19 0.96 (s) 19.0 C-1, 9, 10
20 — 119.8
21 1.78 (s) 20.7 C-17, 20
β-D-ole —
1′ 4.85 (dd, J = 8.4, 1.6 Hz) 99.3 C-3
2′ 1.76 (m), 2.55 (m) 37.3 C-3′, 4′
3′ 3.50 (m) 81.5
4′ 3.49 (m) 76.1
5′ 3.66 (m) 73.2 C-1′, 3′, 4′
6′ 1.55 (d, J = 6.0 Hz) 18.4 C-4′, 5′
-OCH3 3.48 (s) 57.1 C-3′

化合物 2：无色固体（甲醇），Libermann-Burchard
反应阳性，ESI-MS m/z: 355 [M＋Na]+，结合 1H-和
13C-NMR 谱数据推测分子式为 C21H32O3。1H-NMR
(500 MHz, C5D5N) δ: 5.47 (1H, s, H-6), 3.87 (1H, m,
H-3), 2.86 (1H, dd, J = 9.3, 3.8 Hz, H-17), 2.23 (3H, s,
H-21), 1.13 (3H, s, H-19), 1.03 (3H, s, H-18)；
13C-NMR (125 MHz, C5D5N) δ: 216.7 (C-20), 140.6
(C-5), 121.9 (C-6), 85.1 (C-14), 71.2 (C-3), 63.2
(C-17), 49.4 (C-13), 46.4 (C-9), 43.4 (C-4), 38.9
(C-12), 37.9 (C-1), 37.4 (C-10), 37.2 (C-8), 34.6
(C-15), 32.6 (C-21), 32.4 (C-2), 27.9 (C-7), 24.5
(C-16), 21.2 (C-11), 19.7 (C-19), 15.5 (C-18)。以上数
据与文献报道基本一致 [13]，故鉴定化合物 2 为
3β,14-二羟基-14β-孕甾-5-烯-20-酮。
化合物 3：无色固体（甲醇），Libermann-
Burchard 反应阳性，ESI-MS m/z: 377 [M＋H]+，结
合 1H- 和 13C-NMR 谱数据推测分子式为 C21H28O6。
1H-NMR (500 MHz, C5D5N) δ: 6.68 (1H, s, H-18),
6.02 (1H, dd, J = 8.5, 7.6 Hz, H-16), 5.38 (1H, brd,
J = 5.2 Hz, H-6), 4.34 (1H, dd, J = 9.2, 7.4 Hz,
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 18期 2015年 9月

·2678·
H-15α), 4.03 (1H, dd, J = 9.2, 9.0 Hz, H-15β), 3.81
(1H, m, H-3), 1.78 (3H, s, H-21), 0.94 (3H, s, H-19)；
13C-NMR (125 MHz, C5D5N) δ: 175.8 (C-14), 144.7
(C-18), 141.5 (C-5), 123.3 (C-13), 119.8 (C-6), 119.1
(C-20), 92.5 (C-17), 82.1 (C-16), 71.1 (C-3), 67.3
(C-15), 53.0 (C-9), 43.1 (C-4), 40.9 (C-8), 38.8
(C-10), 36.9 (C-1), 32.4 (C-2), 30.7 (C-12), 28.5
(C-7), 21.0 (C-11), 20.7 (C-21), 18.2 (C-19)。以上数
据与文献报道基本一致[13]，故鉴定化合物 3为新白
薇苷元 F。
化合物 4：无色固体（甲醇），Libermann-
Burchard 反应阳性，ESI-MS m/z: 377 [M＋H]+，结
合 1H-和 13C-NMR 谱数据推测分子式为 C21H28O6。
1H-NMR (500 MHz, C5D5N) δ: 6.47 (1H, s, H-18),
5.45 (1H, m, H-16), 5.41 (1H, d, J = 5.0 Hz, H-6),
4.26 (1H, dd, J = 8.2, 7.2 Hz, H-15α), 4.15 (1H, m,
H-2), 3.97 (1H, dd, J = 9.4, 8.8 Hz, H-15β), 3.82 (1H,
m, H-3), 3.56 (1H, brd, J = 7.9 Hz, H-17), 1.56 (3H, s,
H-21), 0.98 (3H, s, H-19)；13C-NMR (125 MHz,
C5D5N) δ: 175.5 (C-14), 143.8 (C-18), 140.9 (C-5),
120.1 (C-6), 118.6 (C-20), 114.4 (C-13), 76.8 (C-3),
75.6 (C-16), 72.4 (C-2), 67.8 (C-15), 56.2 (C-17), 53.2
(C-9), 45.6 (C-1), 40.6 (C-8), 40.4 (C-10), 40.1 (C-4),
30.1 (C-12), 28.5 (C-7), 24.8 (C-21), 23.9 (C-11), 19.2
(C-19)。以上数据与文献报道基本一致[13]，故鉴定
化合物 4为白前苷元 A。
化合物 5：无色固体（甲醇），Libermann-
Burchard 反应阳性，ESI-MS m/z: 361 [M＋H]+，结
合 1H-和 13C-NMR 谱数据推测分子式为 C21H28O5。
1H-NMR (500 MHz, C5D5N) δ: 6.49 (1H, s, H-18),
5.46 (1H, m, H-16), 5.38 (1H, brd, J = 5.2 Hz, H-6),
4.26 (1H, m, H-15α), 3.98 (1H, m, H-15β), 3.83 (1H,
m, H-3), 3.58 (1H, brd, J = 7.7 Hz, H-17), 1.56 (3H, s,
H-21), 0.92 (3H, s, H-19)；13C-NMR (125 MHz,
C5D5N) δ: 175.6 (C-14), 143.9 (C-18), 141.6 (C-5),
119.8 (C-6), 118.6 (C-20), 114.5 (C-13), 75.6 (C-16),
71.2 (C-3), 67.9 (C-15), 56.3 (C-17), 53.3 (C-9), 43.1
(C-4), 40.8 (C-8), 38.7 (C-10), 36.8 (C-1), 32.4 (C-2),
30.1 (C-12), 28.5 (C-7), 24.8 (C-21), 24.0 (C-11), 18.1
(C-19)。以上数据与文献报道基本一致[13]，故鉴定
化合物 5为白前苷元 C。
化合物 6：白色无定形粉末（甲醇），Libermann-
Burchard和Keller-kiliani反应阳性，ESI-MS m/z: 543
[M＋Na]+，结合 1H-和 13C-NMR 谱数据推测分子式
为 C28H40O9。1H-NMR (500 MHz, C5D5N) δ: 6.67
(1H, s, H-18), 6.02 (1H, dd, J = 8.2, 7.8 Hz, H-16),
5.45 (1H, d, J = 4.9 Hz, H-6), 4.89 (1H, dd, J = 9.2,
1.8 Hz, H-1′), 4.33 (1H, dd, J = 9.2, 7.4 Hz, H-15α),
4.03 (1H, dd, J = 9.1, 9.0 Hz, H-15β), 3.82 (1H, m,
H-3), 3.48 (3H, s, 3′-OCH3), 1.78 (3H, s, H-21), 1.61
(3H, d, J = 6.1 Hz, H-6′), 0.90 (3H, s, H-19)；13C-NMR
(125 MHz, C5D5N) δ: 175.7 (C-14), 144.7 (C-18),
140.6 (C-5), 120.6 (C-6), 119.8 (C-13), 119.0 (C-20),
98.3 (C-1′), 92.5 (C-17), 82.1 (C-16), 81.7 (C-3′), 77.4
(C-3), 76.5 (C-4′), 72.9 (C-5′), 67.2 (C-15), 57.0
(3′-OCH3), 53.0 (C-9), 40.8 (C-8), 39.1 (C-4), 38.8
(C-10), 37.5 (C-2′), 36.6 (C-1), 30.6 (C-2), 30.2
(C-12), 28.6 (C-7), 20.9 (C-11), 20.7 (C-21), 18.8
(C-6′), 18.0 (C-19)。以上数据与文献报道基本一致[13]，
故鉴定化合物 6为新白薇苷元 F 3-O-β-D-吡喃夹竹
桃糖苷。
化合物 7：白色无定形粉末（甲醇），Libermann-
Burchard 反应阳性和 Molish 反应阳性，ESI-MS m/z:
543 [M＋Na]+，结合 1H-和 13C-NMR 谱数据推测分
子式为 C28H40O9。1H-NMR (500 MHz, C5D5N) δ:
6.48 (1H, s, H-18), 5.45 (1H, ddd, J = 9.4, 7.7, 7.6 Hz,
H-16), 5.37 (1H, d, J = 5.3 Hz, H-6), 4.90 (1H, d, J =
7.0 Hz, H-1′), 4.25 (1H, dd, J = 8.4, 7.1 Hz, H-15α),
3.96 (1H, dd, J = 9.4, 8.8 Hz, H-15β), 3.93 (3H, s,
3′-OCH3), 3.88 (1H, m, H-3), 3.57 (1H, brd, J = 8.0
Hz, H-17), 1.62 (3H, d, J = 6.0 Hz, H-6′), 1.56 (3H, s,
H-21), 0.80 (3H, s, H-19)；13C-NMR (125 MHz,
C5D5N) δ: 175.5 (C-14), 143.9 (C-18), 140.7 (C-5),
120.4 (C-6), 118.6 (C-20), 114.4 (C-13), 102.5 (C-1′),
88.1 (C-3′), 78.2 (C-3), 76.0 (C-4′), 75.6 (C-16), 75.1
(C-2′), 72.7 (C-5′), 67.8 (C-15), 60.9 (3′-OCH3), 56.2
(C-17), 53.3 (C-9), 40.7 (C-8), 39.0 (C-4), 38.7
(C-10), 36.6 (C-1), 30.1 (C-12), 30.0 (C-2), 28.5
(C-7), 24.8 (C-21), 24.0 (C-11), 18.7 (C-19), 17.9
(C-6′)。以上数据与文献报道基本一致[14]，故鉴定化
合物 7为白前苷元 C 3-O-β-D-吡喃黄花夹竹桃糖苷。
化合物 8：白色无定形粉末（甲醇），Libermann-
Burchard和Keller-kiliani反应阳性，ESI-MS m/z: 543
[M＋Na]+，结合 1H-和 13C-NMR 谱数据推测分子式
为 C28H40O9。1H-NMR (500 MHz, C5D5N) δ: 6.49
(1H, s, H-18), 5.50 (1H, brd, J = 4.8 Hz, H-6), 5.46
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 18期 2015年 9月

·2679·
(1H, m, H-16), 4.87 (1H, dd, J = 8.0, 1.6 Hz, H-1′),
4.26 (1H, dd, J = 7.8, 7.6 Hz, H-15α), 4.06 (1H, m,
H-2), 3.97 (1H, dd, J = 9.1, 9.0 Hz, H-15β), 3.70 (1H,
ddd, J = 11.8, 8.8, 6.0 Hz, H-3), 3.56 (1H, brd, J = 8.0
Hz, H-17), 3.48 (3H, s, 3′-OCH3), 1.56 (3H, d, J = 5.7
Hz, H-6′), 1.56 (3H, s, H-21), 0.95 (3H, s, H-19)；
13C-NMR (125 MHz, C5D5N) δ: 175.4 (C-14), 143.9
(C-18), 139.9 (C-5), 120.8 (C-6), 118.6 (C-20), 114.4
(C-13), 99.4 (C-1′), 85.3 (C-3), 81.5 (C-3′), 76.1
(C-4′), 75.6 (C-16), 73.1 (C-5′), 70.0 (C-2), 67.8
(C-15), 57.1 (3′-OCH3), 56.2 (C-17), 53.1 (C-9), 44.8
(C-1), 40.3 (C-8), 39.6 (C-10), 37.5 (C-4), 37.3 (C-2′),
30.1 (C-12), 28.5 (C-7), 24.8 (C-21), 23.9 (C-11), 19.0
(C-19), 18.5 (C-6′)。以上数据与文献报道基本一致[15]，
故鉴定化合物 8为白前苷元 A 3-O-β-D-吡喃夹竹桃
糖苷。
化合物 9：无色固体（甲醇），Libermann-
Burchard 反应阳性，ESI-MS m/z: 315[M＋H]+，结
合 1H-和 13C-NMR 谱数据推测分子式为 C21H30O2。
1H-NMR (500 MHz, C5D5N) δ: 6.13 (1H, dd, J = 9.8,
2.6 Hz, H-6), 6.06 (1H, d, J = 9.8 Hz, H-7), 5.89 (1H,
s, H-4), 3.96 (1H, m, H-20), 1.43 (3H, d, J = 6.2 Hz,
H-21), 1.02 (3H, s, H-19), 0.79 (3H, s, H-18)；
13C-NMR (125 MHz, C5D5N) δ: 198.4 (C-3), 163.5
(C-5), 141.5 (C-7), 127.9 (C-6), 123.3 (C-4), 68.7
(C-20), 59.1 (C-14), 53.6 (C-17), 50.9 (C-9), 42.7
(C-13), 38.9 (C-12), 37.5 (C-8), 36.2 (C-10), 34.4
(C-1), 34.2 (C-2), 26.3 (C-16), 24.8 (C-21), 23.9
(C-15), 20.6 (C-11), 16.2 (C-19), 12.6 (C-18)。以上数
据与文献报道基本一致[16]，故鉴定化合物 9 为 20-
羟基-4,6-二烯-孕甾-3-酮。
参考文献
[1] Binkhathlan Z, Lavasanifar A. P-glycoprotein inhibition
as a therapeutic approach for overcoming multidrug
resistance in cancer: current status and future perspectives
[J]. Curr Cancer Drug Targets, 2013, 13(3): 326-346.
[2] 钱钧强, 孙 蓓, 何景华. 抗肿瘤药物多药耐药性的研
究进展 [J]. 中国肿瘤临床, 2011, 38(11): 684-687.
[3] Baguley B C. Multiple drug resistance mechanisms in
cancer [J]. Mol Biotechnol, 2010, 46(3): 308-316.
[4] 张 峰, 岑 娟. 肿瘤多药耐药模型的建立与评价方
法 [J]. 药物评价研究, 2013, 36(5): 377-381.
[5] 中国药典 [S]. 一部. 2010.
[6] 曾 粤. 徐长卿的研究进展 [J]. 内蒙古中医药, 2012,
31(11): 125-126.
[7] Sugama K, Hayashi K, Mitsuhashi H, et al. Studies on the
constituents of Asclepiadaceae plants. LXVI. The
structures of three new glycosides, cynapanosides A, B,
and C, from the Chinese drug “xu-chang-qing”,
Cynanchum paniculatum Kitagawa. [J]. Chem Pharm
Bull, 1986, 34(11): 4500-4507.
[8] Oh J Y, Kim C S, Lee K R. C21 Steroidal glycosides from
the root of Cynanchum paniculatum [J]. Bull Korean
Chem Soc, 2013, 34(2): 637-640.
[9] Kim C S, Oh J Y, Choi S U, et al. Chemical constituents
from the roots of Cynanchum paniculatum and their
cytotoxic activity [J]. Carbohydr Res, 2013, 381(1): 1-5.
[10] 娄红祥, 李 铣, 朱廷儒. 华北白前中的 C21 甾体类化
合物 [J]. 药学学报, 1992, 27(8): 595-602.
[11] Li S L, Tan H, Shen Y M, et al. A pair of new C-21
steroidal glycoside epimers from the roots of Cynanchum
paniculatum [J]. J Nat Prod, 2004, 67(1): 82-84.
[12] Bai H, Li W, Koike K, et al. Cynanosides A-J, ten novel
pregnane glycosides from Cynanchum atratum [J].
Tetrahedron, 2005, 61(24): 5797-5811.
[13] 窦 静, 毕志明, 张永清, 等. 徐长卿中的 C21 甾体化
合物 [J]. 中国天然药物, 2006, 4(3): 192-194.
[14] Nakagawa T, Hayashi K, Mitsuhashi H, et al. Studies on
the constituents of Asclpiadaceae plants. LIII. The
structures of glaucogenin-A, -B, and -C mono-D-
thevetoside from the Chinese drug “Pai-ch’ien”,
Cynanchum glaucescens Hand. -Mazz. [J]. Chem Pharm
Bull, 1983, 31(3): 870-878.
[15] Nakagawa T, Hayashi K, Wada K, et al. Studies on the
constituents of Asclepiadaceae plants. LII. The structures
of glaucoside-A, -B, -C, -D, and -E from the Chinese drug
“Pai-ch’ien, ” Cynanchum glaucescens Hand. -Mazz. [J].
Tetrahedron, 1983, 39(4): 607-612.
[16] 谭 华. 徐长卿 C21 甾类化合物成分的分离鉴定研究
[D]. 南京: 南京农业大学, 2003.