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Simultaneous determination of 11 triterpenoids in Alismatis Rhizoma by RP-HPLC-DAD

RP-HPLC-DAD同时测定泽泻中11个三萜类成分



全 文 :中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47 卷 第 16 期 2016 年 8 月

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RP-HPLC-DAD 同时测定泽泻中 11 个三萜类成分
赵万里 1, 2,黄小强 2,许 文 2,杨保成 1,张守仁 1,刘一文 2,李小艳 2*,吴水生 2*
1. 黄河科技学院 纳米功能材料研究所,河南 郑州 450006
2. 福建中医药大学药学院,福建 福州 350122
摘 要:目的 建立同时测定泽泻中泽泻醇 C、泽泻醇 F、23-乙酰泽泻醇 C、泽泻醇 L、24-乙酰泽泻醇 F、泽泻醇 A、24-
乙酰泽泻醇 A、泽泻醇 G、泽泻醇 B、23-乙酰泽泻醇 B 和 11-去氧泽泻醇 B 11 个三萜类成分的 RP-HPLC-DAD 分析方法。
方法 采用 Ultimate XB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相乙腈(A)-水(B)进行梯度洗脱,体积流量 1 mL/min,
检测波长为 208、245 nm,柱温 30 ℃。比较 25 批泽泻中 11 个三萜类成分的量。结果 泽泻醇 C、泽泻醇 F、23-乙酰泽泻
醇 C、泽泻醇 L、24-乙酰泽泻醇 F、泽泻醇 A、24-乙酰泽泻醇 A、泽泻醇 G、泽泻醇 B、23-乙酰泽泻醇 B、11-去氧泽泻醇
B 11 个成分的线性范围分别为 0.313~17.210 μg/mL(r=0.999 9)、0.504~11.880 μg/mL(r=0.999 9)、0.284~9.369 μg/mL
(r=0.999 9)、0.146~2.680 μg/mL(r=0.999 9)、0.254~5.596 μg/mL(r=0.999 8)、2.500~66.000 μg/mL(r=0.999 8)、0.463~
10.190 μg/mL(r=0.999 9)、1.575~20.475 μg/mL(r=0.999 9)、1.525~57.268 μg/mL(r=0.999 6)、3.035~118.362 μg/mL
(r=0.999 9)、0.816~16.880 μg/mL(r=0.999 8)。平均加样回收率分别为 98.76%、100.24%、97.97%、100.14%、99.88%、
96.54%、97.27%、98.85%、99.45%、98.85%和 98.13%。结论 该法准确、可靠、分离效果良好,为泽泻药材质量评价提供
了可靠的方法。
关键词:泽泻;二萜泽泻醇 C;泽泻醇 F;23-乙酰泽泻醇 C;泽泻醇 L;24-乙酰泽泻醇 F;泽泻醇 A;24-乙酰泽泻醇 A;
泽泻醇 G;泽泻醇 B;23-乙酰泽泻醇 B;11-去氧泽泻醇 B;RP-HPLC-DAD
中图分类号:R286.6 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2016)16 - 2933 - 05
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.16.027
Simultaneous determination of 11 triterpenoids in Alismatis Rhizoma
by RP-HPLC-DAD
ZHAO Wan-li1,2, HUANG Xiao-qiang2, XU Wen2, YANG Bao-cheng1, ZHANG Shou-ren1, LIU Yi-wen2,
LI Xiao-yan2, WU Shui-sheng2
1. Institute of Nano-Structured Functional Materials, Huanghe Science and Technology College, Zhengzhou 450006, China
2. School of Pharmacy, Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou 350122, China
Abstract: Objective To establish a RP-HPLC-DAD method for simultaneous determination of alisol C, alisol F, alisol C 23-acetate,
alisol L, alisol F 24-acetate, alisol A, alisol A 24-acetate, alisol G, alisol B, alisol B 23-acetate, and 11-deoxy-alisol B in Alismatis
Rhizoma. The content of 11 components from 25 batches of samples collected from different habitats was determined and compared by
means of this established method. Methods The separation was achieved on a Ultimate XB-C18 column (150 mm × 4.6 mm, 5 μm)
with the mobile phase consisting of water-acetonitrile to be gradient elution. Flow rate was 1 mL/min and column temperature was 30
℃. The optimum detection wavelengths were 208 and 245 nm. Results The linear ranges of alisol C, alisol F, alisol C 23-acetate,
alisol L, alisol F 24-acetate, alisol A, alisol A 24-acetate, alisol G, alisol B, alisol B 23-acetate, and 11-deoxy-alisol B were 0.313—
17.210 (r = 0.999 9), 0.504—11.880 (r = 0.999 9), 0.284—9.369 (r = 0.999 9), 0.146—2.680 (r = 0.999 9), 0.254—5.596 (r = 0.999 8),
2.500—66.000 (r = 0.999 8), 1.620—35.640 (r = 0.999 9), 1.575—20.475 (r = 0.999 9), 1.525—57.268 (r = 0.999 6), 3.035—118.362
(r = 0.999 9), and 0.816—16.880 μg/mL (r = 0.999 8), respectively. The average recoveries (n = 6) were 98.76%, 100.24%, 97.97%,

收稿日期:2015-11-28
基金项目:国家自然科学基金项目(U1205022);福建省自然科学基金项目(2014J01352);福建省卫生厅青年科研资助课题(2013-2-55);福
建省教育厅中青年科研课题(JA15242);福建中医药大学校管课题(X2014107-学科,X2015011-平台)
作者简介:赵万里,助教,硕士,从事中药药效物质基础研究。Tel: (0371)87541300 E-mail: zhaowanlitcm@126.com
*通信作者 李小艳 Tel/Fax: (0591)22861217 E-mail: lixy8556@163.com
吴水生 Tel/Fax: (0591)22861135 E-mail: wushuishengwss@163.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47 卷 第 16 期 2016 年 8 月

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100.14%, 99.88%, 96.54%, 97.27%, 98.85%, 99.45%, 98.85%, and 98.13% respectively. Conclusion The RP-HPLC-DAD method is
feasible and accurate, which could provides the scientific evidence for quality control of Alismatis Rhizoma.
Key words: Alismatis Rhizoma; triterpenoids; alisol C; alisol F; alisol C 23-acetate; alisol L; alisol F 24-acetate; alisol A; alisol A
24-acetate; alisol G; alisol B; alisol B 23-acetate; 11-deoxy-alisol B; RP-HPLC-DAD

泽 泻 系 泽 泻 科 植 物 泽 泻 Alisma orientale
(Samuels) Juzep. 的干燥块茎,具有利水渗湿、泄热,
化浊调脂的功效[1]。现代药理学研究表明,泽泻中三
萜类化合物具有利尿、调血脂、降血糖、抗动脉粥样
硬化的作用[2-3]。《中国药典》2015 年版只规定了 23-
乙酰泽泻醇 B 的测定,目前泽泻中三萜类化合物的
定量分析方法已有 HPLC-UV、HPLC-ELSD 法被报
道[4-6],但是以上方法只针对 2 个或 4 个成分进行定
量分析,具有很大的局限性[7-8]。因此建立泽泻多指标
的综合质量评价方法十分必要。本研究建立
RP-HPLC-DAD 法对泽泻药材中泽泻醇 C、泽泻醇 F、
23-乙酰泽泻醇 C、泽泻醇 L、24-乙酰泽泻醇 F、泽泻
醇 A、24-乙酰泽泻醇 A、泽泻醇 G、泽泻醇 B、23-
乙酰泽泻醇 B、11-去氧泽泻醇 B 11 个成分进行测定,
本法操作简单、准确度高,为泽泻药材的全面质量控
制提供了科学依据。同时对福建和四川产泽泻主要的
成分的量进行了聚类分析,比较 2 大主产地泽泻药材
的质量异同。
1 仪器与试药
Shimadzu LC-20AT 高 效 液 相 色 谱 仪
(LC-20AT 输液泵,SPD-M20A 检测器,CBM-20A
工作站,CTO-22A 柱温箱),LCsolution 工作站;
KQ-500E 超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公
司);DV215CD 型十万分之一分析天平(奥豪斯
公司);HCP-500A 粉碎机(永康市金穗机械制造
厂);Milli-Q 超纯水仪(美国 Millipore 公司),乙
腈为色谱纯(德国 Merck 公司),其余试剂均为分
析纯。
对照品泽泻醇 C、泽泻醇 F、23-乙酰泽泻醇 C、
泽泻醇 L、24-乙酰泽泻醇 F、泽泻醇 A、24-乙酰泽
泻醇 A、泽泻醇 G、泽泻醇 B、23-乙酰泽泻醇 B、
11-去氧泽泻醇 B 由本实验室自制,通过 MS 和 1H、
13C-NMR 数据与文献比较确认[9],经 HPLC-DAD
(面积归一法)检测质量分数均大于 98.0%。25 批
次泽泻药材采自福建、四川等地,经福建中医药大
学药药院吴水生教授鉴定为泽泻科植物泽泻 Alisma
orientale (Samuels) Juzep. 的干燥块茎。具体样品信
息见表 1。
表 1 样品信息
Table 1 Information of samples
批号 样品产地 批号 样品产地
1 福建建瓯 1(球茎) 14 福建建阳 3(饮片)
2 福建建瓯 2(球茎) 15 福建建阳 4(饮片)
3 福建建瓯 3(球茎) 16 四川眉山(球茎)
4 福建建阳 1(球茎) 17 四川彭山(球茎)
5 福建建阳 2(球茎) 18 四川夹江(球茎)
6 福建建阳 3(球茎) 19 四川新荷花(饮片)
7 福建建瓯 1(饮片) 20 四川眉山 1(饮片)
8 福建建瓯 2(饮片) 21 四川眉山 2(饮片)
9 福建建瓯 3(饮片) 22 四川眉山 3(饮片)
10 福建建瓯 4(饮片) 23 四川眉山 4(饮片)
11 福建建瓯 5(饮片) 24 四川彭山 1(饮片)
12 福建建阳 1(饮片) 25 四川彭山 2(饮片)
13 福建建阳 2(饮片)

2 方法与结果
2.1 色谱条件
采用 Ultimate XB-C18 色谱柱(150 mm×4.6
mm,5 μm),流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗
脱,0~5 min,35% A;5~20 min,35%~55% A;
20~35 min,55%~65% A;35~45 min,65%~75%
A;45~55 min,75%~85% A;55~65 min,85% A;
体积流量 1 mL/min;检测波长为 208、245 nm;柱
温 30 ℃;进样量 20 μL。对照品与样品的色谱图结
果见图 1 和 2。
2.2 对照品溶液制备
取各对照品适量,精密称定,加入乙腈制备成


1-泽泻醇 C 3-23-乙酰泽泻醇 C 4-泽泻醇 L
1-alisol C 3-alisol C 23-acetate 4-alisol L
图 1 对照品 (A)、泽泻样品 (B) 在 245 nm 处的色谱图
Fig. 1 HPLC of reference substances (A) and samples of
Alismatis Rhizoma (B) at 245 nm
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
t/min
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
3
4
1
A
B
1 4
3
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• 2935 •

2-泽泻醇 F 5-24-乙酰泽泻醇 F 6-泽泻醇 A 7′-alismol 7-24-
乙酰泽泻醇 A 8-泽泻醇 G 9-泽泻醇 B 10-23-乙酰泽泻醇 B
11-11-去氧泽泻醇 B
2-alisol F 5-alisol F 24-acetate 6-alisol A 7′-alismol 7-alisol A
24-acetate 8-alisol G 9-alisol B 10-alisol B 23-acetate 11-11-deoxy-
alisol B
图 2 对照品 (A)、泽泻样品 (B) 在 208 nm 处的色谱图
Fig. 2 HPLC of reference substances (A) and samples of
Alismatis Rhizoma (B) at 208 nm
泽泻醇 C、泽泻醇 F、23-乙酰泽泻醇 C、泽泻醇 L、
24-乙酰泽泻醇 F、泽泻醇 A、24-乙酰泽泻醇 A、泽
泻醇 G、泽泻醇 B、23-乙酰泽泻醇 B 和 11-去氧泽
泻醇 B 质量浓度分别为 172.10、118.80、93.69、
26.80、55.96、660.00、356.40、204.75、572.68、
1 183.62、168.80 μg/mL 混合对照品储备液,备用。
2.3 供试品溶液制备
将泽泻药材粉碎,过 60 目筛得泽泻粉末。取泽
泻粉末 1 g,精密称定,置具塞三角瓶中,精密加入
乙腈 25 mL,密塞,称定质量,超声提取 30 min(功
率 250 W,频率 50 kHz),放冷,称定质量,用乙
腈补足减少的质量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
2.4 线性关系考察
分别取“2.2”项下方法制备的混合对照品储备
液,用乙腈稀释,摇匀。精密吸取 20 μL,按“2.1”
项下色谱条件进行分析,以质量浓度为横坐标(X),
以峰面积为纵坐标(Y),绘制标准曲线。用乙腈逐
级稀释对照品溶液,进样。按 3 倍信噪比计算 11
个成分的检测限(LOD),按 10 倍信噪比计算 11
个成分的定量限(LOQ),结果见表 2。
表 2 线性关系
Table 2 Linear relationship
指标成分 回归方程 线性范围/(μg·mL−1) r LOD/(μg·mL−1) LOQ/(μg·mL−1)
泽泻醇 C Y=19 457 X-305.17 0.313~ 17.210 0.999 9 0.092 0.312
泽泻醇 F Y=19 873 X-894.93 0.504~ 11.880 0.999 9 0.131 0.437
23-乙酰泽泻醇 C Y=37 838 X-642.27 0.284~ 9.369 0.999 9 0.082 0.271
泽泻醇 L Y=31 863 X-88.07 0.146~ 2.680 0.999 8 0.043 0.146
24-乙酰泽泻醇 F Y=21 920 X-337.13 0.254~ 5.596 0.999 8 0.071 0.240
泽泻醇 A Y=13 574 X-2 871.8 2.500~ 66.000 0.999 9 0.310 1.033
24-乙酰泽泻醇 A Y=14 131 X-1 459.4 0.463~ 10.190 0.999 9 0.068 0.226
泽泻醇 G Y=16 184 X-1 130.1 1.575~ 20.475 0.999 9 0.331 1.173
泽泻醇 B Y=15 570 X-1 815.5 1.525~ 57.286 0.999 6 0.291 0.970
23-乙酰泽泻醇 B Y=19 048 X-4 341.0 3.035~118.362 0.999 9 0.390 1.326
11-去氧泽泻醇 B Y=26 960 X+837.35 0.816~ 16.880 0.999 8 0.122 0.408
2.5 精密度试验
精密吸取混合对照品溶液 20 μL,连续进样 6
次,记录泽泻醇 C、泽泻醇 F、23-乙酰泽泻醇 C、
泽泻醇 L、24-乙酰泽泻醇 F、泽泻醇 A、24-乙酰泽
泻醇 A、泽泻醇 G、泽泻醇 B、23-乙酰泽泻醇 B、
11-去氧泽泻醇 B 的峰面积,结果 11 个被测物峰面
积 RSD 分别为 1.47%、1.05%、1.27%、1.48%、1.36%、
1.01%、0.96%、1.46%、1.09%、1.94%、1.18%,结
果表明仪器的精密度良好。
2.6 稳定性试验
取供试品溶液分别于 0、2、6、10、12、24、
48 h 进样 20 μL,计算得泽泻醇 C、泽泻醇 F、23-
乙酰泽泻醇 C、泽泻醇 L、24-乙酰泽泻醇 F、泽泻
醇 A、24-乙酰泽泻醇 A、泽泻醇 G、泽泻醇 B、23-
乙酰泽泻醇 B、11-去氧泽泻醇 B 峰面积 RSD 分别
为 0.80%、2.06%、1.56%、1.28%、2.38%、1.55%、
1.57%、1.54%、0.90%、1.67%、1.14%,结果表明
供试品溶液在 48 h 内稳定。
2.7 重复性试验
精密称取同一批泽泻样品 6 份,按“2.3”项下
方法制备供试品溶液,分别进样,测定峰面积,计
算各成分质量分数的 RSD。泽泻醇 C、泽泻醇 F、
A
6 7
10
9
2 8
5 11
9 10
6
7'
11
2 5 7 8
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
t/min
B
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23-乙酰泽泻醇 C、泽泻醇 L、24-乙酰泽泻醇 F、泽
泻醇 A、24-乙酰泽泻醇 A、泽泻醇 G、泽泻醇 B、
23-乙酰泽泻醇 B、11-去氧泽泻醇 B 质量分数 RSD
分别为 1.08%、1.98%、1.63%、0.96%、1.43%、0.65%、
1.07%、1.26%、1.51%、0.63%、0.67%,结果表明
该法重复性良好。
2.8 加样回收率试验
取已测定的泽泻粉末,每份 0.5 g,精密称定。精密
加入等量的 11 种对照品,按“2.3”项下方法制备供试
品溶液,在“2.1”项色谱条件下测定,结果泽泻醇C、
泽泻醇F、23-乙酰泽泻醇C、泽泻醇L、24-乙酰泽泻醇
F、泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A、泽泻醇G、泽泻醇B、
23-乙酰泽泻醇B、11-去氧泽泻醇B 的平均加样回收率
分别为98.76%、100.24%、97.97%、100.14%、99.88%、
96.54%、97.27%、98.85%、99.45%、98.85%、98.13%,
RSD 分别为 2.00%、1.00%、1.03%、1.39%、1.16%、
1.07%、1.46%、1.18%、1.94%、0.84%、1.82%。
2.9 样品测定
分别取不同批次泽泻样品粉末 1 g,精密称
定,按“2.3”项下方法制备供试品溶液,进样 20
μL 后测定峰面积,代入标准曲线计算其质量分
数,结果见表 3。
表 3 泽泻药材中 11 种三萜类成分的量
Table 3 Contents of 11 triterpenes in Alismatis Rhizoma by RP-HPLC-DAD
质量分数/(mg·g−1) 编号 泽泻醇 C 泽泻醇 F 23-乙酰泽泻醇 C 泽泻醇 L 24-乙酰泽泻醇 F 泽泻醇 A 24-乙酰泽泻醇 A 泽泻醇 G 泽泻醇 B 23-乙酰泽泻醇 B 11-去氧泽泻醇 B
1 0.070 0 0.079 0 0.144 6 0.038 7 − − 0.055 4 0.052 4 0.179 8 1.420 0 0.199 5
2 0.060 0 0.078 0 0.136 9 0.031 8 − − 0.060 0 0.047 0 0.174 9 1.546 0 0.197 1
3 0.050 0 − 0.118 0 − 0.006 4 − 0.038 0 0.041 3 0.179 7 1.560 0 0.182 8
4 0.053 9 0.079 5 0.156 7 0.011 8 − − 0.083 2 0.039 7 0.309 3 2.092 0 0.130 2
5 0.068 0 0.065 2 0.165 3 − 0.007 1 − 0.078 6 − 0.251 4 1.886 0 0.134 5
6 0.051 1 − 0.106 0 − 0.007 4 − 0.069 1 0.054 1 0.358 7 1.845 0 0.162 8
7 0.070 0 0.096 7 0.149 7 0.012 1 0.008 5 − 0.049 4 − 0.248 1 1.449 0 0.127 4
8 0.045 3 0.019 6 0.152 2 − − − 0.049 7 − 0.273 7 1.452 0 0.094 6
9 0.069 3 − 0.152 2 0.026 2 − − 0.049 7 − 0.273 7 1.452 0 0.110 0
10 0.059 7 0.026 2 0.113 4 0.006 7 − − 0.050 4 0.068 6 0.250 2 1.211 0 0.099 5
11 0.059 7 0.070 4 0.135 9 0.011 9 − − 0.051 5 0.039 4 0.247 1 1.201 0 0.121 4
12 0.069 3 − 0.156 7 − − − − 0.040 2 0.131 7 1.178 0 0.112 0
13 0.059 7 0.070 4 0.138 5 − − − − − 0.130 7 1.082 0 0.123 8
14 0.070 0 0.096 7 0.173 7 − 0.008 5 − − − 0.135 5 1.270 0 0.126 4
15 0.068 0 0.065 2 0.176 4 − 0.009 1 − − − 0.138 1 1.551 0 0.136 5
16 0.366 7 0.185 4 0.201 5 0.051 5 0.021 1 0.836 6 0.104 6 − 0.935 1 1.418 0 0.162 6
17 0.242 6 0.186 5 0.138 3 0.058 9 − 0.509 4 0.247 8 0.100 1 1.408 0 2.006 0 0.337 7
18 0.237 0 0.214 6 0.131 2 0.055 6 0.031 0 0.468 3 0.271 6 0.069 7 1.422 0 2.234 0 0.366 1
19 0.053 7 0.201 0 0.029 3 0.025 8 0.053 0 1.046 0 0.175 2 0.182 6 0.265 3 0.975 7 —
20 0.178 8 0.069 1 0.189 7 0.066 0 0.010 2 0.425 0 0.090 2 0.067 8 0.936 1 1.161 0 0.046 7
21 0.067 4 0.192 8 0.150 3 0.052 1 − 0.790 4 0.069 3 0.123 2 1.241 0 1.397 0 0.065 5
22 0.118 0 0.130 7 0.064 2 − 0.040 8 0.959 4 0.112 7 0.190 4 0.773 6 1.438 0 0.038 0
23 0.077 1 0.155 7 0.068 7 0.040 0 0.035 7 0.926 7 0.128 6 0.153 3 1.440 0 1.163 0 0.103 5
24 0.034 1 0.213 6 0.133 0 0.033 6 0.040 1 1.056 0 0.190 8 0.235 9 1.046 0 1.217 0 0.060 7
25 0.369 4 0.270 8 0.230 8 0.044 0 0.013 7 0.807 4 0.160 4 0.091 2 1.225 0 1.913 0 0.122 7
“−”未检出
“−” mean no detected
2.10 数据分析
运用 DPS 14.50 数据处理软件分析:采用系统
聚类法,以 11 种指标成分量为变量,以卡方距离为
指标,对 25 批泽泻样品进行聚类分析[10]。结果不
同产地的药材可聚类为“川产泽泻”和“闽产泽泻”
2 大类,见图 3。
3 讨论
3.1 提取方法和色谱条件的优化
比较了不同体积分数甲醇和乙腈为提取溶剂,
结果以 100%乙腈为提取溶剂,提取率最高且提取
的杂质较少。考察超声和回流 2 种提取法对待测成
分提取率的影响,结果表明 2 种方法提取率无明显
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47 卷 第 16 期 2016 年 8 月

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图 3 25 批次泽泻样品的系统聚类分析图
Fig. 3 Hierarchical clustering analysis on Alismatis Rhizoma
差异,然而回流提取杂质明显多于超声提取法。考
察乙腈超声提取工艺,结果显示 25 倍量乙腈超声
(250 W,50 kHz)提取 30 min,1 次即可提取完全。
考察了梯度和等度洗脱以及不同流动相(甲醇-水、
乙腈-水)对分离和柱效的影响。结果发现乙腈-水
洗脱分离效果优于甲醇-水,并且由于泽泻三萜无共
轭结构,紫外末端吸收,甲醇-水系统基线漂移明显
高于乙腈-水,因此采用乙腈-水作为流动相。选择
上述“2.1”项色谱条件下的梯度洗脱。在该色谱条
件下,各组分的保留时间最合适,分离效果较优。
3.2 检测波长的确定
对被测成分进行全波长扫描,由于泽泻醇 F、24-
乙酰泽泻醇 F、泽泻醇 A、24-乙酰泽泻醇 A、泽泻醇
G、泽泻醇 B、23-乙酰泽泻醇 B 和 11-去氧泽泻醇 B
的结构中无共轭结构,最大吸收波长在 197 nm,为末
端吸收,干扰因素较多,而在 208 nm 干扰较少。泽
泻醇 C 和 23-乙酰泽泻醇 C 结构中 13,16,17 位有
共轭双键,而且 16 位羰基的增色作用,使他们最大
吸收波长在 245 nm。泽泻醇 L 在 245 nm 波长下干扰
较少,故最终选用 208、245 nm 作为检测波长。
3.3 定量分析
25 批次泽泻药材均符合《中国药典》2015 年版
规定泽泻中 23-乙酰泽泻醇 B 的的量不低于 0.050%
(0.500 0 mg/g)。然而不同来源的泽泻中 11 种三萜
类成分量存在差异,例如福建泽泻样品中未检测到
泽泻醇 A,而四川泽泻中泽泻醇 A 含量较高,达
0.425 0~1.056 mg/g。福建泽泻样品中 24-乙酰泽泻
醇 A 量(0.038 0~0.083 2 mg/g)也显著低于四川
泽泻中 24-乙酰泽泻醇 A 量(0.069 3~0.247 8
mg/g),并且发现色谱图上,在 24-乙酰泽泻醇 A 峰
号前还有一个很高的 7′号峰,经对照品比较确定为
泽泻倍半萜成分泽泻醇,其保留时间和 24-乙酰泽
泻醇A很接近,这个峰在福建泽泻和川泽泻中均有,
并且峰面积较大,非常容易和 24-乙酰泽泻醇 A 混
淆,定量时应该注意勿积分错误。此外 23-乙酰泽
泻醇 B 的量各批次间差异较大,质量分数最低与最
高分别为 0.975 7、2.234 mg/g。而文献报道泽泻多
种三萜均具有调血脂作用[11-12],因此,采用单一某
个指标来评价泽泻药材的质量显然有很大的局限
性,建立泽泻多指标的综合质量评价方法十分必要。
同时对福建和四川产的泽泻主要成分量进行了聚类
分析,比较两大主产地泽泻药材的质量异同。该法
可为泽泻的产地鉴别提供一定的参考。
参考文献
[1] 中国药典 [S]. 一部. 2015.
[2] 许 文, 罗奋熔, 赵万里, 等. 泽泻降糖活性提取物化
学成分研究 [J]. 中草药, 2014, 45(22): 3238-3245.
[3] 吴水生. 泽泻的药学与临床研究 [M]. 北京: 中国中医
药出版社, 2009.
[4] 罗永东, 邱丽莉, 许 文, 等. 不同产地泽泻 4 个三萜
类成分含量比较 [J]. 中药材, 2010, 33(12): 1849-1851.
[5] 丘建芳, 林 婧, 许 文, 等. HPLC-DAD-ELSD 测定
泽泻药材中 4 种三萜类成分含量 [J]. 中国实验方剂学
杂志, 2014, 20(2): 42-46.
[6] 罗张炎, 周爱存, 张朝凤, 等. HPLC 同时测定泽泻中 4
种泽泻醇成分的含量 [J]. 中国中药杂志, 2010, 35(24):
3306-3308.
[7] 张敏娜, 王少云, 聂 磊, 等. HPLC-ELSD 法测定泽泻
药材与饮片中2种有效成分的含量 [J]. 药物分析杂志,
2008, 28(7): 1068-1070.
[8] 赵万里, 张方方, 黄小强, 等. 一测多评法测定泽泻中
4 种三萜类成分的含量 [J]. 中国药学杂志 , 2015,
50(15): 1347-1352.
[9] Yoshijiro N, Yohko S, Masumi K, et al. Terpenoids of
Alisma Orientale Rhizome and the crude drug alismatis
rhizoma [J]. Phytochemistry, 1994, 36(1): 119-127.
[10] 唐启义. DPS 数据处理系统 [M]. 北京: 科学出版社,
2013.
[11] Xu W, Li T, Qiu J F, et al. Anti-proliferative activities of
terpenoids isolated from Alisma Orientalis and their
structure-activity relationships [J]. Anti-Cancer Agents
Med Chem, 2015, 15(3): 228-235.
[12] Chen L L, Hu Z F. Identification and determination of the
major triterpenes in Rhizoma Alismatis by HPLC-evaporative
light scattering detection and HPLC/electrospray
ionization-MSn [J]. J AOAC Inter, 2013, 96(15): 260-264.
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