全 文 ：·2586· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 17期 2015年 9月

基于止咳效价评价半夏及其炮制品品质的方法研究
杨冰月 1, 2，李 敏 1*，吴发明 1，夏 琴 1，周海玉 1，彭 亮 2
1. 成都中医药大学 中药材标准化教育部重点实验室 中药资源系统研究与开发利用国家重点实验室，四川 成都 611137
2. 陕西中医药大学 中药资源产业化协调创新中心 陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心，陕西 西安 712046
摘 要：目的 建立半夏及其炮制品清半夏、姜半夏、法半夏和京半夏止咳效价测定的模型与方法，为初步探索生物效价测定
法用于评价半夏及其炮制品的质量提供科学依据。方法 基于小鼠浓氨水引咳模型，采用量反应平行线（2.2）法建立半夏及其炮
制品止咳效价的测定方法，测定其效价值，并结合总有机酸定量测定结果，分析总有机酸的量与生物效价二者的相关性。结果 半
夏炮制后，止咳效价值均升高；京半夏的止咳效价值最大，为 2 105.59 U/g；其后依次为法半夏、清半夏、姜半夏；半夏止咳效
价值最小，为京半夏的 1/3。结合总有机酸定量分析，半夏及其炮制品的止咳效价与总有机酸的量相关，其 R2为 0.692 0～0.917 8，
表现为总有机酸的量增加，止咳效价值增大，二者呈显著的正相关。结论 该方法重复性、精密度良好，适用于半夏及其炮制
品止咳效价的测定，可作为评价其质量的方法，为完善其质量标准，构建中药质控新模式提供了科学依据。
关键词：半夏；炮制品；止咳；生物效价；总有机酸
中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2015)17 - 2586 - 07
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.17.014
Methodological study on quality evaluation of crude and processed Pinelliae
Rhizoma based on antitussive bioassay
YANG Bing-yue1, 2, LI Min1, WU Fa-ming1, XIA Qin1, ZHOU Hai-yu1, PENG Liang2
1. Key Laboratory of Standardization of Chinese Herbal Medicine Ministry of Education; State Key Laboratory Breeding Base of
Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, College of Pharmacy, Chengdu University of
Traditional Chinese Medicine, Chengdu 611137, China
2. Shaanxi Collaborative Innovation Center of Chinese Medicinal Resources Industrialization; Shaanxi Qinling Application
Development and Engineering Center of Chinese Herbal Medicine, College of Pharmacy, Shaanxi University of Chinese
Medicine, Xi′an 712046, China
Abstract: Objective To establish a method for determining the antitussive effects of Pinelliae Rhizoma (Pinelliae ternate), Pinelliae
Rhizoma Praeparatum cum Alumine, Pinelliae Rhizoma Praeparatum cum Zingibere et Alumine, Pinelliae Rhizoma Praeparatum and
Pinelliae Rhizoma Praeparatum cum Glycyrrhizae et Alumine, and provide a scientific basis for constructing a new quality evaluation
pattern of crude and processed P. ternate. Methods Antitussive bioassay for crude and processed Pinelliae Rhizoma was established by
taking parallel line quantitative analysis method, based on mouse cough model induced by strong aqua ammoniac. Correlation analysis
was used to determine the relationships among the levels of different total organic acids and antitussive bioassay. Results The results
showed that antitussive bioassay increased after prepared. Pinelliae Rhizoma Praeparatum cum Glycyrrhizae et Alumine had the highest
antitussive bioassay (2 105.59 U/g), followed by Pinelliae Rhizoma Praeparatum, Pinelliae Rhizoma Praeparatum cum Alumine and
Pinelliae Rhizoma Praeparatum cum Zingibere et Alumine; Pinelliae Rhizoma demonstrated the lowest antitussive bioassay which was
only 1/3 of Pinelliae Rhizoma Praeparatum cum Glycyrrhizae et Alumine. The antitussive bioassay increased when the content of total
organic acids was growing, presenting a significant positive correlation, R2 among them ranged from 0.692 0 to 0.917 8. Conclusion The
method is stable, precise, and good for determining the antitussive bioassay of crude and processed Pinelliae Rhizoma. It can be used in
quality evaluation and quality standard and provide a scientific basis for the quality control of Chinese materia medica.
Key words: Pinelliae Rhizoma; processed products; cough relieving; biological value; total organic acids

收稿日期：2015-01-26
基金项目：国家自然科学基金资助项目（81173492）；四川省科技厅“十二五”农作物育种攻关（2011NZ0098-12）；国家基础科学人才培养基
金项目（J1310034-04）；川产道地药材麦冬、半夏的品种和质量评价研究项目（2014F038）
作者简介：杨冰月（1983—），女，讲师，博士，研究方向为中药品种、质量及资源开发研究。Tel: 18064331298 E-mail: 304951774@qq.com
*通信作者 李 敏（1962—），女，教授，博士生导师，研究方向为中药品种、质量及资源开发研究。Tel: 13980038316 E-mail: 028limin@163.com
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目前中药内在质量的优劣主要是通过运用各
种分析检测手段测定某种指标性成分或某些活性
成分的量来评价。中药成分多而复杂，大部分中药
的化学成分尚不完全明确，仅以单个或几个有效成
分作为定性、定量的指标远不能完全代表中药的整
体质量，更不能完全反映其临床疗效。随着中药质
量控制与评价模式研究的发展，生物活性检定逐渐
应用于中药领域。它适用于结构复杂，理化方法不
能定量测定或者理化测定不能反映其临床生物活
性的药物[1]，在中药质量控制和评价中具有独到的
优势，如《中国药典》2010年版一部中的水蛭就采
用了此法控制其质量[2]。此外，在洋地黄叶、板蓝
根、益母草、大黄等中药中，生物活性检定法也得
到了广泛的应用[3-7]。
半夏为常用中药，具有祛痰、止咳、止呕等功
效，尤其止咳作用显著，被认为是半夏的主要药理
活性[8-9]。半夏成分复杂，《中国药典》2010年版主要
以薄层定性，琥珀酸定量来控制其质量，但以此作为
评价指标远不能完全代表半夏的整体质量，更不能完
全反映其临床疗效。因此，本实验以半夏及其炮制品
清半夏、姜半夏、法半夏和京半夏为研究对象，基于
小鼠浓氨水引咳模型，建立半夏及其炮制品止咳效价
测定方法，探索构建以生物活性为手段的中药质量控
制与评价的新方法，补充和完善当前质控模式的不足。
1 材料
1.1 仪器
BP121S 十万分之一电子天平（德国赛多利斯
公司）；KQ-500DB数控超声波清洗器（昆山市超声
仪器有限公司）；RE-5203旋转蒸发仪（上海亚荣生
化仪器厂）；PHS-3E pH 计（上海精密科学仪器有
限公司）；磁力搅拌器（大地自动化仪器厂）。
1.2 试剂
磷酸可待因（青海制药厂有限公司，批号
20100110）；琥珀酸（中国食品药品检定研究院）；
氨水、羧甲基纤维素钠（CMC-Na）、氢氧化钠、95%
乙醇均购买于成都市科龙化工试剂厂；盐酸（四川
西陇化工有限公司）；其余试剂均为分析纯。
1.3 样品
半夏采自全国 3个省份，共 6批；半夏炮制品
各 8批，其中 5批购自于药厂，3批为自制炮制品，
共 32 批。样品经成都中医药大学中药鉴定教研室
李敏教授鉴定为天南星科植物半夏 Pinellia ternate
(Thunb.) Berit. 的干燥块茎及其炮制品清半夏、姜
半夏、法半夏和京半夏。样品来源信息见表 1。
表 1 样品来源
Table 1 Origins of samples
编号 名称 来源 编号 名称 来源
bx-1 半夏（野生） 四川南充 jbx-6 姜半夏 自制（由 bx-3炮制）
bx-2 半夏（野生） 四川遂宁 jbx-7 姜半夏 自制（由 bx-3炮制）
bx-3 半夏（栽培） 四川遂宁 jbx-8 姜半夏 自制（由 bx-3炮制）
bx-4 半夏（栽培） 甘肃西河 fbx-1 法半夏 四川新荷花中药饮片股份有限公司
bx-5 半夏（栽培） 甘肃清水 fbx-2 法半夏 成都康美药业有限公司
bx-6 半夏（栽培） 贵州赫章 fbx-3 法半夏 成都康美药业有限公司
qbx-1 清半夏 四川新荷花中药饮片股份有限公司 fbx-4 法半夏 四川省中药饮片有限责任公司
qbx-2 清半夏 四川新荷花中药饮片股份有限公司 fbx-5 法半夏 四川省中药饮片有限责任公司
qbx-3 清半夏 河北光明饮片有限公司汉草饮片厂 fbx-6 法半夏 自制（由 bx-3炮制）
qbx-4 清半夏 河北光明饮片有限公司汉草饮片厂 fbx-7 法半夏 自制（由 bx-3炮制）
qbx-5 清半夏 河北康派中药材有限公司 fbx-8 法半夏 自制（由 bx-3炮制）
qbx-6 清半夏 自制（由 bx-3炮制） jjbx-1 京半夏 四川新荷花中药饮片股份有限公司
qbx-7 清半夏 自制（由 bx-3炮制） jjbx-2 京半夏 四川新荷花中药饮片股份有限公司
qbx-8 清半夏 自制（由 bx-3炮制） jjbx-3 京半夏 成都康美药业有限公司
jbx-1 姜半夏 四川新荷花中药饮片股份有限公司 jjbx-4 京半夏 四川省中药饮片有限责任公司
jbx-2 姜半夏 四川新荷花中药饮片股份有限公司 jjbx-5 京半夏 四川省中药饮片有限责任公司
jbx-3 姜半夏 成都康美药业有限公司 jjbx-6 京半夏 自制（由 bx-3炮制）
jbx-4 姜半夏 成都康美药业有限公司 jjbx-7 京半夏 自制（由 bx-3炮制）
jbx-5 姜半夏 四川省中药饮片有限责任公司 jjbx-8 京半夏 自制（由 bx-3炮制）

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1.4 实验动物
昆明种小鼠，雌雄各半，体质量（20±2）g，
由成都达硕生物科技有限公司提供，合格证号
SOXK（111）2008-24。
2 方法与结果
2.1 半夏的炮制
自制清半夏、姜半夏、法半夏按照《中国药典》
2010年版的炮制方法进行炮制[2]，京半夏炮制方法
参考文献方法[10]。
2.2 半夏及其炮制品供试品溶液的制备
取半夏及其炮制品粉末适量，分别加入 10倍
量 75%乙醇，加热回流提取 2次，每次 1 h，合并
提取液，滤过，回收乙醇，浓缩成浸膏，加 5%无
水碳酸钠溶液调 pH值至 12；然后用醋酸乙酯反复
萃取至萃取液无色，收集碱水液，以盐酸酸化至
pH 值为 2；再用醋酸乙酯反复萃取，至无有机酸
反应（0.1%溴酚蓝乙醇溶液作为薄层色谱显色剂，
喷洒后，呈黄色斑点），合并醋酸乙酯萃取液，回
收溶剂，蒸干后溶解，滤过，滤液浓缩至干，即得
半夏或其炮制品的总有机酸提取物。给药前加含 2
滴 1%聚山梨酯 80的 0.5% CMC-Na使其溶解，按
1∶0.5 倍剂距等比稀释成一定质量浓度的供试品
溶液。
2.3 小鼠浓氨水引咳模型的制备
2.3.1 氨水体积分数的筛选 本实验设置了氨水 3
个体积分数梯度，分别为 20%、25%、30%。在倒
置的 500 mL容器中，放含 30%氨水的棉球时，不
足 1 min，小鼠死亡。降低氨水体积分数，用 25%
的氨水进行实验，小鼠不会出现死亡，且 0.5 min
后出现强烈的咳嗽。使用最低体积分数 20%的氨水
进行实验，小鼠几乎不咳嗽。通过 3次重复实验，
结果显示一致，最终确定实验氨水体积分数为
25%。
2.3.2 氨水使用量 通过 3 次重复实验，结果显示
当 500 mL容器中置入吸取 25%氨水 0.3 mL的棉球
时，氨水致小鼠咳嗽效果最佳，易于体现出受试药
物的药效，并对小鼠病理伤害小，不出现死亡现象。
2.3.3 观察时间 本实验分别设置了 4 个观察时
间即 1、2、3、4 min，对小鼠进行实验。结果见
表 2。结果显示，3 min内小鼠咳嗽次数与 4 min
内咳嗽次数之间无显著差异，故实验最终选择观
察时间为 3 min。
表 2 氨水刺激不同时间致小鼠咳嗽效果的比较 ( x ±s, n = 10)
Table 2 Comparative effect of stimulus time by NH4OH to mouse cough ( x ±s, n = 10)
性别 咳嗽潜伏期/s
咳嗽次数/次
1 min 2 min 3 min 4 min
雄性小鼠 41.12±4.57 3.18±1.58 6.42±2.06 12.69±1.02 14.66±3.50
雌性小鼠 39.92±4.08 4.06±1.65 7.07±1.98 15.02±2.43 16.83±1.74

2.3.4 阳性药验证结果 以磷酸可待因（30 mg/kg）
为阳性对照，观察氨水引咳效果，结果对照组小鼠
咳嗽潜伏期为（40.13±4.02）s（n＝10），3 min 内
咳嗽次数为（15.74±1.36）次（n＝10）；阳性对照
组咳嗽潜伏期为（112.59±3.72）s（n＝10），3 min
内咳嗽次数为（4.06±1.19）次（n＝10），两组间比
较差异非常显著（P＜0.01），阳性药磷酸可待因能够
明显延长小鼠咳嗽潜伏期，减少 3 min内咳嗽次数。
2.3.5 半夏止咳作用 取小鼠 40只，雌雄各半，
随机分成 4 组，分别为对照组、阳性对照组及半
夏高、低剂量组，每组 10只，实验前小鼠禁食不
禁水 12 h。对照组小鼠给予 0.5% CMC-Na（含 2
滴 1%聚山梨酯 80），阳性对照组给予磷酸可待因
30 mg/kg，半夏组给予半夏总有机酸提取物，高、
低剂量分别为 820、410 mg/kg（生药剂量），各组
均 ig给药，每天 1次，连续 7 d。末次给药 1 h后，
分别将小鼠按照分组顺序放置于倒置的 500 mL
容器中，内放一棉球，用 1 mL注射器吸取 25%氨
水 0.3 mL注入棉球中，迅速倒置容器（以防气体
泄漏），秒表记录时间，观察小鼠的咳嗽潜伏期（从
记录时间起到小鼠第 1次咳嗽的时间），3 min内
咳嗽次数（以小鼠腹肌收缩，张大口同时伴有咳
嗽声为准），计算抑咳率［抑咳率＝(对照组小鼠
的咳嗽次数－给药组小鼠的咳嗽次数)/对照组小
鼠的咳嗽次数］。采用 SPSS 18.0软件的单因素方
差分析（One-Way ANOVA）进行数据处理，结果
见表 3。与对照组比较，磷酸可待因及高、低剂量
半夏均能明显延长小鼠咳嗽潜伏期，减少小鼠 3
min内咳嗽次数，差异显著（P＜0.01），结果表明
半夏具有止咳作用。
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表 3 半夏对小鼠的止咳作用 ( x ±s, n = 10)
Table 3 Antitussive effect of Pinelliae Rhizoma in mice
( x ±s, n = 10)
组别
剂量/
(mg·kg−1)
咳嗽潜伏
期/s
3 min咳嗽
次数/次
抑咳
率/%
对照 — 34.22±3.88 14.47±0.97
磷酸可待因 30 105.13±3.87** 4.25±0.42** 70.36
半夏 410 46.58±3.27** 7.81±0.79** 46.03
820 96.93±4.58** 6.48±0.52** 55.22
与对照组比较：**P＜0.01
**P < 0.01 vs control group
2.4 方法学考察
2.4.1 重复性考察 同一样品，制备成 3批供试品
溶液，按“2.3.5”项下方法进行小鼠浓氨水引咳实
验的重复性考察。结果咳嗽潜伏期和咳嗽次数的
RSD均小于 3%，表明方法重复性良好。
2.4.2 精密度考察 制备同一供试品溶液，按
“2.3.5”项下方法平行进行小鼠浓氨水引咳实验 6
次，结果咳嗽潜伏期和咳嗽次数的 RSD均小于 3%，
表明方法精密度良好。
2.5 基于浓氨水引咳法的半夏及其炮制品止咳效
价测定
2.5.1 供试品给药剂量 给药剂量根据人与小鼠
每千克体质量剂量折算系数和提取物的提取率进
行计算。具体剂量（生药剂量）为半夏 410、820
mg/kg，清半夏 400、800 mg/kg，姜半夏 420、840
mg/kg，法半夏 460、920 mg/kg，京半夏 540、1 080
mg/kg。
2.5.2 磷酸可待因阳性对照溶液的配制 参照文
献方法[11-13]，以 30、15 mg/kg（剂距 1∶0.5）的磷
酸可待因分别为阳性对照高、低剂量组。给药前加
入含 2滴 1%聚山梨酯 80的 0.5% CMC-Na溶解。
2.5.3 试验设计 选择量反应平行线（2.2）法，将
对照品溶液和供试品溶液以剂距（1∶0.5）按高、
低剂量随机分组，每组 10 只，其中 2 组作为阳性
对照组，ig高、低剂量阳性对照溶液，其余给药组
分别 ig高、低剂量供试品溶液。采用国家药典委员
会编制的“中国药典生物检定统计程序 BS2000”
进行半夏及其炮制品止咳效价值的计算。
2.5.4 止咳效价的计算 运用“中国药典生物检定
统计程序 BS2000”软件，以采自四川遂宁市（野
生）半夏（编号 bx-2）为例示范止咳效价的计算。
进入“BS2000 工作站”，选择量反应平行线
（2.2）法，输入样品的估计效价、样品的最大剂量、
对照品的最大剂量及剂距等进行分析，通过对数转
换得到可靠性测验结果，见表 4。
表 4 半夏止咳效价检测的方差分析和可靠性测验结果
Table 4 Results of variance analysis and reliability test of antitussive valence of Pinelliae Rhizoma
变异来源 自由度 方差和 方差 F值 P值
试品间 1 0.388 06 0.388 06 1.982 ＞0.05
回归 1 0.060 533 0.060 533 30.916 ＜0.01
偏离平行 1 0.000 541 26 0.000 541 26 ＜1 ＞0.05
剂间 3 0.449 14 0.149 71 76.463 ＜0.01
区组间 9 0.024 667 0.002 740 8 1.399 8 ＞0.05
误差 26 0.050 907 0.001 958
总量 39

（1）可靠性检验：由表 4可知，试品间（供试
品和阳性对照）P＞0.05，说明试品间无显著性差异，
总效价无差异；回归 P＜0.01，具有极显著性差异，
说明随着剂量的增加，3 min 内咳嗽次数有规律的
减少；偏离平行 P＞0.05，说明供试品与阳性对照
作用规律相近，呈平行直线关系，可用（2.2）法测
定供试品的效价；剂间 P＜0.01，具有极显著性差
异，说明实验剂量比例和实验安排合理。
（2）效价计算和实验误差估计：根据公式计算，
半夏的效价及可信限的结果为 sm＝0.169 13，测得
效价（PT）＝836.64 U/g，测得效价的可信限率
（FL）＝8.640 4%。
2.5.5 半夏及其炮制品止咳效价的测定结果 本
实验基于浓氨水引咳法对半夏及其炮制品清半夏、
姜半夏、法半夏和京半夏的止咳效价进行了测定，
结果见表 5。
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表 5 半夏及其炮制品止咳效价测定结果
Table 5 Results of antitussive valence of crude and processed Pinelliae Rhizoma
样品编号 PT/(U·g−1) FL/% 平均 PT/(U·g−1) 样品编号 PT/(U·g−1) FL/% 平均 PT/(U·g−1)
bx-1 825.22 6.81 759.10±68.16 jbx-6 699.85 4.94
bx-2 836.64 8.64 jbx-7 1 438.69 9.46
bx-3 711.82 13.61 jbx-8 872.02 6.49
bx-4 785.29 9.06 fbx-1 2 073.91 3.23 2 017.98±537.35
bx-5 732.50 10.99 fbx-2 2 009.35 9.20
bx-6 663.10 7.35 fbx-3 1 865.10 4.84
qbx-1 1 500.11 5.42 1 832.36±387.58

fbx-4 3 007.10 8.44
qbx-2 1 811.13 4.24 fbx-5 2 541.94 4.03
qbx-3 2 171.80 4.04 fbx-6 1 718.30 3.45
qbx-4 1 889.25 6.40 fbx-7 1 325.65 8.05
qbx-5 2 569.93 4.03 fbx-8 1 602.47 5.63
qbx-6 1 437.44 4.95 jjbx-1 2 362.87 4.77 2 105.59±243.32
qbx-7 1 794.48 9.19 jjbx-2 2 563.80 6.27
qbx-8 1 484.73 3.23 jjbx-3 2 052.18 7.59
jbx-1 883.86 7.95 1 146.63±317.80 jjbx-4 1 947.52 6.86
jbx-2 984.85 9.45 jjbx-5 2 165.19 6.28
jbx-3 1 437.44 5.46 jjbx-6 1 940.19 9.63
jbx-4 1 363.61 5.54 jjbx-7 1 895.22 6.36
jbx-5 1 492.72 3.71 jjbx-8 1 917.73 9.20

由表 5可知，半夏及其不同炮制品效价值存在
差异，效价值在 759.10～2 105.59 U/g，高低相差近
3 倍。半夏炮制后，止咳效价值均升高。京半夏的
止咳效价值最大，为 2 105.59 U/g；其后依次为法
半夏、清半夏、姜半夏；半夏止咳效价值最小，为
759.10 U/g。
2.6 电位滴定法测定半夏及其炮制品中总有机酸
2.6.1 滴定液的配制与标定 按《中国药典》2010
年版一部附录 XV F“滴定液”项下氢氧化钠滴定
液、盐酸滴定液的制备方法配制 0.1 mol/L 氢氧化
钠溶液和 0.1 mol/L盐酸溶液，并进行标定。
2.6.2 供试品溶液的制备 精密称定半夏及其炮
制品清半夏、姜半夏、法半夏和京半夏粉末（过 4
号筛）5 g，置锥形瓶中，加乙醇 50 mL，加热回流
1 h，同上操作，重复提取 2次，放冷，滤过，合并
滤液，蒸干，残渣精密加入 0.1 mol/L 氢氧化钠滴
定液 10 mL，在功率 500 W，频率 40 kHz的条件下
超声处理 30 min，转移至 50 mL量瓶中，加新沸过
的冷水至刻度，摇匀，即得。
2.6.3 测定方法 精密吸取供试品溶液 25 mL，
按《中国药典》2010年版一部附录 VIII A“电位
滴定法”测定供试品溶液中的总有机酸的量。每
毫升 0.1 mol/L 氢氧化钠滴定液相当于 5.904 mg
的琥珀酸。
2.6.4 测定结果 根据实验得到的电位（E）值和
滴定体积（V）值计算一级微商 ΔE/ΔV和二级微商
Δ2E/ΔV2；ΔE/ΔV和 Δ2E/ΔV2等于零时对应的体积即
为滴定终点。滴定终点体积计算公式如下。
V0＝V＋a/(a＋b)×ΔV
V0表示滴定终点体积；V表示 a点对应的滴定液体积；a、b
分别表示过零前、后的二级微商绝对值；ΔV 表示由 a 到 b
点滴加的滴定液体积
半夏及其炮制品清半夏、姜半夏、法半夏和京
半夏的总有机酸的量测定结果见表 6。按照《中国
药典》2010年版一部“含量测定”项下规定，半夏、
清半夏按干燥品计算，含总有机酸以琥珀酸
（C4H6O4）计，分别不得少于 0.25%、0.30%。由表
6 可知，半夏、清半夏各批样品总有机酸的量均达
到药典标准，其平均值分别为 0.42%、0.46%；姜半
夏为 0.40%；法半夏为 0.48%；京半夏为 0.50%。
结果表明，半夏炮制后总有机酸的量不同程度的增
加，姜半夏变化最小。
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 17期 2015年 9月 ·2591·

表 6 半夏及其炮制品总有机酸定量测定结果 (n = 2)
Table 6 Determination of total organic acids in crude and
processed Pinelliae Rhizoma (n = 2)
编号 总有机酸平均值/% 编号 总有机酸平均值/%
bx-1 0.47 jbx-6 0.36
bx-2 0.52 jbx-7 0.42
bx-3 0.36 jbx-8 0.39
bx-4 0.42 fbx-1 0.46
bx-5 0.37 fbx-2 0.49
bx-6 0.38 fbx-3 0.44
qbx-1 0.45 fbx-4 0.60
qbx-2 0.46 fbx-5 0.56
qbx-3 0.44 fbx-6 0.44
qbx-4 0.41 fbx-7 0.44
qbx-5 0.36 fbx-8 0.41
qbx-6 0.52 jjbx-1 0.58
qbx-7 0.50 jjbx-2 0.61
qbx-8 0.53 jjbx-3 0.50
jbx-1 0.37 jjbx-4 0.50
jbx-2 0.40 jjbx-5 0.51
jbx-3 0.42 jjbx-6 0.45
jbx-4 0.40 jjbx-7 0.43
jbx-5 0.45 jjbx-8 0.46

2.7 半夏炮制前后止咳效价与总有机酸量的相关
性分析
以半夏及其炮制品清半夏、姜半夏、法半夏和
京半夏中总有机酸的量为横坐标（x），止咳效价值
为纵坐标（y），通过 SPSS 18.0软件进行相关性分
析，为客观阐明半夏炮制前后生物效价与化学成分
之间的内在联系提供理论依据。相关性分析结果见
表 7。结果表明，半夏及其炮制品总有机酸量与止
表 7 半夏及其不同炮制品止咳效价与总有机酸量相关性
分析结果
Table 7 Correlation analysis of total organic acids and
antitussive valence of crude and processed Pinelliae Rhizoma
样品 回归方程 R2 P值
半夏 y＝943.9 x＋362.66 0.774 8 ＜0.05
清半夏 y＝−5 614 x＋4 407.8 0.692 0 ＜0.05
姜半夏 y＝9 760.1 x－2 769.6 0.793 3 ＜0.05
法半夏 y＝7 557.7 x－1 609.7 0.876 0 ＜0.01
京半夏 y＝3 726 x＋223.97 0.917 8 ＜0.01
咳效价的 R2在 0.692 0～0.917 8，P＜0.05或 0.01，
总有机酸的量与止咳效价存在相关性，京半夏、法
半夏总有机酸的量最高，止咳效价值最大；清半夏、
姜半夏总有机酸的量低于前二者，其止咳效价值亦
较小；半夏的总有机酸的量最低，止咳效价值最小。
因此，总有机酸与止咳效价值存在着密切联系，表
现为总有机酸的量增加，止咳效价值增大，二者变
化趋势一致，呈显著的正相关。
3 讨论
3.1 小鼠浓氨水引咳模型的选择依据
目前研究止咳活性的药理方法主要是使用化
学药物或电刺激引起动物咳嗽的模型，观察药物的
止咳活性。咳嗽多是由刺激呼吸道黏膜引起，用电
刺激喉部延髓咳嗽中枢或神经，可以分析止咳作用
是作用于中枢或是外周，但操作复杂，选用的实验
动物为大型动物如猫、狗等，筛选药物时，耗费大，
难以进行大量研究，应用较少；用化学药物（氨水、
辣椒素、枸橼酸）刺激呼吸道感受器引起咳嗽，操
作简便，选用的实验动物为小型啮齿动物如小鼠、
豚鼠等，实验成本低，宜于大批量筛选药物，实验
中应用较多。豚鼠枸橼酸引咳法和豚鼠辣椒素引咳
法选用的动物是豚鼠，豚鼠对化学刺激物敏感度
强，引起的咳嗽反射与人类十分相似，有利于咳嗽
症状的准确评估，但实验成本高，多用于确定药物
的止咳效果后，再作进一步研究[14]。浓氨水引咳法
适用于小鼠，方法快速、简便，耗药量少，易于掌
握，适合于止咳药研究的筛选[15]，有大量研究报道表
明该法成功应用于中药的止咳作用研究[11,13,16-17]，因
此本实验采用小鼠浓氨水引咳法建立模型，进行半
夏及其炮制品的止咳效价测定。
3.2 半夏及其炮制品止咳效价与总有机酸量的相
关性研究
生物效价反映了药物的药理活性信息，有效成
分是药理活性的基础。本实验对半夏及其炮制品的
止咳效价与有效成分总有机酸进行了相关性分析，
阐明了二者的关系，表现为总有机酸的量增高，止
咳效价值增大。
前期实验对半夏及其炮制品的药效学进行了
研究，结果表明半夏及其炮制品的总有机酸具有止
咳作用[18]。结合总有机酸定量测定结果，显示总有
机酸的量与止咳作用存在着密切联系，总有机酸的
量越高，止咳作用越强。
综上所述，半夏及其炮制品的总有机酸量、止
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咳作用、止咳效价，三者存在一定的相关性，总有
机酸的量增加，止咳作用增强，止咳效价值增大，
三者变化趋势一致，呈显著的正相关。且止咳效价
测定结果与临床功效相一致，止咳效价测定法可作
为评价半夏及其炮制品质量的方法，为其更好地服
务于临床，保证中药用药的安全性、有效性具有重
要意义。在半夏质量控制与评价体系中引入生物活
性测定，结合有效成分定量，构建更全面的中药质
量控制与评价的新方法，既可辅助鉴定药材的真伪
优劣，同时为定性、定量的评价中药的内在质量提
供一定的科学依据。
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