全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45卷 第 8期 2014年 4月
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LC-Q-TOF-MS 和 LC-IT-MSn分析当归芍药散中化学成分
牛 研，王书芳*
浙江大学药物信息研究所，浙江 杭州 310058
摘 要：目的 对当归芍药散中化学成分进行研究。方法 采用液相色谱-四级杆-飞行时间质谱（LC-Q-TOF-MS）和液相色
谱-离子阱-质谱（LC-IT-MSn）对当归芍药散 70%乙醇-水提物进行分析，色谱柱为 Agilent Zorbax SB-C18、Rapid Resolution HT
（50 mm×4.6 mm，1.8 μm），流动相为 0.05%甲酸水（A）-乙腈（B），梯度洗脱，体积流量为 0.6 mL/min。结合 LC-Q-TOF-MS
提供的化合物准确相对分子质量和 LC-IT-MS分析获得的化合物多级质谱信息，对当归芍药散化学成分进行结构推测鉴定，
并对化合物的药材来源进行归属。结果 共鉴定了当归芍药散中 30个成分，其中 14个为首次在当归芍药散中发现，包括以
绿原酸（8）和没食子酰蔗糖（5～7）为代表的 6个有机酸及其苷类化合物，以 16-氧化泽泻醇 A 23-乙酸酯（22）为代表的
2个原萜烷型三萜类化合物，以环四（异）亮氨酸（14）为代表的 4个环肽类化合物以及 N-(1-deoxy-D-fructos-1-yl) pyroglutamic
acid（1）和腺苷（3）等。结论 研究结果加深了对当归芍药散化学组成的理解，为其药效物质基础研究及质量控制提供了
一定的理论依据。
关键词：当归芍药散；液相色谱-四级杆-飞行时间质谱；液相色谱-离子阱-质谱；绿原酸；16-氧化泽泻醇 A 23-乙酸酯
中图分类号：R284.1 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2014)08 - 1056 - 07
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.08.004
Analysis on chemical constituents in Danggui-Shaoyao-San by LC-Q-TOF-MS
and LC-IT-MSn
NIU Yan, WANG Shu-fang
Pharmaceutical Informatics Institute, Zhejiang University, Hangzhou 310058, China
Abstract: Objective To study the constituents in Danggui-Shaoyao-San (DSS, a powder prescription with Angelicae Sinensis Radix,
Paeoniae Radix Alba, Atractylodis Macrocephalae Rhizoma, Poria, Alismatis Rhizome, and Chuanxiong Rhizome). Methods To
analyze the 70% ethanol-water extract from DDS by LC-Q-TOF-MS and LC-IT-MS. The analysis was performed on an Agilent Zorbax
SB-C18 column and Rapid Resolution HT column (50 mm × 4.6 mm, 1.8 μm) with gradient elution of 0.05% formic acid
(A)-acetonitrile (B) at the flow rate of 0.6 mL/min. The constituents from DSS were identified according to the relative molecule
weight by LC-Q-TOF-MS and multistage MS informatics by LC-IT-MS. All the peaks were assigned to the corresponding traditional
Chinese medicinal materials. Results Thirty compounds from DDS could be identified, and 14 of them were identified for the first
time in DSS including six organic acids, such as chlorogenic acid (8) and galloylsucrose (5―7); two protostane trierpenoids, such as
16-oxoalisol A 23-acetate (22); four cyclopeptides, such as cyclo tetraleucyl (or isoleucyl) (14) and other types of compounds, such as
N-(1-deoxy-D-fructos-1-yl) pyroglutamic acid (1) and adenosine (3). Conclusion This work investigates the compounds from DSS,
and the results could provide the evidence for the research on active constituents and quality control of DSS.
Key words: Danggui-Shaoyao-San; LC-Q-TOF-MS; LC-IT-MSn; chlorogenic acid; 16-oxoalisol A 23-acetate
当归芍药散出自《金匮要略》“妇人妊娠病脉证
篇”和“妇人杂病脉证并治篇”，用于治疗因肝脾不
和导致的妇人妊娠腹痛和各种腹痛。全方由当归
Angelicae Sinensis Radix 、 白 术 Atractylodis
Macrocephalae Rhizoma、白芍 Paeoniae Radix
Alba、茯苓 Poria、泽泻 Alismatis Rhizome 和川芎
Chuanxiong Rhizome 6味药组成。
目前，国内外对当归芍药散的研究多为临床及
收稿日期：2014-01-18
基金项目：国家重大新药创制科技重大专项（2011ZX09307-002-01）
作者简介：牛 研（1988—），女，硕士，研究方向为方剂化学。Tel: 15167145060 E-mail: niuyan1026@163.com
*通信作者 王书芳 Tel: (0571)88208426 E-mail: wangsf@zju.edu.cn
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药理方面研究[1-4]，而对于该方化学成分的研究主要
为阿魏酸和芍药苷的定量测定[5-7]，Chen 等[8]和尚
玮玮等[9]采用液相色谱-离子阱-质谱（LC-IT-MSn）
法对当归芍药散中化学成分进行定性分析。
随着液质联用技术的发展，液相色谱-四级杆-
飞行时间质谱（LC-Q-TOF-MS）在中药成分分析中
的应用越来越多。LC-Q-TOF-MS 可给出化合物的
准确相对分子质量及二级碎片信息，结合 LC-IT-MS
提供的化合物多级质谱信息，可以更准确地推测未
知化合物的结构。因此，本研究采用 LC-Q-TOF-MS
和 LC-IT-MSn方法，对当归芍药散中的化学成分进
行了结构推测鉴定，共鉴定了 30 个成分，包括 8
个有机酸及其苷、6个单萜、8个三萜、4个环肽、
2个苯肽及 2个含氮化合物。其中 14个化合物为当
归芍药散成分研究文献中未报道的成分，包括
N-(1-deoxy-D-fructos-1-yl) pyroglutamic acid（1）、柠
檬酸（2）、腺苷（3）、没食子酰蔗糖及其同分异构体
（5、6、7）、绿原酸（8）、隐绿原酸（9）、环四（异）
亮氨酸（14）、环五（异）亮氨酸（16）、环六（异）
亮氨酸（17）、环七（异）亮氨酸（19）、16-氧化泽泻
醇A 23-乙酸酯（22）和 16-氧化泽泻醇A 24-乙酸酯
（25）。本研究对当归芍药散药效物质基础研究、质量
控制及其临床用药具有一定的指导意义。
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
UPLC-Q-TOF-MS系统：AcquityTM ultra型高效
液相（美国Waters公司）；Triple TOF 5600+型飞行
时间质谱，配有电喷雾离子源（美国 AB SCIEX公
司）；LC-IT-MS系统：Agilent 1100型高效液相，配
有自动进样器、柱温箱和光电二极管阵列检测器
（PDA）；Finnigan LCQ DECA XPPlus质谱仪（Thermo
Finnigan，美国），配有电喷雾离子源（IT）；Eppendorf
5810R离心机（Eppendorf，German）；Milli-Q（18.2i）
超纯水处理系统（美国Millipore公司）。
无水乙醇（分析纯）购于浙江常青化工公司，
乙腈（色谱纯）购于德国Merck公司，甲酸（色谱
纯）购于（Tedia 公司），试验用水为 Milli-Q 超纯
水，柠檬酸（批号 T20060119）购于国药集团化学
试剂有限公司，没食子酸（批号 F20090707）购于
中国医药集团（上海）化学试剂公司，腺苷（批号
101209）、绿原酸（批号 130116）、隐绿原酸（批号
130405）和 Z-藁本内酯（批号 110825）购于上海融
禾公司，芍药苷（批号 46600）购于阿拉丁试剂（上
海）有限公司，洋川芎内酯A（批号MUST-12071102）
购自成都曼斯特公司。
本实验所采用的当归、川芎、茯苓、白芍、白术
和泽泻 6种药材购于浙江中医药大学饮片有限公司，
经浙江大学药物信息学研究所陈柳蓉副教授鉴定。
1.2 对照品溶液的制备
分别取约 1 mg 腺苷、没食子酸、柠檬酸、绿
原酸、隐绿原酸、芍药苷、洋川芎内酯 A和 Z-藁本
内酯对照品，精密称定，用乙醇溶解，配制至质量
浓度为 1 mg/mL的对照品溶液。
1.3 样品溶液的制备
1.3.1 当归芍药散样品的制备 按《金匮要略》中
当归芍药散的各药材配比称取当归14.0 g、白芍74.4
g、茯苓 18.6 g、白术 18.6 g、泽泻 37.2 g和川芎 37.2
g于 2 L圆底烧瓶中。由于该方剂为散剂，即药材
粉末直接入药，为能更全面提取其中成分，采用如
下方法提取：加 70%乙醇水浸泡过夜后，加热回流
提取 2次，每次 1 h，第 1次加 6倍量 70%乙醇-水
（约 1 200 mL），第 2次加 4倍量 70%乙醇-水（约
800 mL），合并 2次提取液，纱布滤过，取滤液，减
压浓缩至 200 mL，取其中 5 mL浓缩液转移至 12 mL
棕色样品瓶，冷冻干燥。称取干燥后浸膏 10 mg，用
水溶解，配制成质量浓度为 10 mg/mL的样品溶液。
1.3.2 单味药材样品的制备 取当归、川芎、白芍、
泽泻、茯苓和白术各 10.0 g，按“1.3.1”项下方法
制备，得到各单味药材样品溶液。
1.4 液相色谱分析条件
采用 Zorbax SB-C18，Rapid Resolution色谱柱
（50 mm×4.6 mm，1.8 μm）（Agilent，美国）；流动
相：0.05%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）；采用梯度
洗脱：0～35 min，3%～41% B；35～40 min，41%～
100% B；40～50 min，100% B；体积流量：0.6
mL/min；柱温：30 ℃；检测波长为 230、254、280
和 310 nm；进样量 3 μL。
1.5 LC-Q-TOF-MS 分析条件
正/负离子一级质谱（MS）条件：扫描检测，
m/z 100～1 500，干燥气 344.75 kPa，辅助加热气
344.75 kPa，气帘气 206.85 kPa，毛细管温度
600/550 ℃，离子喷雾空载电压 5 500 V/−4 500 V，
去簇电压＋/−100 V，碰撞能量＋/−10 eV。
正/负离子二级质谱（MS2）条件：扫描检测，
m/z 100～1 500，高灵敏度，去簇电压＋/−100 V，
碰撞能量＋/−35 eV，碰撞能量幅度 10.0，离子释放
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延迟 67，离子释放宽度 25。
1.6 LC-IT-MS 分析条件
正/负离子条件：扫描检测，m/z 100～1 500，离
子源电压＋4 kV/−3 kV，毛细管电压＋19 V/−15 V，
套管透镜补偿电压 25 V/−30 V，毛细管温度 350 ℃，
鞘气体积流量 60 L/min，辅助气和吹扫气体积流量
20 L/min。多级质谱分析：碰撞气为高纯氦气，用
dependent scan或 selected reaction monitoring （SRM）
扫描监测模式分析。应用 Thermo Finnigan Xcalibur
1.3工作站对采集数据进行记录和处理。
2 结果与分析
2.1 LC-Q-TOF-MS 和 LC-IT-MSn分析结果
按“1.4”项下色谱条件，采用 LC-Q-TOF-MS
和 LC-IT-MSn 技术对当归芍药散样品溶液进样分
析，正、负总离子流图见图 1。根据化合物准确相
对分子质量、各化合物的碎片信息并参考相关文献
数据及与对照品对照，共鉴定了 30个化合物，具体
结果见表 1。各化合物通过与药材 LC-IT-MSn图谱
对照确定其来源归属。
2.2 有机酸及其苷类
已经鉴定的有机酸类化合物包括柠檬酸（2）、
没食子酸（4）、绿原酸（8）、隐绿原酸（9）和香草
酸（10）。上述化合物在负离子模式下，准分子离子
峰以 [M－H]−形式存在，在多级质谱中主要发生
CO2或H2O分子的中性丢失形成 [M－H－CO2]−或
[M－H－H2O]−碎片离子，通过与对照品对照，确
图 1 当归芍药散的 LC-Q-TOF-MS 的负离子 (A) 和正离子 (B) 总离子流色谱图
Fig. 1 TIC chromatogram of negative (A) and positive (B) of DSS LC-Q-TOF-MS
定 2号峰为柠檬酸（2）、4号峰为没食子酸（4）。
鉴定出的有机酸苷类化合物包括没食子酰蔗糖
及其同分异构体（5～7），在白芍中检测到。5～7 号
峰出峰时间相近，且 LC-Q-TOF-MS分析显示其分子
式相同，推测为 3个同分异构体。以 5号峰为例，在
二级质谱中，该化合物碎片离子中有一系列失去六碳
糖基结构片段而形成的碎片离子，如 m/z 433 [M－
H－60]−、m/z 403 [M－H－90]−、m/z 331 [M－H－
162]−和m/z 313 [M－H－180]−。在三级质谱中，m/z
331再失去一分子葡萄糖，最后形成没食子酸母核。6
和 7号峰裂解规律均与 5号峰类似。在白芍药材中，
曾报道过 3个该类化合物，为 1′-O-没食子酰蔗糖、
6′-O-没食子酰蔗糖和 6-O-没食子酰蔗糖[10]，根据现
有多级质谱信息无法确定苷元与糖链的连接位置，
因此 5、6和 7号峰均暂定为没食子酰蔗糖（5～7）。
8号峰的准分子离子峰为 m/z 353 [M－H]−，在
二级质谱中，该母离子丢失 1 分子葡萄糖形成 m/z
191的碎片离子，然后再依次丢失 1分子H2O和CO2
形成 m/z 173的碎片离子，之后又失去 1分子 CO2
形成 m/z 127 的碎片。所得碎片信息与绿原酸对照
品的碎片信息相同，且保留时间相同，最后确定为
绿原酸（8）。9号峰的裂解途径与 8号峰相似，但
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52
t / min
A
B
1
2 4
5 6 7
8 9 10
11 12
13
15
18 20
3
14
16 17 19
21
22 23
24
25 26
27
28
29
30
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表 1 当归芍药散中鉴定化合物的 LC-Q-TOF-MS 及 LC-IT-MSn 结果
Table 1 LC-Q-TOF-MS and LC-IT-MSn results of identified compounds in DSS
编号 tR / min 化合物 分子式 高分辨质谱（m/z） MS2（相对丰度 / %） MS3（相对丰度 / %） 药材来源
1a 1.332 N-(1-deoxy-D-fructos-
1-yl) pyroglutamic acid
C11H17NO8 290.088 5 [M－H]− 272 (25), 200 (100) 156 (13), 129 (12), 128
(100)
All
2a* 1.401 柠檬酸 C6H8O7 191.020 6 [M－H]− 173 (25), 131 (1), 129 (2),
111 (100), 87 (2)
All
3a* 1.977 腺苷 C10H13N5O4 268.104 6 [M＋H]+ 250 (1), 136 (100) DG, CX,
BZ, FL, BS
4* 2.382 没食子酸 C7H6O5 169.015 2 [M－H]− 169 (65), 125 (100) 125 (56), 81 (100) BS
5a 2.976 没食子酰蔗糖苷 C19H26O15 493.119 9 [M－H]− 433 (1), 403 (57), 331 (33),
313 (100), 283 (29)
283 (24), 241 (8), 223 (24),
169 (100), 125 (13)
BS
6a 3.155 没食子酰蔗糖苷 C19H26O15 493.120 0 [M－H]− 475 (1), 331 (12), 313 (100),
271 (42), 169 (15)
225 (15), 223 (21), 169
(100), 146 (4), 125 (12),
BS
7a 3.329 没食子酰蔗糖苷 C19H26O15 493.120 1 [M－H]− 331 (2), 313 (100), 223 (2),
179 (2), 169 (4)
241 (36), 223 (85), 169
(100), 153 (22),
151 (62)
BS
8a* 7.567 绿原酸 C16H18O9 353.087 8 [M－H]− 191 (100), 179 (5), 173 (2),
135 (3)
191 (23), 173 (71), 171
(21), 127 (96), 111 (55),
93 (65), 87 (26),
85 (100)
BZ, CX, DG
9a,* 8.110 隐绿原酸 C16H18O9 353.087 7 [M－H]− 324 (81), 317 (35), 295 (99),
179 (89), 173 (100)
BZ, CX, DG
10 8.283 香草酸 C23H28O12 167.035 7 [M－H]− 167 (10), 123 (100) DG
11# 10.077 isomaltopaeoniflorin C30H40O18 687.213 2 [M＋H－
HCOOH]−
641 (18), 611 (46), 593 (100),
489 (18), 471 (14),
323 (8), 121 (11)
BS
12# 10.325 芍药内酯苷 C23H28O11 525.162 0 [M＋H－
HCOOH]−
479 (100), 357 (8), 283 (12),
121 (67)
BS
13*# 11.288 芍药苷 C23H28O11 525.161 9 [M＋H－
HCOOH]−
479 (23), 449 (100), 431 (13),
327 (63), 165 (12), 121 (63)
BS
14a 12.645 环四（异）亮氨酸 C24H44N4O4 453.343 5 [M＋H]+ 453 (2), 435 (100), 341 (3), 340
(4), 322 (27), 228 (3), 209 (4)
All
15 14.876 没食子酰芍药苷 C30H32O15 631.168 3 [M－H]− 613 (100), 509 (13), 491 (24),
465 (27), 399 (14), 313 (9),
271 (27)
BS
16a 15.073 环五（异）亮氨酸 C30H55N5O5 566.428 6 [M＋H]+ 566 (14), 548 (100), 547 (2),
453 (5), 435 (39),
322 (13), 209 (2)
DG, CX, FL,
ZX, BZ
17a 16.909 环六（异）亮氨酸 C36H66N6O6 679.512 7 [M＋H]+ 679 (100), 566 (3), 435 (3),
322 (1)
All
18# 17.519 牡丹皮苷 I C23H28O11 525.162 1 [M＋H－
HCOOH]−
479 (100), 357 (10), 283 (13),
121 (67)
BS
19a 18.244 环七（异）亮氨酸 C42H77N7O7 792.596 8 [M＋H]+ 792 (12), 775 (3), 774 (100),
679 (4), 661 (36), 548 (13),
435 (13), 322 (6)
BS, CX, BZ,
FL, ZX
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续表 1
编号 tR / min 化合物 分子式 高分辨质谱（m/z） MS2（相对丰度 / %） MS3（相对丰度 / %） 药材来源
20 18.440 芍药新苷 C23H26O10 507.151 7 [M＋H－
HCOOH]−
461 (100), 431 (3), 339 (87),
283 (5), 179 (2), 177 (13)
BS
21# 30.042 16-氧化泽泻醇 A C30H48O6 505.352 5[M＋H]+ 487 (10), 469 (19), 415 (100),
397 (11), 353 (6)
ZX
22a,# 31.041 16-氧化泽泻醇 A 23-乙
酸酯
C32H50O7 547.363 6 [M＋H]+ 547 (100), 469 (65), 451 (65) ZX
23# 31.770 泽泻醇 C 23-乙酸酯
或其异构体
C32H48O6 529.352 4 [M＋H]+ 511 (32), 451 (100), 433 (57),
397 (23), 381 (12), 353 (8)
ZX
24# 33.360 泽泻醇 C 23-乙酸酯
或其异构体
C32H48O6 529.353 0 [M＋H]+ 511 (67), 451 (55), 433 (100),
397 (50), 353 (15)
ZX
25a# 33.362 16-氧化泽泻醇 A 24-乙
酸酯
C32H50O7 547.363 3 [M＋H]+ 529 (65), 469 (33), 451 (100),
433 (15), 415 (57)
ZX
26* 35.787 洋川芎内酯 A C12H16O2 193.122 3 [M＋H]+ 147 (100) 119 (65), 105 (100), 91
(35), 81 (6), 67 (7)
DG, CX
27# 36.515 泽泻醇 C C30H46O5 487.342 3 [M＋H]+ 469 (11), 451 (28), 397 (100),
353 (10)
ZX
28* 37.915 Z-藁本内酯 C12H14O2 191.106 9 [M＋H]+ 191 (100), 173 (84), 163 (25),
149 (10), 145 (45), 117 (8),
105 (7), 91 (5)
155 (2), 145 (100), 143
(1), 131 (3)
DG, CX
29# 38.599 泽泻醇 B C30H48O4 473.362 9 [M＋H]+ 455 (19), 473 (13), 383 (81),
365 (100), 339 (50),
219 (46), 121 (26)
ZX
30# 39.042 泽泻醇 B 23-乙酸酯 C32H50O5 515.373 5 [M＋H]+ 515 (55), 383 (73), 365 (100),
339 (78)
ZX
*代表与对照品比照鉴定；a为首次在当归芍药散中发现；#为 LC-Q-TOF-MS碎片，二级能量为 (35±10) V；All＝全部，DG＝当归，CX＝川
芎，BZ＝白术，FL＝茯苓，BS＝白芍，ZX＝泽泻
*compared with reference compounds; a identified for the first time in DSS; # LC-Q-TOF-MS fragments, collision energy (35 ± 10) V; DG = Angelicae
Sinensis Radix, CX = Chuanxiong Rhizome, BZ = Atractylodis Macrocephalae Rhizoma, FL = Poria, BS = Paeoniae Radix Alba, ZX = Alismatis Rhizome
其二级质谱中 m/z 173 [M－162－H2O]−的碎片离子
丰度高于 m/z 191 [M－162]−的碎片离子，通过与对
照品对照，确定 9号峰为隐绿原酸（9）。
2.3 蒎烷型单萜苷类
当归芍药散中共鉴定了6个蒎烷型单萜苷类化合
物，包括 isomaltopaeoniflorin（11）、芍药内酯苷（12）、
芍药苷（13）、没食子酰芍药苷（15）和牡丹皮苷 I
（18），是白芍的特征成分。该类化合物在负离子模
式下主要以 [M－H＋HCOOH]− 形式存在，少数以
[M－H]− 形式存在。在二级质谱中，母离子 [M－
H＋HCOOH]− 易失去 1分子苯甲酸（BA）而形成
[M－H－122]− 和m/z 121 [BA－H]− 的特征离子。13
号峰在负离子模式下形成m/z 525 [M－H＋HCOOH]−
的准分子离子峰，m/z 449 为该化合物失去葡萄糖 6
位上的 1 分子 HCHO 形成，接着，该离子再失去 1
分子苯甲酸形成m/z 327碎片离子，之后再继续失去
葡萄糖残基和甲基自由基形成m/z 165碎片离子。最
后通过与对照品比较确定该化合物为芍药苷（13）。
12和 18号峰两化合物分子式相同，为一对同分
异构体，初步推测为芍药内酯苷和牡丹皮苷 I。两化
合物碎片类似，最后与文献对照[8]，推测 12号峰为芍
药内酯苷（12），18号峰为牡丹皮苷 I（18）。
2.4 原萜烷型三萜类
已鉴定的此类化合物共 8 个，包括 16-氧化泽
泻醇 A（21）、16-氧化泽泻醇 A 23-乙酸酯（22）、
泽泻醇 C 23-乙酸酯或其异构体（23、24）、16-氧化
泽泻醇 A 24-乙酸酯（25）、泽泻醇 C（27）、泽泻醇
B（29）和泽泻醇 B 23-乙酸酯（30），是泽泻的主
要成分。泽泻醇类化合物在正离子模式下形成 [M＋
H]+ 的准分子离子峰。在二级质谱中，准分子离子
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峰易失去 1 分子水而形成 [M＋H－H2O]+ 的碎片
离子。另外一条途径，准分子离子通过 C-23和 C-24
之间的重排而断裂 C23-C24形成碎片离子。如 29号
峰在二级质谱中分别失去 1分子和 2分子水得到 m/z
487和m/z 469的离子。而丰度最高的m/z 415峰则是
由 C-23和 C-24之间的重排后失去 C4H10O2形成的，
最后参考文献报道[11]推测该化合物为泽泻醇B（29）。
乙酰化是原萜烷类三萜化合物常见的生物合成
途径。大多数原萜烷类三萜化合物都有其乙酰化衍
生物。而乙酰化经常发生在 23-OH 或 24-OH。16-
氧化泽泻醇 A 23-乙酸酯（22）和 16-氧化泽泻醇 A
24-乙酸酯（25）为 1对同分异构体，在正离子模式下，
这对同分异构体的裂解碎片除 m/z 415 [M＋H－
C6H12O3]+ 外几乎相同，25 号峰 m/z 415 离子丰度为
57%，而 22号峰则无此碎片离子，这是由于 16-氧化
泽泻醇A 24-乙酸酯（25）容易发生 C-23和 C-24之
间的H重排失去C6H12O3生成m/z 415的碎片，而 16-
氧化泽泻醇A 23-乙酸酯（22）则不易失去C6H12O3[11]。
由此推测22号峰为16-氧化泽泻醇A 23-乙酸酯（22），
25号峰为 16-氧化泽泻醇A 24-乙酸酯（25）。
2.5 苯酞类
已鉴定的此类化合物包括洋川芎内酯 A（26）
和 Z-藁本内酯（28），是川芎和当归的主要成分。该
类化合物在二级质谱中易形成丢失水和烷基链的碎
片离子。28号峰在正离子模式下形成m/z 191 [M＋H]+
的准分子离子峰，在二级质谱中它分别失去 1分子
水和 2分子水形成 m/z 173和 m/z 155的碎片离子；
准分子离子 m/z 191分别失去 1分子 CO和烷基链
生成碎片离子 m/z 163和 m/z 149；而 m/z 117、m/z
105和m/z 91等碎片离子则是由m/z 191离子失去 1
分子水和 CO 后再断裂碳链形成的。最后通过与对
照品比较将此化合物确定为 Z-藁本内酯（28）。
2.6 环肽类
已鉴定的此类化合物包括环四（异）亮氨酸（14）、
环五（异）亮氨酸（16）、环六（异）亮氨酸（17）
和环七（异）亮氨酸（19），这类化合物在当归芍药
散各组方药材中均有检测到。其质谱裂解特征为：在
一级质谱中形成 [M＋H]+的准分子离子峰；在二级质
谱中，该准分子离子失去 1 分子水形成 [M＋H－
H2O]+的碎片离子，接着，该碎片离子依次失去亮氨
酸或异亮氨酸的结构单元（相对分子质量为 113）。按
此规律，推测 14、16、17和 20号峰分别为环四（异）
亮氨酸（14）、环五（异）亮氨酸（16）、环六（异）
亮氨酸（17）和环七（异）亮氨酸（20）。
2.7 其他类
1 号峰在负离子模式下的准分子离子峰为 m/z
290 [M－H]−，在二级质谱中，该离子失去糖基结构
片段，形成基峰离子 m/z 200 [M－H－90]−。在三级
质谱中，母离子完全失去糖基碎片，形成 m/z 128
[M－H－162]−的碎片离子。结合 LC-Q-TOF-MS给
出的精确相对分子质量，推测该化合物为 N-(1-
deoxy-D-fructos-1-yl) pyroglutamic acid（1）。
3 号峰在正离子模式下的准分子离子峰为 m/z
268 [M＋H]+。在二级质谱中，该准分子离子峰失去
1分子水形成 m/z 250 [M＋H－H2O]+的离子，而 m/z
136 的离子则是由 m/z 268 失去 1 分子五碳糖形成
的。最后根据精确相对分子质量及与对照品对照，
确定该峰为腺苷（3）。
3 结论
本实验采用LC-Q-TOF-MS和LC-IT-MSn法鉴定
出当归芍药散中 30 个成分，其中 14 个为在当归芍
药散中首次报道。研究结果表明，LC-Q-TOF-MS和
LC-IT-MSn法可以简便、快速地对方剂中化学成分进
行定性研究。本实验结果可以为当归芍药散的药效
物质基础及质量控制研究提供一定的理论依据。
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·书讯·
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