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Screening of anti-inflammatory components in Mangiferae Indicae Semen based on bioactivity-integrated UPLC-Q/TOF analysis

生物活性结合UPLC-Q/TOF分析的芒果核仁中抗炎药效物质筛选研究



全 文 :中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 18期 2015年 9月 ·2743·

生物活性结合 UPLC-Q/TOF分析的芒果核仁中抗炎药效物质筛选研究
聂 妍 1,侯媛媛 1*,李云鹃 2,侯小涛 2,白 钢 1,邓家刚 2
1. 南开大学药学院,天津市分子药物研究重点实验室,天津 300071
2. 广西中医药大学药学院,广西 南宁 530021
摘 要:目的 探究芒果 Mangifera indica核仁的抗炎活性,并筛选出其中具有抗炎作用的药效物质。方法 利用二甲苯诱
导的小鼠耳肿胀模型和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人胚肾细胞 293(HEK-293)炎症模型对芒果核仁提取物的抗炎作
用进行评价,并采用 UPLC-Q/TOF结合核因子-κB(NF-κB)萤光素酶报告基因检测系统进行谱效关系研究,筛选芒果核仁
提取物中具有抗炎活性的药效物质。结果 芒果核仁提取物能显著改善小鼠耳廓的肿胀情况并能显著抑制细胞中 NF-κB 的
表达;经 UPLC-Q/TOF谱效关系分析筛选出 10个具有 NF-κB 抑制活性的化合物为芒果苷和没食子酸鞣质类化合物,后者包
括:没食子酸、1-没食子酰-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-β-D-半乳糖苷、1-没食子酰-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-半乳糖苷、
1,2,3-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖、1,2,3,4-四没食子酰-β-D-葡萄糖、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、六没食子酰葡萄糖。结论 芒
果核仁提取物具有较好的抗炎作用,芒果苷和没食子酸系列衍生物为其提取物中主要的抗炎活性物质。
关键词:芒果核仁;谱效关系;核因子-κB抑制剂;芒果苷;没食子鞣质;抗炎
中图分类号:R284.1 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670 (2015)18 - 2743 - 07
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.18.013
Screening of anti-inflammatory components in Mangiferae Indicae Semen based
on bioactivity-integrated UPLC-Q/TOF analysis
NIE Yan1, HOU Yuan-yuan1, LI Yun-juan2, HOU Xiao-tao2, BAI Gang1, DENG Jia-gang2
1. Tianjin Key Laboratory of Molecular Drug Research, College of Pharmacy, Nankai University, Tianjin 300071, China
2. College of Pharmacy, Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning 530021, China
Abstract: Objective To investigate the anti-inflammatory effects of Mangiferae Indicae Semen (MIS) and to screen its bioactive
components on nuclear factor-κappa B (NF-κB) inhibition. Methods The anti-inflammatory effects of MIS were assessed in the
swelling of mouse ear induced by dimethylbenzene and the HEK293 inflammatory models induced by TNF-α. UPLC-Q/TOF MS
coupled with NF-κB activity luciferase reporter assay system was applied to detect the potential anti-inflammatory components in MIS
extract. Results MIS extract could ameliorate the edema in swelling of mouse ear induced by dimethylbenzene. Ten components were
screened to have the potential NF-κB inhibitory effects based on the bioactivity-integrated UPLC-Q/TOF assay system. MIS could
contribute to the alleviation of inflammation in the swelling of mouse ear and inhibit the expression of NF-κB. Ten potential active
ingredients were found to have anti-inflammatory effects as NF-κB inhibitors, which were mangiferin and gallotannins. The
gallotannins included gallic acid, 1-galloyl-β-D-glucopyranosyl-(1→4)-β-D-galactopyranoside, 1-galloyl-β-D-glucopyranosyl-
(l→6)-β-D-galactopyranoside, 1,2,3-tri-O-galloyl-β-D-glucose, 1,2,3,4-tetragalloyl-β-D-glucose, 1,2,3,4,6-pentagalloylglucose, and
hexagalloylglucose. Conclusion Mangiferin and gallotannins are verified to be the main bioactive compounds in MIS.
Key words: Mangiferae Indicae Semen; spectrum-effect relationship; NF-κB inhibitor; mangiferin; gallotannins; anti-inflammation

芒果 Mangifera indica L. 为漆树科芒果属热带
常绿大乔木,为“热带水果之王”,是热带、亚热带
地区的重要经济作物[1],芒果中主要含有黄酮、甾
体、萜类、苷类和酚类等化合物[2],具有抗炎、抑
菌、抗癌、抗氧化、调节免疫等药理作用[3],具有
较高的药用开发价值。现代药理学研究表明,芒果

收稿日期:2015-05-07
基金项目:广西中药药效研究重点实验室开放课题(14-045-12)
作者简介:聂 妍(1988—),女,硕士在读,研究方向为复方药物与系统生物学。Tel: (022)23504933 E-mail: nyMISle@126.com
*通信作者 侯媛媛,女,博士,副教授,主要从事复方药物与系统生物学研究。Tel: (022)23506930 E-mail: houyy@nankai.edu.cn
·2744· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 18期 2015年 9月

叶及其提取物有抗脂质过氧化、平喘、止咳、祛痰、
镇痛、抗炎的作用[4]。芒果皮具有止咳、化痰、抗
炎的作用[5];芒果核仁具有健脾、止咳、化痰、抗
炎、抑菌的功效[6-7]。但是,其果皮及果核在日常生
产活动中,常常被作为废弃物丢弃或焚烧,造成环
境的污染及资源的浪费。因此,将农作物废弃物“变
废为宝”成为科研人员关注的重点之一。
炎症是机体对各种致炎因素引起的局部损伤所
产生的具有防御意义的应答性反应,是十分常见而
又重要的基本病理过程,可以发生于机体的任何部
位和任何组织,人类的大多数疾病都与炎症过程有
着密切的联系。核因子-κB(NF-κB)是一种重要的
核转录因子,它可以高效诱导多种细胞因子、受体
分子、黏附分子等的基因表达,同时也能调控参与
炎症级联效应的多种酶的基因表达[8]。因此,抑制
NF-κB 的活性可以阻断炎症的关键启始步骤及其次
级炎症反应。
本实验在建立二甲苯诱导的小鼠耳肿胀炎症模
型和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的细胞炎症模
型评价芒果核仁的抗炎活性的基础上,利用超高效
液相色谱-四级杆/飞行时间质谱(UPLC-Q/TOF)
结合 NF-κB 萤光素酶报告基因检测系统筛选芒果
核仁中具有抗炎活性的化学成分,阐释芒果核仁的
抗炎药效物质基础,为进一步研究其抗炎的作用机
制提供思路,同时也为芒果废弃物的再利用提供理
论依据。
1 仪器与材料
超高效液相色谱仪串联四极杆/飞行时间质谱
(Waters Acquity UPLC-Q/TOF Premier),配自动进
样器、柱温箱、PDA检测器、Masslynx 4.1工作站
(美国 Waters 公司);Milli-Q 超纯水仪(美国
Millipore公司);DZF-6020型真空干燥箱(河南予
华仪器有限公司);HF151UV型CO2细胞培养箱(上
海 Heal Force公司);XD-101型倒置显微镜(南京
东海光电子股份有限公司);MIKRO 220R 型高速
冷冻离心机(德国 Hettich公司);AB104-N型电子
天平(瑞士 Mettler Toledo公司);Bio Absorbance
Reader ELX800(美国 Bio-Tek公司);Modulus荧
光检测仪(美国 Turner Designs公司)。
DMEM-高糖培养基(美国 HyClone公司);双
抗(氨苄青霉素和链霉素)、胎牛血清、胰蛋白酶(美
国 Gibco公司);TNF-α(美国 Peprotech公司);地
塞米松(Dex,美国 Sigma公司);PGL4.32质粒和
海肾荧光素酶质粒、细胞裂解液、双荧光素酶报告基
因试剂盒(美国 Promega公司);脂质体 2000转染试
剂(美国 Invitrogen公司);芒果苷(质量分数 95.0%,
批号 130502,武汉宏信康精细化工有限公司);没食
子酸(质量分数 98.5%,批号 E1309071,上海晶纯
生化科技股份有限公司)。色谱纯甲醇、乙腈(美国
Fisher公司);色谱纯甲酸(比利时Acros公司);亮
氨酸-脑啡肽醋酸盐(美国 Sigma-Aldrich 公司);超
纯水由Milli-Q制备。其他所用试剂均为分析纯。
芒果核仁(Semen Mangiferae Indicae,MIS)采
自广西百色国家农业示范基地,经天津药物研究院张
铁军研究员鉴定为芒果Mangifera indica L. 的核仁。
ICR小鼠(雄性,体质量 18~22 g)购自北京
军事医学科学院实验动物中心,许可证号 SCXK-
(军)2007-004XC。人胚肾细胞(HEK293)购自上
海拜力生物技术有限公司。
2 方法
2.1 MIS实验样品的制备
MIS磨成粉,过 100目筛,取 10 g粉末加入 70%
乙醇水溶液 100 mL超声(40 kHz)提取 30 min,提
取液滤过后旋蒸得MIS提取物,于 4 ℃保存,备用。
2.2 UPLC-Q/TOF分析及样品馏份收集
液相条件:Acquity UPLC BEH C18 色谱柱
(Waters,100 mm×2.1 mm,1.7 μm),流动相为乙
腈(A),0.1%甲酸-水(B),体积流量为 0.4 mL/min,
柱温 35 ℃,进样浓度 10 mg/mL,进样量 2 μL,二
元梯度洗脱:0~2 min,2% A;2~4 min,2%~5%
A;4~6 min,5%~10% A;6~11 min,10%~20%
A;11~13 min,20%~23% A;13~13.5 min,23%~
45% A;13.5~15 min,45%~90% A。
质谱条件:采用正、负 2种模式扫描测定,仪
器参数如下:电喷雾离子源(ESI);V模式;毛细
管电压 3.0 kV(正模式),2.5 kV(负模式);锥孔
电压 30 V;离子源温度 100 ℃;脱溶剂气温度
350 ℃;脱溶剂氮气流量 600 L/h;锥孔气流量 50
L/h;采样频率 0.1 s;间隔 0.02 s;质量数扫描范围
m/z: 100~1 200;内参校正液 Lockmass采用亮氨酸-
脑啡肽醋酸盐 LEA(555.293 1 [M+H]+;553.277 5
[M-H]−)。数据采集工作站为MassLynx 4.1。
馏份收集:采用样品分流同时进行,90%用于
馏份制备,10%用于质谱分析,使用 96孔深孔板进
行馏份收集,按照 UPLC分离时间,每隔 30 s收集
1份。40 ℃减压干燥,残渣用 100 μL细胞培养基
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 18期 2015年 9月 ·2745·

溶解后进行抗炎活性分析。
2.3 小鼠耳肿胀实验[9]
雄性 ICR 小鼠随机分组,每组 10只,分别 ig
0.5%羧甲基纤维素(模型组)、Dex(阳性药组)及
不同剂量的MIS提取物或芒果苷、没食子酸(给药
组)。各组均每天 ig给药 1次,连续给药 3 d。末次
给药45 min后,小鼠乙醚麻醉下将100%二甲苯0.02
mL均匀涂在小鼠右耳前后两面,左耳作对照。1.5 h
后将小鼠脱颈处死,沿耳廓基线剪下两耳,用 9 mm
直径打孔器分别在左右耳的同一部位打下圆耳片,
电子天平称质量,以两耳片的质量差作为耳肿胀度,
计算肿胀抑制率。
耳肿胀度=右耳片质量-左耳片质量
耳肿胀抑制率=(模型组耳肿胀度-给药组耳肿胀度)/
模型组耳肿胀度
2.4 MIS对 NF-κB抑制能力的测定[10]
HEK 293细胞培养于 96孔板中,细胞融合至
60%~70%时用转染试剂 PEI将NF-κB荧光素酶报
告基因质粒 pGL4.32(每孔 100 ng)和内参海肾荧
光素酶报告基因质粒 Renilla(每孔 9.6 ng)共转染
入细胞内,转染试剂 PEI(1 mg/mL)与 pGL4.32
的比例为 8∶1,转染 24 h后分别加入用培养基适
当稀释的 Dex 或不同质量浓度的 MIS提取物或收
集的馏分或芒果苷或没食子酸溶液孵育 6 h,再加
入 TNF-α(10 ng/mL)造模 6 h,空白组加入等体
积培养基,经细胞裂解液裂解细胞,用双荧光素酶
报告基因试剂盒分别检测各组细胞 NF-κB 的荧光
值和内参 Renilla 的荧光值。数据以相对荧光比值
表示:相对荧光比值=NF-κB荧光值/内参 Renilla
荧光值。
2.5 数据处理和统计分析方法
采用 SPSS 18.0软件进行数据统计,实验结果以
±x s表示,组间比较采用单因素方差分析(One-way
ANOVA),以 P<0.05为差异有统计学意义。
3 结果
3.1 MIS提取物抗炎的药效学评价
MIS 提取物对小鼠耳肿胀抑制率的结果见图
1-A,MIS提取物低、中、高剂量(生药 0.17、0.50、
1.50 g/kg)组均不同程度地抑制了二甲苯导致的小鼠
耳肿胀(P<0.05、0.01、0.001),且鼠耳肿胀抑制率
与剂量呈正相关;Dex 10 mg/kg对二甲苯诱导的小鼠
耳肿胀具有显著抑制作用(P<0.001);MIS提取物高
剂量组与Dex组作用强度相当,差异无统计学意义。
MIS 提取物在细胞水平上对 NF-κB 的抑制活性
评价结果见图 1-B,TNF-α 刺激的模型组NF-κB 的表
达量与空白组相比显著升高(P<0.001)。与模型组相
比,阳性药Dex(1×10−5 mol/L)组NF-κB 的表达量
显著降低(P<0.01);虽然MIS提取物低剂量组(0.01
mg/mL)与模型组之间无显著性差异,但中剂量(0.10
mg/mL)和高剂量组(1.00 mg/mL)均显著抑制了
NF-κB 的表达(P<0.05、0.01)。说明MIS提取物能
够较好地抑制 TNF-α 刺激后细胞NF-κB 的表达。
3.2 MIS提取物中抗炎活性成分的筛选
为了进一步确认 MIS 中的抗炎活性成分,将
MIS提取物经UPLC分离,再进行细胞水平的NF-κB
抑制实验的谱效分析,比较每个馏份对 NF-κB 的抑
制效果。图 2为MIS提取物的谱效关系图。图中显
示了与UPLC保留时间相对应的馏份对NF-κB的抑
制率,从中得到 10个色谱峰,其中抑制率大于空白
的 3倍为抑制 NF-κB 表达的潜在活性物质。


A-对小鼠耳肿胀的影响 B-对 NF-κB的抑制活性评价;与空白组比较:###P<0.001;与模型组比较:*P<0.05 **P<0.01 ***P<0.001
A-effects on swelling of mouse ear B-effects on NF-κB inhibition; ###P < 0.001 vs blank group; *P < 0.05 **P < 0.01 ***P < 0.001 vs model group
图 1 MIS提取物抗炎药效学评价 ( x±s, n = 6)
Fig. 1 Pharmacodynamic evaluation on anti-inflammation by MIS extract ( x±s, n = 6)

500
400
300
200
100
0
80
60
40
20
0






/%







***
***
**
*
**
*
**
###
模型 Dex 0.17 0.50 1.50
MIS提取物/(g·kg−1)
空白 模型 Dex 0.01 0.10 1.00
MIS提取物/(mg·mL−1)
A B
·2746· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 18期 2015年 9月


A-HPLC-PDA吸收谱图 B-正离子模式 BPI图 C-负离子模式 BPI图 D-NF-κB抑制率
A-HPLC-PDA absorption spectrum chromatogram B-BPI chromatogram in positive ion mode C-BPI chromatogram in negative ion mode D-NF-κB inhibitory rate
图 2 UPLC-Q/TOF结合荧光素酶报告基因检测系统筛选MIS提取物中抑制 NF-κB活性的单体成分
Fig. 2 Screening of NF-κB inhibitors in MIS extract from using UPLC-Q/TOF coupled with luciferase reporter assay system
3.3 抗炎活性成分的鉴定
为鉴定出 MIS 中的抗炎活性成分,使用
UPLC-Q/TOF对细胞实验所筛选出的几个抗炎活性
单体进行二级质谱鉴定。经质谱信息分析和文献比
对可知,活性成分主要分为 2类: 酮(xanthone)
类化合物芒果苷(5)和没食子酸鞣质类化合物(1~
4、6~10),其中包括以没食子酸为母核,糖基为取
代基的化合物没食子酸(1)、1-没食子酰-β-D-吡喃
葡萄糖基-(1→4)-β-D-半乳糖苷(2)、1-没食子酰-
β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)- β-D-半乳糖苷(3)和以
葡萄糖为母核、没食子酰基取代的化合物 1,2,3-三-
O-没食子酰-β-D-葡萄糖(4)、1,2,3,4-四没食子酰-
β-D-葡萄糖(6)、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖(7)、
六没食子酰葡萄糖混合物(8~10)。以 5号峰化合
物为例阐释其质谱解析过程。此化合物紫外光谱的
最大吸收波长为 256、316和 365 nm,这与 酮类
化合物的紫外特征一致;通过一级质谱信息得知,
其负离子模式的分子离子峰 [M-H]− 为 421.075 4,
正离子模式的分子离子峰 [M+H]+ 为 423.094 4。
按照精确质量数推测化学式为 C19H18O11;分析其二
级质谱图可知,负离子模式下出现 301的分子碎片,
推断为 [M-H-H2O-C4H6O3]−;正离子模式下出
现 405和 303的分子碎片,分别与 [M+H-H2O]+
和 [M+H-H2O-C4H6O3]+相一致。上述裂解规律
与文献报道一致[11],因此推断 5号峰化合物为芒果
苷,质谱数据见表 1。以此类推,解析其他活性成
分,质谱解析图见图 3。此外,需要特殊说明的是,
8~10 号峰的质谱数据完全一致,查阅文献可知,
它们可能的结构为六没食子酰葡萄糖,但仅依靠质
谱数据不能确定第 6个半乳糖的连接位点,因此只

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30空白 Dex
馏份号
t/min D
C
B
A
1
2 3 5 6
7
8
9 10
10
1 2
3
5 6
7
8 9
1
2 3
4 5 6
7
8 9 10
100
50
0
N
F-
κB



/%

中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 18期 2015年 9月 ·2747·

表 1 MIS提取物中具有抗炎活性化合物的质谱数据
Table 1 MS/MS data of anti-inflammatory compounds in MIS extract
峰号 tR/min 化合物 m/z (+) MS/MS m/z (−) MS/MS 化学式 文献
1 1.48 没食子酸 171.028 4 171 [M+H]+, 127 [M+H-CO2]+ 169.014 1 169 [M-H]−, 125 [M-H-CO2]−,
107 [M-H-CO2-H2O]−
C7H6O5 12
2 2.63 1-没食子酰-β-D-吡喃葡萄糖
基- (1→4)-β-D-半乳糖苷
477.125 3 477 [M+H-H2O]+, 315 [M+H-
C6H10O5]+
493.121 2 987 [2M-H]−, 493 [M-H]−,
313 [M-H-Glu]−
C19H26O15 13
3 3.22 1-没食子酰-β-D-吡喃葡萄糖
基- (1→6)-β-D-半乳糖苷
477.125 3 477 [M+H-H2O]+, 315 [M+H-Glu]+ 493.121 2 987 [2M-H]−, 493 [M-H]−,
313 [M-H-Glu]−
C19H26O15 13
4 6.15 1,2,3-三-O-没食子酰-β-D葡萄糖 635.081 9 635 [M-H]−, 616 [M-H-H2O]−, 483
[M-H-C7H4O4]−, 465 [M-H-
C7H6O5]−, 169 [C7H6O5-H]−
C27H24O18 12
5 7.51 芒果苷 423.094 4 423 [M+H]+, 405 [M+H-H2O]+,
387 [M+H-2H2O]+, 369 [M+H-
3H2O]+, 351 [M+H-4H2O]+, 303
[M+H-H2O-C4H6O3]+
421.075 4 421 [M-H]−, 301 [M-H-H2O-
C4H6O3]−
C19H18O11 11
6 9.41 1,2,3,4-四没食子酰-β-D-葡萄糖 771.109 3 771 [M+H-H2O]+, 619 [M+H-
C7H6O5]+, 449 [M+H-2C7H6O5]+,
279 [M+H-3C7H6O5]+
787.093 4 787 [M-H]−, 635 [M-H-C7H4O4]−,
617 [M-H-C7H6O5]−, 465 [M-H-
C7H6O5-C7H4O4]−
C34H28O22 14
7 10.70 1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖 923.124 8 923 [M+H-H2O]+, 771 [M+H-
C7H6O5]+, 431 [M+H-3C7H6O5]+
939.113 3 939 [M-H]−, 787 [M-H-C7H4O4]−
769 [M-H-C7H6O5]−, 617 [M-H-
C7H6O5-C7H4O4]−
C41H32O26 14
8~10 11.50~12.20 六没食子酰葡萄糖 1 075.125 1 1 075 [M+H-H2O]+, 923 [M+H-
C7H6O5]+, 771 [M+H-C7H6O5-
C7H4O4]+
1 091.112 7 1 091 [M - H]−, 939 [M - H -
C7H4O4]−, 769 [M-H-C7H6O5-
C7H4O4]−
C48H36O30 14-15

能推测这一出峰时间段的化合物为六没食子酰葡萄
糖混合物。
3.4 代表性成分抗炎活性的验证
为了确证筛选结果的可信性,选取MIS提取物
中代表性的抗炎活性成分进行验证。从上述结果可
以看出,芒果核仁中的活性成分为芒果苷和没食子
酸的衍生物,因此选取芒果苷和没食子酸作为代表
活性成分进行验证,验证实验分为整体动物水平和
细胞水平两部分。
芒果苷和没食子酸对小鼠耳肿胀的抑制作用
见图 4-A。与模型组相比,芒果苷低、中、高剂量
(3、10、30 mg/kg)组均抑制了二甲苯致小鼠耳肿
胀(P<0.05、0.01、0.001),且耳肿胀抑制率与剂
量呈正相关。没食子酸低剂量(3 mg/kg)组呈现轻
微抑制作用(P<0.05),但是中剂量(10 mg/kg)
和高剂量(30 mg/kg)没食子酸均显著抑制了小鼠
耳肿胀(P<0.001)。
芒果苷和没食子酸对 NF-κB 的抑制作用见图
4-B,TNF-α 刺激的模型组 NF-κB 的表达比空白组
明显升高(P<0.001),而与模型组相比,阳性药
Dex(1×10−5 mol/L)组 NF-κB 的表达显著降低
(P<0.001)。芒果苷和没食子酸低剂量组(1×10−7
mol/L)对 NF-κB 的抑制作用不明显,但中剂量
(1×10−6 mol/L)和高剂量组(10−5 mol/L)芒果苷
和没食子酸均显著抑制了 NF-κB 的表达(P<0.05、
0.01)。说明芒果苷和没食子酸在细胞水平上可以很
好地抑制 NF-κB 的表达,且两者的抑制活性相当。
4 讨论
目前国内外针对芒果的药用研究主要集中在芒
果叶和芒果皮上,研究表明它们在抗细菌、抗病毒、
抗辐射、抗氧化及免疫调节[3]等方面均有一定的作
用。但针对芒果核仁的研究较为局限,大多集中在
芒果核仁有效部位的筛选、功能成分的提取层面
上[16],虽有报道表明芒果核仁具有抗炎作用,但是
·2748· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 18期 2015年 9月


图 3 MIS提取物抗炎活性成分质谱解析图
Fig. 3 MS spectra of anti-inflammatory compounds from MIS extract

A-对小鼠耳肿胀的影响 B-对 NF-κB的抑制作用;与对照组比较:###P<0.001;与模型组比较:*P< 0.05 **P < 0.01 ***P < 0.001
A-effects on swelling of mouse ear B-effects on NF-κB inhibition; ###P <0.001 vs control group; *P<0.05 **P<0.01 ***P<0.001 vs model group
图 4 芒果苷和没食子酸抗炎药效学评价 ( x±s, n = 6)
Fig. 4 Anti-inflammatory pharmacodynamic evaluation on mangiferin and gallic acid ( x±s, n = 6)

B A
***
*** *** ***
***
*
**
*
*
* **
**






/%

100
80
60
40
20
0
3 000
2 000
1 000
0






模型 Dex 3 10 30 3 10 30

空白 模型 Dex 1×10−7 1×10−6 1×10−5 1×10−7 1×10−6 1×10−5
芒果苷/(mg·kg−1) 没食子酸/(mg·kg−1) 芒果苷/(mol·L−1) 没食子酸/(mol·L−1)
###

107.029 9
125.027 9
169.014 1
50 75 100 125 150 175 200 225

m/z
芒果苷
303.037 1
351.048 7
369.050 9
387.063 2
405.067 2
405.067 2
0 100 150 200 250 300 350 400 450
m/z
1-没食子酰-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-β-D-半乳糖苷
313.063 5
493.121 2
987.228 4
100 200 300 400 500 600 700 800 900 1 000 1 100
m/z
100 200 300 400 500 600 700 800 900 1 000 1 100
m/z
1,2,3-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖
169.010 1
465.056 2
483.081 5
616.932 9
635.081 9
1,2,3,4-四没食子酰-β-D-葡萄糖
787.093 4
617.077 6
635.072 7 465.079 7
100 200 300 400 500 600 700 800 900 1 000
m/z
1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖
939.113 3
617.086 2
769.103 1
787.105 6
100 200 300 400 500 600 700 800 900 1 000 1 100
m/z
六没食子酰葡萄糖混合物
1 091.112 7
939.111 4
769.101 1
OH
OH
OH
O
OH
O
HO
HO
OH
OH
O
OH
OH
OH
OH
HO
HO
OH
O
O O
OH
HO OH
O O
OH
HO
OH
OH
O
O O
O
OHHO
O
OH
OH
OH
O
HO OH
OH
O
HO
HO OH

O
OHO
O
OH
OHHO
HO OH
OH
O
O
O
O
O
O
HO
HO OH
OH
OH
OH

O
OO
O
OH
OHHO
O
HO
HO
HO
HO OH
OH
O
O
O
O
O
O
HO
HO OH
OH
OH
OH

O
OO
O
OH
OHHO
O
O
HO
HO
HO OH
OH
O
O
O
O
O
O
HO
HO OH
OH
OH
OH
O
HO
HO OH
100 200 300 400 500 600 700 800 900 1 000 1 100 1 200 1 300 1 400
m/z
没食子酸
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 18期 2015年 9月 ·2749·

并未见关于芒果核仁抗炎活性成分筛选的报道。
芒果苷和没食子酸在近期的药理研究中呈现了
良好的抗炎作用,卫智权等[17-18]通过脂多糖(LPS)
诱导大鼠慢性炎症模型表明,芒果苷可以通过下调
白细胞 NF-κB 基因表达抑制 LPS诱导的慢性炎症。
Gong等[19]通过败血症介导的小鼠肺损伤模型表明,
芒果苷可以通过上调血红素氧化酶-1起到抗炎的作
用。Ho等[20]证明没食子酸可以抑制 NF-κB 活性和
下调 PI3K/AKT 信号通路。Couto 等[21]通过角叉菜
胶鼠爪肿胀模型证明没食子酸具有抗炎的作用。没
食子酸鞣质是鞣质中一类重要的化合物具有抗感
染、止血收敛和抑制肠道的蠕动等多种重要的药理
作用[22]。本研究通过小鼠耳肿胀模型和 NF-κB 抑制
实验证明了 MIS 提取物的抗炎效果,并通过
UPLC-Q/TOF结合NF-κB萤光素酶报告基因检测系
统筛选出了以芒果苷和没食子酸鞣质为代表的 10
个抗炎活性成分,这为后续研究芒果核仁的资源合
理利用和开发提供了理论依据。
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