全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 6 期 2015 年 3 月

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香青兰有效成分提取工艺考察及不同产地香青兰中有效成分量的比较
于 宁 1，何承辉 1，黄 伟 2，邢建国 1*，古丽斯坦•阿吾提 1
1. 新疆维吾尔自治区药物研究所，新疆 乌鲁木齐 830004
2. 中国医学科学院 北京协和医学院药物研究所 药物制剂研究室，北京 100050
摘 要：目的 研究香青兰有效成分的提取工艺并比较不同产地香青兰中有效成分的量。方法 采用 HPLC 法测定香青兰
中木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷（I）、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷（II）、迷迭香酸、香叶木素-7-O-葡萄糖醛酸苷（III）、田蓟
苷和刺槐素-7-O-葡萄糖醛酸苷（IV）的量。在单因素试验的基础上，采用正交试验考察提取溶媒、乙醇用量和提取时间对
提取工艺的影响，确定最佳提取工艺。根据最佳提取工艺，比较不同产地香青兰中 I、II、迷迭香酸、III、田蓟苷和 IV 的量。
结果 最佳提取条件为加 30 倍量的 40%乙醇水溶液，提取 1 次，5 h。新疆吉木萨尔产的香青兰中 I、II、迷迭香酸、III、
田蓟苷和 IV 的量较高。结论 该提取工艺合理、稳定、可行；不同产地的香青兰药材中 I、II、迷迭香酸、III、田蓟苷和 IV
的量存在一定的差异。
关键词：香青兰；木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷；芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷；迷迭香酸；香叶木素-7-O-葡萄糖醛酸苷；田蓟
苷；刺槐素-7-O-葡萄糖醛酸苷；正交试验
中图分类号：R284.2 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2015)06 - 0846 - 07
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.06.011
Extraction technology for active constituents in Dracocephali Moldavici Herba and
comparison on contents of Dracocephali Moldavici Herba from various habitats
YU Ning1, HE Cheng-hui1, HUANG Wei2, XING Jian-guo1, Gu-Li-Si-Tan·AWuTi1
1. Xinjiang Institute of Materia Medica, Urumqi 830004, China
2. Department of Pharmaceutics, Institute of Materia Medica, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical
College, Beijing 100050, China
Abstract: Objective To study the extraction technology for the active constituents in Dracocephali Moldavici Herba (the aerial parts
of Dracocephalum moldevica) and to compare their contents Dracocephali Moldavici Herba from various habitats. Methods The
contents of luteolin-7-O-glucuronide (I), apigenin-7-O-glucuronide (II), rosmarinic acid, diosmetin-7-O-glucuronide (III), tilianin, and
acacetin-7-O-glucuronide (IV) in Dracocephali Moldavici Herba were measured using HPLC method. Based on single-factor test, and
the influence of the extracting menstrua, menstruum dosage, and extracting time were investigated using orthogonal design method.
Based on the optimal technology, the contents of I, II, rosmarinic acid, III, tilianin, and IV in Dracocephali Moldavici Herba from
various habitats were compared. Results The optimal conditions for the extracting for one time, each time for 5 h with 50 times of
amount of 40% ethanol. D. moldevica produced in Jimusar, Xinjiang had the higher contents of I, II, rosmarinic acid, III, tilianin, and
acacetin-7-O- glucuronide. Conclusion This extraction technology is reasonable, stable, and feasible. The contents of I, II, rosmarinic
acid, III, tilianin, and IV in Dracocephali Moldavici Herba from different habitats have some differences. The multi-index contents of
I, apigenin-7-O-glucuronide, rosmarinic acid, III, tilianin, and IV could reflect the quality of Dracocephali Moldavici Herba more
comprehensively.
Key words: Dracocephali Moldavici Herba; luteolin-7-O-glucuronide; apigenin-7-O-glucuronide; rosmarinic acid; diosmetin-7-O-
glucuronide; tilianin; acacetin-7-O-glucuronide; orthogonal test



收稿日期：2014-12-10
基金项目：国家科技重大专项“重大新药创制”课题（2012ZX09102201-009）
作者简介：于 宁（1982—），女，山东人，助理研究员，硕士，主要从事中药新药研究。E-mail: ynjy798@163.com
*通信作者 邢建国，男，研究员，硕士生导师，主要从事中药新药研究。E-mail: xjguodd@163.com
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香青兰 Dracocephali Moldavici Herba 为唇形科
（Labiatae）青兰属 Dracocephalum L. 植物香青兰
Dracocephalum moldavica L. 的干燥地上部分[1]，性
质二级干热，有很强的香味，具有补益心脑、活血
化瘀、通路开窍、止痛解毒、利尿止咳之功能，在
维吾尔医学和民间其用于治疗冠心病、血液质旺盛
（高血压）、寒性神经性头疼、寒性感冒、气管炎等
疾病。香青兰生长于海拔 220～1 600 m 的干燥山
地、山谷、河滩多石处，我国资源十分丰富[2]，分
布于新疆、吉林、辽宁、甘肃、青海及黑龙江。其
主要含有黄酮类、三萜类、苯丙素类、甾体类、环
烯醚萜类和多糖类等成分，其中，黄酮类和苯丙素
类成分是其发挥药理作用的主要活性成分[3-4]。黄酮
类成分木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷（I）、芹菜素-
7-O-葡萄糖醛酸苷（II）、香叶木素-7-O-葡萄糖醛酸
苷（III）、刺槐素-7-O-葡萄糖醛酸苷（IV）和田蓟
苷既是香青兰中量较高的成分，也是扩张冠脉、降
低冠脉血管阻力的主要活性成分[5-6]；苯丙素类化合
物迷迭香酸在香青兰中量较高[7-8]，且文献报道其具
有抗血栓、抗血小板凝集、抗炎、抗氧化、抗菌、
抗病毒和免疫调节的作用[9]。目前，关于香青兰多
指标的定量测定文献报道比较少，所以有必要建立
一种多指标的测定方法[10-11]。为了提高香青兰药材
的利用率和判断药材的优劣，本实验以多个有效成
分（I、II、III、IV、田蓟苷和迷迭香酸）的提取率
为指标，考察香青兰的提取工艺，采用 L9(34) 正交
试验对香青兰有效成分的提取工艺进行探讨研究，
从而确定最佳提取工艺，根据最佳提取工艺，对 4
个不同产地的香青兰中 I、II、III、IV、田蓟苷和迷
迭香酸的量进行比较分析，为香青兰原料的选择和
质量检测提供参考。
1 仪器与试药
日本岛津 SPD-10AVP 型高效液相色谱仪，日
本岛津制造所；AB135-S 梅特勒-托利多电子天平，
梅特勒-托利多国际股份有限公司；WP-UP-IV-10 型
Water Purifier 实验室专用超纯水机，四川沃特尔科
技发展有限公司；JM-B2003 电子天平，余姚市纪
铭称重校验设备有限公司；KQ-100 DE 型数控超声
波清洗器，昆山市超声仪器有限公司。
香青兰采自新疆吉木萨尔、于田、墨玉、阜康
4 个产地，经新疆药物研究所何江副研究员鉴定为
唇形科植物香青兰 Dracocephalum moldevica L. 的
干燥地上部分；对照品 I 和 II 购自上海一林生物科
技有限公司（质量分数＞98%）；对照品田蓟苷、III
和 IV 均为实验室自制，其结构通过 1H-NMR 和
13C-NMR 数据与文献报道的数据比对而确定，经
HPLC 归一法测定质量分数均在 98%以上；对照品
迷迭香酸（批号 111871-201001）购自中国食品药
品检定研究院（质量分数以 98.8%计）；乙腈（色谱
纯）；甲酸（分析纯）；双蒸水；其余试剂为分析纯。
2 方法与结果
2.1 指标成分的定量测定
2.1.1 色谱条件 色谱柱为 Shim-pack ODS（250
mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈-0.5%甲酸水
溶液，梯度洗脱：0～30 min，18%乙腈；30～60 min，
18%～30%乙腈；60～75 min，30%乙腈；体积流量
为 1.0 mL/min；检测波长为 330 nm；柱温为 35 ℃；
进样量 10 μL。
2.1.2 对照品溶液的制备 分别精密称取 I、II、迷
迭香酸、III、田蓟苷和 IV 对照品适量，加 70%乙
醇水溶液制成含 I 149.6 μg/mL、II 116.5 μg/mL、迷
迭香酸 207.36 μg/mL、III 139.2 μg/mL、田蓟苷 395
μg/mL、IV 234 μg/mL 的混合对照品储备液。
2.1.3 供试品溶液的制备 精密移取提取液，滤过，
取续滤液作为各提取液的供试品溶液。
2.1.4 线性关系考察 分别精密吸取“2.1.2”项下
的混合对照品储备液 0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 mL 置
10 mL 量瓶中，用 70%乙醇溶液定容至刻度，摇匀，
即得系列对照品溶液。分别吸取 10 μL，按“2.1.1”
项下色谱条件进行分析，记录色谱图，以对照品的
质量浓度为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），绘
制标准曲线，并进行回归计算，得 6 种指标成分的
回归方程、相关系数（r）和线性范围分别为 I：Y＝
14 784 X＋4 201.2，r＝0.999 7，线性范围 7.48～
59.84 μg/mL；II：Y＝14 709 X－156.34，r＝0.999 7，
线性范围 5.825～46.6 μg/mL；迷迭香酸：Y＝36 953
X＋651.62，r＝0.999 6，线性范围 10.368～82.944
μg/mL；III：Y＝12 574 X－2 545.9，r＝0.999 6，线
性范围 6.96～55.68 μg/mL；田蓟苷：Y＝30 882 X－
6 629.5，r＝0.999 5，线性范围 19.75～158 μg/mL；
IV：Y＝5 513.2 X＋2937，r＝0.999 4，线性范围
11.70～93.60 μg/mL。
2.1.5 精密度试验 取含 I 29.92 μg/mL、II 23.3
μg/mL、迷迭香酸 41.472 μg/mL、III 27.84 μg/mL、
田蓟苷 79 μg/mL 和 IV 46.8 μg/mL 的混合对照品溶
液，重复进样 6 次，结果 I、II、迷迭香酸、III、田
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蓟苷和 IV 峰面积的 RSD 分别为 1.22%、0.92%、
0.68%、0.70%、1.07%和 0.85%。
2.1.6 稳定性试验 取同一供试品溶液，室温下放
置，分别于 0、2、4、6、8、12 h 分别进样，每次
进样 10 μL，按“2.1.1”项下色谱条件测定峰面积，
结果 I、II、迷迭香酸、III、田蓟苷和 IV 峰面积的
RSD 分别为 0.81%、0.65%、0.79%、0.89%、1.20%
和 0.91%。
2.1.7 重复性试验 取同一批香青兰药材共 6 份，
每份 1.0 g，依法制备样品，测定各指标成分的峰面
积，并计算 I、II、迷迭香酸、III、田蓟苷和 IV 质
量分数的 RSD 分别为 1.21%、1.05%、0.99%、1.09%、
1.63%和 1.38%。
2.1.8 加样回收率试验 精密量取香青兰药材共 6
份，每份 0.5 g，分别置 100 mL 具塞锥形瓶中，分
别精密加入“2.1.2”混合对照品溶液 7.0 mL，依法
制备样品，测定各供试品溶液中 I、II、迷迭香酸、
III、田蓟苷和 IV 的平均回收率分别为 99.95%、
98.10%、100.47%、101.11%、98.66%、99.01%，
RSD 分别为 1.38%、1.67%、1.62%、1.18%、0.99%、
1.89%。
2.1.9 提取液中指标成分的测定 分别吸取含 I、
II、迷迭香酸、III、田蓟苷和 IV 的混合对照品和供
试品溶液各 10 μL，照“2.1.1”项下色谱条件进行
测定，色谱图见图 1。
2.1.10 药材中指标成分的测定 根据本课题组前




1-木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷 2-洋芹素-7-O-葡萄糖醛酸苷 3-迷迭
香酸 4-香叶木素-7-O-葡萄糖醛酸苷 5-田蓟苷 6-刺槐素-7-O-葡萄
糖醛酸苷
1-luteolin-7-O-glucuronide 2-apigenin-7-O-glucuronide 3-rosmarinic acid
4-diosmetin-7-O-glucuronide 5-tilianin 6-acacetin-7-O-glucuronide
图 1 混合对照品 (A) 和供试品溶液 (B) 的 HPLC 图
Fig. 1 HPLC of mixed reference (A) and extract solution (B)
期研究“香青兰滴丸的药剂学研究”中香青兰药材
的测定方法[12]，称取新疆吉木萨尔县产香青兰药材
1.0 g，精密称定，置 100 mL 具塞锥形瓶中，精密
加入 40%乙醇水溶液 60 mL，称定质量，加热回流
提取 6 h，放冷，再称定质量，用 40%乙醇水溶液
补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供
试品溶液。照“2.1.1”项下色谱条件进行测定，得
本批药材中 I、II、迷迭香酸、III、田蓟苷和 IV 的
质量分数分别为 0.41%、0.08%、0.23%、0.21%、
0.47%、0.36%。
2.1.11 浸出物量的测定 精密移取提取液 50 mL，
置已干燥至恒定质量的蒸发皿中，在水浴上蒸干，
于 105 ℃干燥 3 h，置干燥器中冷却 1 h，迅速精密
称定质量，计算浸出物的量。
2.2 乙醇回流提取工艺
分别称取新疆吉木萨尔县产香青兰，加入一定
量一定体积分数的乙醇水溶液，进行加热回流提取，
得提取液，分别测定提取液中 I、II、迷迭香酸、III、
田蓟苷和 IV 的质量浓度，计算提取率。
提取率＝提取液中指标成分的质量浓度×提取液体积/
药材中指标成分的总质量
2.3 单因素考察试验
2.3.1 提取溶媒考察 分别称取新疆吉木萨尔县产
香青兰 8 份，每份 20 g，分别加 40 倍量水及 10%、
20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%乙醇水
溶液，加热回流提取 2 次，提取时间为 3 h，每次
1.5 h，滤过，合并 2 次滤液，用相应的溶剂定容至
1 000 mL，照“2.1.1”项下色谱条件，测定提取液
中 I、II、迷迭香酸、III、田蓟苷和 IV 的质量浓度，
分别计算其提取率。结果见表 1。由以上实验结果
可知，40%乙醇提取液中 II、迷迭香酸、田蓟苷和
IV 提取率最高，I 和 III 在 40%乙醇提取液中提取率
较高，故采用 40%乙醇水溶液进行后续单因素考察。
同时，20%乙醇水溶液对 I 和 III 的提取率最高，因
此，选择 20%、40%、60%乙醇进行正交试验考察。
2.3.2 提取次数的选择 分别称取新疆吉木萨尔县
产香青兰 4 份，每份 20 g，设定提取次数为 1、2、
3、4 次，共加 40 倍量的 40%乙醇水溶液，加热回
流提取 3 h，提取操作如下：（1 次）香青兰药材 20 g，
加入 40 倍量的 40%乙醇水溶液，加热回流提取 1
次，3 h；滤过，滤液置 1 000 mL 量瓶中，用 40%
乙醇水溶液定容至刻度，药渣弃去；（2 次）香青兰
药材 20 g，先加入 20 倍量的 40%乙醇水溶液，加
1
2 3
4
5
6
1
2
3
4
5
6
A
B
0 10 20 30 40 50 60 70
t/min
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表 1 不同提取溶媒对指标成分提取率的影响
Table 1 Effect of different extracting solvents on extraction
rates of index components
提取率/% 溶媒
I II 迷迭香酸 III 田蓟苷 IV
水 45.90 39.76 47.83 48.82 37.71 42.47
10%乙醇 55.37 43.37 48.70 47.87 38.35 43.01
20%乙醇 79.30 49.67 53.48 67.40 48.25 55.75
30%乙醇 73.62 50.60 55.57 64.24 47.67 44.93
40%乙醇 73.64 71.45 77.96 63.51 52.91 53.78
50%乙醇 76.43 70.94 73.24 61.04 50.12 50.05
60%乙醇 75.00 68.45 74.61 57.82 48.31 48.71
70%乙醇 55.38 57.69 73.77 55.04 47.47 47.95

热回流提取 1 次，提取时间为 1.5 h，滤过，药渣照
上法再提取 1 次，滤过，合并以上 2 次的提取液，
置 1 000 mL 量瓶中，用 40%乙醇水溶液定容至刻
度，药渣弃去；（3 次）香青兰药材 20 g，先加入 15
倍量的 40%乙醇水溶液，提取 1 次，1.0 h，滤过，
药渣照上法再提取 2 次（第 3 次加 10 倍量的 40%
乙醇水溶液，其他操作相同），滤过，合并以上 3
次的提取液置 1 000 mL 量瓶中，用 40%乙醇水溶液
定容至刻度，药渣弃去；（4 次）香青兰药材 20 g，
先加入 10 倍量 40%乙醇水溶液，提取 1 次，提取
时间为 1.0 h，滤过，药渣照上法再提取 3 次（第 3、
4 次提取时间为 0.5 h，其他操作相同），滤过，合并
以上 4 次的提取液置 1 000 mL 量瓶中，用 40%乙醇
水溶液定容至刻度，药渣弃去。
照“2.1.1”项色谱条件，测定以上 4 份提取液
中 I、II、迷迭香酸、III、田蓟苷和 IV 的质量浓度，
分别计算其提取率，结果见表 2。由以上实验结果
可知，在共加入 40 倍量的 40%乙醇水溶液，加热
回流提取 3 h 的前提下，考察提取次数（1、2、3、
4 次）对 6 指标成分提取率的影响，本实验重复 3
表 2 不同提取次数对指标成分提取率的影响 (n = 3)
Table 2 Effect of different extracting times on extraction
rates of index components (n = 3)
提取率/% 次数/次
I II 迷迭香酸 III 田蓟苷 IV
1 61.89 72.31 89.13 92.42 78.60 66.30
2 55.34 71.13 85.22 69.19 63.98 53.97
3 47.09 56.60 84.78 68.25 53.18 56.44
4 40.78 50.62 81.74 63.98 51.69 50.96
次，结果均为 1 次提取率较高，因此，确定提取 1
次，进行后续实验。
2.3.3 溶媒倍量的考察 分别称取新疆吉木萨尔县
产香青兰 9 份，每份 20 g，分别加入 20、25、30、
35、40、45、50、55、60 倍量 40%乙醇水溶液，加
热回流提取 1 次，提取时间为 3 h，滤液滤过置 1 000
mL 量瓶中，用 40%乙醇水溶液定容至刻度，照
“2.1.1”项下色谱条件测定提取液中 I、II、迷迭香
酸、III、田蓟苷和 IV 的质量浓度，分别计算其提
取率。结果见表 3。由以上实验结果可知，当 40%
乙醇水溶液用量为 40 倍时，各指标成分的提取率均
能达到 60%以上，且 40 倍时各指标成分的提取率
占 60 倍量提取率的 90%以上，因此，采用 40 倍量
40%乙醇溶液，进行后续单因素考察，且 50 倍时各
指标成分的提取率占 60 倍量提取率的 95%以上，
因此，选择 30、40、50 倍进行正交试验。
表 3 不同溶媒倍量对指标成分提取率的影响
Table 3 Effect of different ethanol volumes on extraction
rates of index components
提取率/% 倍量/倍
I II 迷迭香酸 III 田蓟苷 IV
20 37.62 56.63 72.61 58.77 53.18 54.79
25 40.05 57.83 77.83 63.98 63.35 53.70
30 56.31 66.27 83.70 69.67 68.22 58.90
35 57.04 68.67 83.48 70.62 68.86 59.45
40 63.59 71.08 84.78 84.83 70.13 60.55
45 64.53 70.84 88.26 83.89 71.82 61.92
50 68.45 75.49 89.13 85.31 73.31 65.48
55 67.72 75.90 89.57 84.83 73.73 65.34
60 68.69 76.51 90.00 85.31 75.42 67.95

2.3.4 提取时间的考察 分别称取新疆吉木萨尔县
产香青兰 5 份，每份 20 g，加入 40 倍量 40%乙醇
水溶液，加热回流提取 1 次，每次提取时间分别为
2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 h，滤液滤过置 1 000 mL 量
瓶中，用 40%乙醇水溶液定容至刻度，照“2.1.1”
项下色谱条件测定提取液中 I、II、迷迭香酸、III、
田蓟苷和 IV 的质量浓度，分别计算其提取率。结
果见表 4。由结果可知，6 指标成分的提取率随提取
时间的增长而增大，II、迷迭香酸、III、田蓟苷在
提取 5.0 h 与 6.0 h 的提取率接近，且 6 指标成分在
提取 4.0 h 的提取率均占 6.0 h 提取率的 83%以上，
因此，选择 4.0、5.0、6.0 h 进行正交试验。
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表 4 不同提取时间对指标成分提取率的影响
Table 4 Effect of different extracting time on extraction
rates of index components
提取率/% 时间/h
I II 迷迭香酸 III 田蓟苷 IV
2 54.61 61.41 71.74 78.20 51.06 41.64
3 60.19 68.73 80.00 83.89 77.12 64.93
4 81.07 75.90 83.04 84.36 82.84 67.40
5 92.72 89.22 84.69 84.83 96.61 74.79
6 93.20 90.40 84.78 85.78 97.88 75.34

2.4 正交试验优化提取工艺
根据以上单因素试验结果，提取次数为 1 次时，
提取液中 6 指标成分的提取率均最高，因此，固定
提取次数为 1 次，采用正交试验设计，选取乙醇体
积分数（A）、乙醇倍数（B）、提取时间（C）3 个
因素，设计每个因素选取 3 个水平，因素水平表见
表 5。以 I、II、迷迭香酸、III、田蓟苷和 IV 的提
取率和浸出物得率为评价指标，采用 L9(34) 正交试
验表安排试验，选择综合加权评分法对试验结果进
行方差分析。文献报道迷迭香酸是丹参等中药的有
效活性成分，具有明确的抗血栓和抗血小板凝集，
对心血管系统具有明显保护作用；同时，本课题组
目前已经进行了 I、II、III、田蓟苷和 IV 这 5 个成
分对冠心病作用的药效学试验，其中 I、II、III 和
IV 均有不同程度的抑制血小板聚集的作用，且 I、
III、IV 抑制血小板聚集的作用较明显；田蓟苷对大
鼠心肌缺血再灌注损伤有明显的保护作用。因此，
设定满分为 100 分，6 个化合物的权重系数分别为
15、10、20、15、15、15，浸出物得率权重系数为
10，在此基础上进行加权评分。取新疆吉木萨尔县
产香青兰 20 g，按照 L9(34) 正交试验表安排进行试
验，每个样品提取完毕，滤过，合并滤液，用相应
的溶剂定容至 1 000 mL，照“2.1.1”项下色谱条件，
测定提取液中 I、II、迷迭香酸、III、田蓟苷和 IV
的质量浓度，分别计算其提取率。浸出物得率和各
指标成分提取率结果见表 5，正交试验结果见表 5。
综合评分＝I 提取率/I 最大提取率×15＋II 提取率/II 最
大提取率×10＋迷迭香酸提取率/迷迭香酸最大提取率×20＋
III 提取率/III 最大提取率×15＋田蓟苷提取率/田蓟苷最大
提取率×15＋IV 提取率/IV 最大提取率×15＋浸膏物得率/
最大浸膏物得率×10
由直观分析可知，影响提取效果的因素为 A＞
C＞B，以乙醇体积分数影响最大。每个因素 3 个水
平之间的趋势为 A2＞A3＞A1，B3＞B2＞B1，C3＞
C2＞C1。经方差分析结果（表 6）可知，A 和 C 因
素对指标成分的提取效果有显著性影响，B 因素对
指标成分的提取效果无显著性影响，因此从大工业
生产和降低成本、节省工时等方面综合考虑，确定
最佳工艺为 A2B1C3，即 30 倍量 40%乙醇水溶液，
提取 1 次 5 h。
表 5 正交试验设计与结果
Table 5 Design and results of orthogonal test
提取率/%
试验号 A/% B/倍 C/h D (误差)
I II 迷迭香酸 III 田蓟苷 IV
浸出物/% 综合评分
1 20 (1) 30 (1) 3 (1) (1) 61.65 53.01 57.41 65.66 54.87 51.23 24.31 65.26
2 20 (1) 40 (2) 4 (2) (2) 67.72 62.65 63.51 72.22 72.46 60.82 25.40 75.05
3 20 (1) 50 (3) 5 (3) (3) 71.60 71.08 68.30 77.78 85.81 64.38 25.93 81.58
4 40 (2) 30 (1) 4 (2) (3) 92.72 84.34 81.72 79.80 80.30 66.58 20.31 86.49
5 40 (2) 40 (2) 5 (3) (1) 91.26 86.75 80.93 88.38 94.70 74.25 21.22 93.12
6 40 (2) 50 (3) 3 (1) (2) 88.11 84.34 81.75 84.34 75.85 58.90 20.36 86.55
7 60 (3) 30 (1) 5 (3) (2) 69.66 85.54 87.82 78.28 84.96 62.47 18.99 82.26
8 60 (3) 40 (2) 3 (1) (3) 66.02 66.27 93.00 79.80 77.97 92.33 17.55 80.15
9 60 (3) 50 (3) 4 (2) (1) 81.55 79.52 94.81 84.34 91.31 54.52 19.20 84.99
K1 221.89 234.01 231.96 243.37
K2 266.16 248.32 246.53 243.86
K3 247.40 253.12 256.96 248.22
R 44.27 19.11 25.00 4.85
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 6 期 2015 年 3 月

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2.5 验证试验
为验证上述结果的准确性，保证提取工艺的合
理可行，按上述己确定最佳工艺条件，分别取 3 个
批次新疆吉木萨尔县产香青兰药材各 20 g，对优选
的最佳工艺进行验证，照“2.1.1”项下色谱条件测
定提取液中 I、II、迷迭香酸、III、田蓟苷和 IV 的
质量浓度，分别计算其提取率。结果见表 7。结果
表明，该工艺稳定、合理、可靠，可为工业生产提
供理论依据。
表 6 方差分析
Table 6 Analysis of variance
误差来源 偏差平方和 自由度 F 值 显著性
A 329.170 2 69.270 P＜0.05
B 65.890 2 13.866
C 105.119 2 22.121 P＜0.05
D (误差) 4.752 2
F0.05(2, 2) = 19.0 F0.01(2, 2) = 99.0

表 7 提取工艺验证试验
Table 7 Test of varification in extracting technology
批次
提取率/%
浸出物/%
I II 迷迭香酸 III 田蓟苷 IV
1 90.93 87.61 83.99 84.50 89.86 75.83 21.56
2 91.11 86.98 84.05 86.05 90.37 74.91 20.77
3 91.66 87.95 83.69 85.16 89.95 75.09 21.36

2.6 新疆不同产地香青兰有效成分的测定
分别称取吉木萨尔、于田、墨玉、阜康产的香
青兰药材各 20 g，按照“2.4”项确定的提取工艺进
行提取，照“2.1.1”项下色谱条件测定提取液中 I、
II、迷迭香酸、III、田蓟苷和 IV 的量。结果见表 8。
由表 8 的测定结果可以看出，不同产地香青兰药材
中 I、II、迷迭香酸、III、田蓟苷和 IV 的量差异较
大。吉木萨尔产的香青兰药材中 6 种指标成分的量
最高，墨玉产的香青兰药材中 I、II、田蓟苷和 IV
的量最低，于田产的香青兰药材中迷迭香酸、III 的
量最低。同时，吉木萨尔产香青兰药材各指标成分
提取率均到达 85%以上，这进一步验证了优选的最
佳提取工艺的稳定性和可行性。
3 讨论
首先采用单因素试验考察乙醇体积分数、加醇
倍量、提取时间和提取次数 4 个因素对 6 个指标成
分提取率的影响，结果，在总的提取时间为 3 h 的
前提下，考察提取次数对 6 指标成分提取率的影响
表 8 不同产地香青兰中指标成分的测定结果
Table 8 Determination of index components in aerial parts
of D. moldavic from different habitats
产地
质量分数/%
I II 迷迭香酸 III 田蓟苷 IV
吉木萨尔 0.38 0.07 0.22 0.18 0.44 0.32
于田 0.27 0.02 0.14 0.08 0.25 0.16
墨玉 0.15 0.02 0.15 0.09 0.21 0.14
阜康 0.31 0.06 0.19 0.16 0.40 0.29

时，6 个指标成分提取率，随着提取次数的增加而
降低，重复 3 次试验的结果均是提取 1 次时，6 个
指标成分提取率最高，因此，固定提取次数为 1 次。
再采用正交试验对其他影响提取工艺的因素进行优
化，结果乙醇体积分数有显著性影响，提取时间也
有一定的影响，从工业生产和节能降耗等方面考虑，
以 A2B1C3 组合为佳，即 40%乙醇水溶液，加 30 倍
量，提取 1 次，提取 5 h。
据现有文献表明[10-13]，香青兰提取都是以香青
兰中单个成分或 2 个成分作为考察指标，本实验以
香青兰药材中多个活性成分和浸出物作为指标，筛
选提取工艺，有利于兼顾各指标的协同效应，符合
中药多成分多靶点起效的特点，较单一指标筛选更
加科学、合理，而且操作方法简便，结果容易统计，
且优化后的提取工艺结果稳定可靠，可为进一步开
发利用提供重要依据。
根据文献报道[10-14]比较了甲醇-磷酸水溶液、乙
腈-甲酸水溶液流动相系统的洗脱情况，发现以甲
醇-磷酸水溶液作为流动相时，田蓟苷和 IV 都不能
实现基线分离，以乙腈-甲酸水溶液作为流动相，各
指标成分的分离较好，故选择乙腈-甲酸水溶液作为
流动相，为了使 6 个指标成分在较短的时间内出峰，
选择乙腈-甲酸水溶液梯度洗脱。
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