全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 2 期 2011 年 2 月 • 279 •
HPLC 法测定独一味根中环烯醚萜苷和苯乙醇苷
潘 正 1，高运玲 1，张 涛 2，邓 杰 2
1. 重庆邮电大学生物信息学院，重庆 400065
2. 重庆医药工业研究院有限责任公司，重庆 400061
摘 要：目的 建立 HPLC 法，同时测定独一味根中 4 种环烯醚萜苷胡麻属苷、山栀苷甲酯、7,8-dehydropenstemoside、
8-O-乙酰山栀苷甲酯和 2 种苯乙醇苷连翘酯苷、毛蕊花糖苷。方法 采用高效液相色谱法，Waters Symmetry 柱（100 mm×
3.5 mm，3.5 μm），柱温 25 ℃，流动相为甲醇-水，梯度洗脱；体积流量 1.0 mL/min，检测波长 235、332 nm。结果 胡麻
属苷在 0.236～1.410 μg、山栀苷甲酯在 0.440～2.640 μg、7,8-dehydropenstemoside 在 0.094～0.564 μg、8-O-乙酰山栀苷甲酯
在 0.750～4.500 μg、连翘酯苷在 0.698～4.180 μg、毛蕊花糖苷在 0.455～2.730 μg 线性关系良好，回收率均在 96.75%～
103.97%，RSD 均小于 2%。结论 此方法同时测定了独一味根中 6 种化学成分，方法分离度好，快速，简便，结果稳定。
关键词：独一味根；环稀醚萜苷；胡麻属苷；苯乙醇苷；连翘酯苷；毛蕊花糖苷
中图分类号：R286.02 文献标志码：B 文章编号：0253 - 2670(2011)02 - 0279 - 03
HPLC determination of iridoid glycosides and phenylethanoid glycosides in roots
of Lamiophlomis rotata
PAN Zheng1, GAO Yun-ling1, ZHANG Tao2, DENG Jie2
1. College of Bio-Information, Chongqing University of Posts and Telecommunications, Chongqing 400065, China
2. Chongqing Pharmaceutical Research Institute Co., Ltd., Chongqing 400061, China
Key words: the roots of Lamiophlomis rotate (Benth.) Kudo; iridoid glycosides; sesamoside; phenylpropanoid glycosides;
forsythoside B; verbascoside

独一味为唇形科植物独一味 Lamiophlomis
rotata (Benth.) Kudo 的干燥地上部分[1-2]。《中国药
典》2010 年版一部收载以山栀苷甲酯和 8-O-乙酰
山栀苷甲酯为对照，HPLC 法测定了独一味及其
胶囊。独一味中主要含有环烯醚萜苷类和苯乙醇
苷类成分 [3-4]，其中环烯醚萜苷类具有很好的止
血、促凝血作用，是止血活性成分[5]；苯乙醇苷
类成分具有抗炎、抗氧化活性 [6-7]。本实验采用
HPLC-梯度洗脱法，测定独一味根中 4 种环烯醚
萜苷胡麻属苷、山栀苷甲酯、7,8-去氢钓钟柳苷
（7, 8-dehydropenstemoside）[8]、8-O-乙酰山栀苷
甲酯和 2 种苯乙醇苷连翘酯苷、毛蕊花糖苷，为
更好地保证药材质量提供了有益的参考。
1 仪器与材料
Waters1525 高效液相液谱仪，2996PDA 检测
器，717 Sampler 自动进样器，MILLIQ 纯水机，Buchi
旋转蒸发仪，Sartorius CP224S 电子天平。
独一味的根由市场购买，经重庆邮电大学生物
信息学院刘毅副教授鉴定为唇形科植物独一味
Lamiophlomis rotata (Benth.) Kudo 的干燥根；胡麻
属苷、山栀苷甲酯、7, 8-dehydropenstemoside、8-O-
乙酰山栀苷甲酯、连翘酯苷、毛蕊花糖苷对照品均
为本实验室自制，经 HPLC 面积归一化法计算质量
分数分别为 99.87%、99.01%、98.25%、98.63%、
98.06%、98.12%，UV、NMR 光谱测试确认其结构；
甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱为 Waters Symmetry 柱（100 mm×3.5
mm，3.5 μm），柱温 25 ℃，流动相为甲醇（A）-
水（B），梯度洗脱（0～8 min，12%～15% A；8～
11 min，15%～27% A；11～15 min，27% A；15～

收稿日期：2010-06-10
基金项目：重庆市教委科学技术研究基金资助项目（KJ080504）
作者简介：潘 正（1976—），男，河南临颍人，讲师，研究方向为中药成分的分离纯化及质量控制。
Tel: (023)62461884 E-mail: panzhengbusiness@yahoo.com.cn
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18 min，27%～40% A；18～25 min，40%～48% A；
25～27 min，60%甲醇）；体积流量 1.0 mL/min，检
测波长 235、332 nm。
2.2 系统适应性及专属性试验
分别取对照品溶液、供试品溶液各 5 μL 进样，
记录色谱图见图 1。以胡麻属苷计，理论塔板数大
于 1 500，两峰的分离度≥1.5。
1
2
3
4
5 6

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2
3
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5 6


1-胡麻属苷 2-山栀苷甲酯 3- 7, 8-dehydropenstemoside
4- 8-O-乙酰山栀苷甲酯 5-连翘酯苷 6-毛蕊花糖苷
1- sesamoside 2- shanzhiside methyl methyl ester
3-7,8-dehydropenstemoside 4- 8-O-acetylshanzhiside methyl ester
5- forsythoside B 6- verbascoside
图 1 对照品（A）和独一味根（B）的 HPLC 图谱
Fig. 1 HPLC chromatograms of reference substances (A)
and roots of L. rotata sample (B)
2.3 标准曲线的制备
精密称取经五氧化二磷减压干燥24 h的胡麻属
苷、山栀苷甲酯、7, 8-dehydropenstemoside、8-O-
乙酰山栀苷甲酯、连翘酯苷、毛蕊花糖苷对照品适
量，加甲醇制成质量浓度分别为 0.472、0.880、0.188、
1.50、1.395、0.910 mg/mL 的混合对照品溶液。
精密量取上述对照品溶液 0.5、1.0、1.5、2.0、
2.5、3.0 mL，分别置 5.0 mL 量瓶中，用甲醇稀释
至刻度，摇匀，即得。分别进样 5 μL，以峰面积为
纵坐标，进样量为横坐标进行线性回归，得各成分
回归方程，见表 1。由于系统误差，标准曲线未过
原点，所以采用外标两点法进行测定。
2.4 供试品溶液的制备
独一味根研细，过 60目筛，精密称取细粉 0.5 g，
置 25 mL 具塞锥形瓶中，加 70%甲醇 25 mL，称定
质量，超声处理 20 min，冷却，用甲醇补充损失的
质量，滤过，精密吸取续滤液 1.0 mL，置 5.0 mL
量瓶中，70%甲醇定容，摇匀，用 0.22 μm 微孔滤
膜滤过，即得。
2.5 精密度试验
取供试品溶液（批号 20090226），连续进样 6
次，每次 10 μL，记录峰面积，计算质量分数，结
果胡麻属苷、山栀苷甲酯、7, 8-dehydropenstemoside、
8-O-乙酰山栀苷甲酯、连翘酯苷、毛蕊花糖苷质量
分数的 RSD 分别为 1.07%、1.87%、1.94%、1.42%、
1.84%、1.73%。
2.6 稳定性试验
取供试品溶液（批号 20090226）于 0、2、4、6、
8、10 h 进样分析，每次 10 μL，记录峰面积，计算
质量分数，结果胡麻属苷、山栀苷甲酯、7, 8-
dehydropenstemoside、8-O-乙酰山栀苷甲酯、连翘
酯苷、毛蕊花糖苷质量分数的 RSD 分别为 1.08%、
1.75%、1.82%、1.63%、1.14%、1.48%。结果表明
供试品溶液中活性成分在 10 h 内稳定。
2.7 重现性试验
取同一批样品（批号 20090226）6 份，制备供试
品溶液，进样，测定峰面积，计算质量分数，结果胡麻
属苷、山栀苷甲酯、7, 8-dehydropenstemoside、8-O-乙
酰山栀苷甲酯、连翘酯苷、毛蕊花糖苷质量分数的
RSD 分别为1.47%、1.78%、1.92%，1.84%、1.43%、1.15%。
表 1 各成分的回归方程
Table 1 Regression equations of components
成分 回归方程 r 线性范围/μg
胡麻属苷 Y＝−1.53×104＋1.19×106 X 0.999 8 0.236～1.410
山栀苷甲酯 Y＝6.20×103＋1.27×106 X 0.999 5 0.440～2.640
7, 8-dehydropenstemoside Y＝−8.56×103＋1.06×106 X 0.999 5 0.094～0.564
8-O-乙酰山栀苷甲酯 Y＝−7.37×104＋1.41×106 X 0.999 6 0.750～4.500
连翘酯苷 Y＝−9.46×104＋6.12×105 X 0.999 5 0.698～4.180
毛蕊花糖苷 Y＝−7.31×104＋7.67×105 X 0.999 7 0.455～2.730
0 6 12 18 24 30
t/min
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2.8 加样回收率试验
精密吸取独一味样品（批号 20090226），6 份，
分别精密加入混合对照品溶液 1.0 mL，制备供试品
溶液，进样 5.0 μL，测定峰面积，计算回收率，结
果胡麻属苷、山栀苷甲酯、7, 8-dehydropenstemoside、
8-O-乙酰山栀苷甲酯、连翘酯苷、毛蕊花糖苷的平
均回收率分别为 96.75%、103.21%、103.77%、
99.85%、103.97%、97.61%，RSD 分别为 1.86%、
1.77%、1.98%、1.59%、1.73%、1.55%。
2.9 样品测定
取独一味样品，制备供试品溶液，分别精密吸
取 10 μL，注入液相色谱仪，测定峰面积积分值，用
外标法测定样品中环烯醚萜苷和苯乙醇苷，结果见
表 2。
表 2 独一味根中胡麻属苷、山栀苷甲酯、7, 8-dehydropenstemoside、8-O-乙酰山栀苷甲酯、
连翘酯苷、毛蕊花糖苷的测定（n＝3）
Table 2 Determination of sesamoside, shanzhiside methyl ester, 7, 8-dehydropenstemoside, 8-O-acetylshanzhiside
methyl ester, forsythoside B, and verbascoside in roots of L. rotate (n＝3)
质量分数/(mg·g−1) 批号
胡麻属苷 山栀苷甲酯 7,8-dehydropenstemoside 8-O-乙酰山栀苷甲酯 连翘酯苷 毛蕊花糖苷
20090201 7.908 3.512 – 3.610 13.87 7.258
20090226 4.302 2.330 0.151 1.325 14.21 6.740
20090305 6.389 2.818 0.368 1.157 19.17 8.023

3 讨论
研究表明独一味总环烯醚萜苷类成分具有很好
的止血、促凝血作用，是其中的止血活性成分，李
茂星等[9]采用 UV 法对独一味药材中总环烯醚萜苷
类进行了测定，结果显示药材中总环烯醚萜苷类量
最高，可达 12.5%。刘婕等[10]采用 HPLC 法测定了
独一味中苯乙醇苷类成分类叶升麻苷。张凤[11]通过
HPLC 法测定了不同产地的独一味中连翘酯苷和毛
蕊花糖苷。在参考上述研究的基础上，本实验采用
HPLC法对独一味根中的4个环稀醚萜苷和2个苯乙
醇苷类进行测定，对独一味药材的整体质量评价具
有更切实际的指导意义。
考察了乙腈-水、乙腈-0.4%磷酸水、甲醇-水、
甲醇-0.4%磷酸水 4 种流动相，并尝试了这 4 种流动
相的多种线性梯度洗脱，结果表明甲醇-水系统最
佳，并进行了梯度洗脱条件的优化。采用该系统得
到的各个色谱峰的峰形和分离度都较好，基线稳定。
因此选用该系统为独一味根测定的流动相。
参考文献
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