全 文 ：要物质之一,也是 DNA 合成中不可缺少的小分子
巯基化合物,具有消除氧自由基、维持细胞内正常的
氧化还原环境和蛋白质的结构与功能等多方面的作
用,广泛存在于真核细胞中, 影响 GSH 合成的因素
主要包括半胱氨酸 ( Cy steine, Cys) 的供给和合成
限速酶谷氨酰半胱氨酸合成酶 ( glutamylcysteine
synthetase, GCS) 的活性。辐射的直接效应是引起
细胞中氧自由基的增加, 损伤细胞核及膜成分。
GCS 转录增加, GSH 水平升高修复氧化损伤是辐
射应激反应的一个组成部分[ 7]。实验结果显示银杏
叶提取物能不同程度提高实验小鼠的 GSH 活性,
降低辐射对实验小鼠的损害。
以上几个方面实验结果均表明银杏叶提取物对
辐射损伤的实验小鼠具有较强保护作用, 其作用机
制可能与银杏叶提取物抗氧化作用以及免疫影响有
关,但其他作用机制以及银杏叶提取物中银杏内酯
的相关作用正在进一步深入研究。
参考文献:
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注射用夏天无总碱对沙鼠全脑缺血再灌注损伤的影响
姚丽梅, 段 启*
(广东食品药品职业学院,广东 广州 510520)
摘 要: 目的 观察注射用夏天无总碱对沙鼠全脑缺血再灌注损伤的影响。方法 建立沙鼠全脑缺血再灌注损伤
模型,观察注射用夏天无总碱对沙鼠脑卒中指数、脑指数、脑组织含水量及脑组织病理变化的影响。结果 注射用
夏天无总碱高、中剂量均能显著降低沙鼠全脑缺血再灌注损伤脑卒中指数、脑组织含水量, 减轻脑组织病变程度,
但对脑指数无明显影响。结论 注射用夏天无总碱对沙鼠全脑缺血再灌注损伤具有治疗作用。
关键词:注射用夏天无总碱; 脑缺血; 再灌注; 沙鼠
中图分类号: R285 5 文献标识码: A 文章编号: 02532670( 2010) 08134203
夏天无为罂粟科植物伏生紫堇 Cor ydal i s de
cumbens ( T hunb. ) Per s. 的干燥块茎,味苦、微辛,
性温,归肝经,具有活血通络、行气止痛的功效,用于
中风偏瘫、跌打损伤、风湿性关节炎、坐骨神经痛。
夏天无的主要活性成分为生物碱 [ 1] , 已有研究表
明[ 26] ,夏天无总碱对大鼠实验性脑缺血具有保护作
用;可抑制大鼠实验性脑血栓形成,减轻脑栓塞引起
的伊文思蓝染和脑水肿; 对小鼠脑缺血损伤有保护
作用,可降低脑组织内乙酰胆碱酯酶活性,保护神经
元、抗神经元凋亡。注射用夏天无总碱是由从夏天
无中提取的总生物碱制成的冻干粉针剂, 可显著降
低家兔全血黏度、红细胞压积和红细胞聚集指数,抑
制二磷酸腺苷、花生四烯酸和胶原诱导的血小板聚
集, 具有改善家兔血液流变性、活血化瘀的作用[ 7]。
本实验采用沙鼠全脑缺血再灌注损伤模型,进一步观
察注射用夏天无总碱对脑缺血的治疗作用。
1 材料与方法
1 1 试验药物: 注射用夏天无总碱 (冻干粉针, 含
总生物碱> 90% ) ( T ACDI) , 2 mg/瓶, 由石家庄华
康制药有限公司提供, 批号 050508, 试验前用
0 9% 氯化钠注射液配制; 灯盏细辛注射液,云南生
物谷灯盏花药业有限公司生产, 10 mL/支 (含总黄
1342 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 8 期 2010 年 8 月
* 收稿日期: 20100104 作者简介:姚丽梅( 1975 ) ,女,河南漯河人,讲师,硕士,主要从事中药教学科研工作。
T el: ( 020) 28854936 13711409229 Email: yaolm@ gdyzy. edu. cn
* 通讯作者 段启
酮 45 mg) ,批号 20050322。
1 2 动物:雄性长爪沙鼠 60 只,体质量 ( 60 ! 10)
g,浙江省实验动物中心提供,合格证号: SCXL (浙)
20030001。
13 仪器: LIBROR AEL 160电子分析天平 (日本
岛津公司) ; LEICA RM2135 切片机、LEICAHI1210
漂片机、LEICAHI1220 烤片机, LEICAEG1160 包埋
机 (德国 LEICA 公司) ; YG 12T 生物组织电脑脱
水机 (湖北阳光医疗有限责任公司)。
1 4 方法
1 4 1 分组造模及给药: 60 只沙鼠随机分为 6组,
分别为模型组, 假手术组,灯盏细辛注射液 ( 10 mg/
kg )组, 注射用夏天无总碱高、中、低剂量 ( 0 88、
0 44、0 22 mg / kg ) 组, 每组 10 只。参照文献方
法[ 810] , 10% 水合氯醛 ( 0 35 g / kg) ip麻醉沙鼠, 仰
位固定,常规消毒皮肤, 颈部正中切开, 钝性分离双
侧颈总动脉, 用无创动脉夹夹闭 12 min,然后去除
动脉夹恢复血流,再灌注 24 h, 建立沙鼠全脑缺血
再灌注损伤模型, 消毒缝合皮肤。假手术组除不夹
闭双侧颈总动脉外, 其余操作相同。各组于恢复血
流再灌注同时舌下 iv 给药, 模型组和假手术组给予
生理盐水, 给药容量均为 4 mL/ kg。
1 4 2 神经损伤症状评分: 参照文献方法[ 11] , 于再
灌注后 24 h 采用单盲法对沙鼠进行神经损伤症状
评分,评分标准见表 1, 并计算脑卒中指数。按卒中
指数分值划分神经损伤症状等级: 0级: 0分; ∀级: 1
分; #级: 2分; ∃级: 3分; %级: 4分及 4分以上。
表 1 脑卒中指数评分标准
Table 1 Grading standard of stroke index
症状 卒中指数 症状 卒中指数
竖毛震颤 1 眼睑下垂 1
运动减少 1 后肢瘫痪 3
听力减弱 1 旋转运动 3
抬头征 3 癫痫 3
眼球固定 3 昏迷 6
1 4 3 脑指数及脑组织含水量测定: 动物断头取
脑,去除小脑、硬脑膜及表面血管, 生理盐水洗净, 滤
纸吸干,称质量,计算脑指数(脑指数= 脑湿质量/体
质量 & 100) ;沿左右大脑半球正中线纵向切开,取左
侧大脑半球称湿质量,置 105 ∋ 烘箱 72 h, 烘至恒
重,计算脑组织含水量[脑组织含水量= (湿质量-
干质量) /湿质量 & 100% ]。
1 4 4 脑组织病理观察: 将右侧大脑半球用 10%
中性甲醛固定, 乙醇逐级脱水,石蜡包埋, 切片, HE
染色,光镜下观察海马结构及海马 CA1 区细胞形态
变化。按以下等级判定脑组织病变程度。0 级: 未
见明显病理改变; ∀级:脑组织或脑膜轻度充血或脑
膜及脑组织轻度充血或海马 CA1 区神经细胞数量
轻度减少; #级:脑组织或脑膜轻度充血或脑膜及脑
组织轻度充血+ 海马 CA 1 区神经细胞数量轻度减
少; ∃级:脑组织或脑膜轻度充血或脑膜及脑组织轻
度充血+ 海马 CA1 区神经细胞轻度排列紊乱及数
量轻度减少;或海马 CA1区神经细胞轻度排列紊乱
及神经细胞数量减少。
2 结果
2 1 对脑卒中指数的影响: 注射用夏天无总碱高、
中剂量均能显著降低沙鼠全脑缺血再灌注损伤脑卒
中指数,见表 2。
表 2 注射用夏天无总碱对沙鼠全脑缺血再灌注损伤
脑卒中指数的影响
Table 2 Ef fect of TACDI on stroke index of cerebral
ischemiareperfusion injured gerbil
组 别 剂量/
( mg kg- 1)
等级
0 ∀ # ∃ % P 值
模型 - 1 2 3 2 2 -
假手术 - 10 0 0 0 0 < 0 01
灯盏细辛注射液 10 5 5 0 0 0 < 0 01
注射用夏天无总碱 0 88 2 6 1 1 0 < 0 05
0 44 4 4 2 0 0 < 0 05
0 22 3 1 3 2 1 > 0 05
与模型组比较 ( P ) 值,表 4同
Compared w ith m odel group ( P value) , Table 4 is same
2 2 对脑指数及脑组织含水量的影响:注射用夏天
无总碱高、中剂量组脑组织含水量显著下降,但对脑
指数无明显影响, 见表 3。
表 3 注射用夏天无总碱对沙鼠全脑缺血再灌注脑指数
及脑组织含水量的影响 ( x! s, n= 10)
Table 3 Effect of TACDI on cerebral index, cerebral
water content of cerebral ischemiareperfusion
injured gerbil ( x! s, n= 10)
组 别 剂量/ ( mg kg- 1) 脑指数 脑组织含水量/ %
模型 - 1 45 ! 0 10 79 17 ! 0 65
假手术 - 1 39 ! 0 08 78 16 ! 0 86
灯盏细辛注射液 10 1 42 ! 0 12 78 36 ! 0 91*
注射用夏天无总碱 0 88 1 40 ! 0 09 78 33 ! 0 99*
0 44 1 43 ! 0 03 78 57 ! 0 37*
0 22 1 41 ! 0 10 78 73 ! 0 73
与模型组比较: * P < 0 05
* P < 0 05 v s model group
2 3 对脑组织病理变化的影响:模型组沙鼠脑组织
轻度充血,大多样本海马 CA1区神经细胞轻度排列
紊乱及数量减少。假手术组灰白质界限清楚,灰质
区神经细胞及胶质细胞丰富,白质区可见色深、界限
1343中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 8 期 2010 年 8 月
清楚的神经纤维束及胶质细胞;大脑神经细胞、胶质
细胞、神经纤维未见明显改变, 海马 CA1 区神经细
胞形态、数量未见明显改变。灯盏细辛注射液组少
数样本脑组织轻度充血, 偶见海马 CA1 区神经细胞
减少。注射用夏天无总碱高、中剂量组少数样本脑
组织轻度充血,偶见海马 CA1区神经细胞减少; 低剂
量组大多样本脑组织充血,海马 CA1 区神经细胞减
少。注射用夏天无总碱各剂量组脑组织病变均比模
型组轻,其中高、中剂量效果较好。见表 4及图 1。
3 讨论
脑血管疾病是目前危害人类健康的三大疾病之
表 4 注射用夏天无总碱对沙鼠全脑缺血再灌注损伤
脑组织病理变化的影响
Table 4 Ef fect of TACDI on cerebral pathology change
of cerebral ischemiareperfusion injured gerbil
组 别 剂量/
( mg kg- 1 )
等级
0 ∀ # ∃
P 值
模型 - 0 2 5 3 -
假手术 - 10 0 0 0 < 0 01
灯盏细辛注射液 10 5 4 1 0 < 0 01
注射用夏天无总碱 0 88 4 5 1 0 < 0 01
0 44 5 3 2 0 < 0 01
0 22 1 6 3 0 < 0 05
图 1 脑组织病理观察
Fig. 1 Cerebral pathological observation
一,其中缺血性脑血管疾病以其高发病率、高致残率
和高死亡率而严重危害人们的健康。缺血性脑血管
病,其本质就是动脉供血减少或中断而引起脑组织
缺血或梗死,导致神经细胞变性、坏死, 临床表现为
各种症状和体征。再灌注损伤是指缺血组织恢复血
流供应后, 引起该组织原有病变加重,使缺血脑组织
水肿,细胞变性坏死,加重动物神经功能障碍等。沙
鼠由于缺乏完整的 Willis 环,后交通动脉和前交通
动脉十分细小甚至缺乏, 结扎双侧颈总动脉可引起
前脑完全性缺血,被广泛用于脑缺血研究及脑缺血
药物的筛选。本实验采用夹闭双侧颈总动脉 12
min 再灌注 24 h, 建立沙鼠全脑缺血再灌注损伤模
型,观察注射用夏天无总碱对沙鼠全脑缺血再灌注
损伤的作用,结果表明注射用夏天无总碱能降低全
脑缺血再灌注损伤沙鼠脑卒中指数和脑组织含水
量,减轻脑组织海马 CA1 区细胞损伤, 说明注射用
夏天无总碱对沙鼠全脑缺血再灌注损伤具有治疗
作用。
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