全 文 ：

研究结果表明木豆叶中异美五针松双氢黄酮、
木豆茋的量较高。同时木豆叶中活性成分主要为黄
酮类和茋类化合物, 所以,选择该 3种成分作为指标
成分具有较好的代表性, 本方法选择 3种主要成分
作为木豆叶质量控制指标成分是可行的。
参考文献:
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骆庆峰, 孙
兰, 斯建勇, 等
木豆叶茋类提取物对高脂模
型小鼠血脂和肝脏胆固醇的降低作用 [ J]
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京, 陈迪华, 等
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缺乏性大鼠骨质丢失的影响 [ J]
药学学报, 2007, 42( 5 ) :
562565

RPHPLC法测定鹿衔草中水晶兰苷
赵明波,屠鹏飞* 
(北京大学药学院 天然药物及仿生药物国家重点实验室,北京
100191)
摘
要:目的
建立鹿衔草中水晶兰苷的测定方法。方法
采用 RPH PLC 法 , 色谱柱为 Agilent Zorbax SBAq
( 250 mm 4
6 mm, 5
m) ,流动相为甲醇0
1%磷酸溶液( 5! 95) , 体积流量 1
0 mL/ min,检测波长 235 nm,柱温
25 ∀ 。结果
水晶兰苷在0
254 4~ 5
08 8
g线性良好 , R2= 0
999 9;平均回收率 97
2% , 检测限为 13 ng。结论

该方法稳定可靠,回收率高, 可用于鹿衔草的质量控制。
关键词:鹿衔草; 水晶兰苷; RPH PLC
中图分类号: R284
1


文献标识码: A


文章编号: 02532670( 2010) 10172502


鹿衔草为#中国药典∃一部收载的中药品种, 是
鹿蹄草科植物鹿蹄草 Py rola cal liantha H
Andres
或普通鹿蹄草 P
decor ate H
A ndres 的干燥全草,
具有祛风湿、强筋骨、止血等功效[ 1]。现代药理学研
究表明,鹿衔草对心血管系统有一定的作用, 并具有
抗菌、抗炎、镇痛等活性[ 2]。鹿衔草中主要含有黄酮
类、酚类、醌类和环烯醚萜苷类化合物[ 2]。水晶兰苷
属于环烯醚萜苷类化合物, 与其抗炎镇痛作用相
关[ 3]。目前,对鹿衔草的研究主要集中于黄酮类 [ 4] ,
酚苷类[ 5]和三萜类[ 6] 化合物, 而环烯醚萜苷类成分
的研究未见报道。本实验采用 RPHPLC 法, 建立
了鹿衔草中水晶兰苷的测定方法,为鹿衔草的质量
控制提供了参考。
1
仪器和试剂
高效液相色谱仪为 Agilent 1100高效液相色谱
仪:四元泵, 在线脱气机, 自动进样器,柱温箱, 二极
管阵列检测器, Ag ilent 1100化学工作站。乙睛( J

T
Baker,色谱纯, 美国) ;水为乐百事纯净水; 磷酸
(分析纯)为北京化工厂; 水晶兰苷对照品为实验室
自制, HPLC检查质量分数大于 98% (面积归一化
法) ; 鹿衔草药材为各地收集, 由北京大学药学院屠
鹏飞教授鉴定为鹿蹄草 Py r ola cal l iantha H
An
dres或普通鹿蹄草 Py r ola decor ate H
Andres 的
干燥全草。
2
方法和结果
2
1
色谱条件: A gilent Zorbax SBA q色谱柱( 250
mm 4
6 mm, 5
m) ,流动相:甲醇0
1%磷酸溶液
( 5 ! 95) ; 检测波长: 235 nm 体积流量: 1
0 mL/
m in;柱温: 25 ∀ 。
2
2
对照品溶液的制备:精密称取干燥至恒质量的
水晶兰苷对照品适量, 加甲醇溶解制成 0
25 mg/
mL 的溶液, 即得。
2
3
供试品溶液的制备:取本品粗粉约2 g,精密称
定,加水50 mL,称定质量,在 80 ∀ 水浴中提取1 h,
放冷,称定重量,用水补足减失的质量,滤过,精密量
取续滤液 20 mL 减压浓缩至干,残渣加水适量使溶
解,转入 5 mL 量瓶中,用水分次洗涤容器, 洗涤液
并入量瓶中,再加水至刻度,摇匀,即得。
2
4
线性关系考察:取水晶兰苷对照品适量,配制
1
272 mg/ mL 对照品溶液, 精密吸取 0
4、0
8、1
6、
2、4、8 mL 置于 10 mL 量瓶中,加水稀释至刻度,配
制成不同质量浓度的对照品溶液。精密吸取上述溶
液 5
L 进样,测定峰面积。以质量为横坐标,峰面
积为纵坐标作标准曲线。结果表明, 水晶兰苷在
0
254 4~ 5
088
g 线性良好, 回归方程为 Y =
1 106
4 X- 24
381, R2= 0
999 9。水晶兰苷的检测
限为 13 ng ( S/ N= 3)。
2
5
精密度试验: 取编号 25样品, 制备供试品溶
%1725%中草药
Chinese Traditional and Herbal Drugs
第 41 卷第 10 期 2010 年 10月
收稿日期: 20091227





















作者简介:赵明波
北京大学医学部植化教研室
Tel/ Fax : ( 010) 82802859
Email: zmb_77@ 163
com
液,连续进样 6次, 测定水晶兰苷的峰面积, 结果峰
面积的 RSD为 0
097%。
2
6
稳定性试验: 取编号 25 样品, 制备供试品溶
液,在 0, 2, 4, 8, 12, 24 h内测定峰面积,结果表明样
品溶液在 24 h内稳定,峰面积的 RSD为 1
25%。
2
7
重现性试验:取编号 25样品 5份,制备供试品
溶液,计算水晶兰苷质量分数,结果 RSD为 1
51%。
2
8
加样回收率试验:分别精密称取编号 2鹿衔草
样品(含水晶兰苷 1
31 mg / g )共 6 份, 分别加入水
晶兰苷对照品溶液, 按供试品溶液的制备方法制备,
测定,计算平均回收率为 97
15% , RSD为 1
10%。
2
9
样品测定:精密称取不同产地和来源的鹿衔草
药材 2
0 g ,按供试品溶液制备方法制备样品溶液,
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 5
L, 注
入液相色谱仪, 测定,即得。结果见表 1、图 1。
表 1
鹿衔草中水晶兰苷的测定结果( n= 2)
Table 1
Determination of monotropein
from Pyrolae Herba ( n= 2)
编
号 购买地
水晶兰苷/
( m g % g- 1)
1 北京




1
41
2 广东广州


1
31
3 河北安国


1
80
4 湖北荆州


1
70
5 山东青岛


2
16
6 福建温州


3
16
7 河南郑州


2
71
8 甘肃




4
46
9 四川成都


2
97
10 黑龙江大庆

0
58
11 内蒙古乌兰浩特 1
66
12 浙江东阳


4
19
13 江西南昌


2
91
编
号 购买地
水晶兰苷/
( mg % g- 1 )
14 吉林通化

2
97
15 天津



1
17
16 河北



2
22
17 江西临州

1
41
18 河北行唐

0
67
19 河北邯郸

1
00
20 河南郑州

2
99
21 黑龙江牡丹江 2
78
22 浙江温岭

2
74
23 贵州



0
81
24 陕西西安

3
02
25 浙江



1
91
t / min
* 水晶兰苷
* monot ropein
图 1
水晶兰苷对照品( A)与鹿衔草( B)的 HPLC色谱图
Fig
1
HPLCChromatograms of monotropein (A)
and Pyrolae Herba ( B)
3
讨论
3
1
提取溶剂的选择:为了选择最佳的提取溶剂,对
不同溶剂的提取效果进行了比较。取药材粗粉2 g,
精密称定,分别用甲醇、80%甲醇、50%甲醇、95%乙
醇、80%乙醇、50%乙醇和水为溶剂, 采用回流法提
取 2 h,滤过, 取续滤液 20 mL,减压浓缩,残渣加入
50%甲醇定容至 5 mL。经 HPLC 分析测定, 结果
水的提取效果最佳,故选择水为提取溶剂。以水为
溶剂,对不同提取温度和时间进行了比较, 结果表
明, 80 ∀ 温浸提取 1 h效果最佳。
3
2
流动相的选择:由于水晶兰苷的酸性较强, 在
酸性缓冲溶液中才能得到较好的分离, 故选择了不
同浓度的磷酸和三氟乙酸溶液进行比较, 结果发现
使用磷酸的分离效果优于三氟乙酸; 又对磷酸的浓
度进行考察,结果发现使用 0
1%磷酸溶液时,可以
达到较好分离,磷酸浓度增大,分离效果未见明显改
善。故选择 0
1%磷酸溶液分离。由于水晶兰苷的
极性较大,保留时间短,故采用甲醇0
1%磷酸溶液
( 5 !95) ,使高极性的水晶兰苷得到较好分离。
3
3
各地商品药材中水晶兰苷的比较:不同商品药
材中的水晶兰苷的量在 0
58~ 4
46 mg/ g ,相差近8
倍,说明市场流通的商品药材的质量差异较大, 对其
进行适当的质量控制十分必要。#中国药典∃2005
年版中,鹿衔草的质量标准还未建立&测定∋项, 本实
验建立的测定方法操作简便,结果可靠,为完善鹿衔
草的质量标准提供了参考依据。
参考文献:
[ 1]
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一部
2005

[ 2]
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%1726% 中草药
Chinese Traditional and Herbal Drugs
第 41 卷第 10 期 2010 年 10月