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erythritolkinasegeneinCinnamomumcamphora
JINGLi1,ZHENGHan1,2,YAONa1,CHENMeilan1,SHENYe1,HUANGLuqi1
(1.StateKeyLaboratoryofDaodiHerbs,NationalResourceCenterforChineseMateriaMedica,
ChinaAcademyofChineseMedicalSciences,Beijing100700,China;
2.AnHuiUniversityofChineseMedicine,Hefei230038,China)
[Abstract] The4diphosphocytidyl2CmethylDerythritolkinasewasthefourthkeyenzymesinplantterpenoidbiosynthesispath
wayofmethylerythritolphosphatepathway(MEP)AccordingtothestudyofCinnamomumcamphoratranscriptomedata,weabtained
the4diphosphocytidyl2CmethylDerythritolkinasegeneusingRTPCR,andnamedCcCMK1,thendepositeditinGeneBank(Acces
sionnumber:Ku376098)Bioinformaticsanalysisshowedtheopenreadingframe(ORF)oftheCcCMK1was1212bpTheputative
proteinencoded403aminoacids,anditsmolecularweightwas4446kDaandtheoreticalyisoelectricpointwas499Transmembrane
structureanalysisshowedthattherewasnotransmembranestructureSignalpeptideanalysisshowedthatitwasanonsecretoryprotein,
andtherewasnosignalpeptideThesubcelularlocalizationshowedthatthechloroplastwaslocatedinthechloroplastAnalysisofthe
expressionofCcCMK1geneinfivechemotypesofCcamphorausingRealtimePCRshoweditsexpressionlevelwashighestin
Clongepaniculatum,andthelowestinBorneolcamphorThisresearchprovidedabasisforcharacterizingthekeyenzymegenesofter
penoidbiosyntheticpathwayinCcamphora
[Keywords] Cinnamomumcamphora;4diphosphocytidyl2CmethylDerythritolkinase(CMK);genecloning;bioinformation
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doi:10.4268/cjcmm20160902
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ʯ Inter ProScan(htp://wwwebiacuk/interpro/) Ï CcC MK1 Ãö}_!
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Ó4446kDa, ÉUç (theoreticalpI) Ó 499, ÚÃö¥Ó`ô = (instabilityindex) Ó 4283, H¡ÓÓ` , R ÷ô= (aliphaticindex) Ó 2758, øJ!ô= (grandaverageofhydropathicity,GRAVY) Ó 0710。 ʯ TMHMMServerv20(htp://www.cbs.dtu. dk/services/TMHMM/) õºÁÂáz , á ¡ ·êÂ+ , ¥µ¤ÁÂáz 。 ʯ SignalP41Serv er(htp://wwwcbsdtudk/services/SignalP/) n v<Ä¡¢ , á ¡Ó¡¤Ãö , ¥µ¤v< Ä 。 ʯ TargetP11(htp://wwwcbsdtudk/serv ices/TargetP/) nl`· , á ¡`·ê Bðó
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benthamiana(ABO87658. 1);
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.Lonicerajaponica
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.Bathycoccusprasinos(XP_007508688.1);
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z .Physcomitrelapatens(XP_001772320.1); T& .Morusnota bilis(XP_010093814.1); ()* .Medicagotruncatula(XP_ 013459353.1); # ù è L .Brachypodium distachyon(XP_ 010232463.1); úôëjºÄÓ+§Æ ; %ôëjºÄÓ 。 q 4 CcCMK ÃöÖ¤°¨ 4 2C D ô©_¡¢ Fig4 PhylogenetictreeofCcCMK1withotherplantCMKs 323 CcCMK1 ÃöJázLJázõº CcCMK1 .wr½¾¿ÀáB 1212bp, õº /_ 403 C¡ 。 ʯ DNAMAN ¡¢ÚÃö Jáz , ÚÃöJáz α+, 67%、
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protein
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¤< .« 。 q 6 CcCMK1 ¤¥¦_m ¡¢
Fig6 AnalysisoftheexpressionlevelofCcCMK1geneindif
ferentchemotypesofCinnamomumcamphora
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