全 文 ：紫皮石斛的质量标准研究
甘小娜１，２，徐英１，２，徐红１，２，刘家保３，杨莉１，２，王峥涛１，２
（１．中药标准化教育部重点实验室暨上海市复方中药重点实验室，
上海中医药大学 中药研究所，上海 ２０１２０３；
２．上海中药标准化研究中心，上海 ２０１２０３；３．云南省龙陵县林业局，云南 保山 ６７８３００）
［摘要］ 为建立云南省龙陵县紫皮石斛的地方质量标准，采用硫酸苯酚法测定紫皮石斛中多糖的含量；采用高效液相
色谱法测定药材中甘露糖的含量，并根据２０１０年版《中国药典》相关附录测定浸出物。结果表明紫皮石斛的显微鉴别特征性
强；薄层色谱分离度好，斑点清晰；紫皮石斛含多糖质量分数为３５７％～５２１％（平均４２７％），甘露糖为２７８％～４６１％（平
均３５８％），浸出物为４５％～１０６％（平均７３８％）。所建方法操作简单，准确可靠，重复性好，制定的标准限度合理，可用于
评价云南省龙陵县紫皮石斛的质量。
［关键词］ 紫皮石斛；质量标准；显微鉴别；薄层鉴别；含量测定
［收稿日期］ ２０１３０７２５
［基金项目］ 国家自然科学基金优秀青年基金项目（８１２２２０５３）
［通信作者］ 杨莉，博士，研究员，主要从事中药药效物质基础与
质量标准，代谢组学研究，Ｔｅｌ：（０２１）５１３２２５０６，Ｅｍａｉｌ：ｃｐｕｙｌ＠
１２６ｃｏｍ
［作者简介］ 甘小娜，硕士研究生，Ｔｅｌ：１８２２１０９２９８９，Ｅｍａｉｌ：
ｂｒｅｅｚｅ５６８３７＠１２６ｃｏｍ
紫皮石斛为双子叶植物药兰科植物齿瓣石斛
ＤｅｎｄｒｏｂｉｕｍｄｅｖｏｎｉａｎｕｍＰａｘｔ的干燥茎，具有益胃生
津，滋阴清热等功效［１］。紫皮石斛茎具节，稍肉质，
叶革质，互生，因其茎在秋冬收获季节除去叶鞘膜
后，表面多为紫色，生长在阳光较强的地方者，紫色
更加明显，因此俗称紫皮石斛或紫皮兰［２］。新鲜紫
皮石斛的茎秆经修剪、烘干定型后加工成的螺旋团
状颗粒称为紫皮枫斗。石斛的化学成分主要为多
糖、生物碱［３］、菲类、联苄类［４］、酚酸类和黄酮类［５］，
另外还含有少量的微量元素［６］以及氨基酸［７］，可用
于治疗白内障、糖尿病、关节炎、慢性咽炎、肿瘤等疾
病。２０１０年版《中国药典》收载的石斛主流品种有
铁皮石斛、金钗石斛、鼓槌石斛、流苏石斛等，其中铁
皮石斛功效冠盖石斛之首，然其生长条件苛刻、自然
繁殖能力低，生长缓慢，价格昂贵。研究表明紫皮石
斛富含黏液［８］，化学成分及药理作用类似铁皮石
斛，主要活性成分多糖的含量也可与铁皮石斛相媲
美［９］，且其价格仅为铁皮石斛的１／５～１／４，可谓物
美价廉。目前云南省龙陵县大力发展紫皮石斛种植
产业，全县紫皮石斛种植总量已超过１７０万 ｍ２，农
业产值突破１２亿元 ，是我国紫皮石斛的主要产区
之一。本研究关于紫皮石斛地方质量标准的建立，
包括性状描述、显微鉴别，薄层鉴别方法及含量测定
方法等，为系统评价紫皮石斛质量提供科学依据。
１ 材料
Ａｇｉｌｅｎｔ１２６０高效液相色谱仪（美国 Ａｇｉｌｅｎｔ公
司）；ＢＡ２１０显微镜（Ｍｏｔｉｃ公司）；薄层色谱自动点
样器（ＬｉｎｏｍａｔＶＩ，瑞士 ＣＡＭＡＧ公司）；薄层色谱摄
像仪（Ｒｅｐｒｏｓｔａｒ３，瑞士 ＣＡＭＡＧ公司）；薄层色谱硅
胶板（ＨＳＧＦ２５４，烟台市芝罘黄务硅胶开发试验
厂）；数控超声波清洗器（ＫＱ２５０ＤＢ，昆山市超声仪
器有限公司）；１／１万电子分析天平（ＳａｔｏｒｉｕｓＢＳＡ
１２４ＳＣＷ，北京赛多利斯仪器系统有限公司）；１／１０
万电子分析天平（ＳａｒｔｏｒｉｕｓＢＴ２５Ｓ，北京赛多利斯
仪器系统有限公司）；酶标仪（ＢｉｏＴｅｋＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，
美国基因有限公司）；烘箱（ＤＨＧ９２４０Ａ，上海精宏
实验设备有限公司）。
ＨＰＬＣ级乙腈（美国Ｆｉｓｈｅｒ公司）；水为超纯水；
其他试剂均为分析纯；Ｄ（＋）ｇｌｕｃｏｓｅ（ＳＩＧＭＡ，Ｌｏｔ
６９Ｈ００１６１）；Ｄ（＋）ｍａｎｎｏｓｅ（ＳＩＧＭＡ ， Ｌｏｔ
４９Ｈ１０５２２）；Ｄ（＋）ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ（ＳＩＧＭＡ ， Ｌｏｔ
１０１Ｋ０１３３）；紫皮石斛对照药材（上海中药标准化研
究中心提供，编号ｚｐｓｈ１２０９２６０１）；紫皮石斛药材４８
批，见表１，由上海中医药大学杨莉研究员采集并鉴
定，凭证标本保存于上海中药标准化研究中心。
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第３８卷第２３期
２０１３年１２月
Ｖｏｌ３８，Ｉｓｓｕｅ ２３
Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，２０１３
表１ 紫皮石斛浸出物、多糖和甘露糖含量质量分数（ｎ＝２）
Ｔａｂｌｅ１ Ｒｅｓｕｌｔｓｏｆｅｘｔｒａｃｔａｎｄｍａｓｓｆｒａｃｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ
ａｎｄｍａｎｎｏｓｅｏｆＤｅｎｄｒｏｂｉｕｍｄｅｖｏｎｉａｎｕｍｃａｕｌｉｓ（ｎ＝２） ％
批号 产地 浸出物 多糖 甘露糖
ｚｐｓｈ１２０９２６０１ 龙山赧场 ７２４ ３３５１ ３４３４
ｚｐｓｈ１２０９２６０２ 龙山赧场 ７３４ ３８５３ ３７１０
ｚｐｓｈ１２０９２６０３ 龙山赧场 ４５０ ３８９６ ３２２０
ｚｐｓｈ１２０９２６０４ 龙山赧场 ６６５ ３５６１ ３９２５
ｚｐｓｈ１２０９２６０５ 碧寨三家村 ５１１ ４４７６ ３９６０
ｚｐｓｈ１２０９２６０６ 碧寨三家村 ４６２ ４６３５ ４２１６
ｚｐｓｈ１２０９２６０７ 龙山河头 ８６６ ４３３９ ３３７４
ｚｐｓｈ１２０９２６０８ 象达乡营坡 ８５３ ３６０９ ３６３３
ｚｐｓｈ１２０９２６０９ 象达乡赧洒 ６４１ ４２１０ ３６６５
ｚｐｓｈ１２０９２６１０ 象达乡朝阳 ８１６ ４６２６ ３６３２
ｚｐｓｈ１２０９２６１１ 象达乡帕掌河 ７１４ ４１６０ ３６３２
ｚｐｓｈ１２０９２６１２ 镇安镇大坝１ ７４７ ４０３８ ３５８２
ｚｐｓｈ１２０９２６１３ 镇安镇大坝２ ７８０ ４５７５ ３６９２
ｚｐｓｈ１２０９２６１４ 木城乡 ７５３ ３９３３ ３８１９
ｚｐｓｈ１２０９２６１５ 龙山镇白家寨 ７６８ ３７１５ ３４８９
ｚｐｓｈ１２０９２６１６ 龙山镇大竹林 ７７３ ３８２４ ３６６３
ｚｐｓｈ１２０９２６１７ 龙山镇横山 ６９２ ４０８７ ４０３５
ｚｐｓｈ１２０９２６１８ 龙山镇河头１ ７５０ ３９７８ ３９９７
ｚｐｓｈ１２０９２６１９ 龙山镇河头２ ９４３ ４０６３ ３８５７
ｚｐｓｈ１２０９２６２０ 龙山镇河头３ １０５５ ４３９９ ３６２８
ｚｐｓｈ１２０９２６２１ 龙江乡弄岗 ６７３ ５２０８ ３９４２
ｚｐｓｈ１２０９２６２２ 龙江乡邦焕 ６４７ ４７５５ ３４７３
ｚｐｓｈ１２０９２６２３ 平达乡平安村 ９１２ ４８６３ ３６５０
ｚｐｓｈ１２０９２６２４ 平达乡小田坝 ７１５ ４９１４ ３６４３
ｚｐｓｈ１２０９２６２５ 平达乡橄榄寨 ７７６ ４７１８ ３２０８
ｚｐｓｈ１２０９２６２６ 龙新歇气坡 ９２８ ４４０９ ３１９２
ｚｐｓｈ１２０９２６２７ 龙新荆竹坪 ９８３ ４５１５ ３２８５
ｚｐｓｈ１２０９２６２８ 龙新黄草坝 ６１９ ４１１６ ３７７２
ｚｐｓｈ１２０９２６２９ 龙山白家寨 ６０４ ４０１０ ３３０７
ｚｐｓｈ１２０９２６３０ 龙新黄草坝 ６３０ ４１５３ ３６２９
ｚｐｓｈ１２０９２６３１ 像达朝阳 ６０９ ４５２１ ３４０２
ｚｐｓｈ１２０９２６３２ 镇安镇水塘 ８２７ ４２２９ ３５６０
ｚｐｓｈ１２０９２６３３ 龙山白家寨 ６４２ ４５２７ ３６４０
ｚｐｓｈ１２０９２６３４ 像达朝阳 ８１５ ４３３２ ３３９８
ｚｐｓｈ１２０９２６３５ 尹兆场 ６１０ ４４９６ ４２１６
ｚｐｓｈ１２０９２６３６ 尹兆场 ９４６ ４３５７ ３４７７
ｚｐｓｈ１２０９２６３７ 像达朝阳 ６８１ ４８４９ ３５７４
ｚｐｓｈ１２０９２６３８ 尹兆场 ７３３ ４７５７ ３４９８
ｚｐｓｈ１２０９２６３９ 尹兆场 ８５６ ４９１１ ２８４９
ｚｐｓｈ１２０９２６４０ 尹兆场 ６６３ ４３６１ ２８０４
ｚｐｓｈ１２０９２６４１ 尹兆场 ８３３ ３８５４ ２７７９
ｚｐｓｈ１２０９２６４２ 尹兆场 ９０３ ４９６４ ４６０８
ｚｐｓｈ１２０９２６４３ 龙山董华村 ６４４ ３８８３ ３５０４
ｚｐｓｈ１２０９２６４４ 龙山横山 ６４０ ４３２１ ３８４３
ｚｐｓｈ１２０９２６４５ 龙山城区 ５３８ ３８３７ ３６８６
ｚｐｓｈ１２０９２６４６ 碧寨天宁 ６４８ ３５６８ ３０５７
ｚｐｓｈ１２０９２６４７ 龙陵天然石斛种植基地 ７９３ ４０８３ ３４７０
ｚｐｓｈ１２０９２６４８ 龙山赧场 ８６２ ４２１５ ３４１９
注：上述所有紫皮石斛均来源于云南省龙陵县。
２ 方法与结果
２１ 性状
２１１ 紫皮枫斗
本品呈螺旋形团状，环绕紧密或稍松。通常为
２～４个旋纹，茎拉直后长３５～８ｃｍ，直径０２～０７
ｃｍ。表面黄绿色或略带金黄色，有细纵皱纹，节明
显，节上有时可见残留的灰白色叶鞘。质坚实，易折
断，断面平坦而疏松，灰白色至黄绿色，略角质状。
气微，味淡，嚼之有黏性，见图１。
图１ 紫皮枫斗性状图
Ｆｉｇ１ ＴｈｅｐｈａｒｍａｃｏｇｎｏｓｔｉｃｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆＺｉｐｉＦｅｎｇｄｏｕ
２１２ 紫皮石斛
本品呈圆柱形的段，长短不等，表面黄色或紫红
色，有深纵槽；叶鞘膜质抱茎，灰白色或紫红色，偶见
黑斑，见图２。
图２ 紫皮石斛性状图
Ｆｉｇ２ ＴｈｅｐｈａｒｍａｃｏｇｎｏｓｔｉｃｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆＤｅｎｄｒｏｂｉｕｍｄｅｖｏ
ｎｉａｎｕｍ
２２ 鉴别
２２１ 显微鉴别
本品横切面：表皮细胞１列，扁平，类长方形，壁
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第３８卷第２３期
２０１３年１２月
Ｖｏｌ３８，Ｉｓｓｕｅ ２３
Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，２０１３
略增厚、微木化，外被黄色角质层，外层常可见无色
的薄壁细胞组成的叶鞘，叶鞘维管束有时可见。基
本薄壁组织细胞大小相似，类圆形或类多角形，内散
布有多数维管束，略排成４～８列。维管束外韧型，
外侧具纤维束，壁较厚，其外侧常镶嵌有细小的薄壁
细胞，细胞中常含硅质块，维管束内侧具纤维束，壁
增厚。薄壁细胞常含淀粉粒，有的细胞中含草酸钙
针晶束，见图３。
Ａ横切面构造；Ｂ表皮与角质层；Ｃ维管束；１叶鞘；２角质层；
３表皮；４基本组织；５维管束；６淀粉粒；７针晶；８纤维束；
９韧皮部；１０木质部。
图３ 齿瓣石斛茎横切面组织特征图
Ｆｉｇ３ ＭｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｔｒａｎｓｖｅｒｓｅｓｅｃｔｉｏｎｏｆＤｅｎ
ｄｒｏｂｉｕｍｄｅｖｏｎｉａｎｕｍ
２２２ 薄层色谱鉴别
２２２１ 供试品溶液的制备 取本品粉末约１ｇ，
置１００ｍＬ锥形瓶中，加甲醇５０ｍＬ、水１５ｍＬ超声
提取３０ｍｉｎ，滤过，滤液用 ２０ｍＬ石油醚（６０～９０
℃）萃取，取石油醚层挥干，残渣加氯仿１ｍＬ使溶
解，作为供试品溶液。
２２２２ 薄层色谱条件及结果 取对照药材溶液
与供试品溶液各１０μＬ，分别点于同一硅胶预制薄
层板上，以石油醚丙酮（９∶１）为展开剂，展开，取出，
晾干，喷以 １０％硫酸乙醇试液，在 １０５℃烘约 ３
ｍｉｎ，置紫外灯（３６６ｎｍ）波长下检视。供试品溶液
色谱中，在与对照药材溶液色谱相应的位置上，显相
同的颜色的荧光斑点，见图４。
Ａ１对照药材（ｚｐｓｈ１２０９２６０２）；Ａ２（ｚｐｓｈ１２０９２６０４）；Ａ３（ｚｐｓｈ
１２０９２６０５）；Ａ４（ｚｐｓｈ１２０９２６０７）；Ｂ１（ｚｐｓｈ１２０９２６０８）；Ｂ２（ｚｐｓｈ
１２０９２６０９）；Ｂ３（ｚｐｓｈ１２０９２６０１０）；Ｂ４（ｚｐｓｈ１２０９２６１１）；Ｂ９（ｚｐｓｈ
１２０９２６１６）；Ｃ１（ｚｐｓｈ１２０９２６２９）；Ｃ２（ｚｐｓｈ１２０９２６３３）；Ｃ３（ｚｐｓｈ
１２０９２６３５）；Ｃ４（ｚｐｓｈ１２０９２６３８）；Ｃ５（ｚｐｓｈ１２０９２６４２）；Ｄ２（ｚｐｓｈ
１２０９２６４３）；Ｄ４（ｚｐｓｈ１２０９２６４４）；Ｄ５（ｚｐｓｈ１２０９２６４５）；Ｅ１（ｚｐｓｈ
１２０９２６４６）；Ｅ２（ｚｐｓｈ１２０９２６４７）；Ｅ３（ｚｐｓｈ１２０９２６４８）。
图４ 紫皮石斛ＴＬＣ图
Ｆｉｇ４ ＴＬＣｏｆＤｅｎｄｒｏｂｉｕｍｄｅｖｏｎｉａｎｕｍ
２３ 浸出物
按照２０１０年版《中国药典》浸出物测定法（附
录ＸＡ醇溶性浸出物测定法），以９５％乙醇为溶剂
提取、测定，结果见表１。
２４ 含量测定
２４１ 多糖的含量测定
２４１１ 对照品溶液的制备 取无水葡萄糖对照
品适量，精密称定，加水制成每１ｍＬ含９０μｇ的溶
液，即得。
２４１２ 供试品溶液的制备 取本品粉末（过３号
筛）约０３ｇ，精密称定，加水２００ｍＬ，加热回流２ｈ，
放冷，转移至２５０ｍＬ量瓶中，用少量水分次洗涤容
器，洗液并入同一量瓶中，加水至刻度，摇匀，滤过，
精密量取续滤液２ｍＬ，置１５ｍＬ离心管中，精密加
入无水乙醇１０ｍＬ，摇匀，冷藏１ｈ，取出，４０００ｒ·
ｍｉｎ－１离心２０ｍｉｎ，弃去上清液（必要时滤过），沉淀
加８０％乙醇洗涤２次，每次８ｍＬ，离心，弃去上清
液，沉淀加热水溶解，转移至２５ｍＬ量瓶中，放冷，加
水至刻度，摇匀，即得。
２４１３ 线性关系考察 精密量取对照品溶液
０２，０４，０６，０８，１０ｍＬ，分别置１０ｍＬ具塞试管
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第３８卷第２３期
２０１３年１２月
Ｖｏｌ３８，Ｉｓｓｕｅ ２３
Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，２０１３
中，各加水补至 １０ｍＬ，精密加入 ５％苯酚溶液 １
ｍＬ（临用配制），摇匀，再精密加硫酸５ｍＬ，摇匀，置
沸水浴中加热２０ｍｉｎ，取出，置冰浴中冷却５ｍｉｎ，以
相应试剂为空白，照紫外可见分光光度法（附录
ⅤＡ），在４８８ｎｍ的波长处测定吸光度，以吸光度为
纵坐标，浓度为横坐标，进行线性回归，回归方程为
Ｙ＝００５９Ｘ－００１４，ｒ＝０９９９８，多糖在 ２５４～
１２８７ｍｇ·Ｌ－１线性关系良好。
２４１４ 精密度试验 精密吸取０４ｍＬ葡萄糖对
照品溶液 ６份于具塞试管中，分别按 ２４１３中
“加水补至１ｍＬ”起操作，在４８８ｎｍ波长下测定吸
光度并计算其含量，ＲＳＤ为１１％。
２４１５ 重复性试验 取同一批号样品，分别按
２４１２中供试品溶液的制备方法操作，在４８８ｎｍ
波长下测定吸光度并计算其含量，重复操作 ６份。
由计算知葡萄糖质量分数４２０４％ ～４３８０％，ＲＳＤ
为１８％，表明方法重复性良好。
２４１６ 稳定性试验 精密吸取供试品溶液１ｍＬ，
按２４１３中“精密加入５％苯酚溶液１ｍＬ”起操
作，分别于０５，１，１５，２，２５，３，４，６，８ｈ依法测定
吸光度并计算葡萄糖含量。结果表明样品在８ｈ内
稳定性良好，ＲＳＤ为０４０％。
２４１７ 回收率试验 精密量取样品溶液０５ｍＬ，
分别精密量取葡萄糖对照品溶液０１，０２，０３ｍＬ，加
蒸馏水补至１ｍＬ，按２４１３“精密加入５％苯酚溶
液１ｍＬ”起操作，依法测定吸光度，计算加样回收
率，见表２。
表２ 多糖加样回收率（ｎ＝９）
Ｔａｂｌｅ２ Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｅｆｏｒｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ（ｎ＝９）
加入量
／μｇ
测得值
／μｇ
回收率
％
平均回收率
／％
ＲＳＤ
／％
９０６ ２８２２ １００１ １０３３ ３０
９０６ ２８２０ ９８６２
９０６ ２８３４ １０１６
１８１１ ３７３２ １０１４
１８１１ ３８３０ １０５８
１８１１ ３８４３ １０５８
２７１７ ４７２３ １０３２
２７１７ ４８０３ １０６２
２７１７ ４８２７ １０７２
注：样品中量均为１９．２０μｇ。
２４１８ 含量测定 取紫皮石斛药材粉末０３ｇ，
精密称定，按２４１２项下供试品溶液制备方法制
备。吸取供试品溶液１ｍＬ，按２４１３法测定，结
果见表１。
２４２ 甘露糖的含量测定
２４２１ 色谱条件 ＣＡＰＣＥＬＬＰＡＫＣ１８色谱柱
（４６ｍｍ ×２５０ｍｍ，５μｍ）；柱温３０℃；检测波长
２５０ｎｍ；流动相乙腈００２ｍｏｌ·Ｌ－１乙酸铵溶液
（１８∶８２）；流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１；进样量１０μＬ，结果
见图５。
Ａ葡萄糖对照溶液；Ｂ甘露糖对照溶液；Ｃ供试品溶液；１ＰＭＰ；
２甘露糖；３内标（盐酸氨基葡萄糖）；４葡萄糖。
图５ 紫皮石斛高效液相色谱图
Ｆｉｇ５ ＲｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｖｅＨＰＬＣｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓｏｆＤｅｎｄｒｏｂｉｕｍｄｅ
ｖｏｎｉａｎｕｍｃａｕｌｉｓ
２４２２ 校正因子的测定 取盐酸氨基葡萄糖适
量，精密称定，加水制成每１ｍＬ含１２ｍｇ的溶液作
为内标溶液。另取甘露糖对照品约１０ｍｇ，精密称
定，置１００ｍＬ量瓶中，精密加入内标溶液１ｍＬ，加
水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，吸取４００μＬ，加
０５ｍｏｌ·Ｌ－１的 ＰＭＰ（１苯基３甲基５吡唑啉酮）
甲醇溶液与 ０３ｍｏｌ·Ｌ－１的氢氧化钠溶液各 ４００
μＬ。混匀，７０℃水浴反应１００ｍｉｎ，再加０３ｍｏｌ·
Ｌ－１的盐酸溶液５００μＬ，混匀，再用三氯甲烷洗涤３
次，每次２ｍＬ，弃去三氯甲烷液，水层离心后，取上
清液１０μＬ，注入液相色谱仪，测定，计算校正因子。
２４２３ 供试品溶液的制备 取本品粉末（过３号
筛）约０１２ｇ，精密称定，置索氏提取器中，加８０％
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第３８卷第２３期
２０１３年１２月
Ｖｏｌ３８，Ｉｓｓｕｅ ２３
Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，２０１３
乙醇１００ｍＬ，加热回流提取４ｈ，弃去乙醇液，药渣
挥干乙醇，滤纸筒拆开置于烧杯中，加水１００ｍＬ，再
精密加入内标溶液２ｍＬ，煎煮１ｈ并时时搅拌，放
冷，加水补至１００ｍＬ，混匀，离心，取上清液１ｍＬ，置
安瓿瓶中，加３０ｍｏｌ·Ｌ－１的盐酸溶液０５ｍＬ，封
口，混匀，１１０℃水解１ｈ，放冷，用３０ｍｏｌ·Ｌ－１的
氢氧化钠溶液调节ｐＨ至中性，吸取４００μＬ，照校正
因子的测定方法，自“加０５ｍｏｌ·Ｌ－１的 ＰＭＰ甲醇
溶液”起，依法操作，即得。
２４２４ 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液
１０μＬ，连续进样６次，测定甘露糖峰面积，其 ＲＳＤ
为１９％。
２４２５ 重复性试验 取同一批号的样品６份，按
２４２３项下处理并分别测定，结果甘露糖平均含
量为３６２３％，ＲＳＤ为２９％，表明方法重复性良好。
２４２６ 稳定性试验 取供试品溶液，分别于０，
２，４，８，１２，２４，４８ｈ进样，每次１０μＬ，结果甘露糖色
谱峰面积在４８ｈ内基本无变化，ＲＳＤ为２３％，表明
在本实验条件下稳定性良好。
２４２７ 加样回收率试验 取本品粉末００６ｇ，精
密称定，置索氏提取器中，加８０％乙醇适量，加热回
流提取４ｈ，弃去乙醇液，药渣挥干乙醇，滤纸筒拆开
置于烧杯中，定量加入甘露糖对照品粉末，按测定法
项下处理并分别测定。结果见表３。
表３ 甘露糖加样回收率（ｎ＝９）
Ｔａｂｌｅ３ Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｅｆｏｒｍａｎｎｏｓｅ（ｎ＝９）
样品量
／ｍｇ
加入量
／ｍｇ
测得值
／ｍｇ
回收率
／％
平均回收率
／％
ＲＳＤ
／％
２０３９ １６０９ ３７４４ １０７７ １０３０ ２９
２０３９ １６０９ ３７１４ １０４１
２０４６ １６０９ ３７４８ １０５８
２０３２ ２０３５ ４０５０ ９９１６
２０４４ ２０２６ ４１１２ １０２１
２０４４ ２０２６ ４０９９ １０１４
２０４６ ２４８１ ４６５６ １０５２
２０３６ ２４０６ ４４２１ ９９１４
２０１８ ２４１６ ４４９７ １０２６
２４２８ 含量测定 分别精密吸取对照品与供试
品溶液各１０μＬ，注入高效液相色谱仪中，测定其中
甘露糖的色谱峰面积及内标峰面积，以内标法计算
甘露糖含量。结果见表１。
３ 讨论
薄层色谱鉴别实验中，在制备供试品溶液时，比
较了２种方法：① 取本品粉末约１ｇ，置１００ｍＬ锥
形瓶中，加甲醇５０ｍＬ、水１５ｍＬ超声提取３０ｍｉｎ，
滤过，滤液用２０ｍＬ石油醚（６０～９０℃）萃取，取石
油醚层挥干，残渣加氯仿１ｍＬ使溶解，作为供试品
溶液；② 取本品粉末约１ｇ，置１００ｍＬ锥形瓶中，加
甲醇５０ｍＬ超声提取３０ｍｉｎ，滤过，滤液蒸干，残渣
加水１５ｍＬ使溶解，用２０ｍＬ石油醚（６０～９０℃）萃
取，取石油醚层挥干，残渣加氯仿１ｍＬ使溶解，作为
供试品溶液。分别将供试品溶液 １和 ２点样并展
开，比较其色谱图，结果显示方法１比方法２萃取效
率高，故选方法１为供试品溶液的制备方法。参考
文献报道常用的溶剂系统考察展开剂：石油醚丙酮
（７∶３）、石油醚乙酸乙酯（３∶２）、石油醚乙酸乙酯
（２∶１）为展开剂系统，进行比较并优化，结果显示，
以石油醚丙酮（９∶１）为展开剂，斑点显色清晰，Ｒｆ
较合适，故选该条件为展开剂。此外考察了不同硅
胶板、温度、湿度对薄层鉴别的影响。结果表明，不
同品牌的薄层板皆显色清晰，分离度良好，在保证重
复性的前提下，以价格易于接受为原则，推荐使用国
产薄层色谱硅胶板；温度在室温（２０～２５℃）及低温
（４℃）、相对湿度在３２％ ～８８％时，均能获得较好
的分离效果。
多糖是紫皮石斛的主要成分［３］，也是其发挥药
效的重要物质基础［１０］，故将其作为含量测定的指标
成分。含量测定时，同时检测４８批紫皮石斛药材与
８批铁皮石斛药材多糖的含量，结果紫皮石斛多糖
的平均含量为４２７％，铁皮石斛为４２４％，实验表
明，２种石斛多糖含量相当。
参考２０１０年版《中国药典》对铁皮石斛质量标
准的规定，紫皮石斛浸出物、多糖含量限度按照平均
值下浮 ２０％，甘露糖限度范围按均值分别上浮
２０％，下浮２０％制定，建议规定紫皮石斛的浸出物
不得少于６０％，多糖质量分数不得低于３４０％，甘
露糖为２９０％～４３０％。
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第３８卷第２３期
２０１３年１２月
Ｖｏｌ３８，Ｉｓｓｕｅ ２３
Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，２０１３
ｎｏｌｓ（ｂｉｂｅｎｚｙｌ，ｐｈｅｎａｎｔｈｒｅｎｅ，ａｎｄｆｌｕｏｒｅｎｏｎｅ）ｉｎＤｅｎｄｒｏｂｉｕｍ
ｓｐｅｃｉｅｓｂｙｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｗｉｔｈｄｉｏｄｅａｒ
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ＳｔｕｄｉｅｓｏｎｑｕａｌｉｔｙｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆＤｅｎｄｒｏｂｉｄｅｖｏｎｉａｎｉ
ＧＡＮＸｉａｏｎａ１，２，ＸＵＹｉｎｇ１，２，ＸＵＨｏｎｇ１，２，ＬＩＵＪｉａｂａｏ３，ＹＡＮＧＬｉ１，２，ＷＡＮＧＺｈｅｎｇｔａｏ１，２
（１ＴｈｅＭＯＥＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＳｔａｎｄａｒｄｉｚａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅｓａｎｄＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＣｏｍｐｌｅｘＰｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ，
ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ，ＳｈａｎｇｈａｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０１２０３，Ｃｈｉｎａ；
２ＳｈａｎｇｈａｉＲ＆ＤＣｅｎｔｅｒｆｏｒＳｔａｎｄａｒｄｉｚａｔｉｏｎｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅｓ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０１２０３，Ｃｈｉｎａ；
３ＦｏｒｅｓｔｒｙＡｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆＬｏｎｇｌｉｎｇＣｏｕｎｔｙ，Ｂａｏｓｈａｎ６７８３００，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ ＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈｔｈｅｌｏｃａｌｑｕａｌｉｔｙｓｔａｎｄａｒｄｆｏｒＤｅｎｄｒｏｂｉｄｅｖｏｎｉａｎｉｃａｕｌｉｓｆｒｏｍＬｏｎｇｌｉｎｇ，Ｙｕｎｎａｎ，ｔｈｅｐｈａｒｍａｃｏｇｎｏｓｔｉｃ
ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓａｎｄＴＬＣｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｗｅｒｅｄｅｖｅｌｏｐｅｄＳｕｌｆｕｒｉｃａｃｉｄｐｈｅｎｏｌｍｅｔｈｏｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅ
ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅＡｎＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄｗａｓａｄｏｐｔｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｍａｎｎｏｓｅ，ａｎｄｅｘｔｒａｃｔｉｖｅｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄａｃ
ｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓｒｅｃｏｒｄｅｄｉｎｔｈｅＡｐｐｅｎｄｉｘｏｆＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ（２０１０）Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄａｓｔｒｏｎｇｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｍｉ
ｃｒｏｓｃｏｐｉｃｏｆＤｅｎｄｒｏｂｉｄｅｖｏｎｉａｎｉｃａｕｌｉｓ，ａｎｄｉｔｓＴＬＣｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｈａｄａｇｏｏｄｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｗｉｔｈｃｌｅａｒｓｐｏｔｓ；ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ
ｉｓ３５７％５２１％（ａｖｅｒａｇｅ４２７％），ｍａｎｎｏｓｅ２７８％４６１％（ａｖｅｒａｇｅ３５８％），ａｎｄｅｘｔｒａｃｔ４５％１０６％（ａｖｅｒａｇｅ７３８％）Ｔｈｅ
ｍｅｔｈｏｄｉｓｓｉｍｐｌｅ，ａｃｃｕｒａｔｅａｎｄｒｅｌｉａｂｌｅ，ｗｉｔｈｇｏｏｄｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙＴｈｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｓｔａｎｄａｒｄｉｓａｃｃｅｐｔａｂｌｅｆｏｒｑｕａｌｉｔｙｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆＤｅｎ
ｄｒｏｂｉｄｅｖｏｎｉａｎｉｃａｕｌｉｓｆｒｏｍＬｏｎｇｌｉｎｇ，Ｙｕｎｎａｎ
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｄｅｎｄｒｏｂｉｄｅｖｏｎｉａｎｉ；ｑｕａｌｉｔｙｓｔａｎｄａｒｄ；ＴＬＣｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ；ａｓｓａｙ
ｄｏｉ：１０．４２６８／ｃｊｃｍｍ２０１３２３２５
［责任编辑 孔晶晶］
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２０１３年１２月
Ｖｏｌ３８，Ｉｓｓｕｅ ２３
Ｄｅｃｅｍｂｅｒ，２０１３