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Vol.34，Issue 4
February，2009
第 34 卷第 4 期
2009 年 2 月
BN 大鼠与豚鼠用于药物致敏性评价的比较
刘 婷，梁爱华*，易 艳，李春英，赵 雍，郝 然，曹春雨
（中国中医科学院 中药研究所，北京，100700）
[摘要] 目的：比较豚鼠和 BN 大鼠过敏试验，以寻找用于致敏原检测的更为敏感的动物模型。方法：将白色豚鼠和 BN
大鼠（Brown Norway rat）分别随机分为 2 组：1 正常对照组，2 牛血清白蛋白组。牛血清白蛋白组于试验的 1，3，5 d 分别
腹腔注射 0.6％牛血清白蛋白以致敏，1 mL/次，共 3 次。对照组腹腔注射给予相同体积的生理盐水注射液。于末次致敏后第
7，14 天，牛血清白蛋白组分别静脉注射 2.4％牛血清白蛋白 1 mL/次以激发过敏；而对照组静脉注射相同体积生理盐水。
分别于第 1 次及第 2 次静脉注射后，观察每只动物过敏反应情况，根据过敏反应症状评分，评价过敏反应强弱；并从眼眶静
脉丛取血，分离血清，采用 ELISA 竞争试验法检测 IgE 含量；此外，采用激发后动物的血清，用 SD 大鼠进行被动皮肤过
敏试验，计算蓝斑面积，测定并计算伊文思蓝染料的渗出量。结果：豚鼠第 1 次及第 2 次激发后，牛血清白蛋白组的过敏症
状评分与对照组比较无明显差异；BN 大鼠第 1 次及第 2 次激发后，牛血清白蛋白组出现明显的过敏反应，经非参数秩和检
测与对照组比较均有显著性差异；被动皮肤过敏试验显示，BN 大鼠牛血清白蛋白组血清在 SD 大鼠上可造成明显的蓝斑和
伊文思蓝渗出量明显增加。而豚鼠牛血清白蛋白组的蓝斑不明显，伊文思蓝渗出量与对照组比较无明显差异。同种动物比较，
牛血清白蛋白组和对照组血清 IgE 含量无明显差异。结论：BN 在主动全身过敏反应和被动皮肤过敏反应中均显示牛血清白
蛋白呈现阳性反应，而豚鼠反应不明显，因此 BN 大鼠用于致敏原检测比豚鼠更为敏感。同时，BN 大鼠在技术操作上比豚
鼠更方便和容易。
[关键词] 过敏试验；致敏性评价；动物模型

5中药、天然药物、生物制品、食品等作为一种
外源性物质，可能作为过敏原引发机体产生过敏反
应。过敏反应对人体危害大，且发病率高，轻则产
生皮疹、恶心、呕吐等症状，重则发生过敏性休克，
心功能衰竭等严重反应，给病人造成极大痛苦。但
现行的过敏反应评价体系灵敏度及特异性均较差，
所以建立更为灵敏可靠的优化致敏评价方法就成
为当务之急。一般在对某种物质进行过敏反应评价
的时候，优先选用的是较易产生过敏反应的豚鼠，
但目前国内外有许多报道在进行呼吸道过敏、哮
喘、过敏性鼻炎、鼻充血、食品及蛋白质的过敏性
评价等研究时，均用 BN 大鼠作为研究对象[1-5]。2
种动物在对某种物质进行过敏性评价时，是否存在
种属差异却未见报道。本试验通过豚鼠与 BN 大鼠
在主动全身过敏反应、被动皮肤过敏反应、IgE 含
量测定等方面的比较，力求寻找一种更为敏感的，
操作更为简便的动物模型。

[收稿日期] 2008-07-25
[基金项目] 国家科技攻关计划项目（2006BAI14B05）；国家自然科
学基金（90709043）
[通信作者] *梁爱华，Tel：(010)84035683，E-mail：liangaihua@sina.com
1 材料
1.1 动物 BN 大鼠：体重 150~180 g，北京维通利
华实验动物技术有限公司，SPF 级，许可证号 SCXK
（京）2007-0001；豚鼠体重 180~200 g，北京市海
淀兴旺动物养殖场，一级，许可证编号：SCXK（京）
2006-0006；SD 大鼠：北京维通利华实验动物技术
有限公司，SPF 级，许可证号 SCXK（京）2007-0001。
1.2 药物 牛血清白蛋白（Sigma 公司，北京鼎国
生物技术发展中心分装，纯度>98%，50 g/瓶）；伊
文思蓝（沃凯国药集团化学试剂有限公司，批号
WC20070607，10 g/瓶）。
1.3 试剂 豚鼠 IgE Elisa 试剂盒，大鼠 IgE Elisa
试剂盒（Uscn 生命科学技术公司，货号分别为
E0545Gu，E0545r）。
2 方法
2.1 主动全身过敏反应中药、天然药物免疫毒性
（过敏性、光变态反应）研究的技术指导原则（第
二稿）[2]，GPTS-1，2004 年 8 月。以下简称原则）。
将健康雄性白色豚鼠和 BN 大鼠按体重各随机分
为：正常组；0.6%牛血清白蛋白组（BSA）；每组 5
只。BSA 组于试验第 1，3，5 天分别腹腔注射 0.6%


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牛血清白蛋白以致敏，1 mL/只/次。于第 3 次致敏
后第 7 天及第 14 天分别静脉注射 2.4％BSA（1
mL/只）以激发过敏反应。在以上各时间点，对照
组均采用与 BSA 组相同的给药途径给予同体积生
理盐水。在每次静脉注射后即刻至 1 h 内，观察各
动物的过敏反应，进行过敏反应症状评分见表 1。
于最后 1 次激发后 1 h，采用 0.6%戊巴比妥钠 ip 麻
醉动物，经腹主动脉无菌取血，3 000 r·min-1 离心
15 min，分离血清，留测 IgE 及进行被动皮肤过敏
反应试验。
表1 过敏反应症状评分标准
分级 症状
- 无症状
+ 不安宁、立毛、发抖、搔鼻
++ 喷嚏、咳嗽、呼吸急促、排尿、排粪、流泪
+++ 呼吸困难、紫癜、步态不稳、跳跃、喘息、痉挛、横转、潮式呼吸
++++ 死亡

2.2 IgE 含量的测定 实验方法 2.1 项中的动物血
清，采用 ELISA 试剂盒（竞争法）检测血清中 IgE
含量。
2.3 被动皮肤过敏反应（原则） 将健康雄性 SD
大鼠按体重随机分为：1 豚鼠对照血清组；2 BN 对
照血清对照组；3 豚鼠 BSA 血清组；4 BN BSA 血
清组，每组 5 只。
将动物背部脊柱两侧脱毛，脱毛区皮内注射相
应组动物的血清：豚鼠及 BN 对照血清组分别注射
实验方法 2.1 中的豚鼠及 BN 对照组的血清，而豚
鼠及 BN BSA 血清组分别注射豚鼠及 BN 牛血清白
蛋白组动物的血清（动物血清的获得参考实验方法
2.1 项）。每只 SD 大鼠背部注射 2 个点，每个点皮
内注射血清 0.2 mL。48 h 后，豚鼠 BSA 血清组和
BN BSA血清组分别静脉注射含0.8%的伊文斯蓝的
2.4%牛血清白蛋白 1 mL；豚鼠及 BN 对照血清组则
注射 1 mL 含 0.8%的伊文斯蓝的生理盐水。注射后
30 min 将动物处死，剥开背部皮肤，测量皮肤内侧
的蓝色反应斑直径，将蓝色斑片剪下，没有形成蓝
色斑片的动物剪下 3.0 cm×1.5 cm 面积大小的皮肤。
将取下的皮肤剪碎，加入丙酮-生理盐水（7:3）混
合液 6 mL，浸泡 24 h。离心，取上清液于 610 nm
处测吸光度（A）。根据伊文思蓝标准曲线，计算伊
文思蓝染料渗出量（cm2）。
3 统计分析
过敏反应症状采用非参数秩和检验。IgE 和伊
文思蓝渗出量数据均以 x ±s 表示。采用方差分析进
行统计，样本资料不满足方差齐性条件，采用随机
区组设计的多个样本比较的 F 检验，若整体分布水
平有差异，则用 T 检验进行两两比较。
4 结果
4.1 主动全身过敏反应 在第 1 次激发后，BN 大
鼠BSA组的过敏阳性反应动物数较BN对照组明显
增多，两者比较有显著差异（P<0.05），与豚鼠对照
组比较亦有明显增多（P<0.05）。豚鼠 BSA 组阳性
反应动物数虽较对照组有所增加，但无统计学意
义。结果见表 2。第 2 次激发后，豚鼠及 BN 大鼠
BSA 组阳性反应级别较第 1 次激发有所降低，而
BN 对照组亦有 3 只动物出现竖毛、躁动等弱阳性
过敏反应。结果见表 3。
表2 豚鼠及BN大鼠的全身过敏反应症状评级（第1次攻击）
过敏反应症状级别 组别
- + ++ +++ ++++
豚鼠正常 5 0 0 0 0
豚鼠 BSA 1 3 0 1 0
BN 正常 6 0 0 0 0
BN BSA1,2) 0 0 0 6 0
注：与豚鼠正常组比较 1)P<0.05；与 BN 正常组比较 2)P<0.05（表 3
同）。

表3 豚鼠及BN大鼠的全身过敏反应症状评级（第2次攻击）
过敏反应症状级别 组别
- + ++ +++ ++++
豚鼠正常 5 0 0 0 0
豚鼠 BSA 3 1 1 0 0
BN 正常 3 3 0 0 0
BN BSA1,2) 1 0 0 5 0

4.2 IgE 含量的测定 同种属动物的 BSA 组与对
照组的血清 IgE 含量未见明显差异。不同种属之间，
BN 的 IgE 含量低于豚鼠，两者比较有明显差异见
表 4。
4.3 被动皮肤过敏反应 采用 BN 大鼠和豚鼠用
BSA 致敏后分别提供致敏血清，在 SD 大鼠上进行
异种动物被动皮肤过敏试验。结果显示，BN BSA
血清组在 SD 大鼠上造成非常明显的被动皮肤过敏
反应，动物背部皮肤在致敏血清的皮内注射部位周
围形成了清晰的圆形蓝色斑点，面积约为 12 cm2，


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表 4 豚鼠及 BN 大鼠血清中的 IgE 含量（ x ±s） mg·L-1
第 1 次攻击 第 2 次攻击 组别
n IgE n IgE
豚鼠正常 5 207.39±71.11 5 172.73±42.54
豚鼠 BSA 5 190.63±32.18 3 152.19±37.48
BN 正常 5 82.37±24.06 1,3) 5 69.37±25.902,4)
BN BSA 5 73.53±25.781,3) 5 73.97±31.242,5)
注：与豚鼠正常组比较，1)P<0.001，2)P<0.01；与豚鼠 BSA 组比较，
3)P<0.001，4)P<0.01，5)P<0.05。

皮下渗出伊文思蓝蓝斑面积增大，渗出量明显增多
（与对照组比较 P<0.05）。而豚鼠致敏血清在 SD
大鼠上未造成明显的被动皮肤过敏反应，未形成明
显蓝斑，伊文思蓝渗出量与对照组比较无明显差
异。结果见表 5。
表 5 豚鼠及 BN 大鼠伊文思蓝染料渗出量（ x ± s）
渗出量 组别
n μg·cm-2
蓝斑面积
/cm2
豚鼠正常对照 5 0.10±0.05 0.00±0.00
豚鼠 BSA 5 0.17±0.06 0.00±0.00
BN 正常对照 5 0.18±0.15 0.00±0.00
BN BSA 6 1.94±1.031,2,3) 11.80±3.791,2,3)
注：与豚鼠正常组比较 1)P<0.05；与 BN 正常组比较 2)P<0.05；与
豚鼠 BSA 组比较 3)P<0.05。

5 讨论
在全身主动过敏反应试验中，BN 大鼠在给予
较低剂量的致敏原 BSA （0.6%，1 mL/只）致敏后，
有较多的动物产生明显的过敏反应，动物除了有竖
毛、搔鼻、咳嗽、喷嚏、躁动、呼吸急促，还有步
态不稳，呼吸困难，出现哮鸣音等。一般在攻击后
即刻至 10 min 左右出现。但相同剂量的 BSA 在豚
鼠上除 1 只出现强阳性过敏反应外，其余未出现上
述症状，仅表现为竖毛、搔鼻、咳嗽、喷嚏等。BN
大鼠用于全身过敏试验较豚鼠敏感。
从 BN 大鼠的 BSA 组第 1 次及第 2 次激发试验
后的过敏程度来分析，第 1 次激发的过敏症状较第
2 次强，阳性动物数多。结果表明，增加激发次数
并不能增强其过敏反应，反而使过敏反应有所减
轻，认为动物多次接触致敏原后可能会产生一定的
耐受现象。
被 动 皮 肤 过 敏 试 验 （ passive cutaneous
anaphylaxis，PCA）是常用于致敏原筛选的敏感方
法[5]。致敏动物的血清内含丰富的 IgE 抗体，皮内
注射于正常动物后，IgE 与局部皮肤肥大细胞的 FC
受体结合，使之被动致敏。当抗原攻击时，引起局
部肥大细胞释放过敏介质，从而使局部血管的通透
性增加。本试验结果显示，BN 大鼠致敏血清在 SD
大鼠上可造成非常明显的被动皮肤过敏反应，而豚
鼠致敏血清的作用不明显，故不同的动物作为致敏
血清供体，其造成的被动皮肤过敏反应敏感性有差
别，在本实验中 BN 大鼠比豚鼠更为敏感。
综上，不论是 BN 大鼠还是豚鼠，在致敏并激
发处理后，血清 IgE 含量均与对照组比较未见明显
增高。尽管 BN 大鼠在主动全身过敏试验和被动皮
肤过敏试验中均呈现较强的阳性反应，但血清中的
IgE 含量并不增高，故在本研究中 IgE 含量结果与
过敏反应不一致，其原因是与试剂盒的测定方法及
灵敏度有关，还是与过敏反应中所介导的抗体种类
有关尚值得将来进一步研究。
在主动全身过敏试验为期 3 周的试验期内，BN
大鼠全部存活，生长状况良好；豚鼠则有 15%的动
物死亡；在过敏试验操作方面，用 BN 大鼠进行腹
腔注射、皮内、静脉注射等简便易行。而豚鼠则在
操作中容易躁动，血管较细，静脉注射很困难。因
此，与豚鼠相比 BN 大鼠具有应用优势。然而，从
研究成本来看 BN 大鼠的价格较豚鼠高。
本试验从全身主动过敏试验和被动皮肤过敏
试验的敏感性以及动物易操作性等方面综合评价
认为，BN 大鼠是一种可用于过敏试验的较好的动
物模型。
[参考文献]
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Shirota does not decrease the food allergic response to peanut extract
in Brown Norway rats[J]. Toxicology，2008，249（2/3）：140.
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Th2-prone Brown Norway rat[J].Toxicology，2008，246（2/3）：
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[3] De Jonge J D， Ezendam J，Knippels L M，et al. Bis（tributyltin）
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Omparative study on allergen assessment animal models in brown
norway rat and guinea pig

LIU Ting ，LIANG Aihua*，YI Yan ，LI Chunying ，ZHAO Yong， HAO Ran ，CAO Chunyu
(Institute of Chinese Materia Medica，China Academy of Chinese Medical Sciences，Beijing 100700，China)

[Abstract] Objective：To compare the sensitivity of Brown Norway rats（BN）with Guinea pigs（GP）as allergen assessment
animal models. Method: BN rats and GP were randomly assigned to 1 control group，2 Bovine serum albumin group （BSA），
respectively. Animals in BSA groups of BN rats and GPs were sensitized by intraperitoneal injection of 0.6% BSA 1 ml on day 1，3，
5，respectively，and irritated by intravenous injection of 2.4 % BSA 1 ml on day7 and day 14 after the last sensitization，while the
same volume of normal saline was given to control group on each time point mentioned above. The allergic reactions were scored
within 1 h after each irritation treatment，and the sera of both BN rats and GPs were collected to detect IgE concentration by using
ELISA. The sera were also applied for passive cutaneous anaphylaxis test (PCA test) in SD rats. Result: No obvious allergic
reactions were observed in BSA group of GPs after each irritation treat，however，the score of allergic response in BSA group of BN
rats was evidently higher than that in control group after first irritation. PCA test by using sera from BSA group of BN rats after both
irritations showed the strong positive result characterized as large amount of subcutaneous effusions of Evans blue in SD rats，
however，the sera from BSA group of GP were negative in PCA test. Serum IgE concentration did not increase after each irritation
in BSA group of both BN rats and GP. Conclusion: BN rats were more sensitive than GPs on initiative systemic anaphylaxis test
and passive cutaneous anaphylaxis test. Meanwhile，BN rats has an advantage in experimental treatment compared with Guinea pigs .
[Key words] allergen assessment；anaphylaxis test；animal model
[责任编辑 周 驰]