全 文 ：银杏根皮中萜内酯提取工艺研究
何臖!! 杨硕! 杨佳年! 卿晓红
贵州省生化工程中心! 贵州 贵阳 $$+# $摘要%!目的&探索出以乙醇5水为浸提溶剂的银杏根皮中萜内酯的提取工艺$确定最佳提取参数( 方法&通过对银杏根 皮提取参数中浸提温度%浸提时间%料液比%浸提醇浓度%浸提酸度进行单因素梯度试验$采用JGF<法检测含量$确定银杏根 皮中萜内酯浸提最佳参数( 结果&银杏根皮中萜内酯最佳浸提条件#浸提时间 + ?)料液比 r)浸提温度 $ h)浸提液 AJ)) )$g乙醇( 结论&以乙醇5水为溶剂从银杏根皮中提取萜内酯的方法具可行性和生产应用价值( $关键词%!银杏根皮)萜内酯)提取 $稿件编号%!+$$
$基金项目%!贵州省科技厅 +$$年省基金项目!+$$)$*#)贵州
省科技厅 + $$( 年省重大专项项目!+$$ (#$+$
$通信作者%!!何臖$副教授$主要从事天然产物活性成分分离提取 研究$NQV#) $$%(#+&+&$H50BRV#?Q1W2$#3#)f./0 !!银杏萜内酯主要包括银杏内酯 4$M$<和白 果内酯( 银杏内酯 M是一种很有应用前景的特 异性血小板激活因子!G4E受体拮抗剂$其专一 性高$而银杏内酯 4也是一种重要的昆虫拒食 素$白果内酯对老年痴呆症和神经系统疾病具有 一定疗效 *5++ ( 目前$银杏萜内酯对心脑血管及 外周血管疾病的疗效已使它成为药品及保健食 品的原料( 但目前银杏萜内酯化合物的主要工 业生产来源为银杏叶$而对银杏根皮的研究报道 相对较少( 本实验以银杏根皮为原料$用乙醇5水溶液提 取$采用单因素法研究不同条件对银杏根皮中内酯 浸提效果的影响$寻求最佳浸提工艺( 对废弃的银 杏根皮进行利用$提高了银杏资源利用指数( !材料 高效液相色谱仪!42DRVQ2@$$ 型$示差检测 器)恒温水浴锅!JM5()电子分析天平!上海奥豪斯 公司$I\+公司$EZ($)
白果内酯 ! 8R2D0B公司$批号 (+J$++$纯度 *g%银杏内酯 4$M$<对照品!中国药品生物制 品检定所$纯度分别为 *$g$*g$*%g$批号分别
为 +J$#$$(#)5+$$)$ $$(#&5+$$ )$&)银杏 根皮!购自江苏徐州市邳州县) !方法与结果 ]!色谱条件及系统适应性 J6AQCSRV< ( 色谱柱!&f# 00i$ 00$0) 流动相甲醇5水5四氢呋喃!%r%r))流速$f 0F-
0R2
d
)进样体积 $F)柱温 ) h)示差检测器( ]!对照品及供试品溶液的制备 供试液#银杏根皮置于 %$ h烘箱烘 + ?$冷却 后粉碎成粉末$置于密封袋保存备用( 精确称取 D
银杏根皮粉末于 $0F密封管中$加入 # 0F甲醇$在 h水浴密封浸提 + ?$取出冷却后加水 & 0F$摇匀后过装有 f D酸性氧化铝干柱$流出液过微
滤后置于密封管待上机(
对照液#精确称取标样银杏内酯 内酯4!L4%白果内酯!MM和银杏内酯 M!LM&
0D于试管中$加甲醇超声溶解并定容$制备成 $f& D -F d对照品贮备液$待用(
]&!线性关系考察
分别吸取对照品贮备液并稀释为 $f$ $$f$ $f+$$ f) $$f& D-F d $按上述色谱条件测定( 以对 照品浓度为纵坐标$峰面积为纵坐标进行线性回归$ 得 & 种成分的回归方程%相关系数及线性范围$& 种 内酯在 $f$ j$f& 0D-Fd 时关系特性良好( 见表 ( 表 !& 种银杏萜内酯线性方程和相关系数 化合物 回归方程 % 白果内酯 Led$f$$ ) ## m$f$$* ((K$f*** (#
银杏内酯# Led$f$$& %* m$f$) *&K$f*** (*
银杏内酯C Led$f$$** m$f$% K$f*** *$银杏内酯> Led$f $$+% m$f$$ * &(K $f*** %( -%+- 第 ) 卷第 * 期 +$$年 月 !!!!!! ! ! ! ! !!!!!! ! ! ! ! \/Vf)$ :SSWQ!*
9B6$+$$]Y!精密度考察 精密吸取混合对照品溶液$按上述色谱条件重
复进样 # 次$每次$

F$记录 & 种银杏内酯的峰面 积$计算白果内酯%银杏内酯 4$M$<的 >8I分别为
+fg$f+g$f&g$fg( ]$!重复性试验
从同一批银杏根皮中平行取样 份$按供试液 方法制备$每个供试品溶液测定 ) 次$取平均值( 结 果表明白果内酯%银杏内酯 4$M$<的 >8I分别为 f+g$$f&g$$f#(g$$f+g( ][!稳定性试验 取同一供试品溶液$分别于 $$&$($+$+&$)#$ &( ?上机测定$每个供试品溶液测定 ) 次$取平均值 计算含量$白果内酯%银杏内酯 4$M$<的 >8I分别 为 f&$g$$ f(g $$f**g$$ f*%g$结果表明样品 溶液在 &( ?内稳定( ]%!加样回收试验 精密称取 份已知含量的同一批银杏根皮粉 末$分别加入白果内酯%银杏内酯4$M$<适量$按供 试液方法制备$每个供试品溶液测定 ) 次$取平均 值$计算对照品的平均加样回收率$结果表明白果内 酯%银杏内酯 4$M$<添加回收率为 *f)$g$**f%+g$*(f#g$*%f#)g$白果内酯%银杏内酯 4$M$<的>8I分别为 fg $$f(#g$$ f*#g $$f*+g( ]\!从银杏根皮中提取内酯的条件选择 ]\]!浸提醇浓度选择!称取 f$ D上述备用银 杏根皮粉末 份于密封管$分别加入 $ 0F!料液比 r$$ g$)$g $$g$%$g$*$g的乙醇水溶液$置 于 $ h水浴中加热 + ?$浸提液过装有 f D酸性 氧化铝干柱$流出液过微滤后测定$取平均值并计算 浸提量$结果见图 ( 图 !乙醇浓度对内酯含量的影响!-e) 从图 可知$乙醇5水溶液浸提效果明显好于 水$在 )$g以下时醇浓度对浸提率的影响呈线性上 升$)$g醇提时提取最好$但当浸提溶剂醇浓度大于 )$g后内酯浸提减小$可能是因为温度高产生的影 响( 综合成本和提取率考虑$确定最佳浸提醇浓度 为 )$g( ]\]!浸提温度选择!分别平行 ) 次精密称取上 述备用银杏根皮粉末 $f D& 份于密封管中$用 0F!料液比为 r$)$g乙醇水溶液$分别于$$
# $$%$$ ($h下水浴中浸提 + ? 后取出$浸提液过装
有 $f% D酸性氧化铝干柱$流出液过微滤上机$取平 均值并计算浸提量( 结果见图 +( 图 +!浸提温度对内酯含量的影响!-e) 从图 + 可以看出$在 $h前内酯含量随温度升 高而升高$而后随温度的升高$总内酯含量有所降 低( 综合考虑各方面因素$最佳浸提温度为 $h( ]\]&!浸提时间选择!分别精密称取$f D上述
备用银杏根皮粉末 & 份于密封管中$用 0F!料液 比为 r$的 $g乙醇水溶液$于 $h水浴中浸提$+$)$& ?( 浸提液过装有 $f% D酸性氧化铝干柱$
流出液过微滤上机测定$计算浸提量( 结果见图 )( 图 )!浸提时间对内酯含量的影响!-e) 从图 ) 可知$浸提时间为 + ? 时总内酯含量最
高$随后随着时间延长$含量降低( 可能是加热时间
太长引起内酯结构的破坏$因此$确定最佳浸提时间
为 + ?(
]\]Y!料液比选择!分别精密称取 $f D上述 备用银杏根皮粉末 份于密封管中$分别用 $-(+- 第 ) 卷第 * 期 +$$年 月 !!!!!! ! ! ! ! !!!!!! ! ! ! ! \/Vf)$ :SSWQ!*
9B6$+$$%f$ $$+f$ 0F!料液比分别为 r$$ r$r+$$r+$r)g的乙醇水溶液$于$ h
下水浴加热 + ? 后取出$浸提液过装有$f% D酸
性氧化铝干柱$流出液过微滤上机测定$并计算
浸提量( 结果见图 &(
图 &!料液比对内酯含量的影响!-e)
从图 & 可知$银杏根皮中的内酯提取量在初始 时随料液比升高而升高$r 时达到最大( 随后料
液比增大对总内酯浸提影响不大( 综合考虑成本$后续浓缩操作等$确定最佳料液比为 r(
]\]$!浸提液酸度选择!分别精密称取$f D上
述备用银杏根皮粉末 份于密封管中$用 %f 0F !料液比为 r AJ依次为 )$$%$*$的$g乙
醇水溶液$于$ h水浴加热 + ? 后取出$浸提液过 装有$f% D酸性氧化铝干柱$流出液过微滤上机测 定$并计算浸提量( 结果见图 (
从图 可知$银杏根皮萜内酯浸提量在 AJ 时 最高( 酸度对内酯浸提率影响显著$AJ达到 以后
急速下降$到 AJ* 时含量已经很低$AJ 时未检
测出( 主要是银杏内酯在碱中酯环开环$其中白果 !! 图 !提取液 AJ对内酯含量的影响!-e) 内酯最为敏感$所以在碱性环境中总内酯量急剧降
低( 因此$确定最佳浸提 AJ( &!讨论 本实验通过单因素梯度试验研究$采用密封浸
提方式提取银杏根皮中银杏内酯$主要对浸提时间$
浸提温度$料液比$浸提酸度几种浸提参数进行研
究$结果表明$影响银杏根皮中内酯提取最佳浸提条
件为浸提溶剂为 )$g乙醇$浸提温度 $h$料液比
r$浸提时间为 + ?$浸提 AJ(
实验结果对采用乙醇5水为溶剂提取银杏根皮
中的银杏内酯提供浸提成为可能$同时对很多药厂 生产中内酯的损失提供参考$同时为对废弃银杏根
皮资源的综合利用提供依据(
$参考文献% *+!李兆龙f银杏开发与利用*9+f上海#上海科学技术出版社$
**##%$f *++!张迪清$何照范f银杏叶资源化学研究*9+-北京#中国轻工
业出版社$***#f *)+!N4\B2 ]QQ[$J442@R/-IQ@QC0R2B@R/2 /TDR2[D/V5
RUQB2U ]R/]BVRUQB2U ]RV/]BVRUQR2 1;-T<,;(<,& VQBcQSB2U A?6@/5
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