全 文 ：插繁殖出现扦插后假活现象，主要是扦插后插条利
用其积累的干物质发芽，但受环境不适宜、方法不当
及扦条质量等的影响，扦条未发生根，出现扦插后发
芽好成苗低的现象，针对这一生产实际，本试验观察
测定的指标中大量是根的生长发育指标，更能反映
生产实际，同时也把根活力作为评价扦插方式优劣
的第二个重要指标。
［参考文献］
［１］ 中国药典［Ｓ］．一部．２００５：２３３．
［２］ 熊庆娥．植物生理学实验教程［Ｍ］．成都：四川科学技术出版
社，２００３：３０．
［３］ 盖钧镒．实验统计方法［Ｍ］．北京：中国农业出版社，２０００：
１０５．
［责任编辑 张宁宁］
［收稿日期］ ２００６０６０１
［通讯作者］ 宋晓宁，Ｔｅｌ：（０８５１）５８９１３２４，Ｅｍａｉｌ：ｇｚｄｙｘｑｌ＠
ｓｉｎａ．ｃｏｍ．ｃｎ
ＨＰＬＣ测定复方岩连片重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ的含量
宋晓宁，许乾丽，茅向军
（贵州省药品检验所，贵州 贵阳 ５５０００４）
复方岩连片由石吊兰、重楼、板蓝根、百部、和杠
板归５味药材组成，功效为清热解毒，化痰止咳。用
于上呼吸道感染引起的感冒咳嗽，急慢性支气管炎，
咽喉炎，扁桃体炎等。其质量标准收载于《卫生部
药品标准》中药成方制剂第九册中，没有含量测定
指标，作者按照“国家药品标准提高行动计划”的要
求，对重楼进行含量测定。重楼皂苷Ⅰ和重楼皂苷
Ⅱ是重楼的主要有效成分，测定的方法多为高效液
相色谱法，薄层扫描法等。参考《中国药典》２００５年
版一部及有关文献资料［１４］，对制剂中的重楼皂苷
Ⅰ，Ⅱ含量进行了测定，并对测定的方法学进行了研
究。
１ 仪器、试药和样品
Ｗａｔｅｒｓ２６９５高效液相色谱仪，Ｅｍｐｏｗｅｒ色谱工
作站，带二级管阵列检测器；恒温柱箱；ＴＣＱ－２５０
超声波清洗器（北京医疗设备二厂）。乙腈为色谱
纯，水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯；重楼皂苷
Ⅰ，Ⅱ对照品（中国药品生物制品检定所，供含量测
定用，批号分别为１１１５９０２００４０２，１１１５９１２００４０２）。
复方岩连片（贵州德昌祥药业有限公司）。
２ 方法与结果
２．１ 色谱条件 ＷａｔｅｒｓＳｕｎＦｉｒｅＴＭ Ｃ１８（４６ｍｍ×
１５０ｍｍ，５μｍ）色谱柱。流动相乙腈水（４２∶５８），流
速１ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测波长２１０ｎｍ，柱温３０℃。重
楼皂苷Ⅰ与相近峰分离度大于１５。理论板数以重
楼皂苷Ⅰ峰计算不低于３５００。
２．２ 供试品及对照品溶液的制备 供试品溶液的
制备 取本品１２ｇ，精密称定，精密加入２％的氢氧
化钾甲醇溶液５０ｍＬ，称定质量，加热回流４０ｍｉｎ，
放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，滤过，取
续滤液２５ｍＬ，置蒸发皿中蒸干，残渣加水１０ｍＬ溶
解并移至分液漏斗中，用１０ｍＬ正丁醇饱和的水分
次洗涤蒸发皿，合并到上述分液漏斗中，用水饱和的
正丁醇提取 ４次（２０，２０，２０，１０ｍＬ），合并正丁醇
液，用氨试液、正丁醇饱和的水各洗涤１次，每次３０
ｍＬ，弃去洗涤液，正丁醇液置蒸发皿中蒸干，残渣加
甲醇溶解并移至５ｍＬ量瓶中，用甲醇稀释至刻度，
摇匀，用微孔滤膜（０４５μｍ）滤过，取续滤液，作为
供试品溶液。
阴性对照溶液的制备是按处方中药味的比例，
配不含重楼的群药，按其工艺制成重楼空白制剂，再
按供试品溶液制备方法制备。
对照品溶液的制备：精密称取重楼皂苷Ⅰ，Ⅱ各
适量，加甲醇制成每１ｍＬ分别含重楼皂苷Ⅰ０２８
ｍｇ、重楼皂苷Ⅱ ０１４ｍｇ的溶液，即得。在上述色
谱条件下，分别精密吸取对照品溶液１０μＬ与供试
品溶液、阴性对照溶液各２０μＬ，注入液相色谱仪，
测定，得到重楼皂苷对照品溶液、供试品溶液与阴性
对照溶液的色谱图见图１。
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第３３卷第２期
２００８年１月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ ２
Ｊａｎｕａｒｙ，２００８
图１ 复方岩连片ＨＰＬＣ图
Ａ．对照品；Ｂ．样品；Ｃ．阴性对照品；
１．重楼皂苷Ⅰ；２．重楼皂苷Ⅱ
２．３ 线性关系考察 精密吸取重楼皂苷Ⅰ，Ⅱ对照
品溶液（０５７６８，０２９０８ｍｇ·ｍＬ－１）１，２，３，４，５ｍＬ
分别置５ｍＬ量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，分别
精密吸取１０μＬ，注入液相色谱仪，记录峰面积，以
重楼皂苷Ⅰ，Ⅱ对照品进样量为横坐标，峰面积积分
值为纵坐标，绘制标准曲线。回归方程重楼皂苷Ⅰ
Ｙ＝１０６×１０５Ｘ－４３２×１０３，ｒ＝０９９９２，重楼皂
苷ⅡＹ＝８７１×１０４Ｘ－２１２×１０３，ｒ＝０９９９７。结果
表明重楼皂苷Ⅰ在１２～５８μｇ线性关系良好，重
楼皂苷Ⅱ在０５８～２９μｇ线性关系良好。
２．４ 精密度试验 精密吸取同一含量的对照品溶
液连续进样６次，分别测定重楼皂苷Ⅰ，Ⅱ吸收峰面
积积分值，ＲＳＤ分别为１６％，０５４％。
２．５ 重复性试验分 别取同一批号（２００６０４３８）复
方岩连片，按样品的测定方法平行测定６份，样品中
重楼皂苷Ⅰ含量的 ＲＳＤ２２％，重楼皂苷Ⅱ含量的
ＲＳＤ２３％。
２．６ 稳定性试验 取同一份供试样品溶液，于０，
２，４，８，１２，１８ｈ进行测定，重楼皂苷Ⅰ峰面积的ＲＳＤ
２０％，重楼皂苷Ⅱ峰面积的ＲＳＤ２８％。表明样品
溶液在１８ｈ内稳定。
２．７ 加样回收率试验 精密量取已知质量浓度的
同一批号的样品（２００６０４３８）（重楼皂苷Ⅰ质量浓度
０７５５６ｍｇ·ｇ－１，重楼皂苷Ⅱ质量浓度０３２３５ｍｇ
·ｇ－１）６份，分别精密加入重楼皂苷Ⅰ，Ⅱ对照品，
按供试品溶液的制备方法制备及上述色谱条件测定
含量，计算回收率，结果见表１。
２．８ 样品测定 分别精密吸取重楼皂苷Ⅰ，Ⅱ混合
对照品溶液１０μＬ及供试品溶液各２０μＬ，按上述
色谱条件测定，计算重楼皂苷Ⅰ，Ⅱ含量，测定结果
见表２。
表１ 重楼皂苷Ⅰ和Ⅱ的加样回收率
成分
称样量
／ｇ
样品中量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
重楼皂苷Ⅰ ０６１２３ ０４６２７ ０９４７６ １００９ １００２ ２２
０６０５１ ０４５７２ ０９２９７ ９８３
０６２０４ ０４６８８ ０９６００ １０２２
０６０１９ ０４５４８ ０９４１７ １０１３
０６１３２ ０４６３３ ０９２８１ ９６７
０５９９４ ０４５２９ ０９４１３ １０１６
重楼皂苷Ⅱ ０６１２３ ０１９８１ ０４０６５ １００８ １００３ １４
０６０５１ ０１９５８ ０３９９６ ９８６
０６２０４ ０２００７ ０４０７２ ９９９
０６０１９ ０１９４７ ０３９９２ ９８９
０６１３２ ０１９８４ ０４０８８ １０１８
０５９９４ ０１９３９ ０４０４０ １０１６
注：重楼皂苷Ⅰ加入量均为０４８０７ｍｇ，，重楼皂苷Ⅱ加入量均
为０２０６８ｍｇ
表２ ３批样品中重楼皂苷每片含量 ｍｇ
批号 重楼皂苷Ⅰ 重楼皂苷Ⅱ
２００６０４３８ ０２７４５ ０１２１６
２００５０９１０ ０１０２１ ００４６１
２００５０６２０ ０１０６６ ００４９１
３ 讨论
供试品提取方法，本研究采用超声提取和加热
回流提取２种方法比较测定，结果表明加热回流的
提取率比超声提取率高，故选用加热回流方法，又对
不同提取时间（２０，４０，６０ｍｉｎ）进行比较，结果表明
提取时间４０ｍｉｎ即可将制剂中的重楼皂苷提取完
全，故选用加热回流４０ｍｉｎ。
由于本品为复方制剂，成分复杂，为使色谱图中
重楼皂苷能获得满意的分离，曾对样品前处理方法
进行多种方法实验。用不同提取溶剂：甲醇、７０％甲
醇、５０％甲醇、３０％甲醇、乙醇、７０％乙醇、５０％乙醇、
３０％乙醇以及含２％氢氧化钾的甲醇溶液提取，欲
测成分峰面积最大，且选用含２％氢氧化钾甲醇溶
液提取样品溶液中杂质少，不干扰测定。
［参考文献］
［１］ 中国药典［Ｓ］．一部．２００５：１８３．
［２］ 周志华．重楼的分析［Ｊ］．现代中药临床与研究，１９８８，２３（２）：
１３７．
［３］ 邹 阳，胡 迪，叶晓川，等．神农消颗粒的质量标准研究［Ｊ］．
中国实验方剂学杂志，２００５，１１（４）：１８．
［４］ 黄 云，王 强，崔立健．重楼化学分类学的初步研究皂苷的
分析［Ｊ］．中国药物科学杂志，２００５，１４（３）：１７６．
［５］ 孟 芹，郭永利，马克坚．云南红药片质量标准研究［Ｊ］．中国
药业，２００１，１０（１）：２７．
［责任编辑 牛泽宇］
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第３３卷第２期
２００８年１月
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Ｊａｎｕａｒｙ，２００８