全 文 ：ＲＰＨＰＬＣ测定微乳剂中银杏酸同系物含量
杨小明１，夏 磊２，张秀丽１，张蓉仙１
（１．江苏大学 化学化工学院，江苏 镇江 ２１２０１３；
２．江苏大学 食品与生物工程学院，江苏 镇江 ２１２０１３）
［收稿日期］ ２００７０７２５
［基金项目］ 江苏省社会发展基金（ＢＳ２００５０４２）
［通讯作者］ 杨小明，Ｔｅｌ：（０５１１）８７９１８００，Ｅｍａｉｌ：ｚｊｙｘｍ２００３
＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ
杀灭钉螺是预防和控制日本血吸虫病传播的重
要措施之一。采用植物杀钉螺剂能克服氯硝柳胺成
本高，对水中鱼类、贝类毒性大，长期使用对环境将
造成不良影响的缺点［１］。因此高效、低毒、价廉的
植物源杀钉螺药物的开发必将是未来发展的方
向［２］。
银杏ＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａＬ．外种皮是生产白果的废弃
物，其提取物能抑制病原菌生长［３］，对菜青虫、桃赤
蚜等有毒杀和骨杀作用［４］。前期作者首次报道了
银杏外种皮石油醚提取物具有良好的杀钉螺效
果［５，６］，银杏酸是其中的主要活性成分［７］。银杏酸
（ｇｉｎｋｇｏｌｉｃａｃｉｄｓ，ＧＡ）是６烷基或者６烯基水杨酸
的衍生物，其苯环６位碳链长度１３～１７，双键数０～
２，为５种同系物所组成的混合物。
为增加银杏外种皮石油醚提取物在水中的分散
性，作者将其研制成微乳剂剂型，活性试验结果表
明，其微乳剂的杀钉螺效果较原药更好。为了便于
微乳剂质量的监控和制备的条件优化，作者应用
ＲＰＨＰＬＣ测定了微乳剂中银杏酸同系物含量。在
已有银杏酸含量测定的报道中，样品预处理过程复
杂［８，９］，本方法简化了分析过程，可用于银杏杀钉螺
微乳剂的质量快速测定。
１ 仪器与试剂
ＰｒｏＳｔａｒ高效液相色谱仪，３２５型紫外检测器（美
国ＶＡＲＩＡＮ公司）；ＵＶ－２４５０型紫外可见分光光度
计（日本岛津）；ＭｅｔｌｅｒＡＥ２４０型电子分析天平（上
海梅特勒托利多仪器有限公司）。
银杏酸Ｃ１３∶０对照品由中国药科大学提供，纯
度为９５％；银杏酸同系物对照品自制，纯度 ９５％；
ＤＢＳＣａ由江苏钟山化工有限公司提供；色谱分析用
甲醇为色谱纯；其余试剂均为分析纯，水为二次蒸馏
水。
２ 方法与结果
２．１ 色谱条件 ＥｌｉｔＯＤＳＡＰＣ１８柱（４．６ｍｍ×２５０
ｍｍ，５μｍ），流动相甲醇３％甲酸溶液（９２∶８），检测
波长３１０ｎｍ，流速为１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１，进样量１０μＬ，
柱温４０℃。
２．２ 检测波长的确定 分别取一定量的银杏酸对
照品、微乳剂基质和微乳剂，在２００～４００ｎｍ扫描，
结果见图１。由图１可见微乳剂基质在２９０ｎｍ以
上没有吸收，对银杏酸在３１０ｎｍ处的吸收峰不产生
干扰，因此选择３１０ｎｍ作为微乳剂中银杏酸的检测
波长。
图１ 银杏酸和微乳剂的紫外光谱
Ａ．微乳剂基制；Ｂ．对照品；Ｃ．微乳剂
２．３ 对照品溶液的配制 精确称取银杏酸对照品，
无水甲醇溶解，定容于 ２５ｍＬ量瓶，质量浓度为
２．０１６ｍｇ· ｍＬ－１，０．４５μｍ针头滤器过滤，备用。
２．４ 供试品溶液的制备 微乳剂供试液的制备：精
确称取１．０ｇ微乳剂，无水甲醇溶解，定容于１０ｍＬ
量瓶，０．４５μｍ针头滤器过滤，备用。
微乳剂基质为微乳剂中除银杏外种皮石油醚提
取物之外的成分，按２．４项微乳剂供试品溶液的制
备方法制备，得基质供试液。
２．５ 线性范围的考察和标准曲线的测定 按２．１
色谱条件，银杏酸对照品和微乳剂中银杏酸的色谱
图，见图２。
分别准确吸取银杏酸对照品溶液４，８，１２，１６，
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第３３卷第２期
２００８年１月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ ２
Ｊａｎｕａｒｙ，２００８
图２ 银杏酸的ＨＰＬＣ图
Ａ．对照品；Ｂ．微乳剂；１银杏酸 Ｃ１３∶０；２银杏酸 Ｃ１５∶１；３银
杏酸Ｃ１７∶２；４银杏酸Ｃ１５∶０；５银杏酸Ｃ１７∶１
２０μＬ注入液相色谱仪，记录各峰面积，以银杏酸５
个同系物（Ｃ１３∶０，Ｃ１５∶１，Ｃ１７∶２，Ｃ１５∶０和 Ｃ１７∶１）
峰面积之和（ｍＶ·ｓ）为纵坐标，银杏酸质量（μｇ）为
横坐标，在８．０６４～４０．３２μｇ银杏酸质量（Ｘ）与峰
面积之和（Ｙ）有良好的线性关系，回归方程 Ｙ＝
５１９．３Ｘ－４５２．０，ｒ＝０．９９８０。
２．６ 精密度试验 取同１份微乳剂供试液，按２．１
色谱条件连续进样５次，测定５个同系物峰面积，
ＲＳＤ１．７％（ｎ＝５）。
２．７ 重复性试验 取同１个批次的微乳剂样品５
份，按照２．４项下方法制备供试液，２．１项下色谱条
件进行测定，测得ＲＳＤ０．８９％（ｎ＝５）。
２．８ 稳定性试验 取微乳剂供试液于０，１，２，４，８，
１２，２４和３６ｈ分别进样１０μＬ，测定银杏酸５个同系
物峰面积，ＲＳＤ１．６％。
２．９ 加样回收率试验 准确称取微乳剂样品５份，
分别加入银杏酸对照品１０．０ｍｇ，按照２．４项方法
制备供试液，２．１项色谱条件进行测定，计算回收
率，结果见表１。
表１ 银杏酸回收率
样品中量／ｍｇ 测得量／ｍｇ回收率／％ 平均值／％ ＲＳＤ／％
１４．３６ ２３．９１ ９５．５
１４．３７ ２４．１４ ９７．７
１４．２９ ２４．３８ １００．９ ９８４ ２３
１４．３１ ２４．３６ １００．５
１４．３０ ２４．０７ ９７．７
注：银杏酸加入量为１０ｍｇ
２．１０ 微乳剂制剂中银杏酸同系物含量测定 精密
称取不同批次的微乳剂样品，按２．４项方法制备成
供试液，经０．４５μｍ针头滤器过滤后，每批进样 ３
次进行测定。５批微乳剂中银杏酸的测定结果分别
为１．４４％，１．４３％，１．４４％，１．４４％，１．４５％。
３ 讨论
银杏酸是由５种同系物所组成的混合物，采用
高效液相色谱分析微乳剂中银杏酸的含量，其关键
是要使５个同系物能在色谱柱上完全分离。本试验
考察了不同比例的甲醇用量对银杏酸５个同系物分
离效果的影响。发现增加甲醇比例，银杏酸出峰时
间提前，但５个同系物不能完全达到基线分离；降低
甲醇比例，５个同系物能很好基线分离，但分析时间
有所延长。当甲醇３％甲酸溶液体积比为９２∶８时，
５个同系物已达到良好的基线分离，在此条件下分
析时间为２５ｍｉｎ。在该分析条件下能满足微乳剂中
银杏酸含量分析的要求。该方法简便易行，样品不
需要经过复杂的前处理过程，易于推广应用，可用于
银杏杀钉螺微乳剂的质量控制。
［参考文献］
［１］ ＨａｒｙＰ．Ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｐｏｉｓｏｎｉｎｇ［Ｊ］．Ｒｅｖ．Ｐａｒｔ，２０００，５０：３７２．
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药，２００４，４３（１０）：４４２．
［３］ 杨小明，陈 钧，钱之玉，等．银杏酸抑菌效果的初步研究［Ｊ］．
中药材，２００２，２５（９）：６５１．
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［５］ 陈盛霞，杨小明，吴 亮，等．银杏外种皮提取物杀灭钉螺效果
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［６］ 陈盛霞，吴 亮，杨小明，等．银杏外种皮对钉螺的杀灭机理
［Ｊ］．动物学报，２００７，５３（１）：１９０．
［７］ 杨小明，陈盛霞，张蓉仙，等．银杏外种皮石油醚提取物的杀钉
螺活性研究［Ｊ］．中国人兽共患病学报，２００６，１１（１０）：９６１．
［８］ 仰榴青，吴向阳，陈 钧．高效液相色谱法测定银杏外种皮中
银杏酸的含量［Ｊ］．分析化学，２００２，３０（８）：９０１．
［９］ 仰榴青，吴向阳，陈 钧．银杏酸的高效液相色谱法测定［Ｊ］．
药学学报，２００２，３７（７）：５５５．
［责任编辑 王亚君
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第３３卷第２期
２００８年１月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ ２
Ｊａｎｕａｒｙ，２００８