全 文 ：浊点萃取气相色谱法测定槲寄生中２０种农药残留
张舒婷，陈晓辉，于治国，沈旭，勾萌，毕开顺
（沈阳药科大学 药学院，辽宁 沈阳 １１００１６）
［摘要］ 目的：建立浊点萃取气相色谱法测定槲寄生中有机氯和拟除虫菊酯类农药残留量的方法。方法：选用聚乙二
醇辛基苯基醚（ＴｒｉｔｏｎＸ１００）作为提取剂，采用气相色谱法，Ｈｐ５弹性石英毛细管色谱柱分离，电子捕获检测器进行检测，外
标法计算含量。结果：有机氯和拟除虫菊酯分别在５～５００，１０～１０００μｇ·Ｌ－１质量浓度范围内呈良好线性关系，相关系数均
大于为０９９７８；检测限（ＬＯＤ）为１５～７５μｇ·ｋｇ－１；平均回收率为７４１５％～１１１６％ ，ＲＳＤ４０％～９１％。结论：本方法简
便、快速，适用于槲寄生中的农药多残留的测定。
［关键词］ 浊点萃取法；聚乙二醇辛基苯基醚；气相色谱法；有机氯；拟除虫菊酯；槲寄生
［收稿日期］ ２００９０２２０
［通信作者］ 毕开顺，Ｔｅｌ：（０２４）２３９８６２９６，Ｅｍａｉｌ：ｋｓｂｉ＠ｍａｉｌ．ｓｙ．
ｌｎ．ｃｎ
［作者简介］ 张舒婷，硕士研究生，研究方向为中药材农药残留研
究。Ｔｅｌ：１３９９８２０３９４０，Ｅｍａｉｌ：ｚｓｔｚｗｚ３＠１６３．ｃｏｍ
浊点萃取法（ｃｌｏｕｄｐｏｉｎｔｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ＣＰＥ）是一种
较新的样品前处理技术，可同时完成对样品待测组分
的提取和净化；与传统的前处理方法相比，耗时短，溶
剂用量少［１４］。在农残分析气相色谱研究中未见报
道。本研究以槲寄生为研究对象，以非离子表面活性
剂聚乙二醇辛基苯基醚（ＴｒｉｔｏｎＸ１００）作为提取剂，
建立了槲寄生中提取多种农药残留成分的方法，对中
药材中农残提取方法做出了有意义的尝试。
１ 仪器与试药
Ａｇｉｌｅｎｔ６８９０气相色谱仪（美国 Ａｇｉｌｅｎｔ公司），
ＥＣＤ检测器；ＢＰ２１０Ｓ电子天平（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ公司）；
ＸＷ８０Ａ型漩涡混合器 Ｑ／ＤＡＡＫ２２０００（山海医大
仪器厂）；ＳＫ２５０Ｈ超声波清洗器（上海科导超声仪
器有限公司）；ＨＣ２５１６高速离心机（科大创新股份
有限公司中佳分公司）；ＨＨ２数字显示恒温水浴锅
（常州国华仪器有限公司）。
对照品：滴滴涕 ２种异构体（ｐ，ｐ′ＤＤＴ，ｏ，ｐ′
ＤＤＴ）、六氯化苯 ３种异构体（αＢＨＣ，γＢＨＣ，δ
ＢＨＣ）、艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂、七氯、反式氯丹、
六氯苯、五氯苯胺和环氧七氯异构体Ｂ（美国 Ｓｕｐｅｌ
ｃｏ公司，纯度＞９９％）；联苯菊酯、甲氰菊酯、三氟氯
氰菊酯、氯菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯和
溴氰菊酯均购于天津农业部环境质量监督检验测试
中心提供，纯度＞９９％。样品：槲寄生药材（辽宁等
５个产地），由沈阳药科大学孙启时教授鉴定；试剂：
ＴｒｉｔｏｎＸ１００（生工生物工程有限公司），用重蒸水配
制成质量浓度为１００ｇ·Ｌ－１的溶液；丙酮和正己烷
（重蒸，分析纯，天津市大茂化学试剂厂）；ＮａＣｌ（分
析纯，天津市大茂化学试剂厂）；重蒸水（自制）。
２ 方法与结果
２．１ 色谱条件 Ｈｐ５弹性石英毛细管柱（０２５
ｍｍ×３０ｍ，０２５μｍ），ＥＣＤ检测器，进样口温度２３０
℃，检测器温度３２０℃ ，流速为１０ｍＬ·ｍｉｎ－１，载
气为高纯氮，进样分流比为３∶１，进样量１μＬ，升温
程序：初始柱温１５０℃，以５℃·ｍｉｎ－１升至２５０℃
保持１ｍｉｎ，以２℃·ｍｉｎ－１升至２７０℃保持５ｍｉｎ。
２．２ 样品处理 取槲寄生材粉末２０ｇ（过４０目
筛），精密称定，置于２０ｍＬ量瓶中，精密加入丙酮２
ｍＬ，再加入 ＴｒｉｔｏｎＸ１００使其质量浓度为 ３０ｇ·
Ｌ－１，用重蒸水定容至２０ｍＬ，超声１５ｍｉｎ，滤过，取
续滤液１ｍＬ置于１５ｍＬＥＰ管中，加入饱和 ＮａＣｌ
１００μＬ，８０℃水浴平衡１５ｍｉｎ，于１２０００ｒ·ｍｉｎ－１
离心３ｍｉｎ使两相分离，弃去上层水相，加入正己烷
３００μＬ超声５ｍｉｎ，取正己烷相，供气相色谱测定。
２．３ 线性关系考察 分别精密称取各有机氯农药
对照品适量，精密量取各拟除虫菊酯农药对照品适
量，配制成有机氯为５，１０，５０，１００，２００，５００μｇ·Ｌ－１
和拟除虫菊酯为 １０，２０，１００，２００，４００，１０００μｇ·
Ｌ－１６个质量浓度系列混合对照品溶液。取上述混
合对照品系列溶液１μＬ进样，在上述色谱条件下进
行分析。以对照品质量浓度 Ｘ为横坐标，峰面积 Ｙ
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为纵坐标，绘制标准曲线并进行回归分析，有机氯和
拟除虫菊酯类农药的线性回归方程、相关系数，见表
１，结果表明有机氯和拟除虫菊酯在 ５～５００μｇ·
Ｌ－１，１０～１０００μｇ·Ｌ－１成良好线性。
表１ ２０种农药回归方程和相关系数
农药 标准曲线 ｒ
αＢＨＣ Ｙ＝３１３０Ｘ＋４９１９ ０９９９８
六氯苯 Ｙ＝２２８４Ｘ＋１４０１ ０９９９２
δＢＨＣ Ｙ＝２３５９Ｘ＋２３４１ ０９９９９
γＢＨＣ Ｙ＝２８５６Ｘ＋５９４８ ０９９７８
七氯 Ｙ＝１７５８Ｘ＋６８８２ ０９９９４
艾氏剂 Ｙ＝２３４２Ｘ－４２７２ ０９９９８
环氧七氯异构体Ｂ Ｙ＝１９３９Ｘ－９１１ １００００
反式氯丹 Ｙ＝１８６４Ｘ－５７７６ ０９９９７
狄氏剂 Ｙ＝２３４９Ｘ－７６５５ ０９９９７
ｏ，ｐ′ＤＤＴ Ｙ＝８３２Ｘ＋３０８６ ０９９９３
异狄氏剂 Ｙ＝１５２５Ｘ＋２９３０ ０９９９９
ｐ，ｐ′ＤＤＴ Ｙ＝７８４６Ｘ＋１７２７ ０９９９１
联苯菊酯 Ｙ＝８３８Ｘ＋５０１６ ０９９９８
甲氰菊酯 Ｙ＝９１０Ｘ＋４００７ ０９９９６
三氟氯氰菊酯 Ｙ＝２６３９Ｘ－８６３ ０９９９８
氯菊酯 Ｙ＝４１１９Ｘ＋５３１２ ０９９９４
氟氯氰菊酯 Ｙ＝１８３５Ｘ＋１２７１ ０９９８１
氯氰菊酯 Ｙ＝１３９８Ｘ＋７３８０ ０９９８２
氰戊菊酯 Ｙ＝１８０４Ｘ＋１１８２ ０９９９６
溴氰菊酯 Ｙ＝１７８２Ｘ＋１０６５ ０９９９１
２．４ 精密度试验 取同一混合对照品溶液，在上述
色谱条件下，连续进样６次，测定峰面积。有机氯和
拟除虫菊酯类农药峰面积的ＲＳＤ（％）在０９～５８。
符合农药残留国家标准要求，表明分析仪器具有较
好的精密度。
２．５ 检测限 将混合对照品溶液逐级稀释，分别进
样测定，至信噪比Ｓ／Ｎ＝３时定为仪器检测限，根据
样品浓缩倍数，确定本法的检测限为１５～７５μｇ
·ｋｇ－１。
２．６ 加样回收率试验 精密称取同一产地槲寄生
药材粉末９份，分为３组，每组分别加入有机氯５０，
１００，５００μｇ·ｋｇ－１和拟除虫菊酯１００，２００，１０００μｇ
·ｋｇ－１混合对照品溶液，按“供试品溶液制备”项下
的方法操作，在上述色谱条件下测定，结果见表２。
２．７ 样品测定 取各产地药材粉末，精密称定，按
“样品溶液制备”项下操作，在上述色谱条件下测
定。根据外标法定量，计算样品中农药残留量，５
个产地槲寄生样品测定结果见表３，混合对照品溶
液和代表性样品色谱图见图１。
表２ 加样回收率（ｎ＝９）
农药 回收率／％ ＲＳＤ／％
αＢＨＣ １０８５ ６６
六氯苯 １１１６ ６０
δＢＨＣ １００３ ６９
γＢＨＣ ７４１５ ７９
七氯 ８９７ ４０
艾氏剂 ９８８ ６０
环氧七氯异构体Ｂ １００１ ６１
反式氯丹 １０２１ ６５
狄氏剂 １０３６ ５０
ｏ，ｐ′ＤＤＴ １０６１ ８８
异狄氏剂 ９４２ ７８
ｐ，ｐ′ＤＤＴ ７０５１ ４８
联苯菊酯 ９０８ ４９
甲氰菊酯 ８３７ ９１
三氟氯氰菊酯 ９８７ ４５
氯菊酯 ９４１ ９１
氟氯氰菊酯 ７８６ ９０
氯氰菊酯 ９２２ ６０
氰戊菊酯 ８８４ ７０
溴氰菊酯 ７５８ ４３
表３ 槲寄生中农药残留量 μｇ·ｋｇ－１
农药 上海 南京 延吉 黑龙江 辽宁
αＢＨＣ ２４３４ － － － －
六氯苯 － － － － －
δＢＨＣ － － － － －
γＢＨＣ － － － － －
七氯 － － － － －
艾氏剂 ２１３７ １４９５ － － －
环氧七氯异构体Ｂ － － － － －
反式氯丹 １９７８ ２８２９ － － －
狄氏剂 － － － ３９０５ １１８２
ｏ，ｐ′ＤＤＴ － － － － －
异狄氏剂 － － － － －
ｐ，ｐ′ＤＤＴ ４５５８ ３９４８ １８８２ － １５８７
联苯菊酯 － － － － －
甲氰菊酯 － － － － －
三氟氯氰菊酯 － １５３６ － － －
氯菊酯 － － － － －
氟氯氰菊酯 － － － － －
氯氰菊酯 － － － － －
氰戊菊酯 － － － － －
溴氰菊酯 － － － － －
２．８ 药典方法确证 准确称取同一产地药材粉末
１０份，分别按照浊点萃取法和《中国药典》２００５年
版附录Ⅸ Ｑ农药残留测定方法项下“有机氯类农药
残留量测定和拟除虫菊酯类农药残留量测定”方法
进行测定。结果见表４。
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１．αＢＨＣ；２．六氯苯；３．γＢＨＣ；４．δＢＨＣ；５．七氯；６．艾氏剂；７．环氧七氯异构体Ｂ；８．反式氯丹；９．狄氏剂；１０．ｏ，ｐ′ＤＤＴ；１１．异狄氏剂；
１２．ｐ，ｐ′ＤＤＴ；１３．联苯菊酯；１４．甲氰菊酯；１５．三氟氯氰菊酯；１６．氯菊酯；１７．氟氯氰菊酯；１８．氯氰菊酯；１９．氰戊菊酯；２０．溴氰菊酯。
图１ 有机氯和拟除虫菊酯类农药对照品（Ａ）和槲寄生样品（Ｂ）ＧＣ图
表４ ２种方法的测定结果 μｇ·ｋｇ－１
农药 艾氏剂 反式氯丹 ｐ，ｐ′ＤＤＴ 三氟氯氰菊酯
浊点萃取法 １４３９ ２９１８ ４０９９ １６０９
１６０１ ２７６７ ３７６４ １４２７
１５４８ ３０１８ ４０７５ １５０４
１４９８ ２６３６ ３８７１ １４４１
１３９１ ２８０４ ３９３１ １７０１
药典方法 １５６８ ３０１７ ４０８４ １８１１
１６１８ ３１６３ ３９８１ １５９５
１７３１ ２９３１ ４１７８ １６６５
１６４８ ３３２１ ４０５７ １５６２
１４６４ ２８１１ ４２５３ １７５５
由于 ｔ００５，８＝２３０６，艾氏剂：ｔ＝１９０８＜ｔ００５，８，
Ｐ＝００９＞００５；反式氯丹：ｔ＝１９９５＜ｔ００５，８，Ｐ＝
００８＞００５；ｐ，ｐ′ＤＤＴ：ｔ＝２０６４＜ｔ００５，８，Ｐ＝００７＞
００５；三氟氯氰菊酯：ｔ＝２００５＜ｔ００５，８，Ｐ＝００８＞
００５，说明２种方法的测定结果没有显著性差异。
３ 讨论
３．１ 表面活性剂及用量选择 比较了ＴｒｉｔｏｎＸ１１４
和ＴｒｉｔｏｎＸ１００２种非离子表面活性剂，ＴｒｉｔｏｎＸ１１４
熔点较低，超声提取后即凝聚，不易与药材分离，因
此选用非离子表面活性剂 ＴｒｉｔｏｎＸ１００作为提取
剂。考察了不同浓度 ＴｒｉｔｏｎＸ１００对提取回收率的
影响，结果发现，ＴｒｉｔｏｎＸ１００质量浓度达到３０ｇ·
Ｌ－１，即可获得良好的提取回收率，因此，本实验采用
质量浓度为３０ｇ·Ｌ－１的ＴｒｉｔｏｎＸ１００。
３．２ 萃取温度及平衡时间选择 改变萃取温度（６０，
７０，８０，９０℃），同时改变平衡时间（１０，１５，２０，２５，３０
ｍｉｎ），按“供试品溶液制备”项下的方法操作。结果
表明，在８０℃水浴中平衡１５ｍｉｎ表面活性剂相分离
较好，有机氯和拟除虫菊酯提取回收率较高，升高温
度和延长平衡时间提取回收率未见提高。
３．３ 正己烷用量及反萃取时间选择 正己烷与表
面活性剂不互溶，避免表面活性剂直接进入气相色
谱仪造成污染，提取效果好，因此选用正己烷为反萃
取剂。改变正己烷用量（１００，２００，３００，４００，６００
μＬ），同时改变反萃取时间（１，３，５，８，１０ｍｉｎ），按
“供试品溶液制备”项下的方法操作。结果表明，
３００μＬ正己烷反萃取５ｍｉｎ，提取回收率较高。
本研究应用浊点萃取气相色谱法对５个产地槲
寄生药材中残留的２０种有机氯和拟除虫菊酯类农
药进行研究，所测结果与药典方法所测结果无显著
性差异。槲寄生样品中有部分农药被检出，拟除虫
菊酯类农药比有机氯类农药检出率低。与操作复杂
且有机溶剂用量大的传统方法相比，浊点萃取法环
保、简便、高效，只需要确定一定浓度的表面活性剂、
适当的平衡温度、时间和反萃取剂即可以达到理想
的提取分离效果，适用于农药多残留的测定。
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ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙＵＶｄｉｏｄｅａｒａｙａｎｄｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｍａｓｓ
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ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｗｅｎｔｙｐｅｓｔｉｃｉｄｅｒｅｓｉｄｕｅｓｉｎＶｉｓｃｕｍｃｏｌｏｒａｔｕｍｂｙｇａｓ
ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｕｓｉｎｇｃｌｏｕｄｐｏｉｎｔｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ＺＨＡＮＧＳｈｕｔｉｎｇ，ＣＨＥＮＸｉａｏｈｕｉ，ＹＵｚｈｉｇｕｏ，ＳＨＥＮＸｕ，ＧＯＵＭｅｎｇ，ＢＩＫａｉｓｈｕｎ
（Ｓｃｈｏｏｌｏｆｐｈａｒｍａｃｙ，ＳｈｅｎｙａｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ１１００１６，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｍｅｔｈｏｄｆｏｒｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｏｒｇａｎｏｃｈｌｏｒｉｎｅａｎｄｐｙｒｅｔｈｒｏｉｄ
ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｒｅｓｉｄｕｅｓｉｎＶｉｓｃｕｍｃｏｌｏｒａｔｕｍｂｙｃｌｏｕｄｐｏｉｎｔｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ（ＣＰＥ）．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓｗｅｒｅｅｘｔｒａｃｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅｎｏｎｉｏｎｉｃｓｕｒｆａｃ
ｔａｎｔＴｒｉｔｏｎＸ１００．ＴｈｅａｐｐａｒａｔｕｓｗａｓｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｗｉｔｈｅｌｅｃｔｒｏｎｃａｐｔｕｒｅｄｅｔｅｃｔｏｒａｎｄｔｈｅｓｅｐａｒａｒｉｏｎｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｏｎａＨｐ５
ｃｏｌｕｍｎ．Ｔｈｅｐｅｓｔｉｃｉｄｅｒｅｓｉｄｕｅｓｗｅｒｅｃａｌｃｕｌａｔｅｄｂｙｅｘｔｅｒｎａｌｓｔａｎｄａｒｄｍｅｔｈｏｄ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｒｅｌａｔｉｏｎｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄｏｖｅｒｔｈｅｒａｎｇｅ
ｏｆ５５００μｇ·Ｌ－１ｆｏｒｏｒｇａｎｏｃｈｌｏｒｉｎｅａｎｄ１０１０００μｇ·Ｌ－１ｆｏｒｐｙｒｅｔｈｒｏｉｄ．Ｔｈｅｌｉｍｉｔｓｏｆｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｓ１５７５μｇ·ｋｇ－１．Ｔｈｅａｖｅｒ
ａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｏｆｏｒｇａｎｏｃｈｌｏｒｉｎｅａｎｄｐｙｒｅｔｈｒｏｉｄｗｅｒｅ７４１５％１１１６％ ｗｉｔｈｃｏｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇＲＳＤｏｆ４０％ ９１％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ
ｓａｍｐｌｅａｎｄｒａｐｉｄｍｅｔｈｏｄｗａｓａｐｐｌｉｅｄｔｏｐｅｓｔｉｃｉｄｅｒｅｃｉｄｕｅｓｄｅｔｅｃｔｉｏｎ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｃｌｏｕｄｐｏｉｎｔｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ（ＣＰＥ）；ｔｒｉｔｏｎＸ１００；ｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ；ｏｒｇａｎｏｃｈｌｏｒｉｎｅ；ｐｙｒｅｔｈｒｏｉｄ；Ｖｉｓｃｕｍｃｏｌｏｒａｔｕｍ
［责任编辑 吕冬梅］
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