全 文 ：浊点萃取气相色谱法测定槲寄生中２０种农药残留
张舒婷，陈晓辉，于治国，沈旭，勾萌，毕开顺
（沈阳药科大学 药学院，辽宁 沈阳 １１００１６）
［摘要］　目的：建立浊点萃取气相色谱法测定槲寄生中有机氯和拟除虫菊酯类农药残留量的方法。方法：选用聚乙二
醇辛基苯基醚（ＴｒｉｔｏｎＸ１００）作为提取剂，采用气相色谱法，Ｈｐ５弹性石英毛细管色谱柱分离，电子捕获检测器进行检测，外
标法计算含量。结果：有机氯和拟除虫菊酯分别在５～５００，１０～１０００μｇ·Ｌ－１呈良好线性关系，相关系数均大于０９９７８；检
测限（ＬＯＤ）１５～７５μｇ·ｋｇ－１；平均回收率为７４１５％～１１１６％ ，ＲＳＤ４０％～９１％。结论：本方法简便、快速，适用于槲寄
生中的农药多残留的测定。
［关键词］　浊点萃取法；聚乙二醇辛基苯基醚；气相色谱法；有机氯；拟除虫菊酯；槲寄生
［收稿日期］　２００９０２２０
［通信作者］　毕开顺，Ｔｅｌ：（０２４）２３９８６２９６，Ｅｍａｉｌ：ｋｓｂｉ＠ｍａｉｌ．ｓｙ．
ｌｎ．ｃｎ
［作者简介］　张舒婷，硕士研究生，研究方向为中药材农药残留研
究，Ｔｅｌ：１３９９８２０３９４０，Ｅｍａｉｌ：ｚｓｔｚｗｚ３＠１６３．ｃｏｍ
　　浊点萃取法（ｃｌｏｕｄｐｏｉｎｔｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ＣＰＥ）是一种
较新的样品前处理技术，可同时完成对样品待测组分
的提取和净化；与传统的前处理方法相比，耗时短，溶
剂用量少［１４］。在农残分析气相色谱研究中未见报
道。本研究以槲寄生为研究对象，以非离子表面活性
剂聚乙二醇辛基苯基醚（ＴｒｉｔｏｎＸ１００）作为提取剂，
建立了槲寄生中提取多种农药残留成分的方法，对中
药材中农残提取方法做出了有意义的尝试。
１　仪器与试药
Ａｇｉｌｅｎｔ６８９０气相色谱仪（美国 Ａｇｉｌｅｎｔ公司），
ＥＣＤ检测器；ＢＰ２１０Ｓ电子天平（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ公司）；
ＸＷ８０Ａ型漩涡混合器 Ｑ／ＤＡＡＫ２２０００（山海医大
仪器厂）；ＳＫ２５０Ｈ超声波清洗器（上海科导超声仪
器有限公司）；ＨＣ２５１６高速离心机（科大创新股份
有限公司中佳分公司）；ＨＨ２数字显示恒温水浴锅
（常州国华仪器有限公司）。
对照品：滴滴涕 ２种异构体（ｐ，ｐ′ＤＤＴ，ｏ，ｐ′
ＤＤＴ）、六氯化苯 ３种异构体（αＢＨＣ，γＢＨＣ，δ
ＢＨＣ）、艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂、七氯、反式氯丹、
六氯苯、五氯苯胺和环氧七氯异构体Ｂ（美国 Ｓｕｐｅｌ
ｃｏ公司，纯度＞９９％）；联苯菊酯、甲氰菊酯、三氟氯
氰菊酯、氯菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯和
溴氰菊酯均购于天津农业部环境质量监督检验测试
中心提供，纯度＞９９％。样品：槲寄生药材（辽宁等
５个产地），由沈阳药科大学孙启时教授鉴定；试剂：
ＴｒｉｔｏｎＸ１００（生工生物工程有限公司），用重蒸水配
制成质量浓度为１００ｇ·Ｌ－１的溶液；丙酮和正己烷
（重蒸，分析纯，天津市大茂化学试剂厂）；ＮａＣｌ（分
析纯，天津市大茂化学试剂厂）；重蒸水（自制）。
２　方法与结果
２．１　色谱条件　Ｈｐ５弹性石英毛细管柱（０２５
ｍｍ×３０ｍ，０２５μｍ），ＥＣＤ检测器，进样口温度２３０
℃，检测器温度３２０℃ ，流速为１０ｍＬ·ｍｉｎ－１，载
气为高纯氮，进样分流比为３∶１，进样量１μＬ，升温
程序：初始柱温１５０℃，以５℃·ｍｉｎ－１升至２５０℃
保持１ｍｉｎ，以２℃·ｍｉｎ－１升至２７０℃保持５ｍｉｎ。
２．２　样品处理　取槲寄生材粉末２０ｇ（过４０目
筛），精密称定，置于２０ｍＬ量瓶中，精密加入丙酮２
ｍＬ，再加入 ＴｒｉｔｏｎＸ１００使其质量浓度为 ３０ｇ·
Ｌ－１，用重蒸水定容至２０ｍＬ，超声１５ｍｉｎ，滤过，取
续滤液１ｍＬ置于１５ｍＬＥＰ管中，加入饱和 ＮａＣｌ
１００μＬ，８０℃水浴平衡１５ｍｉｎ，于１２０００ｒ·ｍｉｎ－１
离心３ｍｉｎ使两相分离，弃去上层水相，加入正己烷
３００μＬ超声５ｍｉｎ，取正己烷相，供气相色谱测定。
２．３　线性关系考察　分别精密称取各有机氯农药
对照品适量，精密量取各拟除虫菊酯农药对照品适
量，配制成有机氯为５，１０，５０，１００，２００，５００μｇ·Ｌ－１
和拟除虫菊酯为 １０，２０，１００，２００，４００，１０００μｇ·
Ｌ－１６个质量浓度系列混合对照品溶液。取上述混
合对照品系列溶液１μＬ进样，在上述色谱条件下进
行分析。以对照品质量浓度 Ｘ为横坐标，峰面积 Ｙ
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为纵坐标，绘制标准曲线并进行回归分析，有机氯和
拟除虫菊酯类农药的线性回归方程、相关系数，见表
１，结果表明有机氯和拟除虫菊酯在 ５～５００μｇ·
Ｌ－１和１０～１０００μｇ·Ｌ－１成良好线性。
表１　２０种农药回归方程和相关系数
农药 标准曲线 ｒ
αＢＨＣ Ｙ＝３１３０Ｘ＋４９１９ ０９９９８
六氯苯 Ｙ＝２２８４Ｘ＋１４０１ ０９９９２
δＢＨＣ Ｙ＝２３５９Ｘ＋２３４１ ０９９９９
γＢＨＣ Ｙ＝２８５６Ｘ＋５９４８ ０９９７８
七氯 Ｙ＝１７５８Ｘ＋６８８２ ０９９９４
艾氏剂 Ｙ＝２３４２Ｘ－４２７２ ０９９９８
环氧七氯异构体Ｂ Ｙ＝１９３９Ｘ－９１１ １００００
反式氯丹 Ｙ＝１８６４Ｘ－５７７６ ０９９９７
狄氏剂 Ｙ＝２３４９Ｘ－７６５５ ０９９９７
ｏ，ｐ′ＤＤＴ Ｙ＝８３２Ｘ＋３０８６ ０９９９３
异狄氏剂 Ｙ＝１５２５Ｘ＋２９３０ ０９９９９
ｐ，ｐ′ＤＤＴ Ｙ＝７８４６Ｘ＋１７２７ ０９９９１
联苯菊酯 Ｙ＝８３８Ｘ＋５０１６ ０９９９８
甲氰菊酯 Ｙ＝９１０Ｘ＋４００７ ０９９９６
三氟氯氰菊酯 Ｙ＝２６３９Ｘ－８６３ ０９９９８
氯菊酯 Ｙ＝４１１９Ｘ＋５３１２ ０９９９４
氟氯氰菊酯 Ｙ＝１８３５Ｘ＋１２７１ ０９９８１
氯氰菊酯 Ｙ＝１３９８Ｘ＋７３８０ ０９９８２
氰戊菊酯 Ｙ＝１８０４Ｘ＋１１８２ ０９９９６
溴氰菊酯 Ｙ＝１７８２Ｘ＋１０６５ ０９９９１
２．４　精密度试验　取同一混合对照品溶液，在上述
色谱条件下，连续进样６次，测定峰面积。有机氯和
拟除虫菊酯类农药峰面积的ＲＳＤ（％）在０９～５８。
符合农药残留国家标准要求，表明分析仪器具有较
好的精密度。
２．５　检测限　将混合对照品溶液逐级稀释，分别进
样测定，至信噪比Ｓ／Ｎ＝３时定为仪器检测限，根据
样品浓缩倍数，确定本法的检测限为１５～７５μｇ
·ｋｇ－１。
２．６　加样回收率试验　精密称取同一产地槲寄生
药材粉末９份，分为３组，每组分别加入有机氯５０，
１００，５００μｇ·ｋｇ－１和拟除虫菊酯１００，２００，１０００μｇ
·ｋｇ－１混合对照品溶液，按“供试品溶液制备”项下
的方法操作，在上述色谱条件下测定，结果见表２。
２．７　样品测定　取各产地药材粉末，精密称定，按
“样品溶液制备”项下操作，在上述色谱条件下测
定。根据外标法定量，计算样品中农药残留量，５
个产地槲寄生样品测定结果见表３，混合对照品溶
液和代表性样品色谱图见图１。
表２　槲寄生药材加样回收率（ｎ＝９）
农药 回收率／％ ＲＳＤ／％
αＢＨＣ １０８５ ６６
六氯苯 １１１６ ６０
δＢＨＣ １００３ ６９
γＢＨＣ ７４１５ ７９
七氯 ８９７ ４０
艾氏剂 ９８８ ６０
环氧七氯异构体Ｂ １００１ ６１
反式氯丹 １０２１ ６５
狄氏剂 １０３６ ５０
ｏ，ｐ′ＤＤＴ １０６１ ８８
异狄氏剂 ９４２ ７８
ｐ，ｐ′ＤＤＴ ７０５１ ４８
联苯菊酯 ９０８ ４９
甲氰菊酯 ８３７ ９１
三氟氯氰菊酯 ９８７ ４５
氯菊酯 ９４１ ９１
氟氯氰菊酯 ７８６ ９０
氯氰菊酯 ９２２ ６０
氰戊菊酯 ８８４ ７０
溴氰菊酯 ７５８ ４３
表３　槲寄生中农药残留量 μｇ·ｋｇ－１　
农药 上海 南京 延吉 黑龙江 辽宁
αＢＨＣ ２４３４ － － － －
六氯苯 － － － － －
δＢＨＣ － － － － －
γＢＨＣ － － － － －
七氯 － － － － －
艾氏剂 ２１３７ １４９５ － － －
环氧七氯异构体Ｂ － － － － －
反式氯丹 １９７８ ２８２９ － － －
狄氏剂 － － － ３９０５ １１８２
ｏ，ｐ′ＤＤＴ － － － － －
异狄氏剂 － － － － －
ｐ，ｐ′ＤＤＴ ４５５８ ３９４８ １８８２ － １５８７
联苯菊酯 － － － － －
甲氰菊酯 － － － － －
三氟氯氰菊酯 － １５３６ － － －
氯菊酯 － － － － －
氟氯氰菊酯 － － － － －
氯氰菊酯 － － － － －
氰戊菊酯 － － － － －
溴氰菊酯 － － － － －
２．８　药典方法确证　准确称取同一产地药材粉末
１０份，分别按照浊点萃取法和《中国药典》２００５年
版附录Ⅸ Ｑ农药残留测定方法项下“有机氯类农药
残留量测定和拟除虫菊酯类农药残留量测定”方法
进行测定。结果见表４。
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１．αＢＨＣ；２．六氯苯；３．γＢＨＣ；４．δＢＨＣ；５．七氯；６．艾氏剂；７．环氧七氯异构体Ｂ；８．反式氯丹；９．狄氏剂；１０．ｏ，ｐ′ＤＤＴ；１１．异狄氏剂；
１２．ｐ，ｐ′ＤＤＴ；１３．联苯菊酯；１４．甲氰菊酯；１５．三氟氯氰菊酯；１６．氯菊酯；１７．氟氯氰菊酯；１８．氯氰菊酯；１９．氰戊菊酯；２０．溴氰菊酯。
图１　有机氯和拟除虫菊酯类农药对照品（Ａ）和槲寄生样品（Ｂ）ＧＣ图
表４　２种方法的测定 μｇ·ｋｇ－１　
方法 艾氏剂 反式氯丹 ｐ，ｐ′ＤＤＴ 三氟氯氰菊酯
浊点萃取 １４３９ ２９１８ ４０９９ １６０９
　 １６０１ ２７６７ ３７６４ １４２７
　 １５４８ ３０１８ ４０７５ １５０４
　 １４９８ ２６３６ ３８７１ １４４１
　 １３９１ ２８０４ ３９３１ １７０１
药典方法 １５６８ ３０１７ ４０８４ １８１１
　 １６１８ ３１６３ ３９８１ １５９５
　 １７３１ ２９３１ ４１７８ １６６５
　 １６４８ ３３２１ ４０５７ １５６２
　 １４６４ ２８１１ ４２５３ １７５５
　　由于 ｔ００５，８ ＝２３０６，艾氏剂：ｔ＝１９０８，Ｐ＝
００９；反式氯丹：ｔ＝１９９５，Ｐ＝００８；ｐ，ｐ′ＤＤＴ：ｔ＝
２０６４，Ｐ＝００７；三氟氯氰菊酯：ｔ＝２００５，Ｐ＝００８，
说明２种方法的测定结果没有显著性差异。
３　讨论
３．１　表面活性剂及用量选择　比较了ＴｒｉｔｏｎＸ１１４
和ＴｒｉｔｏｎＸ１００２种非离子表面活性剂，ＴｒｉｔｏｎＸ１１４
熔点较低，超声提取后即凝聚，不易与药材分离，因
此选用非离子表面活性剂 ＴｒｉｔｏｎＸ１００作为提取
剂。考察了不同浓度 ＴｒｉｔｏｎＸ１００对提取回收率的
影响，结果发现，ＴｒｉｔｏｎＸ１００质量浓度达到３０ｇ·
Ｌ－１，即可获得良好的提取回收率，因此，本实验采用
质量浓度为３０ｇ·Ｌ－１的ＴｒｉｔｏｎＸ１００。
３．２　萃取温度及平衡时间选择　改变萃取温度（６０，
７０，８０，９０℃），同时改变平衡时间（１０，１５，２０，２５，３０
ｍｉｎ），按“供试品溶液制备”项下的方法操作。结果
表明，在８０℃水浴中平衡１５ｍｉｎ表面活性剂相分离
较好，有机氯和拟除虫菊酯提取回收率较高，升高温
度和延长平衡时间提取回收率未见提高。
３．３　正己烷用量及反萃取时间选择　正己烷与表
面活性剂不互溶，避免表面活性剂直接进入气相色
谱仪造成污染，提取效果好，因此选用正己烷为反萃
取剂。改变正己烷用量（１００，２００，３００，４００，６００
μＬ），同时改变反萃取时间（１，３，５，８，１０ｍｉｎ），按
“供试品溶液制备”项下的方法操作。结果表明，
３００μＬ正己烷反萃取５ｍｉｎ，提取回收率较高。
本研究应用浊点萃取气相色谱法对５个产地槲
寄生药材中残留的２０种有机氯和拟除虫菊酯类农
药进行研究，所测结果与药典方法所测结果无显著
性差异。槲寄生样品中有部分农药被检出，拟除虫
菊酯类农药比有机氯类农药检出率低。与操作复杂
且有机溶剂用量大的传统方法相比，浊点萃取法环
保、简便、高效，只需要确定一定浓度的表面活性剂、
适当的平衡温度、时间和反萃取剂即可以达到理想
的提取分离效果，适用于农药多残留的测定。
［参考文献］
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的六种农药［Ｊ］．色谱，２００７，２５（６）：８５３．
［２］　刘文杰，万英，庞新安，等．高效液相色谱法同时测定土壤中多
菌灵、吡虫啉和甲基托布津的残留［Ｊ］．分析测试学报，２００７，
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Ａ．ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＵＶｆｉｌｔｅｒｒｅｓｉｄｕｅｓｉｎｂａｔｈｉｎｇｗａｔｅｒｓｂｙｌｉｑｕｉｄ
ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙＵＶｄｉｏｄｅａｒａｙａｎｄｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｍａｓｓ
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ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙａｆｔｅｒｍｉｃｅｌｅｍｅｄｉａｔｅｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓｏｌｖｅｎｔｂａｃｋｅｘｔｒａｃ
ｔｉｏｎ［Ｊ］．ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒＡ，２００５，１０７７（１）：１９．
［４］　ＳｈｉＺｈｉｈｏｎｇ，ＨｅＪｉａｎｔａｏ，ＣｈａｎｇＷｅｎｂａｏ．Ｍｉｃｅｌｅｍｅｄｉａｔｅｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ｏｆｔａｎｓｈｉｎｏｎｅｓｆｒｏｍＳａｌｖｉａｍｉｌｔｉｏｒｈｉｚａＢｕｎｇｅｗｉｔｈａｎａｌｙｓｉｓｂｙｈｉｇｈ
ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ［Ｊ］．Ｔａｌａｎｔａ，２００４，６４（２）：４０１．
ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｗｅｎｔｙｐｅｓｔｉｃｉｄｅｒｅｓｉｄｕｅｓｉｎＶｉｓｃｕｍｃｏｌｏｒａｔｕｍｂｙｇａｓ
ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｕｓｉｎｇｃｌｏｕｄｐｏｉｎｔｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ＺＨＡＮＧＳｈｕｔｉｎｇ，ＣＨＥＮＸｉａｏｈｕｉ，ＹＵＺｈｉｇｕｏ，ＳＨＥＮＸｕ，ＧＯＵＭｅｎｇ，ＢＩＫａｉｓｈｕｎ
（ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，ＳｈｅｎｙａｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ１１００１６，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｍｅｔｈｏｄｆｏｒｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｏｒｇａｎｏｃｈｌｏｒｉｎｅａｎｄｐｙｒｅ
ｔｈｒｏｉｄｐｅｓｔｉｃｉｄｅｒｅｓｉｄｕｅｓｉｎＶｉｓｃｕｍｃｏｌｏｒａｔｕｍｂｙｃｌｏｕｄｐｏｉｎｔｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ（ＣＰＥ）．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓｗｅｒｅｅｘｔｒａｃｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅｎｏｎｉｏｎｉｃ
ｓｕｒｆａｃｔａｎｔＴｒｉｔｏｎＸ１００．Ｔｈｅａｐｐａｒａｔｕｓｗａｓｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｗｉｔｈｅｌｅｃｔｒｏｎｃａｐｔｕｒｅｄｅｔｅｃｔｏｒａｎｄｔｈｅｓｅｐａｒａｔｉｏｎｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｏｎａｎ
Ｈｐ５ｃｏｌｕｍｎ．Ｔｈｅｐｅｓｔｉｃｉｄｅｒｅｓｉｄｕｅｓｗｅｒｅｃａｌｃｕｌａｔｅｄｂｙｅｘｔｅｒｎａｌｓｔａｎｄａｒｄｍｅｔｈｏｄ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｒｅｌａｔｉｏｎｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄｏｖｅｒｔｈｅ
ｒａｎｇｅｏｆ５５００μｇ·Ｌ－１ｆｏｒｏｒｇａｎｏｃｈｌｏｒｉｎｅａｎｄ１０１０００μｇ·Ｌ－１ｆｏｒｐｙｒｅｔｈｒｏｉｄ．Ｔｈｅｌｉｍｉｔｓｏｆｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｓ１．５７．５μｇ·ｋｇ－１．Ｔｈｅ
ａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｏｆｏｒｇａｎｏｃｈｌｏｒｉｎｅａｎｄｐｙｒｅｔｈｒｏｉｄｗｅｒｅ７４．１５％１１１．６％ ｗｉｔｈｃｏｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇＲＳＤｏｆ４．０％９．１％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ
ｓａｍｐｌｅａｎｄｒａｐｉｄｍｅｔｈｏｄｗａｓａｐｐｌｉｅｄｔｏｐｅｓｔｉｃｉｄｅｒｅｓｉｄｕｅｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　ｃｌｏｕｄｐｏｉｎｔｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ（ＣＰＥ）；ｔｒｉｔｏｎＸ１００；ｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ；ｏｒｇａｎｏｃｈｌｏｒｉｎｅ；ｐｙｒｅｔｈｒｏｉｄ；Ｖｉｓｃｕｍｃｏｌｏｒａｔｕｍ
［责任编辑　吕冬梅］
《中国药用植物种子原色图鉴》书讯
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该书既是一本我国药用植物种子学研究方面的专著，对于从事药用植物教学、科研及生产管理人员来说
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第３４卷第２０期
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