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Chemical constituents from roots of Distylium myricoides

杨梅叶蚊母树化学成分研究



全 文 :杨梅叶蚊母树化学成分研究
蔡报彬,王,梁鸿,赵玉英
(北京大学 药学院 天然药物学系,北京 100191)
[摘要] 目的:研究杨梅叶蚊母树的化学成分。方法:用硅胶等色谱技术分离化合物,经理化性质及波谱技术鉴定化合
物结构。结果:从中分离鉴定了8个酚类化合物,分别为4羟基2甲氧基苯酚1OβD(6′O没食子酰基)葡萄糖苷(1),4羟
基3甲氧基苯酚1OβD(6′O没食子酰基)葡萄糖苷(2),3,4,5三甲氧基苯酚1OβD(6′O没食子酰基)葡萄糖苷(3),
1,2,3,4,6五O没食子酰基βD葡萄糖苷(4),没食子酸甲酯(5),没食子酸乙酯(6),3,4二羟基苯甲酸(7),没食子酸(8)。
结论:8个化合物均为首次从该属植物中得到,正确归属了化合物1的13CNMR数据。
[关键词] 金缕梅科;蚊母树属;杨梅叶蚊母树;酚类成分
[收稿日期] 20090331
[通信作者] 梁鸿,Tel:(010)82801592,Email:nmechem@bjmu.
edu.cn
  杨梅叶蚊母树 DistyliummyricoidesHemsl.为金
缕梅科 Hamamelidaceae蚊母树属 DistyliumSieb.et
Zucc.植物,该属植物全世界有18种,分布于东亚和
印度、马来西亚,我国有12种,3变种,产西南部至
东南部,四川、安徽、浙江等地[12],该属植物主要含
有黄酮、二苯骈呋喃和鞣质类成分[35],有抑制 α淀
粉酶、α葡萄糖苷酶和抗氧化等活性[67]。杨梅叶蚊
母树为常绿灌木或小乔木,分布在我国四川、安徽、
浙江、福建、江西、广东、广西、湖南及贵州东部[8]。
其根可入药,治手足浮肿[910]。国内、外无杨梅叶蚊
母树化学成分及生物活性研究报道,因此对杨梅叶
蚊母树的化学成分进行了研究,利用各种色谱方法
结合波谱分析技术从中分离鉴定了8个化合物,均
为首次从该属植物中分离得到。
1 材料
BrukerAM400,JNMAL300核磁共振仪,TMS
为内标。薄层色谱和柱色谱硅胶均为青岛海洋化工
厂产品;SephadexLH20为 GEHealthcare产品,反
相硅胶 GELODSA为YMC公司产品。
杨梅叶蚊母树药材于2006年5月采自重庆,由
重庆药用植物研究所易思荣研究员鉴定为金缕梅科
蚊母树属植物杨梅叶蚊母树 D.myricoides的根,样
品保存在北京大学药学院天然药物学系。
2 提取分离
杨梅叶蚊母树根(103kg)粉碎后,用10倍量
的95%乙醇渗漉提取,提取液经薄膜蒸发浓缩后以
水混悬,依次用醋酸乙酯和正丁醇萃取,分别得到
813g和3515g。醋酸乙酯萃取物(800g)经硅
胶柱色谱分离,石油醚醋酸乙酯(6∶1~1∶1),三氯
甲烷甲醇(10∶1~5∶1),三氯甲烷甲醇水(65∶35∶
10),三氯甲烷甲醇水(6∶4∶1)梯度洗脱,得到18
流分(Fr.118)。Fr.17经 SephadexLH20柱色谱
分离,70%甲醇水洗脱得到化合物 8(800mg)。
Fr.14经 SephadexLH20柱色谱分离,甲醇水
(1∶4~4∶1)梯度洗脱得到化合物5(100mg)和6
(120mg)。Fr.18(380g)经硅胶柱色谱分离,三
氯甲烷甲醇水(65∶35∶10)洗脱,得到80流分(Fr.
180),Fr.75经SephadexLH20柱色谱及制备薄层
色谱分离,分别用甲醇水(7∶3)及三氯甲烷甲醇
水甲酸(6∶4∶1∶1)洗脱,得到化合物4(500mg)和
7(200mg);Fr.62~74经反相硅胶柱色谱(甲醇
水梯度洗脱,1∶9~4∶6)、SephadexLH20柱色谱(甲
醇水梯度洗脱,1∶4~4∶1)和制备HPLC(10%甲醇
水洗脱)分离,得到化合物1(70mg),2(120mg)
和3(200mg)。
3 结构鉴定
化合物1 无色结晶,1HNMR谱给出芳香质子
信号δ696(2H,s),1组ABX偶合系统芳香质子信
号δ687(1H,d,J=90Hz),639(1H,d,J=24
Hz),617(1H,dd,J=87,24Hz),1个甲氧基质
子信号 δ365(3H,s),13CNMR谱给出12个芳香
碳信号、1个酯羰基碳信号 δ1658以及1个甲氧
基碳信号,说明该化合物有2个芳基取代,分别是
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 September,2009
1,3,4,5,四取代苯基以及1,3,4三取代苯基;1H
NMR谱还给出糖端基质子信号 δ471(1H,d,J=
69Hz)以及糖上其他质子信号,13CNMR谱给出6
个糖上碳信号,根据1HNMR和13CNMR数据确定
为葡萄糖基取代,根据端基质子偶合常数确定糖为
β构型。各结构片段之间的连接位置是由二维
NMR谱确定的,根据 HSQC谱归属与氢相连的各
个碳信号,在 HMBC谱中(图1),芳香质子信号 δ
687(H6)与碳信号 δ1528(C4),1498(C2),
1393(C1),1015(C1′)相关;芳香质子信号 δ
639(H3)与碳信号 δ1528(C4),1498(C2),
1393(C1)以及1061(C5)相关;芳香质子信号 δ
617(H5)与碳信号 δ1528(C4),1393(C1)以
及 1010(C3)相关;甲氧基质子信号 δ365
(OCH3)与碳信号 δ1498(C2)相关,糖端基质子
信号δ471(H1′)和碳信号δ1393(C1)相关,表
明甲氧基和羟基分别取代在2和4位,葡萄糖连接
在1位酚羟基上。HMBC谱还给出芳香质子信号 δ
696(H2″)与碳信号 δ1658(C=O),1458(C
3″),1388(C4″),1193(C1″),1088(C6″)相关,
糖上质子δ439(H6′)和423(H6′)均和羰基碳
信号δ1658(C=O)相关,表明五倍子酰基连接在
葡萄糖的6位,确定化合物1结构为4羟基2甲氧
基苯酚1OβD(6′O没食子酰基)葡萄糖苷,与文
献[11]报道的 4hydroxy2methoxyphenol1OβD
(6′Ogaloyl)glucopyranoside糖和五倍子酰基部分
NMR数据一致,苷元部分碳谱数据差别较大,化合
物1苷元部分与文献[12]报道的化合物 mileti
aspecosideB苷元部分数据一致,本文正确归属了
13CNMR数据。
图1 化合物1的主要HMBC相关
   化合物 1  无色结晶 (甲醇),1HNMR
(DMSOd6,400MHz)δ:839(1H,s,OH),696(2H,
s,H2″),687(1H,d,J=90Hz,H6),639(1H,d,
J=24Hz,H3),617(1H,dd,J=87,24Hz,H
5),471(1H,d,J=69Hz,H1′),439(1H,d,J=
114Hz,H6′),423(1H,dd,J=117,60Hz,H
6′),359(1H,brs),327(2H,m),317(1H,s),
365(3H,s,OCH3);
13CNMR(DMSOd6,100MHz)
δ:1393(C1),1498(C2),1010(C3),1528(C
4),1061(C5),1171(C6),1015(C1′),733
(C2′),766(C3′),698(C4′),738(C5′),635
(C6′),1193(C1″),1088(C2″),458(C3″),
1388(C4″),1458(C5″),1088(C6″),1658
(COO),555(OCH3)。
化合 物 2  无 色 结 晶 (甲 醇),1HNMR
(DMSOd6,300MHz)δ:839(1H,s,OH),696(2H,
s,H2″),661(1H,d,J=87Hz,H5),658(1H,d,
J=27Hz,H2),646(1H,dd,J=84,24Hz,H
6),474(1H,d,J=72Hz,H1′),444(1H,d,J=
114Hz,H6′),424(1H,dd,J=117,63Hz,H
6′),365(3H,s,OCH3),329317(4H,m,H2′,
3′,4′,5′);13CNMR(DMSOd6,75MHz)δ:1506(C
1),1016(C2),1478(C3),1415(C4),1153
(C5),1077(C6),554(CH3O),1023(C1′),
733(C2′),764(C3′),698(C4′),738(C5′),
636(C6′),1193(C1″),1088(C2″),1458(C
3″),1388(C4″),1458(C5″),1088(C6″),
1658(COO)。以上数据与文献[13]报道的 4羟
基3甲氧基苯酚1OβD(6′O没食子酰基)葡萄
糖苷的数据一致。
化合物3 白色固体,1HNMR(DMSOd6,300
MHz)δ:926(3H,brs,OH),694(2H,s,H2″,6″),
629(2H,s,H2,6),535(3H,brs,OH),492(1H,
d,J=75Hz,H1′),447(1H,d,J=114Hz,H
6′),426(1H,dd,J=117,54Hz,H6′),374
(1H,m,H5′),364(6H,s,OCH33,5),356(3H,
s,OCH34),336~332(3H,m,H2′,3′,4′);
13C
NMR(DMSOd6,75MHz)δ:1538(C1),941(C
2),1532(C3),1325(C4),1532(C5),941(C
6),1006(C1′),732(C2′),762(C3′),697(C
4′),739(C5′),636(C6′),1194(C1″),1086
(C2″),1456(C3″),1385(C4″),1456(C5″),
1086(C6″),1659(COO),601(MeO4),557
(MeO3,5)。以上数据与文献[14]报道的3,4,5
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三甲氧基苯酚1OβD(6′O没食子酰基)葡萄糖
苷的数据一致。
化合物4 白色粉末,positiveESITOFMSm/z
979[M+K]+,963[M+Na]+,negativeESITOFMS
m/z939[M-H]-;1HNMR(DMSOd6,300MHz)δ:
697,691,685,682,677(各2H,s,galolyH2,6),
Glc638(1H,d,J=81Hz,H1),596(1H,t,J=93
Hz,H3),543(2H,q,J=93Hz,H2,4),460(1H,
d,J=99Hz,H6),430(2H,brs,H6),317(1H,s,
H5);13CNMR(DMSOd6,75MHz)δ:Glc917(C1),
706(C2),719(C3),677(C4),721(C5),615
(C6),galoly1189,1180×2,1179,1173(C1),
1090,1089,1087×3(C2,6),1457,1456,
1455×2,1454(C3,5),1397,1391×2,1389,
1388(C4),1654,1648,1646,1645,1639
(COO)。以上数据与文献[15]报道的1,2,3,4,6五
O没食子酰基βD葡萄糖苷的数据一致。
化合物 5~8  无色结晶 (甲醇),NMR
(DMSOd6)数据与文献[16]对照分别鉴定为没食
子酸甲酯,没食子酸乙酯,3,4二羟基苯甲酸和没食
子酸。
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ChemicalconstituentsfromrootsofDistyliummyricoides
CAIBaobin,WANGBin,LIANGHong,ZHAOYuying
(DepartmentofNaturalMedicines,SchoolofPharmaceuticalSciences,PekingUniversityHealthScienceCenter,
Beijing100191,China)
[Abstract] Objective:TostudythechemicalconstituentsfromtherootsofDistyliummyricoides.Method:Thechemicalcon
stituentswereisolatedandseparatedwithchromatographictechniques,andstructureswereidentifiedbyspectroscopicmethods.
Result:Eightphenoliccompoundswereisolatedandidentifiedas:4hydroxy2methoxyphenol1OβD(6′Ogaloyl)glucopyranoside
(1),4hydroxy3methoxyphenol1OβD(6′Ogaloyl)glucopyranoside(2),3,4,5trimethoxyphenol1OβD(6′Ogaloyl)glu
copyranoside(3),1,2,3,4,6pentaOgaloylβDglucopyranoside(4),methylgalate(5),ethylgalate(6),3,4dihydroxy
benzoicacid(7),galicacid(8).Conclusion:AlcompoundswereisolatedfromthegenusDistyliumforthefirsttime.
[Keywords] Hamamelidaceae;Distylium;Distyliummyricoides;phenoliccompound [责任编辑 王亚君]
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