全 文 :加减玉女煎抗甲状腺机能亢进作用的研究
郭娟,陈长勋,李欣
(上海中医药大学 药理教研室,上海 210203)
[摘要] 目的:探讨加减玉女煎抗实验性甲状腺功能亢进症的作用及其相关机制。方法:小鼠每天皮下注射左旋甲状腺
素钠350μg·kg-1造模,随机分为模型组、加减玉女煎颗粒217,433,866g·kg-1不同剂量组,阳性对照他巴唑001g·
kg-1组,另设正常组。观察动物体重、心脏质量指数、心率、自发活动、耗氧量;RIA法测定血清T3,T4含量,放射强度测定法分
析甲状腺吸碘率的变化。结果:与正常组比较模型组动物体重增长明显减慢,心率加快,心脏质量指数、自发活动次数、耗氧
量增加(P<005);与模型组比较,加减玉女煎中、高剂量组及他巴唑组体重增长明显加快(P<005);心脏质量指数明显降低
(P<005);自发活动次数明显减少(P<005),耗氧量明显降低(P<005)。模型组的心率(7945±478)次/min,较正常组
(6825±1164)次/min明显增加(P<005),低、中、高剂量组心率分别为(7369±666),(7421±623),(7158±1028)
次/min,与模型组比较明显减慢(P<005)。血清T3,T4含量模型组分别为(385±096),(23446±5811)μg·L
-1,较正常
组(099±030),(6594±1394)μg·L-1明显增加,加减玉女煎中剂量组血清 T3,T4含量分别为(257±081),(16427±
7263)μg·L-1;高剂量组为(270±055),(15726±3503)μg·L-1;他巴唑组(288±059),(17265±3973)μg·L-1
均较模型组明显降低(P<001)。他巴唑有显著降低甲状腺吸125I率的作用(P<001),提示可拮抗甲状腺激素合成;加减玉
女煎此作用较弱,无显著性差异。结论:加减玉女煎具有抑制实验性甲状腺功能亢进症的作用,其作用机制可能主要不是抑
制甲状腺素合成而与拮抗甲状腺激素的作用或其他因素有关。
[关键词] 加减玉女煎;甲亢;吸碘率;T3;T4
[收稿日期] 20090426
[基金项目] 上海市科委科研计划项目(08DZ1972103);上海市优
秀青年教师科研专项基金项目(200820)
[通信作者] 陈长勋,Tel:(021)51322200,Email:cxchen6@126.
com
甲状腺机能亢进症,简称“甲亢”,一般是指由
于甲状腺自身病变所引起的基础代谢率(BMR)增
高、自主神经系统功能失常等一系列综合征。甲亢
是现代社会的多发病、难治病之一,严重危害了人类
的身体健康。目前,临床所用抗甲状腺药物以硫脲
类化合物为主,其作用机制为抑制甲状腺激素的合
成,临床使用一般起效较慢,疗程较长,且副作用多,
甚至有部分患者无法耐受。本研究以清代名医吴鞠
通所著《温病条辨》名方加减玉女煎(石膏、知母、玄
参、生地黄、麦冬五味药)为研究对象[1],采用皮下
注射左旋甲状腺素钠造模,观察加减玉女煎对实验
性甲状腺功能亢进症的作用,并对相关机制进行初
步探讨。
1 材料
1.1 动物 昆明种小鼠,上海斯莱克实验动物有限
责任公司,许可证号SCXK(沪)20070005。
1.2 药品 加减玉女煎(生石膏30g,知母12g,玄
参12g,生地黄18g,麦门冬18g)水煎剂经过浓
缩、真空干燥等处理成颗粒剂,该颗粒剂由上海中医
药大学科技实验中心制备提供,1g颗粒剂相当于
27g生药,含标示物菝葜皂苷元0266mg。他巴
唑片(北京太洋药业有限公司,批号060501)。左旋
甲状腺素钠(LThyroxineSodiumsalt,美国 Sigma公
司,批号WA13381)。
1.3 试剂与仪器 碘[125I]三碘甲状腺原氨酸(T3)
放射免疫分析药盒,碘[125I]甲状腺素(T4)放射免疫
分析药盒,均购于北京普尔伟业生物科技有限公司。
Na125I溶液,上海中医药大学核医学实验室提供。
YLSA型小动物自主活动测定仪(山东省医学科学院
设备站),CY3测氧仪(上海华光仪器厂)。
2 方法
2.1 造模及给药方法 小鼠,雌雄各半,除正常组
外,其余各组每日皮下注射甲状腺素钠350μg·kg-1
体重造模,正常组按体重注射同等剂量的生理盐水。
每天灌胃给药,阳性药组给予他巴唑10mg·kg-1,加
减玉女煎颗粒低、中、高剂量组分别给予217,433,
866g·kg-1(相当于临床等效量的05,1,2倍),模
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型和空白组给予等体积的生理盐水。
2.2 加减玉女煎对甲亢模型小鼠外观行为的影响
实验期间全程观察小鼠的整体情况,包括小鼠的
精神状态、毛色变化、行为活动等。
2.3 加减玉女煎对甲亢模型小鼠体重的影响 实
验前测量各组小鼠的体重,造模,给药,连续12d,禁
食12h后测量体重,计算最后一次体重与实验前体
重之间的差值。
2.4 加减玉女煎对甲亢模型小鼠血清T3,T4的影响
造模、给药,连续12d,禁食不禁水12h后眼眶取
血,采用放射免疫(RIA)法测定血清中的T3,T4含量。
2.5 加减玉女煎对甲亢模型小鼠心率的影响 造
模、给药,连续8d,于末次给药后3h,在小鼠清醒状
态下,将小鼠置于连接有心电图仪的心电感应盒中,
用心电图仪描记Ⅱ导联心电图计算心率。
2.6 加减玉女煎对甲亢模型小鼠自发活动的影响
造模、给药,连续8d,于末次给药后60min,将小
鼠置于小动物自主活动测定仪中,适应5min,记录
10min内小鼠自主活动的次数。
2.7 加减玉女煎对甲亢模型小鼠心脏质量指数的影
响 造模,给药,连续9d,禁食不禁水12h,测量体重
后取其心脏,称量心脏的质量,计算心脏/体重指数。
2.8 加减玉女煎对甲亢模型小鼠耗氧量的影响
造模、给药,连续12d,于末次给药后3h,将每只小
鼠分别放入500mL的密闭容器瓶中,用 CY3测氧
仪测定20min后各容器瓶中氧分压的变化。
2.9 加减玉女煎对甲亢模型小鼠吸125I率的影
响[23] 造模、给药,连续11d,末次给药后1h,所有
动物腹腔注射 Na125I001μCi·g-1体重,24h后,
处死动物,摘出整个甲状腺,用 SN682γ计数器,测
定放射性,同时测定标准源125I的放射性,计算得出
甲状腺吸125I率。
2.10 统计方法 所有数据采用 珋x±s表示,多组间
比较采用单因素方差分析,两组间比较采用q检验,
检验水准为005。
3 结果
3.1 对甲亢模型小鼠外观行为的影响 实验过程
中,正常组小鼠精神、活动、毛色光泽均未见异常。
模型组小鼠造模第4天出现烦躁不安、易激怒。加
减玉女煎给药组与模型组小鼠比较,表现出一定程
度的安静状态,尤其是高剂量组小鼠表现更加明显。
3.2 对甲亢模型小鼠体重的影响 治疗前各组小
鼠体重比较无显著性差异。治疗后,与正常组相比,
模型组小鼠体重增加明显低于正常组(P<001);
与模型组相比,他巴唑组和加减玉女煎中、高剂量组
小鼠体重增加明显高于模型组(P<005)(表1)。
表1 加减玉女煎对甲亢小鼠体重的影响(珋x±s)
组别 n 剂量/g·kg-1 治疗前/g 治疗后/g 差值/g
正常 12 - 2583±118 3100±238 518±183
模型 12 - 2533±173 2815±2441) 283±2091)
他巴唑 12 001 2537±138 3062±2922) 525±2972)
加减玉女煎 12 217 2592±104 2954±217 363±164
10 433 2547±125 2999±242 452±1462)
12 866 2528±107 3006±1962) 478±1932)
注:与正常组相比1)P<001;与模型组相比2)P<005。
3.3 对甲亢模型小鼠血清 T3,T4的影响 与正常
组比较,模型组小鼠血清 T3,T4水平极显著增高
(P<001)。与模型组相比,加减玉女煎中、高剂量
组及他巴唑组血清 T3,T4极显著降低 (P<001)
(表2)。
3.4 对甲亢模型小鼠心率、心脏指数及自发活动的
影响 与正常组比较,模型组小鼠心率显著加快
(P<005),心脏指数极显著增高(P<001),自发
活动显著增多(P<005)。与模型组相比,加减玉
女煎各剂量组小鼠心率均显著降低(P<005);
表2 加减玉女煎对甲亢小鼠T3,T4的影响(珋x±s)
μg·L-1
组别 n
剂量
/g·kg-1
T3 T4
正常 11 - 099±030 6594±1394
模型 12 - 385±0961) 23446±58111)
他巴唑 12 001 288±0593) 17265±39733)
加减玉女煎 12 217 368±103 18516±6695
10 433 257±0813) 16427±72632)
12 866 270±0553) 15726±35033)
注:与正常组相比1)P<0001;与模型组相比2)P<005,3)P<
001(表3,4同)。
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中、高剂量组小鼠心脏质量指数显著降低,小鼠自发 活动显著减少(P<005)(表3)。
表3 加减玉女煎对甲亢模型小鼠心率、心脏质量指数及自发活动的影响(珋x±s,n=10)
组别 剂量/g·kg-1 心率/次/min HW/BW/%,10-2 自发活动/次/10min
正常 - 6825±1164 3956±141 1136±730
模型 - 7945±4781) 4403±2681) 1806±5301)
他巴唑 001 7635±405 4299±266 1260±4572)
加减玉女煎 217 7369±6662) 4219±306 1423±663
433 7421±6232) 4113±2532) 1236±5752)
866 7158±10282) 3991±2773) 1191±6582)
3.5 对甲亢模型小鼠耗氧量及吸125I率的影响 与
正常组比较,模型组小鼠耗氧量极显著增高(P<
001),吸125I率极显著性降低(P<001)。与模型
组相比,他巴唑组、加减玉女煎中、高剂量组耗氧量
显著降低(P<001);他巴唑组小鼠吸125I率降低更
加明显,两者有极显著性差异 (P<001),而加减
玉女煎各给药组吸125I率与模型组比较,亦有一定
程度的降低,但无统计学差异(表4)。
表4 加减玉女煎对甲亢小鼠耗氧量及吸125I率
的影响(珋x±s)
组别 n
剂量
/g·kg-1
氧含量
/%
吸125I率
/%
正常 10 - 1580±067 2696±1304
模型 10 - 1493±0491) 505±1441)
他巴唑 10 001 1595±0943) 100±0622)
加减玉女煎 10 217 1530±054 368±235
8 433 1563±0702) 461±130
10 866 1565±0573) 407±151
4 讨论
甲亢在传统中医药古籍中并没有相应的病名记
载,根据其主要临床表现,该病归属于中医“肝火”、
“瘿病”等范畴[4]。随着现代对甲亢研究的不断深
入,越来越多的学者认为,先天禀赋不足(素体阴
虚)和情志刺激是导致甲亢的主要发病原因[56]。
加减玉女煎乃清代名医吴鞠通所著的一张名方,全
方由石膏、知母、玄参、生地黄、麦冬五味药组成,功
能清气凉血、滋阴润燥,可用于治疗太阴温病之口
渴、脉数等证[1]。
现代药理研究表明,生石膏对发热具有明显的
解热效果,并可减轻发热所引起的口渴状态[7]。知
母主要成分菝葜皂苷元能使甲状腺素所致大鼠升高
的肝、肾、小肠黏膜 Na+K+ATP酶恢复正常水平,
从而使产热减少,实现解热作用[8]。玄参能够增强
实验小鼠的耐缺氧能力,同时,其对小鼠的自发活动
亦有一定的抑制作用[9]。地黄能够调节甲亢型阴
虚大鼠的甲状腺功能,纠正甲亢模型大鼠肾脏 β受
体数量增加,使之恢复正常[10]。山麦冬水煎醇沉法
制备的注射液对小鼠进行耐缺氧实验中,在常压下
小鼠耐缺氧时间分别延长154%和317%;在减
压下,小鼠存活时间亦显著延长。从上述药理研究
可以看出,加减玉女煎全方具有针对甲状腺功能亢
进症阴虚证的综合调节作用,且其对甲亢所表现出
的高代谢症候群、精神躁动不安等症状亦有多环节
的治疗作用。
本研究表明,加减玉女煎能够缓解甲状腺功能
亢进症的临床表现,如烦躁多动、心率加快、耗氧增
加、体重减轻等,同时还可以明显降低甲亢动物体内
升高的T3,T4水平,抑制T3,T4升高所诱发的心肌肥
厚,心脏/体重指数增加,进而产生抗甲亢的药效学
作用。吸碘率实验结果表明,由于外源性甲状腺素
的给予,造成动物吸碘率均显著降低,这是甲状腺激
素自身的负反馈调节作用。阳性药他巴唑组与模型
组比较,吸碘率极其显著地降低(P<0001),表明
他巴唑的抗甲亢作用主要是通过直接抑制甲状腺素
的生物合成。加减玉女煎各剂量给药组的吸碘率与
模型组相比,亦有一定程度的降低,但其作用不甚显
著,表明其作用机制可能主要不在于抑制甲状腺素
的生物合成,而可能在于拮抗甲状腺素的作用或促
进甲状腺素的降解,详细作用机制尚需进一步研
究。总之,传统中药复方加减玉女煎治疗甲状腺
功能亢进症可能具有应用价值。由于其抗甲亢机
制上与目前临床常用化学药物并不相同,作用靶
点不一,在临床合用可能会产生协同效应,或可减
少化学药物的用量与副作用。对无法耐受化学药
物不良反应的患者,加减玉女煎亦可能成为有价
值的替代治疗药物。
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ExperimentresearchofJiajianYunvjiangranulesonhyperthyroidismgraves
GUOJuan,CHENChangxun,LIXin
(DeptofPharmacology,ShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Shanghai201203,China)
[Abstract] Objective:ToinvestigatetheefectsandtherelatedmechanismsofJiajianYunujian(JJYNJ)granules,which
weremadefromtraditionalChinesemedicinalprescription,onhyperthyroidismgraves.Method:Exceptthatinthenormalgroup,al
micewereinjected350μg·kg·d-1LThyroxinsodiumtoestablishthehyperthyroidismgravesmodel.Themodelmiceweredivided
randomlyintomodelcontrolgroup,3diferentgroupsofJJYNJgranulesatoraldosageof217,433,866g·kg-1,everydayand
thiamazolegroupatoraldosageof10mg·kg-1everyday,respectively.Thebodyweight,heart/bodyweightindex,heartrate(HR),
spontaneousactivityandoxygenconsumptionofalthemiceweremeasured.TheserumT3,T4levelswereevaluatedwiththemethodof
RIA.Meanwhile,theefectofJJYNJgranulesandthiamazoleoniodineuptakebythyroidwasdeterminedbyradioassay.Result:
JJYNJgranulescouldimprovethesymptomscausedbythyroxin,increasebodyweight(P<005),reduceheart/bodyweightindex,
spontaneousactivityandoxygenconsumption(P<005).TheHRofmodelgroupwas(7945±478)beats·min-1,significantly
fasterthanthatofnormalgroup(6825±1164)beats·min-1.Thoseoflow,middleandhighJJYNJgranulegroupwere(7369±
666),(7421±623),(7158±1028)beats·min-1respectively,obviouslyslowerthanthatofmodelgroup(P<005).The
serumT3,T4levelsofmodelgroupwere(385±0960),(23446±5811)μg·L
-1,significantlyhigherthanthoseofnormal
group(099±030),(6594±1394)μg·L-1,P<001).Thoseofmiddle,highofJJYNJgranulegroupwere(257±081),
(16427±7263)μg·L-1and(270±055),(15726±3503)μg·L-1.Thoseofthiamazolegroupwere(288±059),
(17265±3973)μg·L-1.Thesevaluesweresignificantlylowerthanthoseofmodelgroup.Thiamazolecouldsignificantlyinhibit
theiodineuptakeinthyroid(P<001),butJJYNJgranulesdidnotblockthatobviously.Conclusion:JJYNJgranulescouldsignifi
cantlyimprovethesymptomsofexperimentalhyperthyroidismgraves.Itsmechanismsmaybediferentfromthatofthiamazole,whichis
relatedtoinhibitingthesynthesisofthyroxininthyroid.
[Keywords] JJYNJgranules;hyperthyroidism;thyroiduptake;T3,T4
[责任编辑 古云侠]
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