全 文 ：上海中医药杂志 2013年第 47卷第 7期 SH． J． TCM Jul．，2013;Vol． 47 No． 7
高效液相色谱 －蒸发光散射检测法测定加减
玉女煎颗粒剂中菝葜皂苷元含量
李 欣，陈长勋，郭 娟
上海中医药大学(上海 201203)
【摘要】 目的 采用高效液相色谱 －蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)测定加减玉女煎颗粒剂中菝葜皂苷元含量。方法 采用
HPLC-ELSD法，色谱柱:ZOＲBAX Eclipse XDB-C18柱(150 mm ×4． 6 mm，5 μm) ;流动相:甲醇 －水(95 ∶ 5) ;柱温:30℃;流速:1 ml /min。
结果 菝葜皂苷元含量在 1． 08 ～ 5． 4 μg范围内呈良好的线性关系，相关系数 r = 0． 9993，其性质稳定，重复性好，且阴性成分无干扰。
结论 菝葜皂苷元作为加减玉女煎颗粒剂的质控成分具有一定的可行性。
【关键词】 加减玉女煎颗粒;菝葜皂苷元;高效液相色谱 －蒸发光散射检测法
【中图分类号】 Ｒ284． 1 【文献标志码】 A 【文章编号】 1007-1334(2013)07-0101-02
Determination of Sarsasapogenin in“Jiajian Yunvjian Granule”by HPLC-ELSD
LI Xin，CHEN Chang-xun，GUO Juan
Shanghai University of Traditional Chinese Medicine
Abstract:Objective To determine the content of sarsasapogenin in“Jiajian Yunvjian Granule”by HPLC-ELSD． Methods The HPLC-ELSD method was
adopted with ZOＲBAX Eclipse XDB-C18 column (150 mm ×4． 6 mm，5 μm)at 30 ℃，and the methanol-water (95 ∶ 5)as mobile phase with the flow rate of
1 ml /min was used． Ｒesults The linear range of sarsasapogenin was 1． 08 ～ 5． 4μg (r = 0． 999 3) ，the repeatability was good，and there was no disturbance by
negative contents． Conclusion There is some feasibility for taking sarsasapogenin as the quality control content of“Jiajian Yunvjian Granule”．
Keywords:sarsasapogenin;“Jiajian Yunvjian Granule”;HPLC-ELSD
［基金项目］上海市科委中药现代化专项基金资助项目
(08DZ1972103)
［作者简介］李欣，女，硕士，主要从事中药药理及相关文献编辑
工作。
加减玉女煎颗粒剂是由知母、石膏、麦冬、玄参、生
地黄等药经过水煎取汁、浓缩、真空干燥等处理后获得
的制剂，具有清气凉血、滋阴润燥功能。前期的实验研
究表明［1-2］，加减玉女煎颗粒剂具有抑制实验性甲状腺
功能亢进症(简称“甲亢”)的作用，同时，知母总皂苷
在一定剂量范围内亦具有改善实验性甲亢模型小鼠症
状、降低血清甲状腺素水平的作用。在加减玉女煎的
组方构成中，知母具有重要的作用，而知母皂苷及皂苷
元为知母清热泻火、生津润燥功能的主要活性成分［3］，
其中菝葜皂苷元作为指标成分多用于知母药材及含知
母制剂的质量监控研究。为了进一步对加减玉女煎颗
粒剂进行开发，我们选择以菝葜皂苷元作为加减玉女
煎颗粒剂的质量控制成分，对其在该复方中的含量、稳
定性、重复性及复方阴性成分的干扰性进行考察。现
将结果报道如下。
1 仪器与试药
1． 1 仪器 AL104 型电子天平，梅特勒 －托利多仪器
(上海)有限公司;DHG-9053A 型电热恒温鼓风干燥
箱，上海益恒实验仪器有限公司;电热恒温水浴锅，上
海医疗器械五厂;SK52OOH 型超声仪器，上海科导超
声仪器有限公司;SENCO恒温浴锅，上海申生科技有限
公司;SENCO 旋转蒸发器，上海申生科技有限公司;
SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵，郑州长城科工贸有限公
司;Sartorius CP 225D 型电子天平，Sartorius 公司;
Agilent 1100 高效液相色谱仪，美国安捷伦公司;PL-
ELSD 1000 蒸 发 光 散 射 检 测 器，英 国 Polymer
laboratories。
1． 2 试药 菝葜皂苷元对照品，批号:110744-200509，
中国药品生物制品检定所。加减玉女煎颗粒剂，由上
海中医药大学科技实验中心制备。甲醇，色谱纯，德国
SIGMA公司;分析纯，国药集团化学试剂有限公司。三
氯甲烷，分析纯，国药集团化学试剂有限公司。氢氧化
钠(NaOH) ，分析纯，天津市大茂化学仪器供应站。盐
酸，分析纯，开封东大化工(集团)有限公司试剂厂。双
蒸水，由上海中医药大学科技实验中心提供。
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上海中医药杂志 2013 年第 47 卷第 7 期 SH． J． TCM Jul．，2013;Vol． 47 No． 7
2 方法与结果
2． 1 色谱条件 色谱柱:ZOＲBAX Eclipse XDB-C18柱
(150 mm ×4． 6 mm，5 μm) ;流动相:甲醇 －水(95 ∶ 5) ;
柱温:30 ℃;流速:1 ml /min;ELSD 检测器蒸发温度:
100 ℃;雾化温度:80 ℃;气体流速:1． 0 L /min。
2． 2 溶液的制备 ①对照品溶液:取菝葜皂苷元对照
品适量，准确称定，加甲醇配制成 0． 5 g /L 的溶液。
②供试品溶液:取加减玉女煎颗粒剂 2 g，准确称定，加
水 20 ml，加盐酸 2 ml，回流 2 h，放冷，加入 40% NaOH
溶液调节 pH 值至中性，三氯甲烷萃取 3 次，每次
30 ml，合并萃取液，将萃取液过滤后，取澄清滤液，水浴
旋干，加甲醇溶解，定容至 2 ml 即得。③阴性样品溶
液:按加减玉女煎颗粒剂的制备方法，制备出不含知母
药材的模拟加减玉女煎颗粒剂，然后按照上述供试品
溶液的制备方法，制备出阴性样品溶液。
2． 3 标准曲线与线性范围 精密吸取对照品溶液
(0． 54 g /L)2、4、6、8、10 μl，按照上述色谱条件进行测
定，记录色谱峰面积，以色谱峰面积为纵坐标，对照品溶
液中菝葜皂苷元含量(μg)为横坐标，绘制标准曲线。
计算得回归方程为:Y = 855． 08X － 690． 45(r = 0． 9993)。
结果表明，菝葜皂苷元含量在 1． 08 ～ 5． 4 μg范围内呈
良好的线性关系。见图 1。
图 1 标准曲线
2． 4 精密度试验 精密吸取对照品溶液 6 μl，在上述
色谱条件下，重复进样 5 次，测定菝葜皂苷元的峰面
积。结果显示，菝葜皂苷元峰面积的相对标准差
(ＲSD)为 1． 34%。
2． 5 干扰性试验 吸取上述对照品溶液、供试品溶
液、阴性样品溶液各 5 μl，按照上述色谱条件进行测
定。结果表明，阴性样品对菝葜皂苷元含量的测定无
干扰。见图 2。
A:对照品;B:供试品;C:阴性样品
图 2 高效液相色谱
2． 6 稳定性试验 按上述方法制得供试品溶液。在
上述色谱条件下，分别于 0、1、2、3、4 h 进样 10 μl 进行
测定。结果显示，菝葜皂苷元峰面积 ＲSD = 2． 71%。
2． 7 重复性试验 按上述方法制备供试品溶液 5 份。
在上述色谱条件下，进样 10 μl，测定峰面积，计算菝葜
皂苷元的含量，结果 ＲSD = 3． 10%。
2． 8 样品含量测定 按上述方法制备供试品溶液。
在上述色谱条件下，进样 10 μl，得到峰面积，然后计算
出菝葜皂苷元的含量。2 个样品的含量分别为
0． 268 mg /g、0． 264 mg /g。
3 讨论
本研究主要是参考《中华人民共和国药典》［4］及相
关文献［5］报道，采用高效液相色谱 －蒸发光散射检测
(HPLC-ELSD)法，以加水溶解、加酸加热回流水解的方
法制备供试品溶液，以甲醇 －水(95 ∶ 5)为流动相进行
分离，成功检测了加减玉女煎颗粒剂中菝葜皂苷元的
含量。该方法简便、准确，重现性较好，对于加减玉女
煎颗粒制剂的质量控制具有一定的参考价值。
参考文献:
［1］ 郭娟，陈长勋，李欣． 加减玉女煎抗甲状腺机能亢进作用的研究
［J］． 中国中药杂志，2009，34(18) :2369-2372．
［2］ 李欣，陈长勋，郭娟． 知母总皂苷对甲亢模型小鼠影响的实验研究
［J］． 中华中医药学刊，2012，30(7) :1581-1583．
［3］ 边际，徐绥绪． 知母化学及药理研究进展［J］． 沈阳药学院学报，
1993，10(2) :141-144．
［4］国家药典委员会． 中华人民共和国药典［M］． 北京:化学工业出版
社，2005:148．
［5］ 成旭东，贾晓斌，陈彦． 反相高效液相色谱 －蒸发光散射检测法测
定酸枣仁浓缩丸中菝葜皂苷元的含量［J］． 中国药房，2007，18
(3) :204-205．
编辑:肖元春
收稿日期:2013-03-18
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