全 文 ：·ｇ－１（ｄｒｉｅｄｒｅｓｉｎ）ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ；Ｔｈｅｓｔａｔｉｃｅｌｕｔｉｏｎｒａｔｉｏｗｅｒｅ８５７６％，７９２４％，７３５７％，８１４５％，７１０１％ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ
ｐｕｒｉｔｙｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｅｌｕｔｅｄｂｙ５０％ ｅｔｈａｎｏｌｆｒｏｍＤＭ－３０１ｔｙｐｅｏｆｍａｃｒｏｒｅｔｉｃｕｌａｒｗａｓｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔ，ｔｈａｔｉｓ９６６３％．３０％ ａｎｄ５０％ ｅｔｈ
ａｎｏｌｃｏｕｌｄｅｌｕｔｅｍｏｓｔｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｆｒｏｍｍａｃｒｏｒｅｔｉｃｕｌａｒｒｅｓｉｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＴｈｅＤＭ－３０１ｔｙｐｅｏｆｍａｃｒｏｒｅｔｉｃｕｌａｒａｄｓｏｒｂｅｎｔｓｓｈｏｗｅｄｂｅｔｅｒ
ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅａｄｓｏｒｐｔｉｏｎｐｒｏｐｅｒｔｙ．ＩｔｃａｎｂｅｕｓｅｄｔｏｐｕｒｉｆｙｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｏｆＣｈａｅｎｏｍｅｌｅｓｓｐｅｃｉｏｓａ（ｓｗｅｅｔ）Ｎａｋａｉ．３０％ ａｎｄ５０％ ｅｔｈａｎｏｌ
ｓｈｏｗｅｄｂｅｔｅｒｅｌｕｔｉｏｎｐｒｏｐｅｒｔｙ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｃｈａｅｎｏｍｅｌｅｓｓｐｅｃｉｏｓａｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；ｍａｃｒｏｒｅｔｉｃｕｌａｒｒｅｓｉｎ；ｓｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ
［责任编辑 鲍 雷］
［收稿日期］ ２００６１１２３
［基金项目］ 国家重点科技攻关计划项目（９９９２９０１２５）
［通讯作者］ 郭绪林，Ｔｅｌ：（０１０）８２８０１７２０，Ｅｍａｉｌ：ｘｕｌｉｎ＠ｂｊ
ｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
商陆中商陆皂苷 Ａ的含量测定
王铁军，郭宏宝，卢 迪，耿 江，郭敏杰，郭绪林
（北京大学 药学院，北京 １０００８３）
［摘要］ 目的：利用 ＨＰＬＣＥＬＳＤ测定不同产地商陆药材中商陆皂苷 Ａ的含量以控制其质量。方法：采用
ＨＰＬＣＥＬＳＤ含量测定法，ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＬｕｎａＣ１８（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）色谱柱，以甲醇水冰醋酸（６８∶３１∶１）为流
动相。结果：商陆皂苷Ａ在４．０５～２０．２４μｇ呈线性，回收率为９８．８％，ＲＳＤ１．４％。测定１１个不同来源的药材，其
商陆皂苷Ａ的含量在０．３２％～１．１１％。结论：本法可快速、准确测定商陆药材中商陆皂苷Ａ含量，可用于商陆药材
的质量监控。
［关键词］ 商陆；商陆皂苷Ａ；ＨＰＬＣＥＬＳＤ
［中图分类号］Ｒ２８４．２ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）０２０１４３０３
《中国药典》收载的商陆原植物为商陆科植物
商陆ＰｈｙｔｏｌａｃｃａａｃｉｎｏｓａＲｏｘｂ．和垂序商陆Ｐ．ａｍｅｒｉ
ｃａｎａＬ．。具有逐水消肿、通利二便、解毒散结功能；
用于水肿胀满、二便不通，外治痈肿疮毒［１］。商陆
主要含有三萜皂苷类成分。商陆中的皂苷类成分均
为齐墩果烷型五环三萜，结构变化较多，至今已分离
得到 ａｃｉｎｏｓｏｌｉｃａｃｉｄ，商陆皂苷元、ｐｈｙｔｏｌａｃｃａｇｅｎｉｃ
ａｃｉｄ、去氢加利果酸、加利果酸、ｐｈｙｔｏｌａｃｃａｇｅｎｉｎａ、
ＡｃｉｎｏｓｏｌｉｃａｃｉｄＡ、ａｃｉｎｏｓｏｌｉｃａｃｉｄＢ、熊果酸、熊果酸
半乳糖苷、商陆皂苷（ｅｓｃｕｌｅｎｔｏｓｉｄｅ）Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆ，
Ｏ，Ｐ，Ｑ，Ｌ，Ｋ，Ｈ，ｓｐｅｒｇｕｌａｇｅｎｉｃａｃｉｄＡ，ｉｓｏｐｈｙｔｏｌａｃｃｉｎｉｃ
ａｃｉｄＡ，ｉｓｏｐｙｈｔｏｌａｃｃａｇｅｎｉｎＡ，美商陆皂苷 Ｂ，Ｅ，Ｇ等
２０多种皂苷元和３０多种皂苷。商陆在２００５年版
药典中未有含量测定项，文献中有以商陆皂苷元为
对照品比色法测定商陆总皂苷元的含量，缺乏专属
性，难于对商陆药材质量进行有效控制，也有用薄层
扫描法测定商陆中商陆毒素含量［２，３］。作者以商陆
及垂序商陆中均含有且作为主要成分的商陆皂苷Ａ
为含量测定的成分，采用质量型蒸发光散射检测器，
对其含量测定方法做了研究，建立了操作简便、快
速、准确的 ＨＰＬＣＥＬＳＤ测定商陆皂苷 Ａ的含量测
定方法。
１ 仪器与试药
美国光谱物理公司ＳＰ－８８１０液相色谱仪，法国
ＥＵＲＯＳＥＰ－ＤＤＬ３１型蒸发光散射检测器，色谱工作
站（ＪＳ－３０５０）采集数据处理。甲醇为色谱纯，水为
重蒸水。商陆皂苷 Ａ对照品由北京大学药学院应
用药物研究所制备，经ＨＰＬＣ面积归一化法测定，含
量为９９．８％。商陆Ｐ．ａｃｉｎｏｓａＲｏｘｂ．陕西安康采集；
垂序商陆 Ｐ．ＡｍｅｒｉｃａｎａＬ．中国医学科学院北京药
用植物研究所栽培。商品药材在不同地区的药材市
场购买。采集的商陆标本及药材经陕西安康地区药
品检验所朱朝德主任药师及标本室胥道宝副主任药
师鉴定为商陆Ｐ．ａｃｉｎｏｓａ；以上采集及市场购得的商
陆药材均经本院天然药物学系屠鹏飞教授及应用药
物研究所郭绪林教授进一步鉴定，确认除北京药用
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第３３卷第２期
２００８年１月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ ２
Ｊａｎｕａｒｙ，２００８
植物研究所采集的药材来源于垂序商陆 Ｐ．Ａｍｅｒｉ
ｃａｎａ外，其他药材均为商陆Ｐ．ａｃｉｎｏｓａ。
２ 方法与结果
２．１ 色谱条件 ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＬＵＮＡＣ１８柱（４．６
ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）；甲醇水冰醋酸（６８∶３１∶１）；
流速１ｍＬ·ｍｉｎ－１；柱温为３５℃；ＥＬＳＤ检测器 ＰＭ
４５０，漂移管温度６０℃，载气流速７．１２×１０５Ｐａ。在
该色谱条件下，商陆皂苷 Ａ与相邻色谱峰分离度良
好。对照品和商陆样品的ＨＰＬＣ图见图１。
图１ 对照品和样品的ＨＰＬＣ图
Ａ．对照品；Ｂ．样品；１．商陆皂苷Ａ
２．２ 对照品溶液的制备 精密称取商陆皂苷 Ａ对
照品约８，１２ｍｇ，分别置于１０ｍＬ量瓶中，用甲醇溶
解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
２．３ 供试品溶液的制备 取本品粉末约４ｇ，精密称
定，精密加入甲醇５０ｍＬ，称重，加热回流提取１ｈ，
冷却至室温，再称定质量，用甲醇补足减失的质
量，混匀，滤过，精密量取续滤液２５ｍＬ，挥去甲醇，
残渣用０．５％氢氧化钠溶解，并立即通过大孔树脂
柱（大孔树脂ＳＰ８２５，柱内径１．５ｃｍ，高９ｃｍ），树脂
柱用水洗至中性，再用甲醇６０ｍＬ洗脱，收集甲醇洗
脱液，回收溶剂并用甲醇定量转溶至１０ｍＬ量瓶中，
定容，摇匀。微孔滤膜（０．４５μｍ）滤过，滤液作为供
试品溶液。
２．４ 线性关系考察 精密称取商陆皂苷 Ａ对照品
５０．６０ｍｇ，置２５ｍＬ量瓶中，加甲醇溶解，并稀释至
刻度，摇匀，分别精密量取２，３，５，７ｍＬ置１０ｍＬ量
瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。分别量取上述溶液
及原液各１０μＬ注入高效液相色谱仪，测定，以对照
品峰面积Ａ的自然对数值为纵坐标，以对照品进样
量ｍ的自然对数值为横坐标进行线性回归，回归方
程为ｌｎＡ＝１２．１５＋１．６５ｌｎｍ，ｒ＝０．９９９０，结果表明
商陆皂苷 Ａ在４．０５～２０．２４μｇ其自然对数值与峰
面积自然对数值呈良好线性关系。
２．５ 精密度试验 精密吸取对照品溶液１０μＬ注
入高效液相色谱仪，重复进样５次，以峰面积值计算
其ＲＳＤ１．３％。表明实验精密度良好。
２．６ 供试品溶液的稳定性 取样品，按含量测定方
法制备供试品溶液，室温下自然放置，于０，２，４，６，
１２ｈ测定含量，结果 ＲＳＤ１．１％。可见样品溶液中
商陆皂苷Ａ的含量在１２ｈ内稳定性良好。
２．７ 重复性试验 取样品，按拟定的含量测定方
法，平行试验 ５份，商陆皂苷 Ａ平均含量 ０．４２％，
ＲＳＤ２．１％，有较好的重复性。
２．８ 回收率试验 精密称取５份已测知含量的商
陆药材粉末约２．０ｇ，分别精密加入对照品甲醇溶液
５ｍＬ（２．０８６ｍｇ·ｍＬ－１），按样品含量测定法测定，
计算回收率，平均回收率为９８．８％，ＲＳＤ１．４％，具
有良好的回收率。
２．９ 样品测定 取不同地区商陆商品药材粉末，按
供试品溶液的制备方法制成供试品溶液；吸取对照
品溶液和供试品溶液各１０μＬ，注入高效液相色谱
仪，测定，以外标两点法计算样品中商陆皂苷 Ａ的
含量，测定结果见表１。
表１ 不同地区商陆及商陆药材中商陆皂苷Ａ质量分数
％
Ｎｏ． 来源 含量 Ｎｏ． 来源 含量
１ 陕西安康１） ０．８３ ８ 吉林仁合 ０．５４
２ 北京垂序１） ０．６３ ９ 陕西西安 ０．４３
３ 吉林伊通 ０．５１ １０ 安徽亳州 ０．９８
４ 山西长治 ０．４７ １１ 四川成都 ０．３２
５ 新疆乌鲁木齐 ０．３９ １２ 四川康县 ０．４８
６ 内蒙古呼和浩特 １．１１ １３ 湖南长沙 ０．３４
７ 内蒙古包头 ０．４５
注：１）对照药材
３ 讨论
由测定结果可见不同地区的商品商陆药材中商
陆皂苷Ａ的含量在０．３２～１．１１％，含量差异较大，
以呼和浩特的为高，商陆皂苷 Ａ的含量与药材质地
有关，凡质地较轻，粉碎后纤维素比例较高的药材商
陆皂苷Ａ的含量就低，原因有待进一步研究，初步
分析可能与药材采集时间有关。采集的商陆与垂序
商陆中均含有商陆皂苷 Ａ，且含量差异不是非常明
显，这一研究结果为测定商陆皂苷 Ａ监测不同植物
来源的商陆药材提供了可行性依据。
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第３３卷第２期
２００８年１月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ ２
Ｊａｎｕａｒｙ，２００８
研究表明商陆中皂苷类成分复杂，且在紫外区
只有弱的末端吸收（２０５ｎｍ），因此，若采用 ＨＰＬＣ
ＵＶ测定，由于商陆皂苷仅有弱的末端吸收，样品需
经繁杂的前处理，十分严格的操作条件，仍难以避免
噪音对结果的影响。采用 ＨＰＬＣＥＬＳＤ对商陆商陆
皂苷Ａ进行含量测定研究结果，分离效果好，前处
理简单，重复性好，回收率高，是一种简便、快速、准
确的ＨＰＬＣ测定商陆皂苷Ａ的含量测定方法。可用
于商陆药材及相关制剂的质量监控。
由于流动相中有机溶剂比例较大，飘移管温度
不宜太高，在４０～８０℃考察结果，飘移管温度６０℃
时，色谱峰峰形及仪器响应值较为合适，故确定检测
器飘移管温度设为６０℃；仍以色谱峰峰形及仪器响
应值为考察指标，确定载气（空气）流速为１．７５。
商陆皂苷 Ａ溶于乙醇，微溶于水，易溶于甲醇
及稀碱溶液。比较了以甲醇、稀碱溶液为提取溶剂，
操作中稀碱溶液为溶剂提取后过滤较为困难，同时
考虑到商陆皂苷Ａ分子中有酯键存在，稀碱可能影
响其稳定，结果表明以甲醇为提取溶剂为佳。以甲
醇为溶剂，比较了溶剂用量（５０ｍＬ与１００ｍＬ）、提
取方式（超声与回流）、回流提取时间（１ｈ与２ｈ），
根据实验结果选择以甲醇５０ｍＬ，回流提取１ｈ。
ＥＬＳＤ法检测的灵敏度相对于ＵＶ法要低得多，
为了保证分析的精密度，就必须有较大的被测物质
浓度（通常以每１ｍＬ含被测物质１ｍｇ左右为宜），
由于药材中商陆皂苷Ａ的含量较低，直接用甲醇提
取液难于满足被测成分的浓度要求，浓缩后杂质的
浓度增加严重的影响色谱图质量并对色谱柱污染严
重，而且脂溶性杂质的存在使分析周期太长。基于
上述原因供试品溶液需要纯化处理，研究中采用硅
胶柱、氧化铝柱处理，可除去部分杂质，但效果不理
想，对分析周期不产生明显影响。利用被测成分商
陆皂苷分子中有羧基易溶于稀碱并可被大孔树脂吸
附的性质，用大孔树脂法纯化供试品。经研究表明
常用大孔树脂 Ｄ１０１，ＳＰ８２５对皂苷类成分都有较好
的吸附作用；在碱性条件下大孔树脂 Ｄ１０１的吸附
性能有较明显下降，而对 ＳＰ８２５的吸附性能影响较
小，故选用大孔树脂 ＳＰ８２５作为吸附剂。将甲醇提
取液挥去溶剂后的残渣用稀碱溶解，滤过（可除去
大量水不溶性杂质），并通过大孔树脂 ＳＰ８２５柱，水
洗，再用甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液，回收溶剂并定
容，微孔滤膜（０．４５μｍ）滤过，滤液作为供试品溶
液。样品经大孔树脂纯化后可明显提高谱图质量，
并缩短分析周期。
［参考文献］
［１］ 中国药典［Ｓ］．一部．２００５：２２７．
［２］ 范大均，安登魁，李修禄，等．双波长薄层扫描测定商陆及制剂
中商陆皂甙甲的含量［Ｊ］．药物分析杂志，１９９４，１４（６）：４４．
［３］ 查文清，王孝涛，原思通．直序商陆炮制品毒性成分测定［Ｊ］．
安徽中医学院学报，２０００，１９（４）：５６．
ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｅｓｃｕｌｅｎｔｏｓｉｄｅｓＡｉｎＲａｄｉｘＰｈｙｔｏｌａｃｃａｅｂｙＨＰＬＣ
ＷＡＮＧＴｉｅｊｕｎ，ＧＵＯＨｏｎｇｂａｏ，ＬＵＤｉ，ＧＥＮＧＪｉａｎｇ，ＧＵＯＭｉｎｊｉｅ，ＧＵＯＸｕｌｉｎ
（ＣｏｌｅｇｅｏｆＰｈａｒｍａｃｙＰｅｋｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，１０００８３Ｂｅｉｊｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｄｅｖｅｌｏｐａＨＰＬＣＥＬＳＤｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎｏｆｅｓｃｕｌｅｎｔｏｓｉｄｅｓＡｉｎＲａｄｉｘＰｈｙｔｏｌａｃｃａ．Ｍｅｔｈ
ｏｄ：ＡＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＬｕｎａＣ１８ｃｏｌｕｍｎ（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）ｗｉｔｈａｓｏｌｖｅｎｔｓｙｓｔｅｍｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇｏｆｍｅｔｈａｎｏｌｗａｔｅｒａｃｅｔｉｃａｃｉｄ（６８∶
３１∶１）ｗａｓｕｓｅｄ，ａｎｄｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＥＬＳＤ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＴｈｅｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎｃｕｒｖｅｏｆｅｓｃｕｌｅｎｔｏｓｉｄｅｓＡｓｈｏｗｅｄｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｉｔｙｉｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ４．０５
２０．２４μｇ，ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｙｗａｓ９８．８％，ｗｉｔｈＲＳＤｏｆ１．４％．１１ｂａｔｃｈｅｓｏｆＲａｄｉｘＰｈｙｔｏｌａｃｃａｅｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄ，ａｎｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓ
ｗｅｒｅ０．３２％ ｔｏ１．１１％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｉｓｓｉｍｐｌｅ，ｒａｐｉｄａｎｄｓｅｎｓｉｔｉｖｅ，ｃａｎｂｅｕｓｅｄｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｅｓｃｕｌｅｎｔｏｓｉｄｅｓＡｉｎ
Ｒａｄｉｘｐｈｙｔｏｌａｃｃａｅ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｐｈｙｔｏｌａｃｃａａｃｉｎｏｓａ；ＨＰＬＣＥＬＳＤ；ｅｓｃｕｌｅｎｔｏｓｉｄｅｓＡ
［责任编辑 王亚君］
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