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Experimental study of Bailian Caogen granule on pharmacodynamics

柏连草根冲剂药效学研究



全 文 :levelsinsystemicsclerosispatients:corelationbetweenNOlevels andclinicalfeatures.ClinExpImmunol,2003,134(3):538.
Experimentalstudyonefectofcurcuminoninhibiting
injuryoffreeradicalinpulmonaryfibrosisrats
ZHOUGang,NIUJianzhao,WANGJifeng,CHENWeitao,LIUTongxiang,LIYinsheng,LIZhehua
(Labortoryofcelandbiochemistry,BeijingUniversityofChineseMedicine,Beijing100029,China)
[Abstract] Objective:Tostudyontheefectandmechanismofcurcuminoninhibitinginjuryinducedbyfreeradicalinpulmonaryfi
brosis.Method:OnehundredandfortyfourmaleSDratswererandomlydividedinto6groups(24ratsineachgroup).Ratsinthemodelcon
trolgroup,positivemedicinegroup,andhigh,moderateandlowcurcumingroupswereinjectedwithasingledoseofbleomycinbytrachea,
andratsinshammodelcontrolgroupwithsamevolumenormalsaline.Onedayaftertheinjection,curcuminsolutionofdiferentdosages
(200,100,50mg·kg-1·d-1)wasrespectivelygiventoratsinthehigh,moderateandlowcurcumingroupbydailygastrogavage,whileequal
volumeofnormalsalinewasgiventothoseintheshammodelcontrolgroupandmodelcontrolgroup,andanequalvolumeofprednisone(0.56
mg·kg-1·d-1)wassalinewasgiventothoseinpositivemedicinecontrolgroup.Onthe7,14,28days,thecontentsofGSHPx,SOD,
MDAandiNOSinpulmonarytissuesofdiferentgroupsweremeasured.Result:CurcumincanraisethecontentofSODandGSHPxand
lessenthelevelofMDAandiNOS.Conclusion:Curcumincanregulatetheleveloffreeradicalinthebodyofratswithpulmonaryfibrosisand
lessentheoxidativeinjuryofpulmonarytissuescausedbyfreeradical,inthebodyofratswithpulmonaryfibrosis.Themechanismsofcurcumin
onidiopathicpulmonaryfibrosislieinadjustingtheleveloffreeradicalandinhibitingtheinjuryoflungtissueinducedbyfreeradical.
[Keywords] curcumin;pulmonaryfibrosis;rat;freeradical
[责任编辑 方文贤]
[收稿日期] 20051123
[通讯作者] 赵润英,Tel:(024)62215687
柏连草根冲剂药效学研究
赵润英1,赵丽妮1,周艳香1,李大满2,郝 伟2,陈魁敏2
(1沈阳医学院 药理教研室,辽宁 沈阳 110034;
2沈阳医学院 机能学实验中心,辽宁 沈阳 110034)
[摘要] 目的:研究柏连草根冲剂的解热、镇痛和抗炎作用。方法:用蛋白胨制备兔发热模型法研究其解热作
用;用扭体法和热板法观察其镇痛作用;用角叉菜胶致大鼠足跖肿胀法和二甲苯致小鼠耳肿胀法研究其抗炎作用。
结果:柏连草根冲剂能显著抑制蛋白胨所致体温升高;能明显减少小鼠的扭体次数,并显著延长小鼠的痛觉反应时
间;能明显减轻小鼠耳肿胀及大鼠足跖肿胀反应。结论:柏连草根冲剂具有解热、镇痛和抗炎作用。
[关键词] 柏连草根冲剂;解热;镇痛;抗炎
[中图分类号]R2855 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2006)08067204
柏连草根冲剂是由黄柏、黄连、炙甘草、葛根等
传统中药制成的复方制剂。它在祖传秘方的基础上
科学加减修改而成,临床上主要用于湿热蕴积所致
急、慢性肠炎和痢疾的治疗,疗效显著。本研究根据
国家《药品注册管理办法》等有关要求[1],对柏连草
根冲剂进行解热、镇痛和抗炎作用研究,以其为临床
合理应用提供实验依据。
1 材料
11 药品与试剂 羧甲基纤维素钠(上海化学试剂
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公司,批号041008);蛋白胨(中国医药集团上海化学
试剂公司,批号030625);柏连草根冲剂(沈阳勃润生
物技术有限公司,用 05%羧甲基纤维素钠碾磨混
悬均匀,分别配成实验所需浓度);阿司匹林(上海九
福药业有限公司,批号040410,用05%羧甲基纤维
素钠配成 2%的溶液);醋酸(分析纯,上海试剂一
厂,批号990301);盐酸吗啡(沈阳第一制药厂,批号
030420,用 05%羧甲基纤维素钠配成 01%的溶
液);角叉菜胶(上海众伟生化有限公司,批号
040515,用生理盐水配成1%的含量);二甲苯(分析
纯,哈尔滨化工试剂厂,批号020320)。
12 动物 新西兰兔,体重18~22kg,中国医科
大学实验动物中心提供。昆明种小鼠,体重18~22
g;SD大鼠,体重 13O~150g;由沈阳医学院实验动
物中心提供。
2 方法
21 解热实验 按照文献方法[2]选择肛温正常的
新西兰兔32只,根据肛温随机分成4组,每组8只,
雌雄各半。其中 1组为生理盐水对照组,2组为阿
司匹林阳性对照组,3,4组分别为柏连草根冲剂低、
高剂量组。于给药前 3Omin测定各兔肛温作为正
常值,并肌肉注射 10%蛋白胨溶液(15mL·kg-1)
制备兔发热模型。然后采取灌胃给药的方法(灌胃
体积按8mL·kg-1),1,2,3,4组分别给予生理盐水、
阿司匹林和不同剂量的柏连草根冲剂药液,观察给
药后1,2,4,6h新西兰兔的肛温变化情况。
22 镇痛实验
221 扭体法 选择昆明种小鼠50只,随机分为5
组,每组10只,雌雄各半。其中 1组为生理盐水对
照组,2,3组分别为阿司匹林、盐酸吗啡对照组,4,5
组分别为柏连草根冲剂低、高剂量组。采取灌胃给
药的方法(灌胃体积按 05mL·20g-1),1,2,3,4,5
组分别给予生理盐水、阿司匹林和盐酸吗啡 2种不
同剂量的柏连草根冲剂药液,给药后30min,每只小
白鼠均腹腔注射 06%醋酸 02mL,观察 20min内
各组小白鼠出现扭体反应(腹部内凹、伸展后肢、臀
部抬高)的次数。
222 热板法 按文献方法[3]选择痛觉反应在 30
s内的昆明种雌性小鼠 50只,随机分成 5组,每组
10只。其中1组为生理盐水对照组,2,3组为阿司
匹林、盐酸吗啡对照组,4,5组分别为柏连草根冲剂
低、高剂量组。首先测定基础(即给药前)痛觉反应
潜伏期(痛觉反应指标:舔后足),然后采取灌胃给药
的方法(灌胃体积按05mL·20g-1),1,2,3,4,5组
分别给予生理盐水、阿司匹林、盐酸吗啡和不同剂量
的柏连草根冲剂药液,在给药后30min测定各组小
白鼠痛觉反应潜伏期延长的时间(小鼠置热板上60
s仍未出现舔后足反应时,迅速取出,痛觉反应的潜
伏期按60s计算。)
23 抗炎实验[4]
231 小白鼠耳肿胀法 取昆明种雄性小鼠 40
只,随机分成4组,每组 10只。其中 1组为生理盐
水对照组,2组为阿司匹林对照组,3,4组分别为柏
连草根冲剂低、高剂量组。采取灌胃给药的方法(灌
胃体积按05mL·20g-1),1,2,3,4组分别给予生理
盐水、阿司匹林和不同剂量的柏连草根冲剂药液,每
日1次,连续4d。末次给药后 30min,将二甲苯以
002mL/只涂于小白鼠右耳两面,左耳不涂作为空
白对照,4h后脱颈椎处死,用 6mm打孔器沿两耳
相同部位打下两耳片,分别称重,以两耳片重量的差
值作为鼠耳肿胀程度指标,计算鼠耳肿胀度。
鼠耳肿胀度(%)=(右耳片重-左耳片重)/左耳片重×
100%
232 大白鼠足跖肿胀法 取 SD雄性大鼠 40只,
随机分成4组,每组10只。其中1组为生理盐水对
照组,2组为阿司匹林对照组,3,4组分别为柏连草
根冲剂低、高剂量组。采取灌胃给药的方法(灌胃体
积按1mL·100g-1),1,2,3,4组分别给予生理盐水、
阿司匹林和不同剂量的柏连草根冲剂药液,每日 1
次,连续4d。末次给药后1h,在各组大鼠的右后足
跖皮下注射1%角叉菜胶01mL致炎,致炎前和致
炎后 1,2,4,6h用足容积测量器测量大鼠足容积,
按下列公式计算足跖肿胀度。
足跖肿胀度(%)=(致炎后足容积-致炎前足容积)/致
炎前足容积×100%
24 统计学处理 实验数据以珋x±s表示,组间差
异用 t检验(SPSS统计软件,version100)。
3 结果
31 解热作用 肌注蛋白胨可引起新西兰兔肛温
明显升高。由表1可见,阿司匹林作为阳性对照药
能显著对抗蛋白胨的升温作用,与生理盐水组比较,
差异非常显著(P<001);给予柏连草根冲剂后,可
明显抑制蛋白胨的升温作用,其中低、高剂量组与生
理盐水组比较,分别为差异显著和差异非常显著
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(P<005和 P<001),说明柏连草根冲剂的降温作
用呈剂量依赖性。而柏连草根冲剂高剂量组与阿司
匹林组比较,则差异不显著,提示柏连草根冲剂与阿
司匹林的降温作用基本相当。
表1 柏连草根冲剂对新西兰兔发热反应的影响(珋x±s,n=8)
组别
剂量
/g·kg-1
正常肛温
/℃
肛温升高值/℃
1h 2h 4h 6h
生理盐水 - 38.64±0.46 0.54±0.44 0.60±0.38 1.20±0.70 1.49±0.68
阿司匹林 0.102 38.62±0.45 0.06±0.221) 0.18±0.281) 0.44±0.401) 0.65±0.322)
柏连草根冲剂 3.2 38.70±0.30 0.28±0.262) 0.36±0.402) 0.88±0.34 1.08±0.41
6.4 38.66±0.45 0.16±0.141) 0.20±0.281) 0.80±0.69 1.02±0.58
注:与生理盐水组比较1)P<001,2)P<005);与阿司匹林组比较3)P<001(表2~5同)
32 镇痛作用
321 扭体法 腹腔注射06%乙酸可使小鼠出现
扭体反应。由表2可见,阿司匹林和盐酸吗啡作为
阳性对照药,二者对乙酸引起的小鼠扭体反应具有
明显的抑制作用,与生理盐水对照组比较,均差异非
常显著(P<001);给予不同剂量柏连草根冲剂后,
动物在20min内的扭体次数明显减少,与生理盐水
对照组比较,表现为差异显著和差异非常显著(P<
005和 P<001),说明柏连草根冲剂抗小鼠扭体反
应的作用呈剂量依赖性。柏连草根冲高剂量组分别
与阿司匹林、盐酸吗啡组比较,表现为差异非常显著
(P<001)和差异不显著,说明柏连草根冲剂比阿
司匹林的抗小鼠扭体反应作用强,而与盐酸吗啡的
抗小鼠扭体反应作用相当。
表2 柏连草根冲剂对醋酸所致小鼠扭体
反应次数的影响(珋x±s,n=10)
组别 剂量/g·kg-1 扭体次数
生理盐水 - 24.10±4.98
阿司匹林 0.30 15.50±4.021)
盐酸吗啡 0.02 3.10±1.961)
柏连草根冲剂 8.0 16.20±5.681,3)
16.0 3.80±3.581,3)
322 热板法 将小鼠置于热板上能够刺激小鼠
出现舔后足的痛觉反应。由表3可见,给予阿司匹
林、盐酸吗啡药后,小鼠的痛觉反应潜伏期比给药前
明显延长,与生理盐水对照组比较,均差异非常显著
(P<001),说明盐酸吗啡和阿司匹林均能明显缓
解热板对小鼠的热痛刺激。不同剂量的柏连草根冲
剂,能够显著延长小鼠的痛觉反应潜伏期,与生理盐
水对照组比较,差异非常显著(P<001),说明柏连
草根冲剂具有很强的镇痛作用。柏连草根冲剂高剂
量组与阿司匹林组比较差异不显著,说明柏连草根
冲剂与阿司匹林的镇痛作用强度相当;而与盐酸吗
啡组比较则差异显著(P<005),提示柏连草根冲
剂镇痛作用弱于盐酸吗啡。
表3 柏连草根冲剂对小鼠痛觉反应
潜伏期的影响(珋x±s,n=10)
组别
剂量
/g·kg-1
潜伏期/s
给药前 给药后 延长时间
生理盐水 - 21.8±2.6 22.4±4.5 0.6±1.9
阿司匹林 0.30 20.0±3.2 40.2±15.2 20.2±12.01)
盐酸吗啡 0.02 22.2±3.4 58.1±3.8 35.9±0.41)
柏连草根冲剂 8.0 22.4±3.0 30.6±12.0 8.2±9.01)
16.0 20.9±3.0 38.6±12.1 17.7±8.11,4)
注:与盐酸吗啡组比较4)P<005
33 抗炎作用
331 小白鼠耳肿胀法 以二甲苯涂抹小鼠耳面
后,可引起鼠耳明显肿胀。由表4可见,阿司匹林组
和柏连草根冲剂高剂量组均可使鼠耳肿胀度显著降
低,与生理盐水组比较,均差异非常显著(P<
001);而柏连草根冲剂高剂量组与阿司匹林组比较
则差异不显著,提示柏连草根冲剂与阿司匹林的抗
炎作用基本相同。
表4 柏连草根冲剂对二甲苯所致小鼠耳
肿胀度的影响(珋x±s,n=10)
组别 剂量/g·kg-1 耳肿胀度/%
生理盐水 - 75.59±36.00
阿司匹林 0.225 31.02±19.551)
柏连草根冲剂 8.0 68.78±28.98
16.0 33.15±15.121)
332 大白鼠足跖肿胀法 足跖皮下注射角叉菜胶
可使大鼠足跖致炎而肿胀。由表5可见阿司匹林组
和柏连草根冲剂高剂量组在致炎后1,2,4h均可使大
鼠的足跖肿胀度显著降低,与生理盐水组比较,均差
异非常显著(P<001),说明柏连草根冲剂与阿司匹
林均有很强的抗炎作用;而在致炎后6h则未见明显
降低;柏连草根冲剂高剂量组与阿司匹林组比较则差
异不显著,说明柏连草根冲剂与阿司匹林抗炎作用相
当;柏连草根冲剂低剂量组仅在致炎后 1h显著降
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低,与生理盐水组比较,差异非常显著(P<001)。 4 讨论
表5 柏连草根冲剂对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀度的影响(珋x±s,n=10)
组别
剂量
/g·kg-1
足跖肿胀度/%
1h 2h 4h 6h
生理盐水 - 16.08±4.23 10.01±4.59 8.01±3.39 4.41±3.51
阿司匹林 0.10 5.89±4.011) 4.19±2.311) 3.69±3.11) 4.38±3.04
柏连草根冲剂 5.6 6.98±3.801) 9.75±6.13 8.56±8.61 4.19±3.82
11.2 6.79±5.741,3) 4.16±3.131,3) 3.98±3.972,3) 4.02±3.15
复方制剂中的黄柏具有广谱抗菌作用[5],并能
对抗细菌毒素引起的肠分泌亢进和腹泻,还能通过
抑制免疫反应,减轻对动物的炎症损伤[6];黄连能够
泻火、解毒、清热、燥湿,具有抗微生物、抗原虫、抗
炎、抗溃疡、增加冠状动脉血流量及降低血压、抗癌、
抗氧化、保护胃黏膜、抑制一氧化氮(NO)生成以及
磷酸酯酶抑制作用[7],并与炙甘草具有协同的降低
小肠推进性蠕动功能,从而产生良好的抗腹泻效果,
其机制与调节 cAMP有关[8];葛根具有抑制 2,4二
硝基苯酚引起的大鼠体温升高(作用维持约8h),舒
张平滑肌,促进心脑血管、视网膜的血流,从而改善
垂体后叶素引起的心肌缺血,抗癌及诱导癌细胞的
分化,降血糖,提高学习记忆功能等药理作用[9]。
本实验结果表明,柏连草根冲剂能够缓解蛋白
胨所致的动物体温升高,尤其在高剂量下作用更为
突出;在采用不同方法制备的疼痛、炎症模型当中,
柏连草根冲剂也显示了明显的镇痛、抗炎作用。可
以认为,在临床上柏连草根冲剂以临床常用剂量应
用,不但对病理性发热有缓解能力,同时具有镇痛、
抗炎作用,对急、慢性肠炎、痢疾等肠道疾病的发热、
腹痛、腹泻、黏液脓血便和里急后重等临床症状有明
显的治疗作用。
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内蒙古大学出版社,2003.1.
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ExperimentalstudyofBailianCaogengranuleonpharmacodynamics
ZHAORunying1,ZHAOLini1,ZHOUYanxiang1,LIDaman2,HAOWei2,CHENKuimin2
(1DeptofPharmacology,ShenyangMedicalColege,Shenyang110034,China;
2ExperimentalCentreofFunctionCourse,ShenyangMedicalColege,Shenyang110034,China)
[Abstract] Objective:Tostudytheanalgesic,antipyreticandantiinflammatoryefectofBailianCaogengranule.Method:Thean
tipyreticefectsofBailianCaogengranulewasevaluatedinrabbitfevermodelinducedbypeptone.Theanalgesicefectofthedrugwasstudied
withpainmodelofmiceinducedbyaceticacidandhotplate,Theseverityofoedemaininflamedanimalwasobservedtostudytheantiinflam
matoryefectsofBailianCaogengranule.Result:BailianCaogengranulecouldobviouslyinhibitthefeverofrabbits.Thenumberofwrithing
inducedbyaceticacidwasreducedandthepainthresholdofmicewasincreasedbyBailianCaogengranule.BailianCaogengranulealsohad
antiinflammatoryactivityagainstxyleneinducedmouseearswelingandcarageenininducedratpawedema.Conclusion:BailianCaogen
granulehassignificantanalgesic,antipyreticandantiinflammatoryactivities.
[Keywords] BailianCaogengranule;analgesia;antipyresis;antiinflammation
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