全 文 ：ＨＰＬＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｏｆＨｅｒｂａＳｅｎｅｃｉｏｎｉｓＳｃａｎｄｅｎｔｉｓａｎｄｉｔｓＥＳＩＭＳａｎａｌｙｓｉｓ
ＺＨＡＮＧＣｈａｏｆｅｎｇ，ＣＨＥＮＬｕｘｉｎ，ＺＨＡＮＧＭｉａｎ，ＷＡＮＧＺｈｅｎｇｔａｏ
（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｏｇｎｏｓｙ，ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１００３８，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｔｕｄｙａｎｄｅｓｔａｂｌｉｓｈｔｈｅｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓｏｆＨｅｒｂａＳｅｎｅｃｉｏｎｉｓＳｃａｎｄｅｎｔｉｓｂｙＲＰＨＰＬＣａｎｄＬＣＭＳ．
Ｍｅｔｈｏｄ：Ｃ１８ｃｏｌｕｍｎｗａｓｕｓｅｄｉｎｔｈｅＨＰＬＣｓｅｐａｒａｔｉｏｎ．Ｔｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｗａｓｃｏｍｐｏｓｅｄｏｆａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅａｎｄ００３％ ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃａｃｉｄ
ｗｉｔｈｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎ．Ｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｗａｓ１０ｍＬ·ｍｉｎ－１ａｎｄｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗａｓ２５４ｎｍ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｕｎｄｅｒｔｈｉｓｓｅｌｅｃｔｅｄｃｈｒｏｍａｔｏ
ｇｒａｐｈｉｃｃｏｎｄｉｔｉｏｎ，ｇｏｏｄＨＰＬＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓｏｆＳｅｎｅｃｉｏｓｃａｎｄｅｎｓｗｅｒｅｏｂｔａｉｎｅｄ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＨＰＬＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｆａｃｉｌｉｔａｔｅｔｈｅｅｖａｌｕａｔｉｏｎ
ｏｆｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｏｆＨｅｒｂａＳｅｎｅｃｉｏｎｉｓＳｃａｎｄｅｎｔｉｓ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｓｅｎｅｃｉｏｓｃａｎｄｅｎｓ；ＨＰＬＣ；ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ；ＥＳＩＭＳａｎａｌｙｓｉｓ
［责任编辑 王亚君］
［收稿日期］ ２００８０２１９
［基金项目］ 科技部科研院所社会公益研究专项（２００４ＤＩＢ１ＪＯ
３９）
［通讯作者］ 张本刚，Ｔｅｌ：（０１０）６２８９９７２５，Ｅｍａｉｌ：ｚｈａｎｇ
ｂｅｎｇａｎｇ＠１６３．ｎｅｔ
龙胆规范化种植中农药世高安全使用标准的研究
刘海涛１，刘洪科１，２，薛 健１，郑友兰２，陈 峰１，张本刚１
（１．中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所，北京 １０００９４；
２．吉林农业大学，吉林 长春 １３０１１８）
［摘要］ 目的：制定龙胆规范化种植中农药世高的安全使用标准，以保证其施用安全有效。方法：通过测定农
药世高在龙胆生长期的降解动态，计算农药世高在龙胆中的半衰期，从而制定农药世高的安全使用标准。结果：在
当地的气候条件下，农药世高在龙胆茎叶上的半衰期为６８４～６９０ｄ。结论：龙胆规范化种植中，建议农药世高喷
施量应小于４００ｇ·ｈｍ－２，安全使用间隔期为４０ｄ。
［关键词］ 世高；龙胆；降解动态；安全使用标准
［中图分类号］Ｒ２８４．１ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）１８２０９６０３
近年来，中药及其产品的质量引起了人们的高
度重视，中药材 ＧＡＰ指导原则中明确规定，中药材
ＧＡＰ生产要符合“无污染、无公害、绿色药材”的标
准。强调中药质量管理，加强中药材规范化种植管
理源头，农药的安全使用是其中的重要环节。
龙胆斑枯病 ＳｅｐｔｏｒｉａｇｅｎｔｉａｎａｅＴｈüｍ．，褐斑病
ＳｅｐｔｏｒｉａｍｉｃｒｏｓｐｏｒａＳｐｅｇ．是影响龙胆产量和品质的
重要原因，二三年生龙胆草发病率达８４％ ～１００％，
减产高达５０％～８０％，是制约龙胆药材生产的关键
因素［１２］。世高 １０％苯醚甲环唑（ｄｉｆｅｎｏｃｏｎａｚｏｌｅ）水
分散性粒剂（ＷＧ），化学通用名苯醚甲环唑，是三唑
类杀菌剂的一种，内吸性强，杀菌谱广。近年来因其
对斑枯病、叶斑病、白粉病等有较好的防治效果而被
广泛用于龙胆栽培中斑枯病的防治，但国内外有关
该农药在作物上安全使用标准的文献报道很少［３５］，
在中药龙胆上更是一个空白。本试验通过对农药世
高在龙胆中的残留分析和降解动态的研究，提出了
龙胆规范化种植中农药世高的安全使用标准，为龙
胆规范化种植中农药安全使用标准的建立提供了科
学参考。
１ 仪器与试药
ＨＰ６８９０Ｎ气相色谱仪（电子捕获检测器），中性
氧化铝（１００～２００目，经４３０℃灼烧６ｈ，再用５％蒸
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第３３卷第１８期
２００８年９月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ １８
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００８
馏水脱活，北京化工厂）。世高（瑞士，先正达公
司），苯醚甲环唑对照品（大北农集团北京绿色农华
植保公司，纯度≥９７％），所用试剂皆为分析纯。
龙胆药材，２００６年８～１０月采于辽宁天瑞绿色
产业科技开发有限公司龙胆草规范化种植基地，由
本所张本刚研究员鉴定为Ｇｅｎｔｉａｎａｓｃａｂｒａ。
２ 方法
２．１ 田间试验设计
试验设计３个浓度分别为：空白对照、推荐剂量
（１３３３ｇ·ｈｍ－２）、高剂量（４００ｇ·ｈｍ－２，因考虑种
植过程中农民经常人为加大药量），每个浓度设置３
个重复，共计９个小区，小区面积（１５×５）ｍ２。将
农药世高以清水分别配置成相应的浓度，喷施于生
长期的龙胆草茎叶上，于喷药后 １／１２，１，３，６，１０，
１４，２１，３０，４５，６０ｄ随机采集龙胆茎叶、根作为样品，
取样方式为Ｓ型取样，所有样品于当日上午１１时之
前采集完毕，自然晾干后，放入－２０℃冰箱保存。
２．２ 供试品溶液的制备
称取样品２ｇ，置于１００ｍＬ三角烧瓶中，加３０
ｍＬ乙腈浸泡过夜，然后用４０ｍＬ乙腈分２次超声提
取３０ｍｉｎ，依次过盛有５ｇ无水硫酸钠的漏斗，并用
１０ｍＬ乙腈洗涤三角烧瓶和滤渣。４０℃低压浓缩
至约１ｍＬ，自然晾干。
取玻璃色谱柱管，依次装入少量脱脂棉、２ｃｍ
厚的无水硫酸钠，５ｇ中性氧化铝，２ｃｍ厚的无水硫
酸钠，制备成前处理柱，使用前用１０ｍＬ石油醚预淋
洗。将提取物以石油醚乙醚（１∶１）溶解后转入前处
理柱进行净化，用６０ｍＬ石油醚乙醚（１∶１）的混合
溶剂进行淋洗，收集淋洗液，浓缩近干后用石油醚定
容至２ｍＬ，气相色谱分析，测定苯醚甲环唑的含量。
２．３ 气相色谱检测
２．３．１ 色谱条件 ＨＰ－５毛细管色谱柱（０３２
ｍｍ×３０ｍ，０２５μｍ），载气Ｎ２（纯度９９９９９％）；流
速１２ｍＬ·ｍｉｎ－１；气化室温度２６０℃，程序升温：
起始温度１００℃，保持２ｍｉｎ，然后以２０℃·ｍｉｎ－１
升温至２５０℃，继续以３０℃·ｍｉｎ－１升温至２８０℃，
保持１５ｍｉｎ。检测器温度３００℃；不分流进样。
２．３．２ 线性关系考察 在２．３．１项色谱条件下，采
用峰面积外标法进行定量分析。配制０１，０５，１０，
１００，２００ｍｇ·Ｌ－１的苯醚甲环唑对照品溶液，分别
进样１μＬ，以样品质量浓度（Ｘ），峰面积（Ｙ），做标准
曲线，其线性方程为 Ｙ＝３３９５１６７Ｘ－３７００５９，ｒ＝
０９９９９，线性范围为００１～２００ｍｇ·Ｌ－１，苯醚甲环
唑对照品的最低检出限量为４×１０－１２ｇ，最小定量限
为１２×１０－１１ｇ。苯醚甲环唑在龙胆茎叶样品的实测
最低检出限为０００７ｍｇ·ｋｇ－１。
２．３．３ 重复性试验 按照２．２项下方法对同一样
品重复制备６份供试品溶液，在２．３．１项色谱条件
下，分别进样，峰面积平均值为 ４４９２３８６，ＲＳＤ
１０％。
２．３．４ 稳定性试验 按照２．２项下方法制备供试
品溶液，在２．３．１项色谱条件下，分别于０，４，８，１２，
１６，２４ｈ进样 １μＬ，峰面积平均值为 １１１８７０８６，
ＲＳＤ１６％。
２．３．５ 加样回收率试验 精密称取空白对照小区
的样品２０００ｇ，分别添加０１，１，１０ｍｇ·Ｌ－１苯醚甲
环唑对照品溶液（设３个添加水平），按上述方法前
处理后，进行分析检测，见表１。
表１ 世高回收率试验（ｎ＝３）
加入量／μｇ 测得量／μｇ 平均回收率／％ ＲＳＤ／％
２０ １９８８ ９９４０ ０１４
２ １９３４ ９６７０ ０８２
０２ ０１８７ ９３５０ １５６
注：该试验样品为空白对照小区样品
３ 结果分析
３．１ 农药世高在龙胆茎叶中的降解动态
对不同时间采集的龙胆茎叶，进行农药世高的
含量检测（图１），考察农药世高在不同时间内在龙
胆茎叶中的降解情况（图２）。试验结果表明，在当
地气候条件下，农药世高在龙胆茎叶中很快降解。
在龙胆茎叶中的降解情况分别为：
推荐剂量：降解方程为ｌｎＣ＝－０１００５ｔ＋１９３３７（Ｒ２＝
０９１７４），半衰期ｔ１／２＝６９０ｄ
高剂量：降解方程为 ｌｎＣ＝－０１０１３ｔ＋３２１６１（Ｒ２＝
０９１５４），半衰期ｔ１／２＝６８４ｄ
Ａ．对照品；Ｂ．龙胆样品；１．苯醚甲环唑
图１ 对照品和龙胆样品ＧＣ图
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图２ 农药世高降解趋势曲线
３．２ 世高在龙胆根中的残留检测
经试验检测，喷施高剂量（４００ｇ·ｈｍ－２）农药
世高后在龙胆根没有检测出苯醚甲环唑的残留，分
析原因可能为该农药在龙胆茎叶中即进行代谢发挥
药效，不以苯醚甲环唑的原药进入龙胆根部，或者该
农药在进入龙胆根中时原药苯醚甲环唑已经降解到
最低检测限以下，具体情况有待于进一步研究。
４ 讨论
以上试验研究表明，用本方法测定龙胆茎叶中
的苯醚甲环唑残留含量，灵敏度及回收率高、峰形
好，最小检出量和最低检出浓度均符合农药残留分
析要求。
色谱图中出现２个相连峰，是因为苯醚甲环唑
具有顺反异构体，在其标样中顺反异构体比例约为
５５∶４５，在标样的色谱图中，２个峰面积比约为１∶１，
能准确反映标样中各异构体的存在及含量比例。在
测定的所有样品中，其样品色谱图中的２个相连的
峰均一个峰高一个峰低，可能是因为顺反异构体在
自然状态下降解速度不同，至于哪个异构体降解较
快，还需要进一步的研究。
农药世高的降解动态研究中，第１次采样为喷
施农药后２个小时，所以样品中农药的浓度比较高，
超出了线性范围，在进行测定时对其进行了稀释，使
其在线性范围之内。第４次与第５次采样之间，农
药世高的降解速度比较快，这可能与当时采样期间
的降雨有关。
我国目前还没有制定苯醚甲环唑在任何一种植
物中的最大残留量（ＭＲＬ），因此通过本研究对进一
步研究该农药具有一定的指导意义。龙胆作为广泛
使用的中药材的一种，制定施药后的安全采收间隔
期有重要的意义，试验数据表明，在喷施高剂量
（４００ｇ·ｈｍ－１）后经３８ｄ后在茎叶中降解到９８％以
下，建议从最后施药到采收安全间隔期为４０ｄ。
［参考文献］
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ｏｎａｐｐｌｅｌｅａｖｅｓａｎｄｇｒａｓｓａｎｄｓｏｉｌｉｎａｎａｐｐｌｅｏｒｃｈａｒｄｉｎｎｏｒｔｈ
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ｔａｃｔ）ａｎｄｄｉｆｅｎｏｃｏｎａｚｏｌｅ（ｓｙｓｔｅｍｉｃ）ｆｕｎｇｉｃｉｄｅｓｉｎｂｅｅｐｒｏｄｕｃｔｓ
ｆｒｏｍａｎａｐｐｌｅｏｒｃｈａｒｄ［Ｊ］．Ａｐｉｄｏｌｏｇｉｅ，２０００，３１（４）：５３．
Ｓｔｕｄｙｏｎｓａｆｅｕｓｅｏｆ１０％ ｄｉｆｅｎｏｃｏｎａｚｏｌｅｉｎＧＡＰｏｆＧｅｎｔｉａｎａｓｃａｂｒａ
ＬＩＵＨａｉｔａｏ１，ＬＩＵＨｏｎｇｋｅ１，２，ＸＵＥｊｉａｎ１，ＺＨＥＮＧＹｏｕｌａｎ２，ＣＨＥＮＦｅｎｇ１，ＺＨＡＮＧＢｅｎｇａｎｇ１
（１．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭｅｄｉｃｉｎａｌＰｌａｎｔＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓａｎｄＰｅｋｉｎｇＵｎｉｏｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｅｇｅ，
Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００９４，Ｃｈｉｎａ；
２．ＪｉｌｉｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ１３０１１８，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｓａｆｅｕｓｅｏｆ１０％ ｄｉｆｅｎｏｃｏｎａｚｏｌｅｉｎｐｌａｎｔｉｎｇＧｅｎｔｉａｎａｓｃａｂｒａ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅｄｅｇｒａｄａ
ｔｉｏｎｄｙｎａｍｉｃｓｏｆ１０％ ｉｆｅｎｏｃｏｎａｚｏｌｅｉｎｔｈｅｓｔｅｍｓａｎｄｌｅａｖｅｓｏｆＧ．ｓｃａｂｒａｃｏｌｅｃｔｉｎｇｉｎｄｉｆｅｒｅｎｔｔｉｍｅｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＧＣｗｉｔｈＥＣＤ
ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄｔｈｅｈａｌｆｌｉｆｅｏｆｄｉｆｅｎｏｃｏｎａｚｏｌｅｉｎｔｈｅｐｌａｎｔｗａｓｃａｌｃｕｌａｔｅｄ，ａｎｄｔｈｅｎｔｈｅｓａｆｅｕｓｅｍｅｔｈｏｄｏｆ１０％ ｄｉｆｅｎｏｃｏｎａｚｏｌｅｗａｓｆｏｒ
ｍｕｌａｔｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｕｎｄｅｒｔｈｅｌｏｃａｌｃｌｉｍａｔｉｃｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｔｈｅｈａｌｆｌｉｆｅｏｆ１０％ ｄｉｆｅｎｏｃｏｎａｚｏｌｅｗａｓ６８４６９０ｄａｙｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｉｎｔｈｅ
ｇｏｏｄａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌｐｒａｃｔｉｃｅ（ＧＡＰ）ｏｆＧ．ｓｃａｂｒａ，ｔｈｅｍａｘｉｍａｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ１０％ ｄｉｆｅｎｏｃｏｎａｚｏｌｅｉｓ４００ｇ·ｈａ－１，ｔｈｅｓａｆｅｔｙｉｎｔｅｒｖａｌ
ｏｆｕｓｉｎｇ１０％ ｄｉｆｅｎｏｃｏｎａｚｏｌｅｉｓ４０ｄａｙｓ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｄｉｆｅｎｏｃｏｎａｚｏｌｅ；Ｇｅｎｔｉａｎａｓｃａｂｒａ；ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｄｙｎａｍｉｃｓ；ｓａｆｅｕｓｅ ［责任编辑 王亚君］
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