全 文 ：本实验采用了 ＣＺＥ和 ＭＥＫＣ２种模式进行分
离，由于吴茱萸碱及吴茱萸次碱结构相似，极性相
近，在ＣＺＥ模式中先后选用不同浓度、不同ｐＨ的硼
砂缓冲液（２０～１００ｍｍｏｌ·Ｌ－１）、磷酸盐缓冲液
（２０～１００ｍｍｏｌ·Ｌ－１）、碳酸盐缓冲液（５０～１００
ｍｍｏｌ·Ｌ－１），分别在上述缓冲液中按１∶０５～１∶１５
的比例加入甲醇或乙醇或乙腈或异丙醇或不加入有
机溶剂，始终不能分离此两成分，而胶束电泳却可较
好的分离，故选择ＭＥＫＣ模式。
分别考察了不同浓度的硼砂缓冲液（含 ＳＤＳ
２０～１００ｍｍｏｌ·Ｌ－１）和不同浓度的磷酸盐缓冲液
（含ＳＤＳ２０～１００ｍｍｏｌ·Ｌ－１），发现硼砂体系的分
离效率优于磷酸盐体系，且５０ｍｍｏｌ·Ｌ－１的硼砂缓
冲液分离效率最好；另当ＳＤＳ从２０ｍｍｏｌ·Ｌ－１增至
５０ｍｍｏｌ·Ｌ－１的过程中，分离效率逐渐增大，但超过
５０ｍｍｏｌ·Ｌ－１后，分离效率逐渐降低，且电流波动较
大，当ＳＤＳ的浓度超过８０ｍｍｏｌ·Ｌ－１时，吴茱萸碱
及吴茱萸次碱无峰出现，故本实验选用５０ｍｍｏｌ·
Ｌ－１的硼砂缓冲液（含ＳＤＳ５０ｍｍｏｌ·Ｌ－１）。
在胶束电泳模式中，发现不加改性剂峰形差，分
析时间过长，且组分不能达到良好的分离。而在加
入的甲醇、乙醇、乙腈、异丙醇等改性剂中，以甲醇效
果最好，故考察硼砂缓冲液甲醇的比例（１０∶１～１∶
２），发现分离效率随甲醇用量的增加而增大，峰形
改善，但达到１∶１左右时，分离效率急剧下降，至１∶
２时不能达到基线分离，故选择最佳分离比例 ５０
ｍｍｏｌ·Ｌ－１硼砂缓冲液（含 ＳＤＳ５０ｍｍｏｌ·Ｌ－１）甲
醇（１３∶１）。
３．４ 本实验方法学考察的数据表明本方法稳定性、
精密度、加样回收率和重复性均能满足定量的要求，
而且前处理简单，样品及试剂用量少，分析耗费低，
环境污染少，柱效远高于 ＨＰＬＣ，是一种很有发展潜
力的分析方法。
［参考文献］
［１］ 中国药典［Ｓ］．一部．２００５：４１６．
［２］ 戴媛媛，刘保林，窦昌贵．吴茱萸及其有效成分的药理研究进
展［Ｊ］．中药材，２００３，２６（４）：２９５．
［３］ 谭生建，赵炳成，王海涛，等．高效液相色谱法测定戊己丸中吴
茱萸碱和吴茱萸次碱含量［Ｊ］．解放军药学学报，２００２，１８（４）：
２０２．
［４］ 刘蕴秀，罗淑荣，冯孝章．薄层荧光扫描法测定吴茱萸药材及
其制剂中５种生物碱的含量［Ｊ］．药学学报，１９９９，３４（５）：３８３．
［５］ 李琴韵，王智华，洪筱坤．ＨＰＣＥＦＰＳ技术对吴茱萸质量的研究
［Ｊ］．中成药，２００３，２５（７）：５７０．
［６］ ＺｈａｎｇＪＨ，ＯｋｕｂｏＡ，ＹａｍａｚａｋＳＩ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｂｅｔａｉｎｅｓｉｎ
ｐｌａｎｔｓｂｙｌｏｗｐＨｃａｐｉｌａｒｙｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓａｓｔｈｅｉｒｐｈｅｎａｃｙｌｅｓｔｅｒｓ
［Ｊ］．ＢｕｎｓｅｋｉＫａｇａｋｕ，１９９７，４６（４）：２７５．
［责任编辑 鲍 雷］
［收稿日期］ ２００７０１２４
［基金项目］ 贵州省中药现代化科技产业研究开发基金项目
（黔科合农字［２００５］５０４０号，［２００６］５０４２号）
［通讯作者］ 王永林，Ｔｅｌ：（０８５１）６９０８８９９，Ｅｍａｉｌ：ｇｙｗｙｌ＠ｍｃ．
ｅｄｕ．ｃｎ
ＨＰＬＣ测定珍珠滴丸中３，４Ｏ二咖啡酰基奎宁酸的含量
赵 平，王爱民，王永林，兰燕宇，何 迅，李勇军
（贵阳医学院 药学院，贵州 贵阳 ５５０００４）
珍珠滴丸系由羊耳菊、珍珠等药味组成，经提取
精制而得，为贵州省中药现代化科技产业研究开发
基金项目。本方具有解毒定痛，化腐生肌之功效，临
床用于复发性口腔溃疡等症。处方中的君药羊耳菊
为贵州地道药材，具有疏风散热，解毒消肿作用［１］。
羊耳菊药材目前尚无质量检测用对照品［２］，为了有
效控制药材及制剂质量，作者对羊耳菊化学成分进
行了研究，从中分离出含量较高的化合物［３６］，并按
《中药新药质量标准用对照品研究的技术要求》进
行标准物质研究，制备了化学纯度较高、化学结构明
确的３，４Ｏ二咖啡酰基奎宁酸（Ｃ２５Ｈ２４Ｏ１２）化学对
照品。建立了珍珠滴丸中３，４Ｏ二咖啡酰基奎宁
酸的含量测定方法，以控制本品的质量。
１ 仪器与试药
高效液相色谱仪系统（岛津 ＬＣ－１０Ａｖｐ），包含
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第３２卷第１８期
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２台 ＬＣ－１０ＡＴｖｐ泵；ＳＰＤ－１０Ａｖｐ紫外检测器，
７７２５ｉ手动进样阀，ＴＣ－１００柱温箱（天津特纳科技
公司），ＷＭＬ色谱工作站（广西威玛龙色谱科技公
司）；紫外可见光分光光度计（岛津ＵＶ－２４０１ＰＣ）；
超声波清洗器（２５０Ｗ，２９～３４ｋＨｚ；北京医疗设备
二厂）等。甲醇（色谱纯）；磷酸（分析纯）；水为重蒸
水；３，４Ｏ二咖啡酰基奎宁酸对照品由贵阳医学院
临床前药物研究所天然药物研究室从羊耳菊 Ｉｎｕｌａ
ｃａｐｐａ（Ｂｕｃｈ．Ｈａｍ．ｅｘＤ．Ｄｏｎ）ＤＣ．中分离、纯化而
得，经ＮＭＲ，ＭＳ鉴定为３，４Ｏ二咖啡酰基奎宁酸，
ＨＰＬＣ归一化法测定其纯度为９８０１％；珍珠滴丸由
贵阳医学院药物研究开发中心提供 （批号
２００５１０１０，２００５１０１７，２００５１０１９）。
２ 方法与结果
２．１ 色谱条件 色谱柱大连依利特 ＫｒｏｍａｓｉｌＣ１８
（５０ｍｍ×２００ｍｍ，５μｍ）；流动相甲醇０１％磷酸
（３７∶６３）；流速１ｍＬ·ｍｉｎ－１；温度３０℃；检测波长
３２９ｎｍ；进样量１０μＬ。
２．２ 对照品溶液的制备和线性关系考察 取３，４
Ｏ二咖啡酰基奎宁酸对照品，精密称定，加５０％乙
醇制成１ｍＬ含０２５２８ｍｇ的对照品储备液。分别
吸取１，１５，２，２５，３ｍＬ分别置于２５ｍＬ量瓶中，用
５０％乙醇稀释至刻度，摇匀。分别精密吸取上述系
列对照品工作液各１０μＬ注入液相色谱仪，按上述
色谱条件测定峰面积，以进样浓度（Ｘ）为横坐标，峰
面积（Ｙ）为纵坐标，绘制工作曲线，计算线性回归方
程Ｙ＝２０２１５Ｘ＋４３２，ｒ＝０９９９９，结果表明二者在
１０～３０μｇ·ｍＬ－１有良好的线性关系。
２．３ 供试品溶液的制备 取本品８丸（约０４ｇ），
置５０ｍＬ量瓶中，精密称定，加５０％乙醇约４０ｍＬ
超声处理（功率２５０Ｗ，频率２９～３４ｋＨｚ）１０ｍｉｎ，放
冷，再加５０％乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜（０４５
μｍ）滤过，即得。同法制得阴性对照溶液。
２．４ 系统适用性试验 取对照品溶液、供试溶液及
阴性对照溶液各１０μＬ注入色谱仪，记录色谱（图
１），从图中可见，本试验条件下３，４Ｏ二咖啡酰基
奎宁酸与其他组分离完全，３，４Ｏ二咖啡酰基奎宁
酸保留时间（ｔＲ）为１４３ｍｉｎ，阴性对照图谱在３，４
Ｏ二咖啡酰基奎宁酸峰位置处无假阳性峰，理论塔
板数以峰计３，４Ｏ二咖啡酰基奎宁酸为３６００。
２．５ 精密度试验 取同一份供试品溶液，重复进样
５次，测定３，４Ｏ二咖啡酰基奎宁酸峰面积，峰面
积的ＲＳＤ０６８％。
２．６ 稳定性试验 取同一份供试品溶液，分别于
０，１，２，４，６ｈ进样测定，其峰面积的 ＲＳＤ１７％，表
明供试品溶液在６ｈ内稳定。
２．７ 重复性试验 取供试品按供试品溶液的制备
方法制备５份，分别进样测定，平均含量０４７５０％，
ＲＳＤ１６％。
图１ 珍珠滴丸的ＨＰＬＣ图
Ａ．对照品；Ｂ．样品；Ｃ．阴性；１．３，４Ｏ二咖啡酰基奎宁酸
２．８ 加样回收率试验 称取已测定含量的制剂
（含量 ０４７５０％）９份，分别加入 ３，４Ｏ二咖啡酰
基奎宁酸对照品适量，按供试品溶液制备项下方法
操作，测定并计算回收率，结果见表１。
表１ ３，４Ｏ二咖啡酰基奎宁酸加样回收率
称样量
／ｇ
样品中
含量／ｍｇ
加入量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
０２０３８ ０９６８０ ０４９２８ １４５６ ９９０
０２０６１ ０９７９０ ０４９２８ １４６２ ９７０
０２０４７ ０９７２３ ０４９２８ １４８１ １０３２
０２０８５ ０９９０４ ０９８５５ １９７４ ９９８
０２０５３ ０９７５２ ０９８５５ １９７８ １０１８ ９９９ ２０
０２０９６ ０９９５６ ０９８５５ １９５１ ９６９
０２１０７ １００１０ １４７８０ ２４８６ １００５
０２００４ ０９５１９ １４７８０ ２４０９ ９８６
０２０８０ ０９８８０ １４７８０ ２４９２ １０１１
２．９ 样品测定 取３个批号的制剂，按上述供试品
溶液的制备方法制备供试品溶液，分别进样测定，同
时计算样品中３，４Ｏ二咖啡酰基奎宁酸含量，结果
见表２。
表２ 珍珠滴丸中３，４Ｏ二咖啡酰基奎宁酸
含量测定（ｎ＝３）
批号 ３，４Ｏ二咖啡酰基奎宁酸／ｍｇ·ｇ－１ ＲＳＤ／％
２００５１０１０ ４９５ ２６
２００５１０１７ ５１９ ２１
２００５１０１９ ４７８ ３１
３ 讨论
取３，４Ｏ二咖啡酰基奎宁酸对照品适量按对
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照品溶液的制备方法制成对照品溶液，置紫外可见
光分光光度计下记录其紫外吸收光谱，结果显示３，
４Ｏ二咖啡酰基奎宁酸在３２９ｎｍ波长处有最大吸
收，故选择３２９ｎｍ为测定波长。
３，４Ｏ二咖啡酰基奎宁酸为羊耳菊的活性成
分之一，此前尚未见其含量测定方法的报道。本实
验建立了珍珠滴丸中羊耳菊药材所含的３，４Ｏ二
咖啡酰基奎宁酸含量测定的 ＨＰＬＣ法，该法简便快
速，准确度高，灵敏度高，重复性好。
本实验尚考察过不同乙醇溶液，乙醇溶液用量
及超声处理时间对３，４Ｏ二咖啡酰基奎宁酸含量
的影响，结果表明，以５０％乙醇溶液超声波提取转
移率最高。
［参考文献］
［１］ 中国药品生物制品检定所．中国民族药志［Ｍ］．第２卷．北京：
人民卫生出版社，１９９０：２５９．
［２］ 贵州省药品监督管理局．贵州省中药材民族药材质量标准
［Ｓ］．贵阳：贵州科技出版社，２００３：１７６．
［３］ 国家中医药管理局中华本草编委会．中华本草［Ｍ］．第７册．
上海：上海科学技术出版社，１９９９：８６６．
［４］ ＢａｒｕａｈＮＣ，ＳｈａｒｍａＲＰ，ＴｈｙａｇａｒａｊａｎＧ，ｅｔａｌ．Ｎｅｗｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ
ｆｒｏｍＩｎｕｌａｃａｐｐａａ［Ｊ］．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９７９，１８（１２）：２００３．
［５］ 张贵君．常用中药鉴定大全［Ｍ］．哈尔滨：黑龙江科学技术出
版社，１９９３：３７２．
［６］ 江苏新医学院．中药大辞典［Ｍ］上册．上海：上海科学技术出
版社，１９９６：６９８．
［责任编辑 鲍 雷］
［收稿日期］ ２００６１２２８
［基金项目］ “十一五”国家科技支撑计划项目（２００６ＢＡＩ０９Ｂ０７）
［通讯作者］ 谷雨龙，Ｔｅｌ：１３８１１４０４２９８，Ｆａｘ：（０１０）８４７３８６
１１，Ｅｍａｉｌ：ｇｕｙｕｌｏｎｇ＿２０００＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
地椒挥发油分子蒸馏精制工艺初步研究
谷雨龙，倪 健，翟小玲
（北京中医药大学 中药学院，北京 １００１０２）
地椒为唇形科植物百里香 Ｔｈｙｍｕｓｍｏｎｇｏｌｉｃｕｓ
（Ｒｏｎｎ）Ｒｏｎｎ．的干燥地上部分。又名百里香、千里
香、山椒、麝香草，分布在我国陕西、山西、辽宁等省。
地椒性温、味辛、有小毒，地椒挥发油具有抗菌、抗
炎、止咳、平喘及祛痰等作用［１］。主要用于治疗中
暑、感冒、消化不良、牙痛、急性胃肠炎、高血压、慢性
湿疹等。现代药理研究证实，在大剂量或长期给药
时，地椒油有一定的毒性和刺激性。分析表明地椒
油中的主要成分麝香草酚和异麝香草酚是导致其毒
性和刺激性的主要原因，并具有致畸、致突变作
用［２］。为有效降低这两个成分的含量，同时为地椒
油脱色脱臭，作者应用分子蒸馏（ＭＤ）法对地椒油
进行精制。
１ 材料与仪器
ＦＩＮＮＩＧＡＮＴＲＡＣＥ气相色谱质谱联用仪，刮膜
式分子蒸馏器（处理量１ｋｇ·ｈ－１）（北京化工大学
新特科技发展公司）。地椒采自兰州市榆中县兴隆
自然保护区，经甘肃省中医学院生药教研室李成义
教授鉴定。地椒挥发油为本实验室经水蒸气蒸馏法
提取而得。
２ 方法与结果
２．１ 分子蒸馏 将分子蒸馏器进行加热，并打开冷
却系统，当温度分别达到１００℃和３～５℃时，打开
真空泵抽至压力约为１２０Ｐａ时，调节转子刮膜的转
速为５０～６０ｒ·ｍｉｎ－１，将地椒油１２５０ｇ加热到７０
℃后从进料口以２５０～３００滴／ｍｉｎ的流速加入，蒸
馏７５ｍｉｎ后出料，收集馏出物Ⅰ（２８０ｇ），馏余物Ⅰ
（９００ｇ）；用同样方法，对馏余物Ⅰ进行蒸馏（参数为
１１０℃，９０Ｐａ，转速为 ５０～６０ｒ·ｍｉｎ－１，流速为
２５０～３００ｄ·ｍｉｎ－１），收集到馏出物Ⅱ（３５０ｇ），馏
余物Ⅱ（４５０ｇ）；将馏余物Ⅱ再进行蒸馏（参数为
１１０℃，５５Ｐａ、转速为５０～６０ｒ·ｍｉｎ－１、流速为３００
～３５０ｄ·ｍｉｎ－１），收集到馏出物Ⅲ（２１０ｇ），馏余物
Ⅲ（２４０ｇ）。
２．２ ＧＣＭＳ分离与鉴定 样品处理：取地椒油和
ＭＤ馏出物Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，馏余物Ⅲ各０５ｍＬ，至１０ｍＬ
·０４９１·
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ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ １８
Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００７