全 文 ：金银花挥发油 ＧＣ指纹图谱研究
梁 倩１，王俊儒２，３，梁宗锁１，３，杨东风１
（１．西北农林科技大学 生命学院，陕西 杨凌 ７１２１００；
２．西北农林科技大学 理学院，陕西 杨凌 ７１２１００；
３．陕西省中药指纹图谱与天然产物库研究中心，陕西 杨凌 ７１２１００）
［摘要］ 目的：建立１０批金银花药材挥发油的指纹图谱。方法：用水蒸气蒸馏法提取，ＧＣ法分析对比１０批
金银花药材挥发油的成分。结果：１０批金银花药材的挥发油相似度较高。结论：该指纹图谱方法简便，重现性好，
可作为金银花药材的质量控制方法之一。
［关键词］ 金银花；挥发油；ＧＣ指纹图谱
［中图分类号］Ｒ２８４．１ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００８）２０２３５９０３
［收稿日期］ ２００７１２２３
［基金项目］ ２００５年教育部新世纪优秀人才支持计划（ＮＣＥＴ
０５０８５５）；２００５年西北农林科技大学青年学术骨干支持计划
［通讯作者］ 王俊儒，Ｅｍａｉｌ：ｗａｎｇｊｒ０７＠１６３．ｃｏｍ
金银花又名忍冬花，为忍冬科植物忍冬Ｌｏｎｉｃｅｒａ
ｊａｐｏｎｉｃａＴｈｕｎｂ．的干燥花蕾或带初开的花，夏初花
开放前采收，干燥［１］。挥发油是金银花的有效成分
之一［２］。金银花精油在卷烟、食品以及高级化妆品
等行业中是上等香精香料［３］。本研究根据国家食
品药品监督管理局《中药注射剂指纹图谱研究的技
术要求（暂行）》对其进行了气相指纹图谱的研究，
对综合评价和控制金银花及其挥发油的质量有着重
要的意义，为金银花药材的质量评价和ＧＡＰ实施提
供科学依据。
１ 仪器与试药
日本岛津ＧＣ－２０１０气相色谱仪，ＦＩＤ检测器，
ＧＣｓｏｌｕｔｉｏｎ色谱工作站，高纯氮气，分析纯乙醚。金
银花药材共１０批样品，经西北农林科技大学药用植
物教研室张跃进副教授鉴定为忍冬科植物忍冬 Ｌ．
ｊａｐｏｎｉｃａ的花蕾，见表１。
２ 方法与结果
２．１ 气相色谱条件
ＯＶ１７０１毛细管柱（０３２ｍｍ×３０ｍ，０３３
μｍ）；载气 高纯氮气；进样量１μＬ；分流比１０∶１；检
测器温度 ２８０℃；汽化室温度 ２８０℃；压力 ８８９
ｋＰａ；柱流量２８８ｍＬ·ｍｉｎ－１；线速度４６５ｓｅｃ－１；吹
扫流量３０ｍＬ·ｍｉｎ－１；氢气流量４７ｍＬ·ｍｉｎ－１；空
表１ 金银花样品的产地及采集时间
Ｎｏ． 产地 采集日期
１ 山东平邑 ２００６０７
２ 山东费县 ２００６０７
３ 河南密县 ２００６０７
４ 河南封丘 ２００６０５
５ 陕西汉中 ２００６０５
６ 广西忻城 ２００６０７
７ 安徽石台县 ２００６０５
８ 安徽黄山 ２００６０６
９ 湖南隆回 ２００６０６
１０ 陕西安康 ２００６０６
气流量４００ｍＬ·ｍｉｎ－１；升温程序 初温７０℃，保持
５ｍｉｎ，以５℃·ｍｉｎ－１升温至２８０℃，保持１０ｍｉｎ；
ＳＰＢ－３全自动空气源，ＳＰＨ－３００Ａ氢气发生器，上
海闵东电子仪器有限公司 ＭＤ－１气体净化器（Ｎ２，
Ｈ２）。
ＧＣＭＳ条件：ＴＲＡＣＥＤＳＱＧＣＭＳ联用仪（美国
Ｆｉｎｎｉｇａｎ公司）；ＤＢ－ＷＡＸ色谱柱（０２５ｍｍ×３０
ｍ，０２５μｍ）弹性石英毛细管柱（美国 Ａｇｉｌｅｎｔ公司
产品）；分流比１０∶１；程序升温 初温７０℃，保持５
ｍｉｎ，以５℃·ｍｉｎ－１升温至２８０℃，保持１０ｍｉｎ；离
子源 ＥＩ，７０ｅＶ；载气 高纯氮气；离子源的温度２５０
℃；传输线温度２２０℃，发射电流１００μＡ；扫描质量
范围ｍ／ｚ１０～４００，检测电压１４ｋＶ；ＮＩＳＴ２００２标准
谱库自动检索，参考有关文献资料，按面积归一化法
计算各组分的相对含量。
２．２ 供试品溶液的制备
分别称取１０批金银花样品各５０ｇ，置圆底烧瓶
中用水蒸气蒸馏法提取，对溜出液用乙醚萃取，将萃
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取液封口置冰箱冷冻，使水与含有挥发油的乙醚样
品分离（水结冰），接着将样品转入干净的样品瓶。
低温挥发乙醚到一定的量，作为供试品溶液。
２．３ 方法学考察
２．３．１ 精密度试验 取同一份金银花的供试品溶
液连续进样５次，比较共有指纹峰的相对保留时间
和相对峰面积，各共有峰的相对保留时间 ＲＳＤ＜
００２％，相对峰面积比值 ＲＳＤ平均值 ＜２１％符合
指纹图谱的检测要求，表明该仪器的精密度良好。
２．３．２ 稳定性试验 取同一份金银花的供试品溶
液，分别在制备后０，４，８，１６，２４ｈ进样，比较各共有
指纹峰的相对保留时间和相对峰面积。各共有指纹
峰的相对保留时间 ＲＳＤ＜０１４％，相对峰面积
ＲＳＤ＜４７％，表明该样品溶液比较稳定。
２．３．３ 重现性试验 取同一批金银花样品５份，按
供试品溶液制备方法分别制备，比较各共有指纹峰
的相对保留时间和相对峰面积，结果表明，各共有指
纹峰的相对保留时间 ＲＳＤ＜０１８％，相对峰面积
ＲＳＤ＜３８％，表明该测定具有较好的重现性。
２．３．４ 指纹图谱相似性评价 分别将１０批样品进
样分析，记录色谱图，见图１。根据１０批金银花样
品相对保留时间的一致性，共确定了２６个共有峰。
ｔＲ＝４８２ｍｉｎ的峰面积较稳定，且分离度好，设为参
照峰Ｓ，将各共有色谱峰保留时间和峰面积与同一
图谱中参照峰的保留时间和峰面积相比，其比值为
各共有峰的相对保留时间和相对峰面积，见表 ２。
可以看出，相对含量较高的组分除２５号峰外，还有
８，１０，１１，２４号峰。
图１ ８批金银花挥发油的气相色谱图
表２ １０批金银花药材的相对保留时间和相对峰面积
Ｎｏ．
ｔＲ
／ｍｉｎ
１０批样品的相对峰面积
１ ２ ３ ４ ５ ６ ７ ８ ９ １０ 均值
１ ００８２ ００１０ ００１７ ００２１ ００３０ ００１９ ００１７ ００１３ ００２９ ００１２ ００２７ ００１９
２ ０２６２ ００１０ ００１０ ００１２ ００３０ ００２１ ０００８ ００２０ ００１９ ００１２ ００８８ ００２３
３ ０４６６ ００７４ ０００９ ０００９ ００３３ ００４４ ００１４ ００１３ ００１４ ００７２ ００８９ ００３７
４ ０５９５ ００１４ ００６５ ００３５ ０２７３ ０００７ ００３３ ００３７ ００５１ ００１５ ００３０ ００５６
５ ０６５７ ００１６ ００５４ ００４１ ０１７２ ０００３ ００４３ ００５２ ００７６ ００４９ ００１５ ００５２
６ ０６６０ ０１６２ ００２７ ００２０ ００６０ ００１９ ００２２ ００２９ ００８６ ００７６ ０１６９ ００６７
７ ０６６７ ０００８ ００２６ ００１５ ０１３４ ００１４ ００１７ ００３８ ００２０ ００７８ ００２２ ００３７
８ ０６８３ ０２６７ ０８７３ ０７４０ ５３７６ ０１５４ ０５６８ ０５００ ０９３７ ０３１２ ０１６５ ０９８９
９ ０７１０ ００２１ ００４６ ００５７ ００７８ ０００６ ００４３ ００４６ ００４３ ０００８ ００２５ ００３７
１０ ０７６１ ０２２８ １０５６ ０７５３ ５９８５ ０１９１ ０５８６ ０５５５ ０９３３ ０３３９ ００９８ １０７２
１１ ０７６７ ０３９８ １１７２ ０８７５ ５１３８ ０３１７ ０６７５ ０５３２ ０９６６ ０３２９ ０２４５ １０６５
１２ ０７７５ ００６９ ０１５０ ０２０１ ０１３９ ００５４ ０１６８ ００４６ ００９６ ００００ ００１１ ００９３
１３ ０７８５ ００１１ ００４８ ００４９ ００７７ ０００５ ００３８ ００４１ ００３５ ０００８ ００１２ ００３２
１４ ０７９２ ００２６ ００５９ ００６６ ００８８ ００１４ ００５２ ００４８ ００４５ ００１２ ００２５ ００４３
１５ ０８０１ ００９６ ０１３８ ０１４２ ０１９０ ００７８ ０１２５ ０１３０ ０１７２ ０１１１ ０１４４ ０１３３
１６ ０８３６ ００５９ ００４０ ００４６ ００６０ ００２８ ００３８ ００３７ ００４８ ００３０ ００２１ ００４１
１７ ０８７１ ０１４８ ０２９１ ０２８６ ０３１５ ０１４５ ０２３８ ０２６３ ０２９９ ０２３１ ０１６６ ０２３８
１８ ０９０５ ００２０ ００１７ ００１４ ００１０ ００１０ ００１１ ００１１ ００１０ ００１２ ００００ ００１１
１９ ０９０８ ００７５ ００７６ ００８０ ００５２ ００３８ ００６５ ００１５ ００４０ ０００９ ００１５ ００４７
２０ ０９２５ ００３３ ００３０ ００３０ ００２７ ００２６ ００２３ ００１６ ００００ ００１２ ００２０ ００２２
２１ ０９３７ ０２３０ ０３１４ ０３１０ ０３０２ ０１９１ ０２６１ ０３０３ ０３２２ ０２５６ ０２１５ ０２７０
２２ ０９４７ ０１２３ ００８１ ０１３４ ０００５ ０２３１ ００９３ ０００７ ００００ ０００７ ００８９ ００７７
２３ ０９６８ ００３１ ００３０ ００３０ ００２６ ００２５ ００２７ ００２８ ００２７ ００２５ ００２８ ００２８
２４ ０９７３ ０３２５ ０２８２ ０３０１ ０１５５ ０１４３ ０２９４ ００８０ ０１８４ ００６５ ００８２ ０１９１
２５ １０００ １０００ １０００ １０００ １０００ １０００ １０００ １０００ １０００ １０００ １０００ １０００
２６ １０８０ ０１２０ ０１３５ ０１４６ ０１６７ ０１１８ ０１６２ ０１６５ ０１５８ ０１８６ ０１４４ ０１５０
２．３．５ 金银花样品相似度的分析 相关系数和向
量夹角余弦法是评价指纹图谱相似度的重要指标，
以２６个指纹峰相对峰面积为基本参数，对１０批金
银花药材进行了相似性评价，见表３。
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表３ １０个产地金银花的相似度
Ｎｏ．相关系数 向量夹角余弦 Ｎｏ．相关系数 向量夹角余弦
１ ０８５７ ０９０３ ６ ０９８８ ０９９１
２ ０９７９ ０９８５ ７ ０９７０ ０９７９
３ ０９９３ ０９９５ ８ ０９８５ ０９８９
４ ０７８４ ０８２０ ９ ０８８８ ０９２０
５ ０８１３ ０８６２ １０ ０７４８ ０８１９
２．３．６ 金银花药材系统聚类分析 运用“ＤＰＳ”软
件对其进行系统聚类分析，采用离差平方和法
（Ｗａｒｄ＇ｓＭｅｔｈｏｄ），利用欧氏距离（Ｅｕｃｌｉｄｅａｎ）作为样
品的测度，将１０批金银花样品进行聚类，１０个产地
金银花样品的聚类分析见图３。
图３ 金银花聚类分析图
３ 讨论
采用如下的几种条件对金银花的挥发油进行指
纹图谱条件分析。初温分别采用５０，７０，９０℃进样，
７０℃的色谱图明显优于另２个的色谱图；采用２０∶
１，１５∶１，１０∶１，５∶１分流比，１０∶１分流比的色谱图分
离效果较好；通过不同速率的程序升温比较，５℃·
ｍｉｎ－１的色谱图优于其他的色谱图，并且分析时间在
６０ｍｉｎ以内。从金银花样品２ｈ的图可看出，５７ｍｉｎ
前，样品中的有效成分已经完全得到分离。采用
ＯＶ－１７０１柱子和 ＳＥ－５４柱子分析，ＯＶ－１７０１柱
子分离的效果优于ＳＥ－５４柱子。
从相对峰面积可以看出，１０个产地的金银花挥
发油色谱图中虽然都出现了相应的色谱图，但是不
同产地金银花挥发油的相对峰面积还是有较大的差
异，说明各产地金银花挥发油化学组分受生境等因
素的影响，还是有相当的差异。对此需要用不同的
挥发油提取方法和分析技术深入探讨。
对金银花２号样品（山东费县）挥发油进行了
ＧＣＭＳ分析，按面积归一化法计算了相对含量，棕
榈酸是金银花的挥发油的主要成分，其他主要成分
有亚油酸、二十九烷、十四酸甲酯等。
对金银花样品相似度的分析表明，多数相关系
数达到显著水平，表明所测试样品间的挥发油组分
具有相似性，各成分间相对含量较为一致，但４，１０
样品相关系数未达到显著水平，这可能与样品自身
特性有关。
［参考文献］
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［２］ 贺 伟．金银花的化学成分及药理作用研究［Ｊ］．中医药导报，
２００７，４（２４）：８．
［３］ 董克满．金银花的化学成分及生物活性［Ｊ］．齐齐哈尔医学院
学报，２００３，２４（６）：６９２．
［４］ 苗爱东，孙殿甲．Ｅｘｃｅｌ２００２在中药指纹谱相似度计算中的应
用［Ｊ］．药学进展，２００３，２７（１）：５１．
ＳｔｕｄｙｏｆＧＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｏｆｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌｓｆｒｏｍｆｌｏｗｅｒｏｆ
Ｌｏｎｉｃｅｒａｊａｐｏｎｉｃａ
ＬＩＡＮＧＱｉａｎ１，ＷＡＮＧＪｕｎｒｕ２，３，ＬＩＡＮＧＺｏｎｇｓｕｏ１，３，ＹＡＮＧＤｏｎｇｆｅｎｇ１
（１．ＣｏｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＮｏｒｔｈｗｅｓｔＡｇｒｉｅｕｌｔｕｒａｌ＆ＦｏｒｅｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｌｉｎｇ７１２１００，Ｃｈｉｎａ；
２．ＣｏｌｅｇｅｏｆＳｃｉｅｎｃｅ，ＮｏｒｔｈｗｅｓｔＡｇｒｉｅｕｌｔｕｒａｌ＆ＦｏｒｅｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｌｉｎｇ７１２１００，Ｃｈｉｎａ；
３．ＳｈａａｎｘｉＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒｉｎＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅＦｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ＆ＮａｔｕｒａｌＰｒｏｄｕｃｔＬｉｂｒａｒｙ，Ｙａｎｇｌｉｎｇ７１２１００，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｔｕｄｙａｎｄｅｓｔａｂｌｉｓｈｔｈｅＧＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｏｆｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌｓｏｆ１０ｂａｔｃｈｅｓｔｈｅｆｌｏｗｅｒｏｆＬｏｎｉｃｅｒａｊａｐｏｎｉｃａ．
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ｔｏｇｒａｐｈｙ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅｓｉｍｉｌａｒｉｔｙｏｆ１０ｂａｔｃｈｅｓｏｆｔｈｅｆｌｏｗｅｒｏｆＬ．ｊａｐｏｎｉｃａｗａｓｈｉｇｈ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｗａｓｒｅｌｉａｂｌｅ，ａｎｄｃａｎ
ｂｅｕｓｅｄｔｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｏｆｔｈｅｆｌｏｗｅｒｏｆＬ．ｊａｐｏｎｉｃａ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｆｌｏｗｅｒｏｆＬｏｎｉｃｅｒａｊａｐｏｎｉｃａ；ｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌｓ；ＧＣｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ
［责任编辑 王亚君］
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