全 文 ： 表 u 黄连细胞膜透性 !脯氨酸与丙二醛含量的动态变化
株龄
取样
月份
电解质外渗率
rh
脯氨酸
rΛª# ªpt
丙二醛
rΛ°²¯# ªpt
一年生 v {1wu vu1y ts1x
x z1vx vz1x |1{
{ |1ty vt1u tu1u
tt {1uw wu1s tv1t
二年生 v {1tu wv1w z1y
x z1wz vw1x ts1x
{ |1x{ uw1z tt1y
tt z1w| vu1u |1w
三年生 v y1wv wz1t ts1z
x z1tw ws1w tu1v
{ {1xy vy1x ts1u
tt {1sw wu1z |1z
四年生 v z1uw vw1w tt1u
x {1xt vs1x {1|
{ |1wx uw1x |1x
tt {1tz vz1y tu1t
五年生 v {1ux ws1t tu1v
x {1sy vy1v tt1w
{ |1vv u|1x tu1x
tt {1ut vx1z ts1w
平也决定了膜质过氧化反应的程度 ∀ ≥’⁄能催化
超氧阴离子自由基的歧化反应而形成 ’u和 ‹u ’u o
从而减轻对植物的毒害 ∀ °’÷ 和 ≤„×则进一步分
解 ‹u ’u ∀ ≥’⁄是一种典型的诱导酶 o它的活性变化
在一定程度上反映了植株受胁迫的变化程度 ≈x  ∀
黄连是阴生植物 o在生长发育过程中 o要求光照条件
逐渐提高 o强光易对植株产生伤害 ∀试验结果表明 o
各年黄连在夏季高温高光强情况下 ≥’⁄活性最高 o
≤„×和 °’÷的含量也是较高的 o是黄连
适应性反应之一 ∀因此 o黄连抗高温逆境的能力与
保护酶活性的大小及其防御功能是相关联的 ∀
3q2 生物膜在植物逆境胁迫研究中占重要地位 o是
植物抵御逆境伤害的敏感部位 o许多研究证实生物
膜 k特别是质膜 l与植物抗性关系密切 ≈y  ∀在不同
生长阶段生物膜透性的状况可以直接反映出植株的
生理状况 o在植物受到高温伤害时 o细胞质膜透性会
增加 ∀电解质渗漏率测定结果表明 o随着气温升高
光照强度增强而逐渐升高 o其膜透性增加 o有利于对
高温高光照强度的抵御 ∀  ⁄„是膜质过氧化作用
的产物 o可以反映细胞膜在光温条件下的过氧化程
度 o但随着气温升高光照强度增强 o丙二醛 k ⁄„l
并没有达到最大值 o可能除光温条件外 o还有其他的
影响因素 ∀
≈参考文献  
≈t  邹 琦 q植物生理生化实验指导 ≈   q北京 }中国农业出版社 o
t||{}{vq
≈u  波钦诺克 q植物生物化学分析方法 ≈   q北京 }科学出版社 o
t|{t}tytq
≈v  张志良 q植物生理学实验指导 ≈   q北京 }高等教育出版社 o
t||y}utyq
≈w  李美茹 o刘鸿先 q钙对水稻秧苗的效应 ≈ q植物学报 ot||yov{
k|l}zvxq
≈x  罗广华 o王爱国 o郭俊颜 q几种外源因子对大豆幼苗 ≥’⁄活性
的影响 ≈ q植物生理学报 ot||sotykvl}uv|q
≈y  王建华 o刘鸿先 o徐 同 q超氧物歧化酶 k≥’⁄l在植物逆境和
衰老生理中的作用 ≈ q植物生理学通讯 ot|{|ot}uq
≈责任编辑 张宁宁  
≈收稿日期   ussy2sy2us
≈通讯作者   3 王四旺 oר¯}ksu|l{wzzvu|so∞2°¤¬¯}º¤±ª¶¬ºƒ
©°°∏q §¨∏q¦±
不同生长期女贞子中齐墩果酸和熊果酸的含量变化
戚志华 o王四旺 3 o王剑波 o谢艳华 o黎海妮 o涂剑波
k第四军医大学 药物研究所 o陕西 西安 ztssvul
女贞子是木犀科植物女贞 Λιγυστρυµ λυχιδυµ
„¬·q的果实 ∀在我国资源丰富 o华东 !华南 !西南及
华中各地均产 ∀具有滋补肝肾 !明目乌发之功
效 ≈t  ∀本实验旨在测定不同生长期女贞子中有效
成分齐墩果酸和熊果酸的含量 o对于指导该药的采
收时间及合理应用具有实际意义 ∀
1 仪器与试药
• ¤·¨µ¶yss高效液相色谱 ou||y二极管阵列检
测器 ozzux¬手动定量进样阀 o∞°³²º µ¨软件 ∀ „ª¬2
¯¨ ±·微量进样器 ∀ • uss⁄电子分析天平 k德国 ≥¤µ·²2
µ¬∏¶公司 l∀
#v{xt#
第 vu卷第 tx期
ussz年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ tx
„∏ª∏¶·o ussz
流动相所用甲醇 !乙腈均为色谱纯 k美国 ƒ¬¶«¨ µ
公司 lo超纯水 k美国  ¬¯¯¬³²µ¨纯水系统 l∀磷酸 !三
乙胺 k„• o西安化学试剂厂 l∀齐墩果酸对照品 k中
国药品生物制品检验所 o批号 ttszs|2ussvswlo熊
果酸对照品 k中国药品生物制品检验所 o批号
ttszwu2usswtxl∀女贞子药材采自西安市区第四军
医大学校园内 kussx年 { ∗ tu月每月采摘 t次 o共 x
批 lo经陕西省药品检验所鉴定为该药材系木犀科
植物女贞 Λ. λυχιδυµ的果实 ∀
2 方法与结果
2q1 色谱条件 色谱柱 ¬¦«µ²¶³«¨ µ≤t{ kw1y °° ≅
uxs °°ox Λ°lk江苏汉邦公司 l~流动相乙腈 2甲醇 2
水 2磷酸 2三乙胺 kxsΒvsΒusΒs1suΒs1swl~流速 t °
# °¬±pt ~检测波长 usx ±°~柱温室温 ~进样量 us
ˏ∀
2q2 对照品溶液的制备 精密称取齐墩果酸对照
品 tu1y{ °ª与熊果酸对照品 x1tu °ªo置 x °量瓶
中 o加甲醇制成每 t °分别含 s1xsz u °ª齐墩果
酸与 s1usw { °ª熊果酸的混合溶液 o摇匀 o即得对
照品贮备液 o备用 ∀
2q3 供试品溶液的制备 精密称取过 yx目筛的女
贞子干燥粉末 s1u ªo加甲醇 xs °o称重 o超声处理
vs °¬±o取出 o放冷 o再称重 o用甲醇补足减失的量 o
摇匀 o经 s1wx Λ°的微孔滤膜过滤 o即得供试品溶
液 ∀
2q4 线性关系考察 精密吸取 212项下对照品贮
备液 touovowox °o分别置于 ts °量瓶中 o甲醇
定容 o摇匀 o得 x个不同浓度的混合对照品溶液 ∀分
别精密吸取 us ˏo按上述色谱条件进样分析 ∀以
质量浓度 ΞkΛª# °pt l为横坐标 o峰面积 Ψ为纵坐
标绘制标准曲线并计算回归方程 ∀回归方程为 }齐
墩果酸 Ψ €t1uw ≅ tsw Ξ n t1s{ ≅ tsx oρ€ s1||| y~熊
果酸 Ψ € t1ut ≅ tsw Ξ n {1x| ≅ tsw oρ€ s1||| {∀结
果表明 }齐墩果酸在 t1st ∗ x1sz Λªo熊果酸在
s1wt ∗ u1sx Λª呈良好的线性关系 ∀
2q5 精密度试验 精密吸取同一混合对照品溶液
us ˏo按上述色谱条件 o重复进样 x次 o测得齐墩果
酸 !熊果酸峰面积的 • ≥⁄分别为 t1vh ou1uh ∀
2q6 稳定性试验 取供试品溶液 o分别于 sotouo
wo{ «精密吸取 us ˏ进样 o测得齐墩果酸 !熊果酸
峰面积的 • ≥⁄分别为 t1zh ou1vh ∀结果表明供试
品溶液在 { «内稳定性较好 ∀
2q7 重复性试验 精密称取同一样品 x份 o按供试
品溶液制备方法分别制备 x份供试品溶液 o测得齐
墩果酸 !熊果酸含量的 • ≥⁄分别为 s1ywh os1u|h ∀
2q8 加样回收率试验 取已知含量的供试品 y份 o
分别精密加入一定量齐墩果酸与熊果酸对照品 o照
供试品溶液的制备方法进行处理 o按上述测定方法
进行测定计算回收率 o结果齐墩果酸和熊果酸的平
均回收率和 • ≥⁄分别为 ||1yh otss1zh和 t1|h o
u1uh ∀
2q9 样品含量测定 取不同生长期干燥恒重的女
贞子样品 s1uo按 2q3项下方法制成供试品溶液 o在
上述色谱条件下 o每个样品重复测定 x次 o测量峰面
积并用外标法计算样品中齐墩果酸与熊果酸的含
量 o样品含量测定结果见表 to对照品和样品的高效
液相色谱图见图 t∀
表 t 西安产不同生长期女贞子中齐墩果酸和
熊果酸的质量分数 kcξ ? σ, ν € xl h
采收日期 齐墩果酸 熊果酸
s{2tv u1s{ ? s1sx t1ss ? s1sw
s|2tv u1tt ? s1sw s1|w ? s1sv
ts2tw u1yt ? s1su s1z| ? s1su
tt2ts u1st ? s1su s1yv ? s1sv
tu2tv t1vu ? s1st s1xx ? s1su
图 t 对照品 k„l与女贞子样品 k…l‹ °≤图
tq齐墩果酸 ~uq熊果酸
3 讨论
3q1 提取条件的选择 实验中以齐墩果酸和熊果
酸的含量作为考察指标 o筛选并确定最佳提取方法 o
比较不同提取方式 k超声提取 o加热回流 l!不同溶
剂 k甲醇 o乙腈 l!不同提取时间 kvsowxoys °¬±l对
含量的影响 ∀结果表明 o溶剂 !提取时间对实验结果
影响不大 o提取方式为主要影响因素 ∀故采用甲醇
#w{xt#
第 vu卷第 tx期
ussz年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ tx
„∏ª∏¶·o ussz
超声 vs °¬±提取样品 ∀
3q2 流动相的选择 齐墩果酸和熊果酸为五环三
萜类同分异构体 o在中性流动相中三萜酸可解离 o很
难分离 ∀参考文献 ≈uov 实验中曾采用的甲醇 2水
k|sΒtsl!乙腈 2水 k{sΒusl!乙腈 2水 2磷酸 kzxΒuxΒ
s1sul!甲醇 2s1xh醋酸铵溶液 k|sΒtsl!乙腈 2s1xh
冰醋酸 kzxΒuxl!乙腈 2甲醇 2水 2冰醋酸 2三乙胺 kxsΒ
vsΒusΒs1suΒs1swl等多种流动相 o分离效果均不理
想 ∀其中选择冰醋酸峰形较平 o故选用磷酸 ∀通过
加入适量磷酸和三乙胺调节流动相 ³‹o可抑制齐墩
果酸和熊果酸的解离 o改善色谱峰的峰形 ∀且 ³‹
对齐墩果酸和熊果酸的分离有较大影响 ∀经过反复
实验 o最终选择乙腈 2甲醇 2水 2磷酸 2三乙胺 kxsΒvsΒ
usΒs1suΒs1swl作为流动相 o在此条件下 o所得图谱
基线平稳 o齐墩果酸和熊果酸达到了较好的分离 ∀
3q3 其他色谱条件的选择 流速和柱温也是影响二
者分离的因素 o流速越大 !柱温越高分离效果越差 o故
实验选择 t °# °¬±pt的流速 !室温为最佳分离条件 ∀
3q4 通常认为女贞子在 tu月冬至前后果实紫黑色
且饱满即为成熟 o并大多在此时采收 ∀但本实验证
实 o女贞子中主要有效成分齐墩果酸和熊果酸的含
量随生长期不同而发生显著变化 ∀其中齐墩果酸在
ts月份含量最高 ~而熊果酸则在幼果中含量最高并
随生长延长其含量逐渐下降 ~tu月份二者含量均降
至最低 ∀由此可见 o女贞子不同生长期时齐墩果酸
和熊果酸的含量是不同的 o故在实际应用时应根据
不同需要适时采收和应用 ∀
≈参考文献  
≈t  中国药典 ≈≥ q一部 qussx}vtq
≈u  石心红 o郭江宁 o翟静华 q‹°≤法测定女贞子中齐墩果酸 !熊
果酸的含量 ≈ q海峡药学 oussxotzkwl}wtq
≈v  李 涛 o郝武常 o徐长根 o等 q‹°≤ 2∞≥⁄法测定不同产的女贞
子中齐墩果酸与熊果酸的含量 ≈ q中药材 oussx~u{kxl}v|tq
≈责任编辑 张宁宁  
≈收稿日期   ussy2tu2ts
≈基金项目   四川省青年基金项目 ksz±suy2sttl~四川省教
育厅教育教学改革项目 kussxl~西南民族大学教学改革项目 kussxl
≈通讯作者   3 刘圆 oר¯}ksu{l{xxuuuyv
• °2‹°≤测定不同产地藏药材红毛五加中绿原酸的含量
刘 圆 3 o孟庆艳 o孙卓然 o夏 青
k西南民族大学 少数民族药物研究所 o四川 成都 ytsswtl
红毛五加 Αχαντηοπαναξ γιραλδιι ‹¤µ°¶为五加科
植物 ∀分布于四川 !甘肃 !青海 !宁夏等地 o其中四川
小金县为该药材的主要产区 ∀茎皮入药 o有祛风除
湿 o强筋壮骨之功效 ≈t  ∀在研究中发现红毛五加含
有绿原酸成分 ~绿原酸具有较强的生物学活性 o在一
些制剂中已将其作为质量控制的标准之一 ≈u  ∀红
毛五加药材在民间特别是四川省阿坝地区较广泛使
用 o药典尚未收载红毛五加药材的质量标准 ∀本实
验拟采用 • °2‹°≤测定藏药红毛五加药材中绿原
酸的含量并比较不同产地红毛五加中绿原酸的含
量 o为该药材的质量评价提供参考依据 ∀
1 材料与试药
• ¤·¨µ¶uy|x高效液相色谱仪 o• ¤·¨µ¶u||y检测
器 o∞°³²º µ¨色谱工作站 ~ty个不同产地的红毛五
加药材样品采自四川省境内 o经刘圆副教授鉴定 ~绿
原酸 k批号 ttszxv2ussutuo中国药品生物制品检定
所 l~乙腈为色谱纯 ~水为二次重蒸水 ~其余试剂均
为分析纯 ∀
2 方法与结果
2q1 色谱条件 Žµ²¶°¤¶¬¯ ≤t{柱 kw1y °° ≅ uxs
°°ox Λ°lo柱温 vs ε ∀流动相为乙腈 2uϕ磷酸水
溶液 ktsΒ|slo检测波长 vuz ±°o流速 t °# °¬±pt ∀
绿原酸峰可以达到基线分离 o峰形对称 o分离度好 o
以绿原酸峰计 o理论塔板数不应低于 x sssk图 tl∀
2q2 对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品
适量 o加甲醇配置成 s1vy °ª# °pt的溶液 ∀
2q3 样品溶液的制备 称取红毛五加药材粉末
#x{xt#
第 vu卷第 tx期
ussz年 {月
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Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ tx
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