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Determination of β-eudesmol in rhizome of Atractylodes lancea by RP-HPLC

RP-HPLC测定茅苍术中β-桉叶醇的含量



全 文 :国药学杂志 ot||yovtkvl}twsq
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≈z  巢志茂 o何 波 o张 颖 o等 q栝楼种子中不皂化类脂的化学成
分研究 ≈ q中国药学杂志 ousssovxkttl}zvvq
≈{  阚连娣 o胡 全 o巢志茂 o等 q木鳖子脂肪油不皂化物质的化学
成分研究 ≈ q中国中药杂志 oussyovtktzl}twwtq
≈|  „®¬«¬¶¤×o Ž²®®¨ • q פ°∏µ¤ ×o ·¨¤¯q z2’¬²§¬«¼§µ²®¤µ²∏±¬§¬²¯
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶·∏§¼ ·«¨ ¦«¨ °¬¦¤¯ ¦²±¶·¬·∏¨ ±·¶²©∏±¶¤³²±¬©¬¤¥¯¨°¤·¨µ©µ²° ·«¨ ¶¨ §¨²¬¯²©Τριχηοσαντηεσηυπεηενσ2
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¨¯∏¦¬§¤·¨§q Χονχλυσιον: „ ¯¯ ²©·«¨ ¶¨ ¦²°³²∏±§¶º µ¨¨ ©²∏±§¬± ·«¬¶³¯¤±·©²µ·«¨ ©¬µ¶··¬° q¨
[ Κεψ ωορδσ] Τριχηοσαντηεσ ηυπεηενσισ~ ®¤µ²∏±¬§¬²¯~ tsΑ2¦∏¦∏µ¥¬·¤§¬¨±²¯~ ∏±¶¤³²±¬©¬¤¥¯¨°¤·¨µ~ ³¨ ±·¤¦¼¦¯¬¦·µ¬·¨µ³¨ ±¨
≈责任编辑 牛泽宇  
≈收稿日期   ussy2tt2tx
≈基金项目   国家中医药管理局中医药科技重大项目专项 ksu代 s{l~上海市重点学科建设项目 k≠svstl~上海市科委科研计划项目
ksv⁄t|xwyl
≈通讯作者   3 侴桂新 oר¯}ksutlxs{sxxuu2vsvuoƒ¤¬}ksutlxsuztzs{o∞2°¤¬¯}¦«²∏ª∏¬¬¬±ƒ «²·°¤¬¯q¦²°
• °2‹°≤测定茅苍术中 Β2桉叶醇的含量
陈炎明 tou o侴桂新 tou3 o王峥涛 tou
ktq上海中医药大学 中药研究所 教育部中药标准化重点实验室 o上海 ustusv~
uq上海中药标准化研究中心 o上海 ustusvl
≈摘要   目的 }采用 • °2‹ °≤测定茅苍术中 Β2桉叶醇的含量 o为茅苍术质量标准研究提供依据 ∀方法 }采用
反相高效液相色谱法 o色谱柱为 Œ± µ¨·¶¬¯ ’⁄≥2vkw1y °° ≅ uxs °°ox Λ°l~流动相乙腈 2水 ky{Βvul~流速 t1s °#
°¬±pt ~检测波长 uss ±°~柱温为 ux ε ∀结果 }测得 ts批茅苍术药材中 Β2桉叶醇含量为 s1{vv ∗ w1wyy °ª# ªpt oΒ2
桉叶醇为 s1sw{ ∗ t1uss Λªoρ€ s1||| |o平均回收率 ||1vh o• ≥⁄ t1wh kν € |l∀结论 }建立了高效液相色谱法测定
茅苍术中 Β2桉叶醇含量的方法 o该方法准确 o可靠 o可用于茅苍术药材的测定 ∀
≈关键词   茅苍术 ~ Β2桉叶醇 ~高效液相色谱法 ~含量测定
≈中图分类号   • u{wqt ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszlut2uuyx2sv
#xyuu#
第 vu卷第 ut期
ussz年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ ut
‘²√ °¨¥¨ µo ussz
茅苍术为菊科植物茅苍术 Ατραχτψλοδεσ λανχεα
׫∏±¥q⁄≤q的干燥根茎 o始载于 5神农本草经 6o具有
燥湿健脾 o祛风湿 o明目之功效 o主治湿困脾胃 o倦怠
嗜卧 o胸痞腹涨 o食欲不振 o呕吐泻泄 o痰饮 o湿肿 o表
证夹湿 o头身重痛 o痹证湿胜 o肢节酸痛重着 o痿蹩 o
夜盲 ≈t  ∀ Β2桉叶醇为茅苍术燥湿健脾功效的主要有
效成分之一 ≈u  o另外它还有利尿 !镇痛等作用 ≈v  ~文
献报道用气相色谱法对其进行测定 ≈w  o但茅苍术的
反相高效液相色谱法含量测定尚未报道 o本研究首
次采用反向高效液相色谱法对茅苍术中 Β2桉叶醇
含量进行测定 o并对其提取方法进行了考察优化 ∀
1 仪器与试药
‹° ttss系列高效液相色谱仪 k美国 „ª¬¯¨ ±·公
司 l~氯仿 !甲醇 !正己烷均为分析纯 o乙腈为色谱
纯 o水为超纯水 oΒ2桉叶醇 k上海中药标准化研究中
心提供 o经检测纯度达到 ||h l~收集广州 !河北 !上
海 !北京 !广西 !安徽等地和市售茅苍术样品共 ts
批 o均由上海中医药大学中药学吴立宏鉴定为菊科
苍术属植物茅苍术 Α. λανχεα∀
2 方法
2q1 色谱条件 Œ± µ¨·¶¬¯ ’⁄≥2v色谱柱 kw1y °° ≅
uxs °°ox Λ°lo流动相乙腈 2水 ky{Βvul~流速 t1s
°# °¬±pt o检测波长 uss ±°o柱温为 ux ε ∀高效
液相色谱图见图 to图 u∀
图 t 茅苍术样品 ‹ °≤图
¤qΒ2桉叶醇
图 u 对照品 Β2桉叶醇的 ‹ °≤图
¤qΒ2桉叶醇
2q2 供试品溶液的制备 取样品粉末约 t ªo精密
称定 o每批样品平行称量 v份 o置索氏提取器中 o加
入甲醇 ws °连续回流提取 v «o回收甲醇至干 k水
温控制在 xs ε lo用甲醇分 v次溶解 ktxotxots
°o超声处理 o每次 x °¬±lo准确转移到 xs °量瓶
中 o加甲醇定容 o摇匀 o过 s1wx Λ°微孔滤膜 o即得
供试品溶液 ∀
2q3 对照品溶液的制备 精密称取 Β2桉叶醇对照
品适量 o置于 ts °量瓶中 o加甲醇至刻度 o摇匀 o制
成含量为 s1uw °ª# °pt的对照品溶液 ∀
2q4 线性关系考察 精密吸取上述 s1uw °ª#
°pt的对照品溶液 touov °o分别置于 x °量瓶
中 o加甲醇至刻度 o得到质量浓度分别为 s1sw{o
s1s|yos1tww °ª# °pt的对照品溶液 ~精密吸取
s1sw{ °ª# °pt的对照品溶液 tov °o分别置于 x
°量瓶中 o加甲醇至刻度 o得到质量浓度分别为
s1ss| yos1su{ { °ª# °pt的对照品溶液 o分别精
密吸取上述 y个不同浓度的对照品溶液 x ˏo按
211色谱条件进行测定 o以峰面积 kΨl对照品质量
kΞl进行线性回归 o回归方程为 Ψ € t xtw1uΞ n
v1u|yoρ€s1||| |oΒ2桉叶醇在 s1sw{ ∗ t1uss Λª与
峰面积成良好的线性关系 ∀
2q5 精密度试验 准确吸取对照品溶液 ts ˏo在
同一条件下重复进样 y次 o测定 Β2桉叶醇的吸收峰
面积 o• ≥⁄为 s1xzh o表明精密度良好 ∀
2q6 稳定性试验 准确吸取同一供试品溶液 x
ˏo分别间隔 souowo{otyousouw «进行测定 o以 Β2
桉叶醇的吸收峰面积进行考察 o结果表明样品在 uw
«内稳定 ∀
2q7 重复性试验 取同一批号的茅苍术样品粉末 o
平行称定 y份 o分别按供试品溶液制备项下方法操
作制备供试品溶液 y份 o每份精密吸取 x ˏ按 2q1
项下色谱条件进样测定并计算 Β2桉叶醇的含量 o
• ≥⁄为 t1th o表明本法重复性较好 ∀
2q8 加样回收试验 取已知 Β2桉叶醇含量的茅苍
术药材粉末约 s1x ªo精密称定 |份 o每 v份加入相
同量的 Β2桉叶醇对照品 o按供试品溶液制备项下方
法操作 o测定 ∀ |次测定平均回收率为 ||1vh o• ≥⁄
为 t1wh o结果见表 t∀
2q9 样品测定 取收集的 ts批样品 o按供试品溶
液制备项下方法操作 o分别制成供试品溶液 ∀精密
吸取 Β2桉叶醇对照品溶液 x ˏo供试品溶液 x ˏo
在上述色谱条件下 o用外标法测定 o并计算各样品中
Β2桉叶醇的含量 ots批样品中 Β2桉叶醇的含量见表
u∀
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第 vu卷第 ut期
ussz年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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‘²√ °¨¥¨ µo ussz
表 t 加样回收试验结果 kν € |l
样品量

样品中含量
r°ª
加入量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
rh
平均值
rh
• ≥⁄
rh
s1xsz s t1u{{ t1uz| u1xyu ||1y
s1xs{ s t1u|s t1uz| u1xzv tss1v
s1xsv s t1uz{ t1uz| u1xut |z1u
s1xsx t t1u{v t1suv u1vt| tst1v
s1xsw u t1u{t t1suv u1vtv tss1{ ||1v t1w
s1xsz t t1u{{ t1suv u1vsv ||1v
s1xsy u t1u{y t1xvx u1z|w |{1u
s1xsv x t1uz| t1xvx u1z{t |z1|
s1xsv z t1uz| t1xvx u1{st ||1u
表 u 样品测定结果 kν € vl
收集地 产地 Β2桉叶醇 r°ª# ªpt • ≥⁄rh
广州 河北 u1xw t1u
河北 吉林 s1{vv t1u
上海 辽宁 s1|ty s1{
上海 天津 v1vu s1x
广西 江苏 s1|{z s1x
北京 内蒙 u1tt s1{
安徽 黑龙江 t1yz s1z
安徽 内蒙古 w1wz s1u
安徽 不详 t1v| t1t
上海 不详 t1vs s1u
3 结果与讨论
文献报道采用 • °2‹°≤测定了关苍术中苍术
内酯 ¶的含量 ≈x  o作者对茅苍术中苍术内酯 ¶的含
量进行了考察 o结果表明其平均含量为 s1ssxh o有
的样品尚检测不出 o故苍术内酯 ¶不适作为茅苍术
药材的含量测定指标 ~另外 o茅苍术中另一主要成分
苍术酮由于性质很不稳定 ≈w  o也不宜作为指标性成
分定量 ~本研究采用 • °2‹°≤测得 ts批茅苍术药
材中 Β2桉叶醇的含量在 s1{vv ∗ w1wyy °ª# ªpt o该
法重复性好 o准确度高 o故选择 Β2桉叶醇作为茅苍
术药材含量测定的指标成分 ∀
比较了 v种不同提取溶剂 k甲醇 !氯仿 !正己烷 lo
结果表明 o以甲醇提取率最高 ∀以甲醇为提取溶媒 o
比较了 v种不同提取方法 o超声波提取法 !热回流提
取法 !索氏提取法 o结果后者提取率明显高于前面两
种 o故采用索氏提取法提取 ∀采用索氏提取法 o分别
考察了 uovowox «时间内的提取率 o结果表明 vowox «
提取率无明显差异 o故提取时间选择 v «∀
由于 Β2桉叶醇的沸点较低 o在制备供试品溶液
回收溶媒时 o采用减压回收水温控制在 xs ε 以下为
宜 ≈w  ∀
≈参考文献  
≈t  国家中医药管理局中华本草编委会 q中华本草 ≈   q第 z册 q
上海 }上海科技出版社 ot|||qztuq
≈u  王金华 o薛宝云 o梁爱华 o等 q苍术有效成分 Β2桉叶醇对小鼠小
肠推进功能的影响 ≈ q中国药学杂志 oussuovzkwl}uyyq
≈v  周德文 o周立勇 q术类的药理和药效 ≈ q国外医学 # 植物药分
册 ot||yottkvl}tusq
≈w  傅梅红 o王金华 o张 颖 o等 q气相色谱法测定苍术中有效成分
Β2桉叶醇含量的方法学研究 ≈  q中国中药杂志 ousssoux
kttl}y{sq
≈x  李英姬 o朴惠善 q高效液相色谱法测定关苍术中苍术烯内酯 ¶
的含量 ≈ q延边大学医学学报 oussuouxkwl}uxuq
∆ ετερµ ινατιον οφ Β2ευδεσµ ολιν ρηιζοµ ε οφΑτραχτψλοδεσλανχεα βψ Ρ Π2ΗΠΛΧ
≤‹∞‘≠¤±2°¬±ªtou o ≤‹ ’˜ Š∏¬2¬¬±tou o • „‘Š «¨ ±ª2·¤²tou
(t. Κεψ Λαβορατορψ οφ Στανδαρδιζατιον οφ Χηινεσε Μεδιχινε, Μινιστρψ οφ Εδυχατιον, Ινστιτυτεσ οφ Χηινεσε ΜατεριαλΜεδιχα,
Σηανγηαι Υνιϖερσιτψ οφ ΤραδιτιοναλΧηινεσε Μεδιχινε, Σηανγηαι ustusv, Χηινα;
u. Σηανγηαι Ρ&∆ χεντρε φορΣτανδαρδιζατιον οφ Χηινεσε Μεδιχινε, Σηανγηαι ustusv, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ §¨ √¨¯²³¤ • °2‹ °≤ ° ·¨«²§©²µ§¨ ·¨µ°¬±¤·¬²± ²©Β2¨ ∏§¨ ¶°²¯ ¬± µ«¬½²°¨²©Ατραχτψλοδεσλανχεαo ¤±§
·²³µ²√¬§¨ √¤¯∏¥¯¨§¤·¤©²µ ∏´¤¯¬·¼ ¦²±·µ²¯ ²©Α. λανχεαq Μετηοδ : ׫¨ ¶¤°³¯ ¶¨º µ¨¨ ¶¨³¤µ¤·¨§ ²± ¤± Œ± µ¨·¶¬¯ ’⁄≥2vkw1y °° ≅ uxs
°°ox Λ°l ¦²¯∏°± º¬·«·«¨ °²¥¬¯¨ ³«¤¶¨ ²©¤¦¨·²±¬·µ¬¯¨ 2º¤·¨µky{Βvulq ƒ ²¯º µ¤·¨º¤¶t1s °# °¬±pt q ׫¨ §¨ ·¨¦·¬²± º¤√¨¯ ±¨ª·«º¤¶
¶¨·¤·uss ±°q ≤²¯∏°± ·¨°³¨ µ¤·∏µ¨ º¤¶ux ε q Ρ εσυλτ: ׫¨ ¦²±·¨±·¶²©Β2¨ ∏§¨ ¶°²¯ §¨ ·¨µ°¬±¤·¨§º¤¶s1{vv2w1wyy °ª# ªpt o׫¨ ¬¯±2
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²©Α. λανχεαq
[ Κεψ ωορδσ] Ατραχτψλοδεσ λανχεα~ Β2¨ ∏§¨ ¶°²¯~ • °2‹ °≤~ §¨ ·¨µ°¬±¤·¬²± ≈责任编辑 牛泽宇  
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中 国 中 药 杂 志
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