全 文 ：银杏外种皮不同提取部位灭螺活性的研究
吴向阳１，仰榴青１，陈 钧１，张联恒２，葛琴娟２，茆广华１
（１江苏大学，江苏 镇江 ２１２０１３；２镇江市疾病预防控制中心，江苏 镇江 ２１２００１）
［收稿日期］ ２００６０５１２
［基金项目］ 国家自然科学基金资助项目（２０６７２０４７）；江苏省
中医药局科研项目（Ｈ０５００６）；江苏大学自然科学创新预研基金项目
（０４ＣＸ０５）
［通讯作者］ 仰榴青，Ｔｅｌ：（０５１１）５０３８４５１，Ｅｍａｉｌ：ｙａｎｇｌｉｕｑｉｎｇ
＠ｕｊｓｅｄｕｃｎ
血吸虫病是严重危害人民身体健康和生命安全
的重大传染病，消灭钉螺是控制血吸虫病的主要措
施之一，氯硝柳胺是世界卫生组织（ＷＨＯ）唯一推荐
使用的化学灭螺药物，但其对鱼类等水生动物毒性
强［１３］，不能在鱼、蟹等养殖区使用，同时，在浸杀钉
螺时钉螺有上爬现象，从而导致灭螺效果的降
低［４］。因此ＷＨＯ推荐开发使用植物灭螺剂，但至
今还没有发掘出一种能推广使用的植物灭螺药。银
杏是世界上最古老的树种之一，其银杏叶、白果和外
种皮皆具有食用和药用价值，我国银杏资源丰富，约
占全世界的 ７０％以上，干银杏外种皮每年至少有
１２万吨。许义祥等［５］采用室内浸杀法测定了银杏
外种皮干粉剂的灭螺效果，结果表明银杏果皮液能
杀灭钉螺。本试验对银杏外种皮中不同提取部位的
灭螺活性进行研究，以期为植物灭螺新药的研究开
发提供基础，为银杏外种皮的利用提供一条新途径。
１ 材料与方法
１１ 材料与试剂
钉螺采自镇江市丹徒区江滩，为肋壳螺，系湖北
钉螺指名亚种Ｏｎｃｏｍｅｌａｎｉａｈｕｐｅｎｓｉｓｈｕｐｅｎｓｉｓ，将钉螺
洗净饲养１ｄ后，除去死钉螺，挑选活力强的钉螺用
于室内浸杀试验；银杏外种皮２００１年９月采集于江
苏大学校园（树龄３０～４０年，经江苏省镇江市药品
检验所陈黎主任药师鉴定），于太阳下暴晒至干，存
于密封容器中备用（含水率为１０９８％）；银杏外种
皮粗粉由晒干的银杏外种皮粉碎制得；２５％氯硝柳
胺悬浮剂（江苏省血吸虫病防治研究所和江苏省农
药研究所联合研制生产）；其余试剂均为分析纯。
１２ 仪器
ＬＣ－１５００高效液相色谱仪（日本 ＪＡＳＣＯ公
司）；Ｒ－２００型旋转薄膜蒸发器（德国Ｂüｃｈｉ公司）；
ＭｅｔｌｅｒＡＥ２４０型电子分析天平［梅特勒托利多仪器
（上海）有限公司］；ＺＦ－Ⅰ型三用紫外分析仪（上海
顾村电光仪器厂）。
１３ 方法
１３１ 银杏外种皮石油醚提取物、乙醇提取物和水
提取物的制备 银杏外种皮粗粉加入石油醚８５℃
回流提取，至提取液在２５４ｎｍ下无紫色荧光为止，
提取液合并后减压浓缩得石油醚提取物；经石油醚
脱脂后的银杏外种皮，加入乙醇回流提取数次，合并
提取液，减压浓缩得乙醇提取物；经乙醇提取过的外
种皮，再加入去离子水回流提取数次，提取液合并后
减压浓缩得到水提取物。
１３２ 银杏酸含量测定 按文献［６］ＨＰＬＣ分析方
法测定。
１３３ 灭螺药液配制 准确称取适量银杏外种皮
石油醚提取物，加入适量一定浓度的助溶剂溶解后，
加入适量去离子水配成一定浓度的母液，再量取适
量母液，加去离子水稀释，配制成各种浓度的石油醚
提取物药液（其中助溶剂质量分数低于００３％）；准
确称取适量乙醇提取物、水提取物、２５％氯硝柳胺悬
浮液，加入去离子水配制成母液，再稀释配制得各种
浓度的供试药液。
１３４ 室内浸杀钉螺试验［７９］ 将１００ｍＬ不同浓
度的上述供试药液，分别倒入１００ｍＬ烧杯中，每个
烧杯中再投入用塑料纱网包扎的１０只钉螺，设立去
离子水对照和氯硝柳胺对照。在（２５±２）℃的室温
下浸泡钉螺２４，４８，７２ｈ后，倒去药液，用去离子水
冲洗钉螺，洗净晾干，复苏３ｄ后用玻片压碎法观察
钉螺死亡情况。重复测定３次，得到死亡率。采用
加权概率单位法［１０］（ＳＰＳＳ１１５）计算ＬＣ５０，ＬＣ９０。在
１００ｍＬ去离子水的１００ｍＬ烧杯中，加入准确称量
的银杏外种皮粗粉，每个烧杯中投入１０只钉螺，同
前方法观察钉螺死亡情况，得到死亡率。
２ 结果与分析
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２１ 石油醚提取物的ＨＰＬＣ分析结果
经ＨＰＬＣ分析，银杏外种皮石油醚提取物含有
文献［６］报道的５种银杏酸（Ｃ１３∶０，Ｃ１５∶０，Ｃ１５∶１，Ｃ１７
∶１，Ｃ１７∶２），其总银杏酸含量为５６２％。
２２ 室内浸杀钉螺效果
去离子水对照的钉螺死亡率为０；助溶剂质量
浓度低于００４％时，其钉螺死亡率为０。图１～４为
银杏外种皮粗粉和３种提取物不同浓度时（按粗粉
和提取物的量计算）的杀螺效果，表１是石油醚提
取物、乙醇提取物和氯硝柳胺药液浸杀钉螺的 ＬＣ５０
和ＬＣ９０。可见，银杏外种皮粗粉水浸泡液有一定的
灭螺效果，质量分数为 ０２５％、浸杀 ７２ｈ时仍有
６０％的杀螺率；石油醚提取物的灭螺效果最好，２４ｈ
浸杀的 ＬＣ５０为０９１８ｍｇ·Ｌ
－１，ＬＣ９０为２５５５ｍｇ·
Ｌ－１；乙醇提取物的灭螺效果次之，２４ｈ浸杀的 ＬＣ５０
为２７２４３ｍｇ·Ｌ－１，ＬＣ９０为５４２３０ｍｇ·Ｌ
－１；水提
取物的灭螺效果差，１００ｍｇ·Ｌ－１水提取物７２ｈ时
的钉螺死亡率只有２６７％。
图１ 银杏外种皮粗粉的灭螺效果
图２ 石油醚提取物的灭螺效果
表１ 不同提取物和氯硝柳胺的灭螺效果比较
时间／ｈ
石油醚提取物 乙醇提取物 氯硝柳胺
ＬＣ５０ ＬＣ９０ ＬＣ５０ ＬＣ９０ ＬＣ５０ ＬＣ９０
２４ ０９１８ ２．５５５ ２７２４３ ５４２３０ ００６２２０１５２５
４８ ０６５５ １８４１ ２０９６０ ４０００２ ００４９９０１００２
７２ ０５６８ １４５５ １４５０１ ２６４０８ ００４３０００７３９
注：质量浓度单位为ｍｇ·Ｌ－１
图３ 乙醇提取物的灭螺效果
图４ 水提取物的灭螺效果
２３ 银杏外种皮中灭螺活性成分
由图１～４和表１浸杀钉螺效果表明，银杏外种
皮粗粉水浸泡液中具有杀螺活性成分，随浸泡时间
的延长活性成分不断溶出，杀螺率在７２ｈ时迅速提
高；石油醚提取物的 ＬＣ５０比乙醇提取物的 ＬＣ５０小得
多，石油醚提取物药液的灭螺效果大大高于乙醇提
取物，说明灭螺活性成分主要在石油醚提取物中。
水提取物的灭螺效果差，而石油醚提取物是外种皮
中的脂溶性组分，其主要成分是银杏酸（含量为
５６２％），因此推测银杏酸可能是银杏外种皮中主
要的灭螺活性成分，乙醇提取物中还含有灭螺活性
成分有待进一步研究。
３ 结论
银杏外种皮石油醚提取物的灭螺效果好，２４ｈ
浸杀的 ＬＣ５０为０９１８ｍｇ·Ｌ
－１，ＬＣ９０为２５５５ｍｇ·
Ｌ－１，银杏酸是否是银杏外种皮中主要的灭螺活性成
分值得进一步研究。
［参考文献］
［１］ 张 涛，姜庆五氯硝柳胺的毒理学研究［Ｊ］中国血吸虫病
防治杂志，２００２，１４（３）：２３４
［２］ 奚伟萍，黄轶昕强螺杀粉剂急性鱼毒实验观察［Ｊ］中国血
吸虫病防治杂志，２００４，１６（１）：６３
［３］ 戴建荣，吴 锋，高智慧，等Ｂ００２和氯硝柳胺及复方对鱼类
急性毒性的观察［Ｊ］实用寄生虫病杂志，１９９７，５（４）：１６８
［４］ 高智慧，洪青标，戴建荣，等氯硝柳胺与五氯酚钠复配后钉
螺上爬实验研究［Ｊ］实用寄生虫病杂志，１９９８，６（３）：１１３
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第３２卷第８期
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Ｖｏｌ．３２，Ｉｓｓｕｅ ８
Ａｐｒｉｌ，２００７
［５］ 许义祥，黄社来，陈雪峰，等银杏果皮杀灭钉螺的实验研究
［Ｊ］中国血吸虫病防治杂志，２００３，１５（１）：６１
［６］ 仰榴青，吴向阳，陈 钧高效液相色谱法测定银杏外种皮
中银杏酸的含量［Ｊ］分析化学，２００２，３０（８）：９０１
［７］ 戴建荣，张燕萍，姜玉骥，等杀螺剂室内筛选实验方法标准
化的研究 药液量对杀螺效果的影响［Ｊ］中国血吸虫病防治
杂志，２００２，１４（２）：１２２
［８］ 戴建荣，奚伟萍，梁幼生，等杀螺剂室内筛选实验方法标准
化的研究 钉螺数对杀螺效果的影响［Ｊ］中国血吸虫病防治
杂志，２００２，１４（４）：２６３
［９］ 戴建荣，梁幼生，张燕萍，等杀螺剂室内筛选实验方法标准
化的研究 实验钉螺饲养时间对杀螺效果的影响［Ｊ］中国血
吸虫病防治杂志，２００３，１５（５）：３４６
［１０］ 周永治，马志庆医药数理统计［Ｍ］２版北京：科学出版
社，２００４：８
［责任编辑 张宁宁］
ＧＣＭＳ分析八角茴香种子 ＣＯ２超临界流体萃取物中的脂肪酸成分
袁经权１，２，冯 洁３，缪剑华１，２，杨峻山４
（１．广西药用植物研究所，广西 南宁 ５３００２３；
２．中国医学科学院 药用植物研究所 广西分所，广西 南宁 ５３００２３；
３．北京大学 药学院 天然药物及仿生药物国家重点实验室，北京 １０００８３；
４．中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所，北京 １０００９４）
［收稿日期］ ２００６０３２８
［基金项目］ 国家科技攻关计划“西部开发”重大项目（２００５
ＢＡ９０１Ａ０９）
［通讯作者］ 缪剑华，Ｔｅｌ：（０７７１）５６０１１３９，Ｅｍａｉｌ：ｍｊｈ１９６２＠
ｖｉｐ．１６３．ｃｏｍ
八角茴香又称八角，为木兰科八角属植物Ｉｌｉｃｉ
ｕｍｖｅｒｕｍＨｏｏｋ．ｆ．的果实，其味辛、性温，有温阳散寒、
理气止痛功效，用于寒疝腹痛、肾虚腰痛等症［１］。长
期以来八角果实主要开发成分为挥发油类即八角茴
香油，其有芳香调味和健胃作用［２］。而八角还有另一
大类成分即脂类化合物尚未深入研究，ＫａｔａｏｋａＥ
等［３］报道了八角果实中总油脂占９４％，脂类成分主
要存在于种子中，刘莉玫等［４］也初步报道八角种子富
含棕榈酸、亚油酸、油酸和硬脂酸，共占油脂量的
３４６％，但除此之外的其他脂肪酸成分未见研究。本
研究利用ＣＯ２超临界流体萃取技术提取八角种子油
脂等成分，并对油脂进行甲酯衍生化，然后应用 ＧＣ
ＭＳ技术对其中所含的脂肪酸成分进行系统分析研
究，为进一步综合开发利用八角提供科学依据。
１ 仪器与材料
ＨＬ－（２＋１）Ｌ／５０ＭＰａ－ⅡＢ超临界 ＣＯ２流体
萃取仪（杭州华黎公司），ＴｒａｃｅＧＣＭＳ气质联用仪
（美国Ｆｉｎｎｉｇａｎ公司）；乙醚、苯、甲醇和氢氧化钠等
均为北京化工厂分析纯试剂。
八角果实２００５年１０月采于广西防城港，经广
西药用植物研究所资源室余丽莹副研究员鉴定为木
兰科植物八角茴香 Ｉ．ｖｅｒｕｍ的果实，标本存放于该
所标本室。
２ 方法
２．１ 油脂提取和甲酯衍生化试验
采用ＳＦＥＣＯ２技术萃取八角种子油脂等成分，
萃取釜压力 ２０ＭＰａ，温度 ４０℃；分离釜 １压力 ７
ＭＰａ，温度３５℃；分离釜２压力５ＭＰａ，温度３５℃。
萃取时间９０ｍｉｎ，流速２０Ｌ·ｈ－１。称取干燥种子
１８０ｇ，粉碎，过１０目筛，置萃取釜中萃取，从分离釜
１和分离釜２收集油脂等萃取物，共１６９０ｇ，得率
９４％。取少量萃取物于小瓶中，加入２ｍＬ的乙醚
苯（１∶１）混合溶剂使之溶解后加入０４ｍｏｌ·Ｌ－１氢
氧化钠甲醇溶液摇匀，于室温下放置，３０ｍｉｎ后，加
入蒸馏水，待分层后取上清液做色谱分析试样。
２．２ 油脂的ＧＣＭＳ分析
２．２．１ ＧＣＭＳ条件 ＤＢ－５石英毛细管色谱柱
（０２５ｍｍ ×３０ｍ，０２５μｍ）；进样口温度２６０℃；
柱温：程序升温８０℃～１５０℃（８℃·ｍｉｎ－１）～２１０
℃（５℃·ｍｉｎ－１，保持 ３ｍｉｎ）～２３０℃（４℃·
ｍｉｎ－１）～２５０℃（５℃·ｍｉｎ－１，保持５ｍｉｎ）；载气为
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第３２卷第８期
２００７年４月
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Ａｐｒｉｌ，２００７