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Study on secondary metabolic organ of echinacoside in herbs of Cistanche tubulosa

管花肉苁蓉松果菊苷次生代谢部位研究



全 文 :我国中草药栽培仍然沿用农作物的栽培方法 o
缺乏系统的栽培理论基础 o不能按照生物学特性如
生育期 !营养特性 !有效成分累积动态规律 !需水需
肥规律等进行规范化栽培 o结果造成中药材产量低 o
有效成分不稳定 !农药及重金属残留超标 o不适宜于
企业和出口需要标准 o导致经济效益较差 ∀本研究
通过不同配比施肥条件下板蓝根的产量与多糖含量
的影响进行研究 o从而为板蓝根的规范化栽培理论
提供研究基础 ∀
≈参考文献  
≈t  中国药典 ≈≥ q一部 qussx}twuq
≈u  李戈莲 o高义富 o江成君 q板蓝根的药用价值及 Š„°示范栽培
技术 ≈ q陕西农业科学 ousswoktl}ysq
≈v  许益民 o陆平成 o王永珍 q板蓝根多糖促进免疫功能的实验研
究 ≈ q中西医结合杂志 ot||tottkyl}vxzq
≈w  吴慧平 o陈建伟 o李 祥 o等 q板蓝根多糖对 ‘ƒ2ϑ…活性的作用
≈ q药物生物技术 oussto{kxl}uzyq
≈x  邓慧敏 o苏碧茄 o程艳阳 q正交试验法优选板蓝根的提取工艺
≈ q中药研究与信息 ousstovkzl}tzq
≈y  刘达民 o程 岩 q研究生应用数学丛书之应用统计 ≈  q北京 }
化学工业出版社 oussw}txvq
≈z  李好枝 o吕永俊 o白 钢 o等 q松果有效成分的研究 ŒŒŒ油松果
多糖的含量测定 ≈ q中草药 ot||wouxkwl}t{xq
Εφφεχτσ οφ φορµ υλα φερτιλιζατιον το ψιελδ ανδ χοντεντ ον
πολψσαχχηαριδε οφ Ισατισ ινδιγοτιχα
• „‘Š Ž¤±ª2¦¤¬o ׄ‘Š ÷¬¤²2´ ¬±ªo • ˜ ¬¤±o ≥˜‘¬2³¬±ª
(Χολλεγε οφ Ηορτιχυλτυρε, Νανϕινγ ΑγριχυλτυραλΥνιϖερσιτψ, Νανϕινγ utss|x, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶¨¯¨ ¦··«¨ ²³·¬°∏° ©²µ°∏¯¤©¨µ·¬¯¬½¤·¬²± ²©Ισατισινδιγοτιχα·«µ²∏ª«¤±¤¯¼½¬±ª·«¨ ¼¬¨ §¯¤±§¦²±·¨±·¶²©
³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ²©• ¤§¬¬Œ¶¤·¬¶©²µ§¬©©¨µ¨±··µ¨¤·° ±¨·¶q Μετηοδ : „± ²µ·«²ª²±¤¯ ¬¨³¨ µ¬° ±¨·§¨ ¶¬ª± ²± ·«¨ ¥¤¶¬¶²©·«µ¨¨©¤¦·²µ¶¤±§©²∏µ
¯¨ √¨¯¶º¤¶¤³³¯¬¨§©²µ¶·∏§¼¬±ª·«¨ ©¨©¨¦·²©©²µ°∏¯¤©¨µ·¬¯¬½¤·¬²± ²± ¼¬¨ §¯1 ׫¨ ¦²±·¨±·¶²©³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ¶º µ¨¨ §¨ ·¨µ°¬± §¨º¬·«³«¨ ±²¯2
º¬·µ¬²¯¬¦¦²¯²µ¬° ·¨µ¼q Ρ εσυλτ: ׫¨ ²³·¬°∏° ©²µ°∏¯¤ ©¨µ·¬¯¬½¤·¬²± ²©• ¤§¬¬ Œ¶¤·¬¶º¤¶¦¤µ¥¤°¬§¨ {y|1s ®ª# «° pu o ¶∏³¨ µ³«²¶³«¤·¨ t
wu{1y ®ª# «° pu ¤±§³²·¤¶¶¬∏° ¶∏¯©¤·¨s ®ª# «° pu q Χονχλυσιον: ≥∏³¨ µ³«²¶³«¤·¨ ¦¤± ²¥¶¨µ√¤¥¯¼ ¬±©¯∏¨ ±¦¨ ·«¨ ¼¬¨ §¯¶²©• ¤§¬¬ Œ±§¬2
·¬¶q º«¬¯¨ ¦¤µ¥¤°¬§¨ ¬±©¯∏¨ ±¦¨ ·«¨ ¦²±·¨±·¶²©³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ²©• ¤§¬¬Œ±§¬·¬¶q
[ Κεψ ωορδσ] Ισατισ ινδιγοτιχα~ ²µ·«²ª²±¤¯ ¬¨³¨ µ¬° ±¨·~ ¼¬¨ §¯~ ³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ¦²±·¨±·~ ¬¨·µ¤¦·¬²± ¤±§¦²±·¨±·§¨ ·¨µ°¬±¤·¬²±¶
≈责任编辑 张宁宁  
≈收稿日期   ussz2sw2s{
≈基金项目   河北省自然科学基金项目 k≤usszsssy|ul
≈通讯作者   3 杨太新 oר¯}ksvtslvtuvxtyo∞2°¤¬¯}¼¤±ª·¤¬¬¬±ƒ tuyq¦²°
管花肉苁蓉松果菊苷次生代谢部位研究
杨太新 tou3 o张喜焕 t o蔡景竹 u
ktq河北工程大学 农学院 o河北 邯郸 sxysut~ uq河北农业大学 农学院 o河北 保定 sztsstl
≈摘要   目的 }通过对管花肉苁蓉寄生生长和柽柳 2管花肉苁蓉不同部位松果菊苷含量的研究 o为明确管花肉
苁蓉松果菊苷的次生代谢部位及调控提供理论依据 ∀方法 }高效液相系统分析了指标性成分松果菊苷含量 o比较
分析了管花肉苁蓉干物质积累量 !松果菊苷积累量和寄生柽柳根粗的相关关系 ∀结果 }随着管花肉苁蓉干物质积
累量的增加 o植株内的松果菊苷积累量显著增加 o两者与寄生的柽柳根粗呈极显著正相关关系 ∀吸器韧皮部的松
#t|xu#
第 vu卷第 uw期
ussz年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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⁄ ¦¨¨°¥¨ µo ussz
果菊苷质量分数为 tx1xvh o高于吸器木质部 !管花肉苁蓉植株及其他部位的松果菊苷含量 ∀结论 }吸器韧皮部可
能是管花肉苁蓉松果菊苷的次生代谢部位 ∀
≈关键词   管花肉苁蓉 ~柽柳 ~松果菊苷 ~次生代谢
≈中图分类号   ≥ xyz ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukusszluw2ux|t2sw
管花肉苁蓉 Χιστανχηε τυβυλοσα k≥¦«¨ ±®l • ¬ª«·
为列当科肉苁蓉属的全寄生植物 o其自身不能进行
光合作用 o生长发育所需的碳水化合物全部来源于
寄主柽柳 ∀管花肉苁蓉中碳的存在形式与柽柳不
同 o指标性成分松果菊苷是柽柳光合产物经次生代
谢后形成的 o国内外对其次生代谢发生的部位未见
报道 ∀已有研究指出 }寄主植物体内的碳 !氮化合物
及有机酸等转入寄生植物体内之前 o在吸器中进行
了活跃的代谢加工和转化 o或改变有机化合物各组
分的比例 o或产生一些寄主植物体内没有的有机化
合物 ≈tou  ∀另外 o寄生植物体内也是一个很重要的
有机化合物转化或合成的场所 o≥¬°¬¨µ等推测了寄
生植物体内从磷酸丙糖到甘露醇的合成途径 ≈v  o另
有学者证明了这一合成途径的存在 ≈w  ∀笔者在对
管花肉苁蓉种子萌发 !寄生过程 !寄生环境 !栽培技
术和管花肉苁蓉干物质积累等研究的基础上 ≈x2|  o对
管花肉苁蓉寄生生长与中国柽柳根粗变化的相关关
系 o柽柳 2管花肉苁蓉不同部位的松果菊苷含量进行
了测定分析 o为明确管花肉苁蓉松果菊苷的次生代
谢部位提供理论依据 o对管花肉苁蓉人工栽培和次
生代谢调控具有重要的指导作用 ∀
1 材料和方法
1q1 材料
田间试验在河北省吴桥实验站进行 o管花肉苁
蓉寄主为中国柽柳 Ταµ αριξ χηινενσισ²∏µqk中国农
业大学郭玉海教授鉴定 lov ∗ w年株龄 ∀管花肉苁
蓉为一年生植株 o松果菊苷含量测定在北京大学中
医药现代研究中心进行 o‹°ttss高效液相系统
k„ª¬¯¨ ±·ttsso∂ • ⁄ p Štvtw„检测器 lo松果菊苷
对照品为实验室自制 o纯度 |{h以上 ∀
1q2 方法
1q2q1 管花肉苁蓉寄生生长与柽柳根粗测定 v ∗
tt月每月调查 t次管花肉苁蓉生长情况和柽柳根
粗变化 o随机取样 tu株管花肉苁蓉 o重复 v次 ∀测
定管花肉苁蓉单株干物质积累量和松果菊苷积累
量 o同时测定管花肉苁蓉寄生的柽柳根粗 o未寄生管
花肉苁蓉的柽柳根粗为对照 o结果均取平均值 ∀
1q2q2 不同部位松果菊苷含量分析 取柽柳 2管花
肉苁蓉的不同部位 o按照柽柳叶 o柽柳枝 o柽柳根 t
k与木质化吸器相连的根段 o取样长度 t1s ¦°l的木
质部 !韧皮部 o柽柳根 uk根 t以外与柽柳相连的根
段 lo木质化吸器 k管花肉苁蓉与柽柳根连接处 o取
样长度 s1x ¦°l的木质部 !韧皮部 o管花肉苁蓉植株
进行分样 o样品烘干后称重 o测定其松果菊苷含量 ∀
同时以未接种管花肉苁蓉的柽柳为对照 o测定其叶 !
枝和根干燥样品的松果菊苷含量 ∀随机取样 tu株 o
重复 v次 ∀
1q2q3 色谱条件 色谱柱 }• ¤·¨µ¶≥¼°° ·¨µ¼ ≤t{
kw1y °° ≅ uxs °°ox Λ°l~流动相甲醇 2s1th甲酸
溶液 ku{1xΒzt1xl~检测波长为 vvt ±°o流速 t °
# °¬±pt ∀
1q2q4 对照品溶液制备及标准曲线绘制 精密称
取松果菊苷对照品适量 o置棕色量瓶中 o用 xsh甲
醇制成每 t °含 s1u °ª的溶液 o即得对照品溶液 ∀
精密吸取对照品溶液 uowoyo{ots ˏ注入液相色谱
仪 o用上述色谱条件测定 o重复 v次 o取峰面积平均
值 o得到标准曲线回归方程 Ψ € t t{x1yΞ p{1xsu yo
ρ€s1||| |∀
1q2q5 精密度试验 精密吸取对照品溶液 o重复进
样 x次 o测定峰面积 o松果菊苷 • ≥⁄ t1|h ∀
1q2q6 重复性试验 取同一批样品 x份 o按供试品
溶液制备方法制备试品 o测定含量 o松果菊苷 • ≥⁄
u1vh ∀
1q2q7 回收率试验 取已知含量样品 x份 o分别精
密加入相应的对照品溶液 o按上述色谱条件测定 ∀
计算松果菊苷的回收率为 ||1uh o• ≥⁄ t1zh ∀
1q2q8 供试品溶液制备 将 1q2q1所述烘干后的
管花肉苁蓉样品粉碎 o粉末过 {s目筛 o取 t ªo精密
称定 o置 tss °棕色量瓶中 o精密加入 xsh甲醇 xs
°o密塞 o称定重量 o浸泡 vs °¬±o超声处理 k功率
uvs • o频率 vx Ž‹½lxs °¬±kxs ε 以下 l取出 o放
冷 o再称重 o用 xsh甲醇补足损失的量 o摇匀 o过滤 o
滤液再以微孔滤膜 ks1wx Λ°l滤出 o滤液置棕色量
瓶中 o即得 ∀
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第 vu卷第 uw期
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中 国 中 药 杂 志
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1q2q9 管花肉苁蓉松果菊苷含量测定 松果菊苷
含量测定按照 ussx年版药典方法 ≈ts  ∀吸取对照品
溶液 ts ˏ与供试品溶液 x ∗ ts ˏo注入液相色谱
仪 o测定 o即得 k图 toul∀
图 t 松果菊苷对照品色谱图
图 u 试验样品色谱图
2 结果与分析
2q1 管花肉苁蓉生长与柽柳根粗变化的相关分析
由表 t可见 o随着管花肉苁蓉单株干物质积累
量的增加 o植株内的松果菊苷积累量极显著增加
kΠ s1stl∀管花肉苁蓉松果菊苷含量以 w月时最
高 o之后迅速下降 o松果菊苷含量与干物质积累量的
变化呈极显著负相关关系 oρ€ p s1|wu w∀生长 t
年的管花肉苁蓉单株干物质积累量和松果菊苷积累
量分别为 tv{1x{otv1xv ªo而松果菊苷降为 |1zyh ∀
这可能与管花肉苁蓉干物质量迅速增加对松果菊苷
的稀释作用和温度变化对次生代谢转化为松果菊苷
的影响有关 ∀
表 t 管花肉苁蓉生长与寄生柽柳根粗变化
月份
干物质积
累量
rªr株
松果菊苷
rh
松果菊苷
积累量
rªr株
寄生肉苁
蓉根粗
r°°
未寄生肉
苁蓉根粗
r°°
v s1vw ut1u| s1sz s1u|{ s1vsy
w s1zx vs1x| s1uv s1vvu s1vtw
x t1|w u{1xt s1xx s1vzy s1vvu
y y1uu uz1x{ t1zu s1wvw s1vw{
z uw1zs us1tu w1|z s1w|y s1vyw
{ x|1|u tw1uv {1xv s1yt{ s1v|u
| tsw1tz tt1u{ tt1zx s1{|u s1wxw
ts tvs1yu ts1sx tv1tu t1swy s1w{u
tt tv{1x{ |1zy tv1xv t1txu s1w|y
另由表 t可见 o随着管花肉苁蓉干物质积累量
的增加 o其寄生的柽柳根显著增粗 o从 v月时的单根
粗 s1u|{ °°增加到 tt月时的单根粗 t1txu °°o增
加了 u1{z倍 ~而未接种管花肉苁蓉的柽柳根 o从 v
月时的单根粗 s1vsy °°增加到 tt月时的 s1wz{
°°o仅增加了 s1yu倍 ∀进一步分析表明 }寄生柽柳
根粗与管花肉苁蓉干物质积累量和松果菊苷积累量
均呈极显著正相关关系 oρ干物质 € s1||u xoρ松果菊苷 €
s1|zt s∀以上结果表明 o寄生柽柳根是柽柳和管花
肉苁蓉物质运输的通道 o随着管花肉苁蓉的生长发
育 o需要柽柳根运输更多的光合产物供给管花肉苁
蓉植株 o从而使寄生柽柳根显著增粗 ∀
2q2 柽柳 2管花肉苁蓉不同部位松果菊苷含量分析
由表 u可见 o未接种管花肉苁蓉的中国柽柳 o其
叶片 !分枝和根中均未检测出松果菊苷成分 ∀柽柳 2
管花肉苁蓉复合体中 o不同部位和组织中的松果菊
苷含量差异极显著 kΠ  s1stl∀吸器韧皮部的松果
菊苷质量分数最高 o为 tx1xvh o高于其木质部 y1x{
个百分点 o且比管花肉苁蓉植株的松果菊苷含量高
u1|{个百分点 ∀在与吸器相连的柽柳根 t中也发
现松果菊苷成分 o木质部和韧皮部中的质量分数分
别为 s1wyh和 s1wzh o两者的松果菊苷含量相近但
显著低于吸器韧皮部 !木质部和管花肉苁蓉植株 ∀
远离吸器的柽柳根 u中的松果菊苷含量甚微 o为
s1szh ∀以上表明 o吸器韧皮部可能是管花肉苁蓉
松果菊苷的次生代谢部位 o这一问题有待于通过相
关酶活性或基因表达进一步验证 ∀柽柳根中也发现
松果菊苷成分 o且与吸器距离愈远松果菊苷含量愈
低 o这可能是物质渗透作用或逆向运输的结果 ∀
3 小结与讨论
管花肉苁蓉是全寄生植物 o其寄生的柽柳根是
柽柳光合产物向管花肉苁蓉物质运输的通道 ∀试验
结果表明 }随着管花肉苁蓉干物质积累量的增加 o植
株内的松果菊苷积累量显著增加 o寄生管花肉苁蓉
的柽柳根作为物质运输的通道也随之显著增粗 ov
月到 tt月单根粗增加了 u1{z倍 o而未接种管花肉
苁蓉的柽柳根仅增加了 s1yu倍 o寄生柽柳根粗变化
与管花肉苁蓉干物质积累量和松果菊苷积累量均呈
极显著正相关 ∀
吸器是寄生植物的专性器官 o它类似植物根的
组织 o能穿透寄主植物的表皮 !皮层而到达维管束 o
并与寄主植物维管束相通 o是寄生植物从寄主植物
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∂ ²¯qvuo Œ¶¶∏¨ uw
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表 u 中国柽柳和管花肉苁蓉不同部位松果菊苷质量分数 h
项目 柽柳叶 柽柳枝 柽柳根 u
柽柳根 t
木质部 韧皮部
吸器
木质部 韧皮部
植株
柽柳 2管花肉苁蓉 s1ss s1ss s1sz s1wy s1wz {1|x tx1xv tu1xx
柽柳 k未接种肉苁蓉 l s1ss s1ss s1ss s1ss s1ss
体内吸取营养物质的通道 ≈tt  ∀管花肉苁蓉与柽柳
的寄生关系建立后 o随着管花肉苁蓉的生长 o吸器逐
渐木质化 o前人对管花肉苁蓉不同生长时期吸器的
界定未见报道 ∀本试验取中国柽柳与一年生管花肉
苁蓉连接部位 s1x ¦°作为吸器 o探讨了柽柳与管花
肉苁蓉复合体不同部位的松果菊苷含量 ∀结果表
明 }不同部位和组织中的松果菊苷含量差异显著 o吸
器韧皮部的松果菊苷含量最高 ∀由此推断吸器韧皮
部可能是管花肉苁蓉指标性成分松果菊苷的次生代
谢部位 o对管花肉苁蓉人工栽培中松果菊苷次生代
谢调控具有重要的指导作用 ∀柽柳根中的松果菊苷
含量甚微 o可能是物质渗透作用或逆向运输的结果 o
这些问题还有待于进一步探讨 ∀
≈参考文献  
≈t  ≥¦«∏¯½¨ ∞ ⁄o ×∏µ± µ¨‘≤o Š ¤¯·½¨ ¯Šq ≤¤µ¥²± º¤·¨µ¤±§±∏·µ¬¨±·
µ¨ ¤¯·¬²±¶²©·º²°¬¶·¯¨·²¨ ¶¤±§·«¨ ¬µ«²¶·¶o ¤«¼³²·«¨ ¶¬¶≈ q ° ¤¯±·
≤¨¯¯∞±√¬µ²±o t|{woz}u|vq
≈u  × ±¨±¤®²± Ž˜o °¤·¨ ≥q ÷ ¼¯ °¨ ©¯∏¬¨ ¶²©©¬¬¨ §‘·«µ²∏ª« ±²§2
∏¯ ¶¨²©·«¨ ¯¨ ª∏°¨Αχαχια λιττορεα ¤±§ «¤∏¶·²µ¬¤ ²©¤± ¤¶¶²¦¬¤·¨§
‘2§¨ ³¨ ±§¨ ±·µ²²·«¨ °¬³¤µ¤¶¬·¨ Ολαξ πηψλλαντηι≈  q  ∞¬³¨ µ¬°
…²·o t||zow{kvtsl}tsytq
≈v  ≥¬°¬¨µ°o • ±¨¤∏§¬± ≥o ƒ µ¨„q ≤«¤µ¤¦·¨µ¬¶·¬¦¶²©·«¨ °¤±±¬·²¯
³¤·«º¤¼ ¬± ¤ µ²²·«¨ °¬³¤µ¤¶¬·¬¦¶³¨ ¦¬¨¶o Τηεσιυµ ηυµ ιλε ∂ ¤«¯
k≥¤±·¤¯¤¦¨¤¨ l≈ q ° ¤¯±·°«¼¶¬²¯o t||wotwv}vvq
≈w  ‹¤µ¯²©©‹ o • ª¨°¤±± Žq ∞√¬§¨ ±¦¨ ©²µ¤°¤±±¬·²¯ ¦¼¦¯¨¬± Ορο2
βανχηε ραµ οσε ¤±§ Οροβανχηε χρενατα ≈  q  ° ¤¯±·°«¼¶¬²¯o
t||votwt}xtvq
≈x  王华磊 o杨太新 o杨重军 o等 q管花肉苁蓉种子萌发和寄生过
程的形态学研究 ≈ q中国中药杂志 oussxovskuvl}t{tuq
≈y  杨太新 o王华磊 o郭玉海 o等 q管花肉苁蓉田间接种技术研究
≈ q中国中药杂志 oussxovskzl}w{{q
≈z  杨太新 o王华磊 o郭玉海 o等 q华北平原管花肉苁蓉寄生环境
研究 ≈ q中国中药杂志 oussxovsktzl}tv{sq
≈{  马东明 o杨太新 o郭玉海 o等 q管花肉苁蓉与柽柳试管苗离体
接种的研究 ≈ q植物学通报 oussxouukyl}y{zq
≈|  杨太新 o王华磊 o郭玉海 o等 q华北平原管花肉苁蓉干物质积
累和松果菊苷含量动态变化研究 ≈ q中国中药杂志 oussyo
vtktyl}tvtzq
≈ts  中国药典 ≈≥ q一部 qussx}|sq
≈tt  ∞¶·¤¥µ²²® ∞  o ≠ ²§¨ µŒq ° ¤¯±·2³¯¤±·¦²°°∏±¬¦¤·¬²±¶} µ«¬½²2
¶³«¨ µ¨ ¶¬ª±¤¯¬±ª ¥¨ ·º¨¨ ± ³¤µ¤¶¬·¬¦¤±ª¬²¶³¨ µ°¶¤±§ ·«¨ ¬µ«²¶·¶
≈ q ° ¤¯±·°«¼¶¬²¯o t||{otty}tq
Στυδψ ον σεχονδαρψ µ εταβολιχ οργαν οφ εχηιναχοσιδε ιν ηερβσ οφ
Χιστανχηε τυβυλοσα
≠ „‘Š פ¬2¬¬±tou o ‹ „‘Š ÷¬2«∏¤±t o ≤„Œ¬±ª2½«∏u
(t. Αγρονοµ ψ Χολλεγε, Ηεβει Υνιϖερσιτψ οφ Ενγινεερινγ , Ηανδαν sxysut, Χηινα;
u. Αγρονοµ ψ Χολλεγε, ΑγριχυλτυραλΥνιϖερσιτψ οφ Ηεβει, Βαοδινγ sztsst, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: Œ·¦²∏¯§ª¬√¨¶²°¨·«¨ ²µ¼ ¶∏³³²µ·²©¦²±©¬µ°¬±ª·«¨ ¶¨¦²±§¤µ¼ ° ·¨¤¥²¯¬¶° ²µª¤± ¤±§µ¨ª∏¯¤·¬²± ²© ¦¨«¬2
±¤¦²¶¬§¨ ¬± Χιστανχηε τυβυλοσα ¥¼ ¶¨¤µ¦«¬±ª³¤µ¤¶¬·¬¦ªµ²º·« ²©Χ. τυβυλοσα ¤±§ ¦¨«¬±¤¦²¶¬§¨ √¤µ¬¤·¬²± ¬± §¬©©¨µ¨±·²µª¤±¶²©«²¶·¤±§
³¤µ¤¶¬·¨q Μετηοδ : ׫¨ ¦¨«¬±¤¦²¶¬§¨ ¦²±·¨±·º¤¶¤±¤¯¼½¨ §¥¼ ‹°≤q ׫¨ µ¨ ¤¯·¬²±¶«¬³ ¥¨ ·º¨¨ ± §µ¼ °¤·¨µ¤¦¦∏°∏¯¤·¬²± ¤±§ ¦¨«¬±¤¦²2
¶¬§¨ ¤¦¦∏°∏¯¤·¬²± ²©Χ. τυβυλοσα ¤¶·«¨ º¨¯¯¤¶µ²²·§¬¤° ·¨¨µ²©«²¶·º µ¨¨ ¦²°³¤µ¤·¬√¨¯¼ ¤±¤¯¼½¨ §q Ρ εσυλτ: • ¬·«·«¨ ¬±¦µ¨¤¶¨ ²©§µ¼
°¤·¨µ¤¦¦∏°∏¯¤·¬²± ²©Χ. τυβυλοσαo ¦¨«¬±¤¦²¶¬§¨ ¤¦¦∏°∏¯¤·¬²± ¬±¦µ¨¤¶¨§¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼o ¤±§¥²·«²©·«¨ ° º µ¨¨ ¬± ¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ ³²¶¬·¬√¨
¦²µµ¨ ¤¯·¨§º¬·«·«¨ µ²²·§¬¤° ·¨¨µ²©«²¶·q ∞¦«¬±¤¦²¶¬§¨ ¦²±·¨±·¬± «¤∏¶·²µ¬∏° ³«¯²¨ ° º¤¶tx1xvh o «¬ª«¨ µ·«¤± ·«¤·²©«¤∏¶·²µ¬∏° ¬¼2
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¶¬§¨ ¬± Χ. τυβυλοσαq
[ Κεψ ωορδσ] Χιστανχηε τυβυλοσα; Ταµ αριξ χηινενσισ~ ¦¨«¬±¤¦²¶¬§¨ ~ ° ·¨¤¥²¯¬¶°
≈责任编辑 张宁宁  
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