免费文献传递   相关文献

Study of determination method for heavy metals and harmful elements
residues in four traditional Chinese medicine injections

4种中药注射液中重金属及有害元素残留量检测方法研究



全 文 :量大于57%。
防风的止痛作用是其多种化合物共同作用的结
果,其各种成分含量的改变,尤其是在方剂中与其他
药物的不同配伍,会使其止痛作用发生质变和量变。
本研究结果为阐明防风色原酮类成分群的药效物质
基础提供了实验依据。
[参考文献]
[1] 薛宝云,李 文,李 丽,等.防风色原酮苷类成分的药理活性
研究[J].中国中药杂志,2000,25(5):297.
[2] EmiOkuyama,Tetsuyahasegawa,TakamitsuMatsushita,etal.
AnalgesiccomponentsofSaposhnikoviaRoot(Saposhnikoviadivar
icata)[J].ChemPharmBul,2001,49(2):154.
Isolationpreparationanddeterminationofchromonesfrom
Saposhnikoviadivaricata
ZHANGCun,XIAOYongqing,LILi,PANGZhen,LIGuiliu
(InstituteofChineseMateriaMadica,ChinaAcademyofChineseMedicialSciences,Beijing100700,China)
[Abstract] Objective:TocomparethecontentsofchromonesinthediferentisolationandpurificationproceduresfromSaposh
nikoviadivaricata.Method:TheseparationofsixchromoneswasdeterminedsimultaneouslybyHPLConaKromasilC18columnat35
℃ withthemethanol01% phosphoricacidingradientelutionasthemobilephrase.Thedetectionwavelengthwassetat254nmand
theflowratewas10mL·min-1.Result:Altheobtainedcorelationcoeficientofthesixcomponentswasover09995andtheav
eragerecoverieswerenotlessthan97% (RSD<5%),respectively.Conclusion:Themethodissimple,accuratewithgoodrepro
ducibility.Resultsshowedthebeterpreparationprocedureiswaterdecoctionandethanolprecipitationwithresinseparationandsilica
gelpurification.
[Keywords] Saposhnikoviadivaricata;chromones;preparation;HPLC;determination
[责任编辑 鲍 雷]
[收稿日期] 20080311
[通讯作者] 聂黎行,Tel:(010)67095313,Email:nielixing@
163.com
4种中药注射液中重金属及有害元素残留量
检测方法研究
聂黎行,金红宇,王钢力,田金改,林瑞超
(中国药品生物制品检定所,北京 100050)
[摘要] 目的:建立了4种中药注射液中重金属及有害元素的残留量的测定方法。方法:采用石墨炉原子吸
收分光光度法测定铅、镉、铜,原子荧光法测定砷、汞。对样品的前处理方法进行了优化。结果:5种重金属元素的
回收率在91%~112%,精密度<2%。铅、镉、铜、砷、汞的检出限分别为028,0014,049,019,0061μg·L-1。
结论:方法简便、灵敏、准确、可靠,值得推广。
[关键词] 重金属及有害元素;中药注射液;原子吸收分光光度法;原子荧光法
[中图分类号]R284.1 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2008)23276404
  中药作为天然药物,因毒副作用小、疗效好而受
到人们的青睐,但由于中药在栽培、贮存、炮制等过
程中可能不同程度受到有毒有害物质的污染,其安
·4672·
第33卷第23期
2008年12月
         
    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
Vol.33,Issue 23
 December,2008
全性近来受到广泛关注。重金属及有害元素残留量
成为焦点问题之一。目前,国内外将铅(Pb)、镉
(Cd)、铜(Cu)、砷(As)和汞(Hg)作为主要监控指
标。药典[1]对金银花、甘草等5种中药材中Pb,Cd,
Cu,As,Hg的残留量规定了检测方法和限度要求。
近年来,中药中重金属残留问题引起了越来越多的
国内学者的关注[23],但有关中药注射液中重金属残
留的检测鲜有报道[4],注射液中砷、汞的检测尚未
见报道。国家食品药品监督管理局为贯彻落实国务
院常务会议精神,针对当前药品安全风险现状,对注
射剂等高危、高风险品种进一步采取措施严格监管,
开展了中药注射剂质量标准提高工作。作者建立了
石墨炉原子吸收分光光度法和原子荧光法测定4种
中药注射液中铅、镉、铜、砷、汞残留量的方法,为进
一步提高中药注射液的质量,保证其用药安全提供
了实验依据。
1 仪器与试药
Mars5微波消解仪(CEM公司),AFS-9130双
道原子荧光光度计(北京吉天仪器有限公司),SO
LAARM6原子吸收光谱仪(Thermo公司)。分析纯
磷酸二氢铵、硝酸镁、碘化钾、抗坏血酸、硼氢化钠、
氢氧化钠(北京化学试剂公司),优级纯盐酸、硫酸
(北京化工厂),MOS级硝酸(北京化学试剂研究
所),水为超纯水(由 MILLIPORE超纯水系统制
备)。铅、镉、铜、砷、汞单元素标准溶液购于国家标
准物质研究中心,用2%硝酸稀释后使用。生脉注
射液来自四川省宜宾五粮液集团宜宾制药有限责任
公司、吉林省集安益盛药业股份有限公司、雅安三九
药业有限公司、上海和黄药业、江苏苏中药业集团股
份有限公司、常熟雷允上制药有限公司、山西太行药
业股份有限公司、四川川大华西药业股份有限公司,
参麦注射液来自正大青春宝药业有限公司、河北神
威药业有限公司、四川川大华西药业股份有限公司、
四川三精升和制药有限公司、雅安三九药业有限公
司、参附注射液来自雅安三九药业有限公司、肿节风
注射液来自广东省博罗先锋药业集团有限公司、福
建古田药业有限公司、通化华夏药业有限责任公司、
浙江国境药业有限公司、广西梧州制药(集团)股份
有限公司、江西天施康中药股份有限公司。
原子吸收工作条件和石墨炉升温程序分别见表
1和表2,原子荧光仪器工作条件见表3。
表1 原子吸收仪工作条件
参数 Pb Cd Cu
灯电流(mA) 50 56 40
波长(nm) 2833 2288 3248
狭缝(通带)(nm) 05 05 05
背景校正 塞曼 塞曼 塞曼
进样量(μL) 100 100 100
基体改进剂(含1%磷酸二氢铵和 50 50 无
02%硝酸镁的溶液)(μL)      
读数方式 峰高 峰高 峰高
表2 石墨炉升温程序
参数 Pb Cd Cu
石墨管类型 ELC ELC ELC
干燥温度(℃) 120 110 110
保持(s) 25 20 20
灰化温度(℃) 600,1000 800 800
保持(s) 15,5 25 20
原子化温度(℃) 1450 1300 2100
保持(s) 3 3 3
清除温度(℃) 2500 2100 2500
保持(s) 2 2 3
表3 原子荧光仪工作条件
参数 As Hg
原子化器高度(mm)  8  8
载气(Ar)流量(mL·min-1) 400 800
屏蔽气(Ar)流量(mL·min-1) 500 800
灯电流(mA) 70 25
光电倍增管负高压(V) 280 280
还原剂 含1%硼氢化钠和03%氢氧化钠的溶液 含005%硼氢化钠和02%氢氧化钠的溶液
载液 盐酸(1~100) 盐酸(1~100)
读数方式 峰面积 峰面积
2 方法
2.1 供试品溶液的制备
精密量取样品3mL于微波消解罐内,加入硝酸
40mL,置 Mars5微波消解仪内消解,消解程序见
表4。消解完毕后,使消解罐自然冷却至室温,置电
热板上130℃赶酸30min,放冷,用水转移至10mL
比色管中,并稀释至刻度,即得供试品溶液。随行
做试剂空白。
·5672·
第33卷第23期
2008年12月
         
    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
Vol.33,Issue 23
 December,2008
表4 微波消解程序
步骤 温度/℃ 升温时间/min 保持时间/min
1 110 3 3
2 150 3 3
3 180 3 9
2.2 测定方法
2.2.1 Pb,Cd,Cu的测定 均采用随行标准曲线法
测定,使用仪器自动配制标准系列见表5,以吸光度
为纵坐标,标准溶液浓度为横坐标绘制标准曲线,同
法测定试剂空白溶液和供试品溶液,然后根据供试
品溶液吸光度从标准曲线上读出相应的浓度,计算
含量。
表5 标准曲线浓度范围
元素 线性范围/μg·L-1
Pb  5~80
Cd 08~8
Cu 10~50
As  1~10
Hg 01~10
2.2.2 As的测定 精密量取砷标准储备液(1mg
·L-1)1mL,加 25%碘化钾溶液(临用前现配)1
mL,摇匀,加 10%抗坏血酸溶液(临用前现配)1
mL,摇匀,再加硫酸溶液(1~10)25mL,加水稀释并
定容至100mL,摇匀,作为主标液(10μg·L-1)。
仪器自动配置标准系列(表5),测定荧光强度值,以
荧光值为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。精
密量取供试品溶液1mL,加25%碘化钾溶液(临用
前现配)1mL,摇匀,加10%抗坏血酸溶液(临用前
现配)1mL,摇匀,再加硫酸溶液(1~10)25mL,加
水稀释并定容至 10mL,摇匀,同法测定荧光强度
值,从标准曲线上读出供试品中砷的浓度,计算含
量。
2.2.3 Hg的测定 精密量取汞标准液(100μg·
L-1)1mL,置100mL量瓶中,加20%硫酸溶液10
mL,再加水稀释至刻度,摇匀,作为主标液(1μg·
L-1)。仪器自动配置标准系列(表5),测定荧光强
度值,以荧光值为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准
曲线。精密量取供试品溶液1mL置10mL比色管
中,加20%硫酸1mL,加水稀释至刻度,摇匀。同法
测定荧光值,从标准曲线上读出供试品中汞的浓度,
计算含量。
3 结果与讨论
3.1 精密度和检出限
对样品进行 6次重复测定,吸收值 RSD低于
2%,见表6。连续测定空白溶液11次,用3倍空白
溶液吸收值的标准偏差除以标准曲线斜率即为各元
素检出限,见表6。
表6 精密度和检出限
元素 精密度/% 检出限/μg·L-1
Pb 102 028
Cd 165 0014
Cu 181 049
As 101 019
Hg 101 0061
3.2 准确性
采用3水平加样回收实验,取已知各元素残留
量的4种注射液各 15mL,分别加入 3个水平的
Pb,Cd,Cu,As,Hg标准溶液,每个水平平行处理 3
份样品,依法测定其含量,计算回收率,结果4种注
射液的5种重金属元素的回收率在91% ~112%,
精密度<2%。
3.3 空白干扰
重金属元素的残留测定属痕量分析范畴,环境、
试剂、器皿都可能给分析带来极大干扰。硝酸试剂
必须采用高纯试剂,实验用水以蒸馏水为好。本实
验比较了4种净化水,结果以经 Milipore超纯水系
统过滤的蒸馏水,砷、铜等元素空白吸收最低,效果
最好。所用器皿均在使用前以硝酸溶液(1→3)浸
泡过夜,再冲洗后使用。供试液及标准液均不宜在
玻璃器皿中长时间存放。每次测定必须随行空白试
验,以保证分析结果可靠。
3.4 样品经消解处理的必要性
由于注射液为液体,理论上在原子吸收和原子
荧光分析中,可以直接进样测定。但由于待测元素
在样品中不一定会以单一的无机游离状态存在,可
能有多种形态、价态存在方式;另一方面,样品中的
复杂基质可能对测定起到掩蔽、干扰等作用。因此,
有必要对样品是否需要消解进行对比考察。同一样
品分别采用以下3种不同方法进行前处理:A原液
直接测定;B取样3mL,加水稀释并定容至10mL;C
取样3mL,加硝酸5mL消解,赶酸后用水转移并定
容至10mL,测定其5种元素含量,见表7。结果表
明,未经消解的样品检出量明显低于消解过的样品,
说明应对样品进行有机破坏后再测定。
3.5 加热赶酸对测定的影响
消解完毕后,溶液中含较多的氮氧化物,需加热
·6672·
第33卷第23期
2008年12月
         
    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
Vol.33,Issue 23
 December,2008
   表7 不同前处理方法的考察
前处理
方法
质量浓度/μg·L-1
Pb Cd As Hg Cu
A 205 - 140 - 1391
B 595 - 299 - 2681
C 584 030 4942 641 4485
排除,以免对后续测定造成影响。分别考察了不同
硝酸残留浓度和加热温度对测定的影响。精密量
取各元素标准液适量,平行制备含 Pb,Cd,Cu,As,
Hg对照品各 02,002,02,05,005μg的混合
溶液4份,分别加硝酸0,1,3,5mL,再加水定容至
10mL,摇匀,按前法,测定5种元素含量,结果见表
8。由表可见,不同酸浓度下的混标液质量浓度差
别不大,说明硝酸浓度对5种元素的测定无显著影
响。
表8 不同酸度对混标溶液测定结果的影响
加酸量
/mL
质量浓度/μg·L-1
Pb Cd As Hg Cu
0 1961 243 5164 595 2181
1 1907 235 5017 539 1891
3 1939 221 4931 545 1974
5 1964 233 4872 1974 1905
  精密量取各元素标准液适量,平行制备含 Pb,
Cd,Cu,As,Hg标准品各 02,002,02,05,005
μg的混合溶液4份,各加硝酸5mL,分别于130℃
电热板上加热赶酸0,05,1,2h,放冷,再加水定容
至10mL,摇匀,测定含量,结果见表9。由表可见,
随着加热时间的增长,Pb,Cd,Cu,As,Hg的质量浓
  
度没有明显下降,说明130℃加热赶酸时间不超过
2h,不会造成Pb,Cd,Cu,As,Hg的损失。
表9 不同赶酸时间对混标溶液测定结果的影响
赶酸时间
/h
质量浓度/μg·L-1
Pb Cd As Hg Cu
0 1954 214 4872 539 2158
1 1926 203 5017 539 2097
3 1917 224 4931 471 2146
5 1932 218 5025 511 2114
3.6 样品测定结果
用所建立的方法对17个厂家的4种共计60批
注射液样品进行测定,所有样品各元素质量浓度分
布见表10。
表10 样品测定结果分布
质量浓度
批数
Pb Cd As Hg Cu
低于检出限 12 44 8 42 2
<10μg·L-1 26 16 7 18 18
10~100μg·L-1 19 0 43 0 40
>100μg·L-1 3 0 2 0 0
[参考文献]
[1] 中国药典.一部[S].2005:52.
[2] 秦樊鑫,张明时,胡继伟,等.氯化钯作基体改进剂 GFAAS法
测定中药材中微量铅的研究[J].光谱学与光谱分析,2007,27
(10):2123.
[3] 聂黎行,李向日,金红宇,等.同仁乌鸡白凤丸中重金属和农药
残留的测定[J].中国中药杂志,2007,32(23):2563.
[4] 宗水珍,汪学英,徐 娟.石墨炉原子吸收分光光度法测定茵
栀黄注射液及其中的铅镉[J].应用化学,2007,24(10):1219.
Studyofdeterminationmethodforheavymetalsandharmfulelements
residuesinfourtraditionalChinesemedicineinjections
NIELixing,JINHongyu,WANGGangli,TIANJingai,LINRuichao
(NationalInstitutefortheControlofPharmaceuticalandBiologicalProducts,Beijing100050,China)
[Abstract] MethodsfordeterminationofheavymetalsandharmfulresiduesintraditionalChinesemedicineinjectionwerees
tablished.Graphitefurnaceatomicabsorptionspectrometrywasusedfordeterminationoflead,cadmiumandcopper,atomicfluores
cencespectrometryforarsenicandmercury.Thepreprocessingmethodwasoptimized.Theaveragerecoveriesof5elementswerebe
tween91% and112% whiletheprecisionswerelessthan2%.Thedeterminationlimitoflead,cadmium,copper,arsenicandmercu
rywere028,0014,049,019,0061μg·L-1,respectively.Theproposedmethodwassimple,sensitive,accurateandreliable,
andcouldbeusedwidely.
[Keywords] heavymetalsandharmfulelementsresidues;traditionalchinesemedicineinjection;atomicabsorptionspectrome
try;atomicfluorescencespectrometry [责任编辑 鲍 雷]
·7672·
第33卷第23期
2008年12月
         
    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
Vol.33,Issue 23
 December,2008