全 文 ：¬±·²·«¨ ¤¯·¨µ¤¯ √ ±¨·µ¬¦¯ ¶¨¬± «¤¯©²©·«¨ µ¤·¶·µ¨¤·¨§º¬·«÷ ∏¨ ½«¬®¤±ª¤±§¶¬°√¤¶·¤·¬± wx °¬± ¥¨ ©²µ¨ ·«¨ ¬¶¦«¨ °¬¤1 ׫¨ ± ∏¨µ²¯²ª¬¦¤¯ §¨ ©¬2
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¦²°³¯ ·¨¯¨¼ ¤¥²¯¬¶«¨ §·«¨ ³µ²·¨¦·¬√¨ ©¨©¨¦·²©¶¬°√¤¶·¤·¬±1 Χονχλυσιον: ÷ ∏¨ ½«¬®¤±ª«¤¶³µ²·¨¦·¬√¨ ©¨©¨¦·¶²± ¬¶¦«¨ °¬¦¥µ¤¬± §¤°¤ª¨ ¬±
µ¤·¶o º«¬¦«·«¨ ¥¨ ± ©¨¬¦¬¤¯ ©¨©¨¦·¶¤µ¨ ³¤µ·¯¼ §∏¨ ·² ·«¨ ¶·¤·¬±¶¦²°³²± ±¨·¶1 ׫¨ ²·«¨ µ¦²°³²± ±¨·¶¬± ÷ ∏¨ ½«¬®¤±ª°¤¼ ¤¯¶² ¤¦¦²∏±·©²µ
·«¨ ± ∏¨µ²³µ²·¨¦·¬√¨ ©¨©¨¦·¶o º«¬¦«¬¶º²µ·«©∏µ·«¨ µ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¬²±¶1
[ Κεψ ωορδσ] ÷ ∏¨ ½«¬®¤±ª~ ¶·¤·¬±¶~ ¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤
≈责任编辑 古云侠
≈收稿日期 ussy2su2ts
≈基金项目 浙江省中医药科研基金项目 kussw≤s|wl
≈通讯作者 3 郑树 o ר¯} ksxztl {zz{wxsto ƒ¤¬} ksxzt l
{zszw{yyo∞2°¤¬¯}½«¨ ±ª¶«∏ ½∏q §¨∏q¦±
粉背南蛇藤中新三萜化合物对 细胞
体外抗癌作用的研究
毛建山 t o王奎武 u o郑 树 v3 o潘远江 u
kt1浙江大学 医学院 附属第二医院 消化内科 o浙江 杭州 vtsss|~
u1浙江大学 化学系 o浙江 杭州 vtssuz~ v1浙江大学 肿瘤研究所 o浙江 杭州 vtsss|l
≈摘要 目的 }探讨粉背南蛇藤中新的三萜齐墩果 2tu2烯 2vΒoyΑ2二醇对人结肠癌细胞系 细胞的体外增
殖抑制作用和诱导凋亡作用 ∀方法 }采用 ××法检测齐墩果 2tu2烯 2vΒoyΑ2二醇对体外培养人结肠癌细胞系
细胞的增殖抑制作用 o通过 r∞
双染色荧光显微镜 !∞染色光学显微镜 !⁄琼脂糖凝胶电泳 !流式细胞仪分
析齐墩果 2tu2烯 2vΒoyΑ2二醇对 细胞的诱导凋亡作用及对细胞周期的影响 ∀结果 }齐墩果 2tu2烯 2vΒoyΑ2二醇
对 细胞生长抑制作用具有剂量依赖性和时间依赖性 o作用 w{ «时 ≤xs为 ktu1us ? s1z|l Λª# °pt ~ r∞
双染色 !∞染色可见典型的肿瘤细胞凋亡改变 ~ts Λª# °pt的三萜处理 细胞 w{ «即可出现明显的 ⁄梯
带 !流式细胞仪可检测到亚二倍体峰 o在 ts ∗ us Λª# °pt内具有明显的量 2效作用关系 ~并可见 细胞 s 2t
期 !u 2 期的细胞明显减少 o而 ≥期细胞无变化 ∀结论 }粉背南蛇藤中新的三萜齐墩果 2tu2烯 2vΒoyΑ2二醇能抑制
人结肠癌细胞系 细胞增殖和诱导凋亡 ∀
≈关键词 齐墩果 2tu2烯 2vΒoyΑ2二醇 ~粉背南蛇藤 ~抗肿瘤 ~细胞凋亡 ~ 细胞
≈中图分类号 u{x1x ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussyltz2twxs2sw
南蛇藤系卫矛科南蛇藤属 Χελαστρυ󬱱植物 o
我国约有 vs种 o分布于全国各地 o多数产自长江以
南地区 o又名过山风 !黄藤 !苦树皮 !穿山龙等 ∀药用
其根 !藤茎和叶 ∀南蛇藤属普遍含有三萜 !倍半萜 !
生物碱和黄酮类等化合物 o这些成分具有抗氧化活
性 !抗炎 !抗生育活性 !抗肿瘤以及抗艾滋病毒等作
用 ≈t2w o南蛇藤属是寻找天然活性成分的重要来源之
一 ∀笔者从粉背南蛇藤 Χελαστρυσ ηψπολευχυσ藤茎的
甲醇浸膏中分离到 t个新的三萜齐墩果 2tu2烯 2vΒ,
yΑ2二醇 ktu2²¯ ¤¨± ±¨ 2¨vΒ, yΑ2§¬²¯l≈x o该化合物是首
次从南蛇藤属植物中分得 o经 ≤检索确认是新的
化合物 ∀本研究旨在研究这个新的三萜化合物对人
结肠癌细胞系 细胞的体外抗增殖作用和诱导
凋亡作用 o为南蛇藤的临床抗肿瘤应用提供依据和
资料 ∀
1 材料与方法
111 药材 三萜化合物为齐墩果 2tu2烯 2vΒoyΑ2二
醇 ktu2²¯ ¤¨± ±¨ 2¨vΒo yΑ2§¬²¯lo系从粉背南蛇藤 k经
#sxwt#
第 vt卷第 tz期
ussy年 |月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφΧηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vto¶¶∏¨ tz
≥ ³¨·¨°¥¨ µoussy
浙江大学孙红祥副教授鉴定 l藤茎的甲醇浸膏中分
得 ≈x o纯度 |xh ∀用二甲基亚枫配成 ts °ª#
°pt的储备液 o使用时用培养基稀释 ∀
112 试剂与仪器 小牛血清 k中国杭州四季青生
物技术公司 lo ° 2tyws培养基 k¬¥¦²
lo二
甲基亚枫 k⁄ ≥ l!甲基噻唑蓝 k ×× l!吖啶橙
kl!嗅乙啶 k∞
l!碘化丙啶 k°l购于 ≥¬ª°¤公
司 o其余所用试剂均为分析纯 ∀酶标仪 k • ¤¯2
¤¯¦twuso芬兰 lo蔡氏荧光显微镜 k÷ tssso德
国 lo流式细胞仪 kƒ≤≥ ≤¤¯¬¥∏µo美国
⁄公司 l∀
113 细胞系及培养 人结肠癌细胞系 由浙江
大学肿瘤研究所提供 o用含 tsh灭活小牛血清 !青
霉素 tss # °pt !链霉素 tss Λª# °pt的 ° 2
tyws在 vz ε !饱和湿度 !xh ≤u培养箱中培养 ou ∗
v §传代 t次 ∀取对数生长期的细胞用于试验 ∀
114 体外细胞生长抑制试验 采用 ××法 ≈y ∀每
孔 t ≅ tsw个细胞 o每个剂量 v个复孔 o分别作用 uwo
w{ozu «o酶标仪于 xzs ±°波长测定各孔吸光度
kΑlo增殖抑制率 kh l k对照组 Α p实验组 Α) /
(对照组 Α p空白组 Αl ≅ tssh ∀采用 µ¬ª¬±y1s数
据处理软件的 ¶¬ª°²§¨ 函¯数拟合求出半数抑制浓度
k≤xs l∀每实验重复 v次 ∀
115 r∞
双染色荧光显微镜观察细胞形态 对
数生长期 细胞 u ≅ tsw r孔种于 uw孔板 ovz ε
培养 uw «使细胞贴壁 o用含不同剂量的三萜化合物
作用 w{ «os1uxh胰酶消化 o离心弃上清液 o加入冷
°
≥洗 v次 o制成细胞悬液 o吸 |x Λo加入 x Λ混
合荧光染色液 ≈tss Λª# °pt吖啶橙 k l和 tss
Λª# °pt嗅乙啶 k∞
l临用前等体积混合 o混匀 o
压上盖玻片 o荧光显微镜下观察并摄像 ∀
116 苏木精 2伊红 k∞l染色光学显微镜观察细胞
形态 对数生长期 细胞 t ≅ tsx接种于置有盖
玻片的 y孔培养板内 o待细胞贴壁后加入三萜化合
物作用 w{ «o取出盖玻片 o多聚甲醛固定 o常规 ∞
染色 o光镜下观察并摄像 ∀
117 琼脂糖凝胶电泳 ⁄梯带检测 t ≅ tsy的细
胞按文献 ≈z 方法提取 ⁄∀取 x Λ⁄样品于
t1xh的琼脂糖电泳 o嗅乙啶 k∞
l染色 o紫外灯下观
察 !摄像 ∀
118 流式细胞仪细胞周期及亚二倍体峰凋亡分析
收集 t ≅ tsy个细胞 o经冷 °
≥洗 u次 o加入 t °
体积分数为 zsh的乙醇固定 ow ε 放置 uw «o加等量
的 °
≥洗 u次 o加 酶 kts °ª# °pt ltss Λo
vz ε 置 tx ∗ us °¬±∀加含 ×µ¬·²± ÷ 2tss的碘化丙啶
kxs Λª# °pt lxss Λo w ε 置 vs °¬±o流式细胞仪
检测 o用 ≤¨¯¯´ ∏¨ ¶·v1t©分析软件分析 ∀以凋亡指数
k°l表示细胞凋亡情况 o实验重复 v次 ∀
°凋亡细胞数 r所测细胞总数 ≅ tssh
119 统计学方法 数值采用 cξ ? σ表示 o用 ≥°≥≥
tt1x软件包进行方差分析 ∀
2 结果
211 对人结肠癌细胞系 细胞的生长抑制作用
三萜化合物对人结肠癌细胞系 细胞作用 uw
«时 ≤xs为 kt|1ut ? u1u{l Λª# °pt o作用 w{ «时
≤xs为 ktu1us ? s1z|l Λª# °pt o作用 zu «时 ≤xs
为 k{1x| ? s1tul Λª# °pt ∀ w{ «时 ≤xs与 uw «时
≤xs相比 oΠ s1st~ zu «时 ≤xs与 w{ « ≤xs相比 o
Π s1sx∀三萜化合物对 细胞的生长抑制作
用呈明显的量效和时效作用关系 k见图 tl∀
图 t 南蛇藤三萜化合物对 细胞的生长抑制作用
212 r∞
双染色荧光显微镜观察 对照组细胞
形态饱满 o细胞质呈绿色 o核为亮绿色 o呈现荧光深
浅不一的结构样特点 ∀三萜化合物处理的细胞则出
现凋亡细胞 }早期凋亡细胞细胞质呈绿色 o细胞核染
色增强 o荧光明亮 o呈均匀一致的圆状或固缩状 !团
块状结构 ~晚期凋亡细胞核着红色并呈团缩或串珠
状 o胞质染成红色 ~凋亡细胞数随三萜化合物的剂量
增高而增多 k见图 ul∀
213 ∞染色光学显微镜观察 对照组的 细
胞呈梭形 o体积较大 o胞核呈椭圆形 o核膜清楚 o核仁
清晰可见 ∀经三萜化合物处理的 细胞见到较
典型的细胞凋亡形态变化 }细胞体积缩小 o染色质固
缩成斑片状 o核碎裂 o凋亡小体形成等 k见图 vl∀
214 琼脂糖凝胶电泳 三萜化合物处理 细胞
w{ «后 ox Λª# °pt未能检测到有 ⁄梯带 ots Λª
# °pt可观察到明显的 ⁄梯带 o随着三萜化合
#txwt#
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图 u 三萜化合物作用 细胞 w{ «后 r∞
双
染色荧光显微镜观察 k ≅ wssl
1对照 ~
1三萜化合物 ts Λª# °pt ~
≤1 tx Λª# °pt ~⁄1 us Λª# °pt
图 v 三萜化合物作用 细胞 w{ «
后 ∞染色光镜观察 k ≅ tssl
1对照 ~
1三萜化合物 ts Λª# °pt
物剂量的增高 ktxous Λª# °pt lo⁄梯带更加明
显 k见图 wlo有量效作用关系 ∀
图 w 三萜化合物作用 细胞 w{ «后
⁄琼脂糖凝胶电泳结果
t1对照 ~u1三萜化合物 x Λª# °pt ~v1 ts Λª# °pt ~
w1 tx Λª# °pt ~x1 us Λª# °pt ~ 1°¤µ®¨ µ
215 流式细胞仪分析 将三萜化合物作用 细
胞 w{ «后进行 °染色 o在流式细胞仪 ⁄含量直
方图上显示在 ²2t峰前出现一个 ⁄含量减少
的亚二倍体峰 o即凋亡峰 o随三萜化合物的剂量增大
而增高 o有明显的剂量效应关系 ∀分析三萜化合物
对 细胞周期的影响 o从表 t可见 ou1xox1s Λª
# °pt的三萜化合物处理 细胞 w{ «o细胞各
周期变化不明显 o但经 tsotxous Λª# °pt三萜化
合物处理的细胞与对照组比较 o显示 s 2t期 !u 2
期的细胞明显减少 ~而 ≥期细胞虽有减少的趋势 o但
无统计学差异 ∀
表 t 不同剂量三萜化合物作用 w{ «后对 细胞凋亡
和细胞周期的影响 kcξ ? σ, ν vl h
剂量
rΛª# °pt
细胞周期分布
s 2t ≥ u 2
°
sqs xvq|z ? wqwt uyqyv ? tq{s t{qyx ? tq|w tqys ? sqy|
uqx xvqsx ? uqzz u{qts ? tqxt tyqyx ? uqzx uq|v ? sq{w
xqs xtq{t ? vqss uyq|z ? wq{x t{quy ? tqut wqvs ? tq|u
tsqs v|qxx ? zqustl uvqvy ? tqyt {q{{ ? uq{|ul u|q{u ? zqywul
txqs vxqy| ? vq|wul tzqv{ ? xqyz zq{x ? sq{uul wsqv{ ? tq|yul
usqs uwqzt ? wq|tul t|qtt ? vqvy yqut ? tqw{ul xsqz| ? yqytul
注 }与对照组比较 tl Π sqsxoul Π sqst
3 讨论
近年来从南蛇藤属植物中分离得到了大量化合
物 o其中一些具有抗肿瘤和逆转肿瘤细胞多药耐药
的活性 ≈wo{2ts ∀细胞生长抑制试验结果表明 o这个新
的三萜化合物对人结肠癌细胞系 具有抗增殖
作用 o其抗增殖作用具有剂量依赖性和时间依赖性 o
作用 w{ «时其 ≤xs为 ktu1us ? s1z|l Λª# °pt o表
明这个新三萜化合物具有较强的体外抗癌活性 o有
进一步研究的价值 ∀
本研究应用吖啶橙 r嗅乙啶 k r∞
l双荧光染
色和细胞爬片 ∞染色从形态学方面检测粉背南蛇
藤中新的三萜化合物诱导人结肠癌细胞系 细
胞的凋亡作用 o结果表明 ts Λª# °pt的三萜化合
物即能明显地诱导 细胞发生凋亡 ~应用 ⁄
电泳从生化特征方面检测三萜化合物的诱导凋亡作
用 ots Λª# °pt的三萜化合物处理 细胞 w{ «
即可出现明显的 ⁄梯带 ~流式细胞仪检测亚二倍
体峰 k凋亡峰 lots Λª# °pt的三萜化合物作用 w{
«其凋亡指数为 ku|1{u ? z1ywlh o与未处理对照
细胞具有显著差异 ∀ r∞
双荧光染色 !⁄电
泳 !流式细胞仪等检测三萜化合物诱导 细胞的
凋亡在 ts ∗ us Λª# °pt内具有明显的量 2效作用
关系 ) ) ) 即具有剂量依赖性 ∀流式细胞仪细胞周期
分析表明 }ts ∗ us Λª# °pt的三萜化合物作用 w{
#uxwt#
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Χηινα ϑουρναλοφΧηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vto¶¶∏¨ tz
≥ ³¨·¨°¥¨ µoussy
«可使 细胞 s 2t期 !u 2 期的细胞明显减
少 o而 ≥期细胞无变化 o结合凋亡指数同步增加分
析 o提示粉背南蛇藤中新的三萜化合物可能主要作
用于 s 2t期 !u 2 期的细胞并诱导其凋亡 o该三
萜化合物的诱导凋亡的分子机制值得进一步研究 ∀
≈参考文献
≈t 陈佩东 o梁敬钰 q南蛇藤属植物化学成分及活性研究进展
≈ q海峡药学 ot|||ottkwl}vq
≈u º¤±ª
≠ o ¬° ≥o ¨¨ o ·¨¤¯q ±·¬²¬¬§¤±·¥¨ ±½²¼¯ ¤·¨§
©¯¤√¤±2v2²¯ ª¯¼¦²¶¬§¨ ©µ²° Χελαστρυσ ορβιχυλατυσ≈ q¤·°µ²§o
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≈v ¬± o º¤±ª
≠ o ¬° ≥o ·¨¤¯q ±·¬¬±©¯¤°°¤·²µ¼ ¦²±¶·¬·2
∏¨ ±·¶²©Χελαστρυσορβιχυλατυ󬱫¬¥¬··«¨ ƒ2ϑ
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Χελαστρυσηινδσιι≈ 1°«¼·²¦«¨ °¬¶·µ¼ot||zowwkzl}tuzxq
≈x • ¤±ª• o ¤² ≥o פ¬≠ °o ·¨¤¯q ²√¨¯ ¶®¨ ¯¨·²± ·¨µ³¨ ± ¶¨
©µ²° Χελαστρυσ ηψπολευχυσ º¬·« ¤±·¬2·∏°²µ¤¦·¬√¬·¬¨¶≈ q
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§¨≤ «¨ ° ¨·o ussyotyk{l}uuzwq
≈y 韩 锐 q抗癌药物研究与实验技术 ≈ q北京 }北京医科大学
中国协和医科大学联合出版社 ot||z}tz{xq
≈z 胡 野 o凌志强 o单小云 q细胞凋亡的分子医学 ≈ q北京 }
军事医学科学出版社 oussu}w{uq
≈{ ¬° ≥ ∞o ¬° ≠ o ¨¨ q ± º¨ ¶¨¶´∏¬·¨µ³¨ ±¨ ¶¨·¨µ©µ²°
Χελαστρυσορβιχυλατυσµ¨√ µ¨¶¬±ª°∏¯·¬§µ∏ªµ¨¶¬¶·¤±¦¨ ¬± ¦¤±¦¨µ¦¨¯¯¶
≈ q¤·°µ²§ot||{ oytktl}ts{q
≈| פ®¤¬¶«¬≠ o «¶«¬°¤≥o ¤®¤±²o ·¨¤¯q ≥·µ∏¦·∏µ¨¶²©¶¨¶´∏¬·2
µ¨³¨ ±¨³²¯¼²¯ ¶¨·¨µ¶©µ²° Χελαστρυσ στεπηανοτιιφολιυσ º¬·«³²·¨±·¬¤¯
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Χελαστρυσ ορβιχυλατυσ ¤±§ ·«¨ ¬µ¶·µ∏¦·∏µ¨2¤¦·¬√¬·¼ µ¨ ¤¯·¬²±¶«¬³ ²±
·«¨ °²§∏¯¤·¬²± ²©°∏¯·¬§µ∏ª µ¨¶¬¶·¤±¦¨ ≈ q¤·°µ²§ot|||oyu
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Αντιτυµ ορ εφφεχτσ οφ νοϖελτριτερπενε φροµ Χελαστρυσηψπολευχυσ ον
ηυµ αν χολορεχταλχανχερ χελλλινε Ρ ΚΟ ιν ϖιτρο
¬¤±2¶«¤±t o• ∏¬2º∏u o∞ ≥«∏v o° ≠∏¤±2¬¤±ªu
(t. ∆επαρτµ εντ οφ Γαστροεντερολογψ, Τηε Σεχονδ ΗοσπιταλΑφφιλιατεδ το ΜεδιχαλΧολλεγε οφ Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ,
Ηανγζηου vtsss|, Χηινα; u1∆επαρτµ εντ οφ Χηεµ ιστρψ, Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ, Ηανγζηου vtssuz, Χηινα;
v1Χανχερ Ινστιτυτε, Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ, Ηανγζηου vtsss|, Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨·«¨ ©¨©¨¦·¶²©±²√¨¯ ·µ¬·¨µ³¨ ± k¨tu2²¯ ¤¨± ±¨ 2¨vΒ, yΑ2§¬²¯l ©µ²° Χελαστρυσηψπολευχυσ²± ·«¨
³µ²¯¬©¨µ¤·¬²± ¤±§¤³²³·²¶¬¶²©«∏°¤± ¦²¯²µ¨¦·¤¯ ¦¤±¦¨µ¦¨¯¯ ¬¯±¨ q Μετηοδ : ׫¨ ¬±«¬¥¬·²µ¼ ©¨©¨¦·²©·«¨ ±²√¨¯ ·µ¬·¨µ³¨ ±¨²± ¦¨¯¯
³µ²¯¬©¨µ¤·¬²± º¤¶¤¶¶¤¼¨ §¥¼ ×× §¼¨ µ¨§∏¦·¬²±q ׫¨ °²µ³«²¯²ª¼ ²©¤³²³·²·¬¦¦¨¯¯¶º¤¶²¥¶¨µ√ §¨º¬·« r∞
§²∏¥¯¨©¯∏²µ¨¶¦¨±¦¨ ¶·¤¬2
±¬±ª¤±§∞ ¶·¤¬±¬±ªo ⁄ ©µ¤ª° ±¨·º¬·«¨¯ ¦¨·µ²³«²µ¨¶¬¶²± ¤ª¤µ²¶¨ ª¨ ¶¯o ¶∏¥2§¬³¯²¬§³¨ ¤®¤±§¦¨¯¯ ¦¼¦¯¨º¬·«©¯²º ¦¼·²° ·¨¨µkƒ≤ lq
Ρ εσυλτ: ²√¨¯ ·µ¬·¨µ³¨ ± k¨tu2²¯ ¤¨± ±¨ 2¨vΒ, yΑ2§¬²¯l ©µ²° Χ1 ηψπολευχυ󶬪±¬©¬¦¤±·¯¼ ¬±«¬¥¬·¨§³µ²¯¬©¨µ¤·¬²± ²© ¦¨¯¯¶¬± §²¶¨2§¨ 2
³¨ ±§¨ ±·¤±§·¬° 2¨§¨ ³¨ ±§¨ ±·°¤±± µ¨o ·«¨ ≤xs º¤¶ktuqus ? sqz|l Λª# °pt ¤·w{ «q ×¼³¬¦¤¯ ¤³²³·²·¬¦¦«¤±ª¨ ¶º µ¨¨ ²¥¶¨µ√ §¨ ¬±
¦¨¯¯¶∏±§¨ µ·«¨ ©¯∏²µ¨¶¦¨±¦¨ °¬¦µ²¶¦²³¨ ¤±§·«¨ ¬¯ª«·°¬¦µ²¶¦²³¨ q⁄ ¤¯§§¨ µº¤¶§¨ ·¨¦·¨§²± ¤ª¤µ²¶¨ ª¨ ¶¯¤·¦²±¦¨±·µ¤·¬²±¶©µ²°
ts Λª# °pt ·²us Λª# °pt ¤·w{ «q • ¬·«ƒ≤ ° ·¨«²§¶o §²¶¨2§¨ ³¨ ±§¨ ±·¤³²³·²¶¬¶2¬±§∏¦¨§ ©¨©¨¦·º¤¶²¥¶¨µ√ §¨¬± ¦¨¯¯ ¬¯±¨
¤©·¨µ·µ¨¤·° ±¨·²©·µ¬·¨µ³¨ ±¨©²µw{ «o ¤±§·«¨ ¤³²³·²·¬¦µ¤·¨¶º µ¨¨ ¬±¦µ¨¤¶¨§©µ²°kuq|v ? sq{wlh ·²kxsqz| ? yqytl h ¤·¦²±¦¨±·µ¤2
·¬²±¶©µ²° uqx Λª# °pt ·²us Λª# °pt q ⁄ «¬¶·²ªµ¤°¶§¤·¤©µ²° ƒ≤ ¤±¤¯¼¶¬¶¶«²º §¨·«¤··«¨ ±∏°¥¨ µ²©¦¨¯¯¶º¤¶²¥√¬²∏¶¯¼ µ¨2
§∏¦¨§§∏µ¬±ªs 2t ³«¤¶¨ ¤±§u 2 ³«¤¶¨o ¥∏·±²·§∏µ¬±ª≥ ³«¤¶¨ ©²µ ¦¨¯¯ ¬¯±¨¤©·¨µ·µ¨¤·° ±¨·º¬·«√¤µ¬²∏¶¦²±¦¨±·µ¤·¬²±¶²©·«¨
·µ¬·¨µ³¨ ±¨©²µw{ «²∏µ¶q Χονχλυσιον: ²√¨¯ ·µ¬·¨µ³¨ ± k¨tu2²¯ ¤¨± ±¨ 2¨vΒ, yΑ2§¬²¯l ©µ²° Χ1ηψπολευχυ󦤱 ¬±§∏¦¨ ¤³²³·²¶¬¶¤±§«¤¶¬±«¬2
¥¬·¬²± ©¨©¨¦·²± ·«¨ ³µ²¯¬©¨µ¤·¬²± ¬± ¦¨¯¯ ¬¯± q¨
[ Κεψ ωορδσ] tu2²¯ ¤¨± ±¨ 2¨vΒ; yΑ2§¬²¯~ Χελαστρυσ ηψπολευχυσ; ¤±·¬·∏°²∏µ~ ¤³²³·²¶¬¶~ ¦¨¯¯ ¬¯±¨
≈责任编辑 古云侠
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