全 文 ：[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ≤²±©¬µ° ·«¨ ¬µµ¬·¤·¬²± ²©±¨¨ §¯ 2¨¯¬®¨ ¦¤¯¦¬∏° ²¬¤¯¤·¨ ¦µ¼¶·¤¯¶¬± µ¤º Πινελλια τερνατα. Μετηοδ : ≤²°³¤2
µ¬±ª·«¨ ¬µµ¬·¤·¬²±¶²©µ¤º Π. τερνατε ¦²±·¤¬±¬±ª¦¤¯¦¬∏° ²¬¤¯¤·¨ ¦µ¼¶·¤¯¶o ·«¨ µ¤º Π. τερνατε ±² ¦²±·¤¬±¬±ª¦¤¯¦¬∏° ²¬¤¯¤·¨ ¦µ¼¶·¤¯¶o ·«¨
³∏µ¨ ±¨¨ §¯ 2¨¯¬®¨ ¦¤¯¦¬∏° ²¬¤¯¤·¨ ¦µ¼¶·¤¯¶¬¶²¯¤·¨§©µ²° µ¤º Π. τερναταo ·«¨ ¬¨·µ¤¦·¶²©º¤·¨µ¤±§√¤µ¬²∏¶¶²¯√ ±¨·¶©µ²° µ¤º Π. τερνατεq
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∏° ²¬¤¯¤·¨¦µ¼¶·¤¯ ¬¶²¯¤·¨§©µ²° µ¤º Π. τερνατε ²± µ¤¥¥¬·¶π ¼¨¨ ¶1 ’¥¶¨µ√ ¬¨±ª·«¨ ¶«¤³¨ ¤±§¤³³¨ ¤µ¤±¦¨ ²©¦¤¯¦¬∏° ²¬¤¯¤·¨¦µ¼¶·¤¯¶¬± µ¤º
Π. τερνατε ¤±§µ¤º Œ±§¬¤ ¤§§¨ µ• ²²·¥¼·«¨ ¨¯ ¦¨·µ²°¬¦µ²¶¦²³¨ ¤±§¦²°³¤µ¬±ª·«¨ ¬µ¬µµ¬·¤·¬²± §¨ ªµ¨ ¶¨º¬·«·«¨ ¶¤°¨¦²±·¨±·¶²©¦¤¯¦¬∏°
²¬¤¯¤·¨ ¦µ¼¶·¤¯¶q Ρ εσυλτ: ≤ ¤¯¦¬∏° ²¬¤¯¤·¨ ¦µ¼¶·¤¯¶¬± µ¤º Π. τερνατα ¶«²º §¨√ µ¨¼ ¶·µ²±ª¬µµ¬·¤·¬²± ³µ²³¨ µ·¼q ˜±§¨ µ·«¨ ¶¤°¨¦²±·¨±·²©
¦¤¯¦¬∏° ²¬¤¯¤·¨ ¦µ¼¶·¤¯¶o ·«¨ ¬µµ¬·¤·¬²± ²©µ¤º Π. τερνατα ¤±§³∏µ¨ ±¨¨ §¯ 2¨¯¬®¨ ¦¤¯¦¬∏° ²¬¤¯¤·¨¦µ¼¶·¤¯¶¬¶²¯¤·¨§©µ²° µ¤º Π. τερνατε «¤§
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¼¨¨ ¶¤±§·«¨ ¼ ¶«²º §¨∏±§²∏¥·¨§ ∏´¤±·¬·¼2¨ ©©¨¦·µ¨ ¤¯·¬²±¶«¬³q Χονχλυσιον: ≤ ¤¯¦¬∏° ²¬¤¯¤·¨¦µ¼¶·¤¯ ¬¶·«¨ ¬µµ¬·¤·¬²± ¦²°³²± ±¨·¬± µ¤º Π.
τερνατα.
[ Κεψ ωορδσ] µ¤º Πινελλια τερνατε; ±¨¨ §¯ 2¨¯¬®¨ ¦¤¯¦¬∏° ²¬¤¯¤·¨ ¦µ¼¶·¤¯~¬µµ¬·¤·¬²± ≈责任编辑 刘  
≈收稿日期   ussx2tu2uw
≈基金项目   教育部优秀团队资助项目 k|{x2u2syv2ttul
≈通讯作者   3 车庆明 o ר¯} kstsl{u{suwy{o∞2°¤¬¯}¦«¨ ¬´±ª2
°¬±ªussvƒ ¶¬±¤q¦²°
灯盏花乙素苷元的胆汁排泄研究
车庆明 3 o陈 颖 o潘丽怡 o何 红
k北京大学 药学院 o北京 tsss{vl
≈摘要   目的 }建立大鼠胆汁中灯盏花乙素的高效液相 2电化学色谱 k‹ °≤ 2∞≤⁄l测定方法 o研究灌胃给药灯
盏花乙素苷元 uss °ª# ®ªpt后 o代谢产物在胆汁中的排泄方式 ∀方法 }°µ²±·²¶¬¯ ≤t{色谱柱 kw1y °° ≅ uxs °°ox
Λ°lo流动相 xs °°²¯# pt磷酸盐缓冲液 k³‹ u1yl2甲醇 2四氢呋喃 kysΒ wsΒ tsl~流速 t °# °¬±pt o分析电压
tss °∂ ∀结果 }灌胃给药灯盏花乙素苷元后 o胆汁中主要以灯盏花乙素 k灯盏花乙素苷元 z2Ο2Š ¦¯„ l的形式排泄 ∀
结论 }口服灯盏花乙素苷元后 o大鼠胆汁中没有原形药排出 o只有代谢产物灯盏花乙素 ∀
≈关键词   灯盏花乙素苷元 ~灯盏花乙素 ~高效液相 2电化学色谱法 ~胆汁排泄
≈中图分类号   • u{x1x ≈文献标识码   „ ≈文章编号   tsst2xvsukussylus2tzts2sv
灯盏花乙素苷元系菊科植物灯盏细辛 Εριγερον
βρεϖισχαπυσk∂ ¤±·1l的活性成分之一 o具有活血化瘀 !
散寒解表 !舒筋活络 !祛风除湿之功效 ∀它的化学结
构是 xoyozowχ2四羟基黄酮 o与灯盏花乙素的区别在
于 z位羟基上无葡萄糖醛酸 ∀大量的临床报道证
明 o灯盏花乙素注射剂治疗心脑血管疾病的临床疗
效确切 o但口服制剂的生物利用度极低是始终未能
解决的问题 ≈t  ∀为研究灯盏花乙素生物利用度差
的原因 o对灯盏花乙素在大鼠胆汁中的代谢产物进
行了研究 ≈u  ∀结果发现 o大鼠口服灯盏花乙素后 o
被肠道微生物水解成苷元 o吸收后在体内发生甲基
化和葡萄糖醛酸化 o生成苷元的 y位甲基化产物和
各种葡萄糖醛酸代谢物 ∀通过灯盏花乙素的代谢研
究 o证实了灯盏花乙素肠道内难以直接吸收 o生物利
用度低 ∀灯盏花乙素被肠道菌群水解为中间产物灯
盏花乙素苷元 o是其主要的吸收形式 ∀最近在对灯
盏花乙素苷元代谢产物的研究中发现 o灯盏花乙素
苷元在体内易被葡萄糖醛酸化 o主要转化成灯盏花
注射剂的有效成分灯盏花乙素 ∀
鉴于灯盏花乙素为中药灯盏花制剂的有效成
分 o且为灯盏花乙素苷元的主要代谢产物 o采用灯盏
花乙素作为定量检测的标准 ≈v  o建立了 ‹°≤ 2∞≤⁄
测定胆汁中灯盏花乙素的方法 o对 ≥⁄大鼠灌胃给
药灯盏花乙素苷元后的胆汁排泄进行了研究 ∀
1 材料
111 仪器与试剂 高效液相 2电化学系统 o≤ p
ts„泵 !≤²∏¯²¦«¨ °¶电化学检测器 !xsts„型分析
#stzt#
第 vt卷第 us期
ussy年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯1vtoŒ¶¶∏¨ us
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电极 !xsus型保护电极 k美国惠泽公司 lo依立特色
谱工作站 k大连依立特公司 l~±p |st涡旋混合器
k海门市其林贝尔仪器制造有限公司 l∀ …ƒ÷ p {s
型台式高速离心机 k白杨离心机厂 l∀
灯盏花乙素及其苷元对照品 k含量  |{h o承德
医学院中药研究所李守拙研究员惠赠 l~灌胃给药灯
盏花乙素苷元样品含量大于 {sh ∀甲醇 k色谱纯 l∀
112 动物 y只健康 ≥⁄雄性大鼠 o北京大学医学
部动物中心提供 o雄性 okt||1z ? u1tl ªo实验前 o大
鼠禁食 tu «o自由饮水 ∀
2 方法与结果
211 对照品溶液的配置 精密称取灯盏花乙素对
照品适量 o加甲醇溶解并制成 t °ª# °pt的灯盏花
乙素甲醇溶液 ∀
212 胆汁样品处理方法 取分离得到的胆汁样品
uss ˏo加入甲醇 wss ˏo强烈涡漩混合 ts °¬±后 o
x sss µ# °¬±pt离心 tx °¬±o取上清液加 s1th磷酸
us ˏo混匀 o以 s1uu Λ°针式过滤器过滤 o滤液待
分析 ∀
213 色谱条件 反相 ’⁄≥ 柱 °µ²±·²¶¬¯ ≤t{
kw1y °° ≅ uxs °°ox Λ° lo流动相甲醇 2xs °°²¯#
pt磷酸二氢钠缓冲液 2四氢呋喃 kwsΒysΒtso磷酸调
节 ³‹ u1ylo流速 t1s °# °¬±pt o分析电压 tss
°∂ o室温 o进样量 ts1s ˏ∀
214 专属性试验 取空白胆汁按生物样品的处理
和测定方法操作 o其色谱图见图 t∀由图可知 o在选
定色谱条件下 o灯盏花乙素与胆汁中的内源性物质
分离良好 ∀灯盏花乙素的保留时间约为 ts °¬±∀
图 t 大鼠胆汁 ‹ °≤图
1空白胆汁 ~…1给药 ts «后胆汁 ~≤1空白胆汁加灯盏花乙素对照品
ku1ss Λª# °pt l~t1灯盏花乙素
215 标准曲线与标准生物样品的制备 取空白胆
汁加入灯盏花乙素贮备液适量 o配制成含灯盏花乙
素 tss Λª# °pt的胆汁溶液 o再以空白胆汁稀释配
制成 s1yzou1ssov1vvoy1yzots1ss Λª# °pt的系
列标准溶液 o照生物处理方法操作 o每个样品进样 v
次 o记录色谱图 !样品峰面积 ∀以峰面积为横坐标 o
灯盏花乙素质量浓度为纵坐标进行回归 o得回归方
程 ∀ Ψ €s1sss wΞ ns1tvv v, ρ€ s1||| {∀结果表明
胆汁中灯盏花乙素在 s1yz ∗ ts1ss Λª# °pt呈良
好的线性关系 ∀
216 精密度试验 在 t §内或日间不同时间点 o在
标准曲线范围内选择高 k接近标准曲线上限 l!中和
低 k接近最低检测限 lv种灯盏花乙素 o以空白胆汁
配制成相应对照溶液 o按照生物样品处理和分析方
法测定样品 o日间精密度的 • ≥⁄[ w1zsh o日内精密
度的 • ≥⁄[ t1{{h k表 tl∀
表 t 胆汁中灯盏花乙素测定方法的日内与日间精密度
胆汁中量
rΛª# °pt
日内 日间
检测量
rΛª# °pt
• ≥⁄
rh
检测量
rΛª# °pt
• ≥⁄
rh
sqyz sqyu ? sqst tqyt sqyt ? sqsu vqu{
vqvv vqs| ? sqsy tq{{ vqt| ? sqtx wqzs
tsqss |q{t ? sqtw tqwv |qzv ? sqt{ tq{x
217 回收率试验 以空白胆汁配制高 !中 !低 v种
灯盏花乙素样品溶液各 v份 ∀同时配制相同的以检
测流动相为基质的对照溶液 ∀将相同的样品在同一
天 o按照生物样品处理方法处理分析 o每份样品进样
v次 o对照样品溶液的测定值与对照溶液的测定值
相比作为分析方法的提取回收率 ∀平均回收率为
ktst1vx ? {1wtlh k表 ul∀
表 u 灯盏花乙素胆汁样品回收率
胆汁中量
rΛª# °pt
检测量
rΛª# °pt
回收率
rh
平均值
rh
• ≥⁄
rh
sqyz sqzw ? sqsv ttsq|w ? wqv| vq|y
vqvv vqtz ? sqsy |xquu ? tq|v tstqvx ? {qwt uqsv
tsqss |qz{ ? sqsw |zq{{ ? sqww sqwx
218 动物实验方法 乙醚麻醉大鼠 o打开腹腔 o以
聚乙烯管做胆总管插管 o引流胆汁 o待稳定后 o灯盏
花乙素苷元按 uss1s °ª# ®ªpt体重灌胃给药 o口服
后 u1sow1soy1so{1sots1sotu1s «累积取胆汁置离
心管中 o磷酸调 ³‹v1s∀按 /胆汁样品的处理 0操
作 o测定各胆汁样品中灯盏花乙素的浓度 ∀
219 胆汁中药物含量计算 胆汁中灯盏花乙素按
/标准曲线法 0定量 o其药物含量 2时间见图 u∀
#ttzt#
第 vt卷第 us期
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中 国 中 药 杂 志
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图 u 大鼠灌胃灯盏花乙素苷元 uss1s °ª# ®ªpt后的
胆汁药物含量 2时间 kν € yl
3 讨论
首次对大鼠灌胃给药灯盏花乙素苷元后的胆汁
排泄物进行了研究 o建立了大鼠胆汁中灯盏花乙素
的高效液相 2电化学测定方法 ∀测定了灌胃给药灯
盏花乙素苷元 uss °ª# ®ªpt后不同时间内大鼠胆
汁中灯盏花乙素的含量 o胆汁中灯盏花乙素的药物
排泄量前 u «最高 o{ «内随时间推移逐渐下降 o但
在 { ∗ tu «浓度有所增加 o这可能是由于灯盏花乙
素苷元在肠道不同部位有所吸收 o入血时间上有差
异所至 ∀
灯盏花乙素苷元 us °ª# ®ªpt的药物动力学特
点是血浆中无原形药检出 o只有代谢产物灯盏花乙
素 o即灯盏花乙素苷元在此剂量下完全被代谢 ∀ uss

°ª# ®ªpt剂量下的特点是在大鼠血浆中能同时检
测出原形药灯盏花乙素苷元和代谢产物灯盏花乙
素 o且血药浓度几乎相同 o但此时胆汁中无原形药排
出 o只有代谢产物灯盏花乙素 ∀曾研究了灯盏花乙
素的药物动力学 o其血药浓度在 t1s «达到第 t个
高峰 o在 x1s «形成第 u个高峰 ∀胆汁中灯盏花乙
素的药物含量变化表明 o灯盏花乙素血药浓度的双
峰现象是由药物的肠肝循环引起 ∀即灌胃给药后 o
灯盏花乙素先在肠内水解 o以其苷元的形式被吸收 o
在体内被葡萄糖醛酸化 o形成其代谢产物灯盏花乙
素的第 t个血药浓度高峰 ~灯盏花乙素经胆汁排至
小肠 o被肠内微生物水解成苷元 o再次被吸收后 o在
z位羟基上发生葡萄糖醛酸化 o形成灯盏花乙素的
第 u个血药浓度高峰 ∀
≈参考文献  
≈t  葛庆华 o周 臻 o支晓瑾 o等 1灯盏花乙素在犬体内的药动学
和绝对生物利用度研究 ≈ 1 中国医药工业杂志 o ussvo vw
ktul} yt{1
≈u  «¤±ªo ≤«¨ ±  o ¬≥ 1 ≥·∏§¼ ²± ° ·¨¤¥²¯¬¶° ²©¶¦∏·¨¯ ¤¯µ¬±
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≈v  刘昌孝 1实用药物动力学 ≈  1北京 }中国医药科技出版社 o
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k¤§­∏¶·¨§¥¼ ³«²¶³«²µ¬¦¤¦¬§·²³‹ u1ylo ¤±§·¨·µ¤«¼§µ²©∏µ¤± kwsΒysΒtslo ·«¨ ©¯²º µ¤·¨º¤¶t1s °# °¬±pt ~ ·«¨ ³²·¨±·¬¤¯ ¨¯ ¦¨·µ²§¨
√²¯·¤ª¨ º¤¶tss °√1 Ρ εσυλτ: ≤²±¦¨±·µ¤·¬²± ³µ²©¬¯¨ ²©¶¦∏·¨¯ ¤¯µ¬± ¬± µ¤·¥¬¯¨ º¤¶¶«²º± ¬± ·«¬¶³¤³¨ µ¤©·¨µ²µ¤¯ ¤§°¬±¬¶·µ¤·¬²± ²©¶¦∏·¨¯ ¤¯2
µ¨¬±1 Χονχλυσιον: ’± ¼¯ ¶¦∏·¨¯ ¤¯µ¬± º¤¶§¨ ·¨¦·¨§¬± µ¤·¥¬¯¨ o º«¬¯¨ ¥²·«²©¶¦∏·¨¯ ¤¯µ¬± ¤±§¶¦∏·¨¯ ¤¯µ¨¬± º µ¨¨ §¨ ·¨¦·¨§¬± µ¤·³¯¤¶°¤1
[ Κεψ ωορδσ] ¶¦∏·¨¯ ¤¯µ¬±~ ‹°≤ 2∞≤⁄~ ³«¤µ°¤¦²®¬± ·¨¬¦¶~ ¥¬¯¨ ¬¨¦µ¨·¬²±
≈责任编辑 刘  
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