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Structural Features of a Neutral Heteropolysaccharide CPB-4 from Cynanchum paniculatum

徐长卿中多糖CPB-4的化学结构研究



全 文 :徐长卿中多糖 ≤°…2w的化学结构研究
王顺春 o鲍幸峰 o方积年
k中国科学院 上海生命科学研究院 上海药物研究所 o上海 usssvtl
≈摘要  目的 }研究徐长卿中多糖 ≤°…2w的化学结构 ∀方法 }采用糖组成分析 o甲基化分析 o部分酸水解和tv ≤
‘ • 光谱等方法测定 ≤°…2w的糖组成 o连接方式 o主链和支链结构及分枝点状况 ∀结果 }≤°…2w由 Λ2阿拉伯糖 oΛ2
木糖 oΛ2鼠李糖和 ∆2半乳糖 € s q{Βs quΒs quΒt qs组成 o主链由 t ox连接的半乳呋喃聚糖组成 ~侧链分枝主要位于半
乳糖的 y位 o另有少量分枝位于半乳糖的 u位 ~分枝的组成包括木糖端基 !阿拉伯寡糖及由阿拉伯糖 !鼠李糖和半乳
糖组成的寡糖链 ∀结论 }≤°…2w为一新颖的中性杂多糖 ∀
≈关键词  徐长卿 ~中性杂多糖 ~化学结构
≈中图分类号  • u{w qt ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukussulsu2stu{2sv
常用中药徐长卿为萝摩科草本植物 o入药部位
为其根及根茎 ∀具有温经活络 !祛风止痛之功效 ∀
药理研究结果表明 o具有解热镇痛 !改善心肌缺血 !
降血脂 !抗氧化 !抗菌消炎等作用≈t  ∀已报道的低分
子量成分包括氨基酸 !牡丹酚 !黄酮及多种苷
元≈u ∗ w  ∀我们前研究表明徐长卿中含有多种具有不
同活性的多糖组分≈x ∗ {  o本文再报道 t种新颖的中
性杂多糖 ≤°…2w的化学结构研究 ∀
1 材料与仪器
徐长卿kw ®ªlt||y年购自上海药材总公司 o鉴
定为 Χψνανχηυ µ πανιχυλατυ µ k…∏±ª¨ l Ž¬·¤ª¤º¤∀
…Œ’2• „⁄ tvvs 型高效液相仪 o≥«²§¨ ¬ Ž≥2{sx
柱 o≥«²§¨ ¬ • Œ ≥∞2zt ⁄¨ ·¨¦·²µ示差检测仪 ∀ Ž…柱
色谱系统 oŽ… uuts记录仪 ∀ ° µ¨®¬±2∞¯ ° µ¨x||…型
红外光谱仪 o≥«¬°¤§½∏2|„ 型 Š≤ 仪 o’ ∂2uux 填充
柱 o„≥≤ ’ ⁄Œ°2t{t型旋光仪 ∀ Š≤2  ≥为 ƒ¬±±¬ª¤±
 ⁄{ss ⁄…2x  o≥∞2xw 交链毛细管玻璃柱 ∀ …µ∏®¨ µ
„ 2wss型 ‘ • 仪 ∀
单糖标准品 o⁄∞„∞2≥ ³¨«¤µ²¶¨ ƒƒ 离子交换剂 o
≥ ³¨«¤¦µ¼¯ ≥2vss凝胶 o≥ ³¨«¤§¨ ¬ Š2ux凝胶 o⁄¨ ¬·µ¤±
× 系列标准品均为 °«¤µ°¤¦¬¤出品 ∀ ‘¤…‹w 为
„ §¯µ¬¦«出品 ∀三氟乙酸 o⁄ ≥’ 及纤维素色谱板为
ƒ ∏¯®¤出品 ∀试剂为国产 „ • 级 ∀
2 方法和结果
≈收稿日期  usst2sv2sx
≈作者通讯  方积年 电话 }ksutlywvtt{vv2yst 传真 }ksutl
ywvzsuy| ∞2°¤¬¯}­±©¤±ªƒ °¤¬¯q¶«¦±¦q¤¦q¦±µ¨¦²µ§¨µ
2 q1 提取分离
徐长卿根及根茎粉碎 o|x h 工业乙醇脱脂 ots
倍体积沸水提取 w «k重复 v次l o过滤 o残渣再 ts倍
体积 x h ‘¤’ ‹ 于 w ε 提取 tu «∀清液稀盐酸中和 o
透析 o未透过部分减压浓缩 ow倍体积乙醇沉淀 o静
置 o离心 o乙醇和丙酮依次洗沉淀得固体 ows ε 减压
干燥 o得碱提粗多糖 ≤°…∀ ≤°…经 ⁄∞„∞2≥ ³¨«¤µ²¶¨
ƒƒ离子交换柱色谱 o‹u’2u °²¯ #p t ‘¤≤¯梯度洗
脱 o硫酸2苯酚法检测 o第 w 个洗脱部位再经
≥ ³¨«¤¦µ¼¯ ≥2vss凝胶柱反复色谱 os qu °²¯#pt‘¤≤¯
洗脱 o透析 o干燥后得 ≤°…2w ∀
≤°…2w为浅黄色粉末 o紫外扫描无 u{s ±°的蛋
白质特征吸收峰 o不含多肽或蛋白质 ∀水和二甲亚
砜中溶解度不大 o不溶于其他常用溶剂 ∀比旋光度
≈Α ⁄ p vv q| βks qtw o‹u ’l ∀
2 q2 纯度及分子量的测定≈| 
≤°…2w和 ×2系列葡聚糖标准品以 s qsst °²¯ #
pt‘¤’ ‹ 配制成 u °ª#°p t溶液 o分别进行 ‹°≤
色谱k柱为 Ž≥2{sx ¶∏ª¤µ¦²¯∏°±l ∀根据洗脱时间确
定分子量 o由峰型判断纯度 ∀
‹°≤图谱呈现为单一对称尖峰 o为均一多糖
组分 ∀由标准曲线确定其分子量大于 tss万 ∀
2 q3 糖组成分析≈ts 
x °ª ≤°…2w ou °²¯#pt三氟乙酸完全水解 o部
分进行纤维素板色谱 o乙酸乙酯2吡啶2冰醋酸2水kxΒ
xΒtΒvl展层 o苯胺2邻苯二甲酸显色 ∀各种单糖标准
品作对照 ∀另部分硼氢化钠还原 o乙酰化后进行气
#{ut#
第 uz卷第 u期
ussu年 u月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o‘²qu
ƒ ¥¨qoussu
相分析 ∀结果 ≤°…2w含 w种单糖 }Λ2阿拉伯糖 oΛ2
木糖 oΛ2鼠李糖和 ∆2半乳糖 ~乙酰化衍生物气相分
析结果表明 o各单糖比见表 t ∀
表 t ≤°…2w o≤°…2w2t及 ≤°…2w2u的组成比
≤°…2w ≤°…2w2t ≤°…2w2u
Λ2„µ¤ s q{ t qs
Λ2÷¼¯ s qu
Λ2• «¤ s qu t qs
∆2Š¤¯ t qs t qs u qs
2 q4 甲基化分析≈tt 
x °ª≤°…2w充分干燥 o溶于 ⁄ ≥’ o按 ‘¨ §¨¶方
法进行甲基化 oŒ• 检测无羟基后水解 o还原 o乙酰化
后进行 Š≤2  ≥分析k表 ul ∀ Š≤2  ≥无法确定半乳
糖的环型 o另相比于 Š≤ 分析甲基化分析结果鼠李
糖含量稍有减少 o这可能是由于鼠李糖基处于多糖
链的外周 o在甲基化的强碱条件下发生了部分降解
与脱落≈tu  ∀
表 u 多糖 ≤°…2w的甲基化分析结果
部分甲基化的糖基 摩尔比 糖基连接方式
u ov ox2×µ¬2 Ο2  2¨„µ¤© us q{ „µ¤©kt ψ
u ov2⁄¬2 Ο2  2¨„µ¤© t| q| ψ xl„µ¤©kt ψ
v ow2⁄¬2 Ο2  2¨• «¤³ x qt ψ ul• «¤³kt ψ
u ov ow2×µ¬2 Ο2  2¨÷¼¯ ³ { q{ ÷¼¯ ³kt ψ
u ov2⁄¬2’2  2¨Š¤¯ ut q| ψ x oylŠ¤¯³kt ψ ²µ ψ w oylŠ¤¯³kt ψ
v oy2⁄¬2’2  2¨Š¤¯ y qy ψ u oxlŠ¤¯©kt ψ ²µ ψ u owlŠ¤¯³kt ψ
u ov oy2×µ¬2’2  2¨Š¤¯ ty q{ ψ xlŠ¤¯©kt ψ ²µ ψ xlŠ¤¯³kt ψ
2 q5 部分酸水解
tss °ª ≤°…2w os qsx °²¯ #p t三氟乙酸于 tss
ε 水解 t «o透析 ∀
袋内部分用 ≥ ³¨«¤¦µ¼¯ ≥2vss凝胶柱纯化 o得次
级多糖组分k≤°…2w2tl o分子量 zs万 o由于 ≤°…2w2t
分子量仍很大 o故可推定它和原多糖 ≤°…2w具有相
同的主链结构 ∀糖组成分析表明 ≤°…2w2t仅含有半
乳糖 o因此其主链结构只能为半乳聚糖 o同时按前面
的推定可知 ≤°…2w的主链也应为半乳聚糖 ∀
袋外部分用 ≥ ³¨«¤§¨ ¬ Š2ux凝胶柱纯化 o得 t个
寡糖组分k≤°…2w2ul和 t个混合的单糖组分 o≤°…2w2
u的单糖组成为 Λ2阿拉伯糖 oΛ2鼠李糖和 ∆2半乳
糖 o表明 ≤°…2w中含有由以上单糖组成的片段 o考虑
到部分酸水解后 ≤°…2w 的主链未断 o则寡糖片段
≤°…2w2u应位于原多糖的支链上 ∀
2 q6 tv≤ ‘ • k⁄u’l分析
异头碳区只显示 u个信号k∆ ts{ q|| ots| qxvl o
归属为含量较高的阿拉伯糖基和半乳糖基 o为 Α2 Λ2
„µ¤©和 Β2 ∆2Š¤¯©构型≈tv  ∀∆}ty qzsk鼠李糖的甲基
峰l o{y qtxkΒ2 ∆2Š¤¯©o≤2ul o{v q|{ ∗ {u qtxk多重峰 o
Α2 Λ2„µ¤©和 Β2 ∆2Š¤¯©o≤2u owl oz{ qyykΑ2 Λ2„µ¤©和 Β2
∆2Š¤¯©o≤2vl oy| qyyk宽峰 oΑ2 Λ2„µ¤©和 Β2 ∆2Š¤¯©o≤2
x oyl oyv quxkΑ2 Λ2„µ¤©和 Β2 ∆2Š¤¯©o≤2x oyl≈tw otx  ∀
3 讨论
综合分析 o可确定 ≤°…2w的结构为主链由 t ox
连接的 Β2 ∆2Š¤¯©组成 o分枝点位于半乳糖的 ≤2y和
≤2u上 o侧链分枝含有端基木糖 o端基阿拉伯糖 o阿
拉伯糖链 o和半乳糖 !鼠李糖及阿拉伯糖组成的糖
链 o详细的分支结构研究正在深入进行中 ∀初步的
免疫活性筛选表明该多糖对以 ≤²±„或 °≥诱导的
× o…2淋巴细胞增殖有一定的抑制作用 ∀
≈参考文献 
≈t  江熟平 o陈永学 q徐长卿及丹皮酚的应用与研究进展 q中国中
药杂志 ot||w ot|kxl }vtt q
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k|l }xzy q
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中国药科大学学报 ot|{| ouskvl }tyz q
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学学报 ot|{| ouwkzl }xvu q
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≈tw  张惟杰 q糖复合物生化研究技术 q第二版 q杭州 }浙江大学出版
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第 uz卷第 u期
ussu年 u月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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Στρυχτυραλ Φεατυρεσ οφ α Νευτραλ Ηετεροπολψσαχχηαριδε ΧΠΒ2w
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶·∏§¼ ·«¨ ¦«¨ °¬¦¤¯ ©¨ ¤·∏µ¨¶²© ≤°…2w o¤ «¨ ·¨µ²³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ²¥·¤¬±¨ §©µ²° Χψνανχηυ µ πανιχυλα2
τυ µ qΜετηοδ : ≥∏ª¤µ¦²°³²¶¬·¬²± ¤±¤¯¼¶¬¶o ° ·¨«¼¯ ¤·¬²± ¤±¤¯¼¶¬¶o³¤µ·¬¤¯ «¼§µ²¯¼¶¬¶¤±§¦¤µ¥²±2tv ±∏¦¯ ¤¨µ °¤ª±¨ ·¬¦µ¨¶²±¤±¦¨ º µ¨¨
∏¶¨§·² §¨·¨µ°¬±¨ ·«¨ ¶∏ª¤µ¦²°³²¶¬·¬²±o ¬¯±®¤ª¨¶o °¤¬±¦«¤¬±o¥µ¤±¦«¦«¤¬±¶¤±§¥µ¤±¦«¬±ª³²¬±·¶qΡεσυλτ :≤°…2w¬¶¦²°³²¶¨§²© Λ2
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µ¨²³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ©µ²° Χ. πανιχυλατυ µ q
[ Κεψ ωορδσ] Χψνανχηυ µ πανιχυλατυ µ ~±¨ ∏·µ¤¯ «¨ ·¨µ²³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ~¦«¨ °¬¦¤¯ ¶·µ∏¦·∏µ¨
≈责任编辑 刘  
箭秆风的化学成分研究
乔春峰t o郝小江u o王峥涛t o徐珞珊t
kt q中国药科大学 生药学研究室 o江苏 南京 utssv{ ~
u q中国科学院 昆明植物研究所 植物化学开放研究实验室 o云南 昆明 yxsuswl
≈摘要  目的 }研究箭秆风的化学成分 ∀方法 }溶剂提取 o大孔树脂 !硅胶柱色谱分离 o理化性质和光谱数据鉴
定结构 ∀结果 }分离鉴定了 w个化合物 o为山柰酚2v2 Ο2葡萄糖醛酸苷ktl o二十二烷酸kul ov2羟基2豆甾2x2烯2z2酮
kvl和 Β2谷甾醇kwl ∀结论 }均为首次从该植物中分得 ∀
≈关键词  箭秆风 ~化学成分
≈中图分类号  • u{w qt ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukussulsu2stvs2su
箭秆风系姜科山姜属植物 o广泛分布于我国广
东 !广西 !四川等华南和西南地区 o资源丰富 o其果实
在部分地区作为土砂仁≈t 或伪充砂仁≈u 入药 o根茎
和全草也在民间药用 o用于治疗胃脘疼痛 o跌打损伤
等≈v  ∀有关箭秆风化学成分的研究报道 o只见其果
≈收稿日期  usst2su2sy
≈作者通讯  王峥涛 电话 }ksuxlxvs|yv| 传真 }ksuxl
xvs|yv| ∞2°¤¬¯} º¤±ª½«·ƒ «²·°¤¯ q¦²°
实挥发油成分的分析≈w  o为此我们对采于四川峨嵋
的箭秆风根茎进行了初步的化学成分研究 o从中分
离鉴定了 w个化合物 o分别为山柰酚2v2 Ο2葡萄糖醛
酸苷ktl o二十二烷酸kul ov2羟基2豆甾2x2烯2z2酮kvl
和 Β2谷甾醇kwl o均为首次从该植物中分得 ∀
1 仪器与材料
Ž²©¯ µ¨显微熔点测定仪k未校正l o° µ¨®¬±2∞¯ ° µ¨
xzz型红外光谱仪kŽ…µ压片l o…µ∏®¨ µ2„ 2wss型核
磁共振仪k ×  ≥ 内标l o∂ Š2„∏·²¶³¨¦2vsss 型质谱
#svt#
第 uz卷第 u期
ussu年 u月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o‘²qu
ƒ ¥¨qoussu