全 文 ：西洋参种子分离真菌的致病性测定及
杀菌剂对种传病原真菌的生物测定
张国珍 3 o张树峰
k中国农业大学 植物病理学系 o北京 tsss|w l
≈摘要  目的 }测定西洋参种子分离真菌的致病性 o并筛选对西洋参种传病原真菌有效的新型杀菌剂 ∀方法 }
幼苗期接种测定对西洋参的致病性 o平皿菌丝生长抑制法进行杀菌剂的生物测定 ∀结果 }镰刀菌 Φυσαριυµ ¶³qx号
菌株和链格孢菌 Αλτερναριᶳqtv号菌株对西洋参幼苗能致病 ∀v种杀菌剂中 o施保克对 u种致病菌的抑制作用最
强 o多菌灵次之 o适乐时的抑菌作用相对弱一些 ∀结论 }施保克和适乐时可作为有效的候选药剂用于西洋参种子的
药剂处理或种子包衣 o替代生产上已使用多年的多菌灵 o用来防治西洋参苗期病害 ∀
≈关键词  西洋参 ~种传真菌 ~致病性 ~杀菌剂 ~生物测定
≈中图分类号  ≥ xyz ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswlsu2stv{2sw
西洋参种子在发育过程中常受到人参链格孢等
病原真菌的侵染 o致使种子带菌 ~在种子贮藏期间也
会被一些腐生真菌污染 o引起种子霉变腐烂 ∀西洋
参是一种经济价值很高的五加科药用植物 o因种子
带菌引发的苗期病害给西洋参的生产造成的经济损
失要大于一般的农作物 ∀因此 o对西洋参种子带菌
造成的危害应该给予高度的重视 ∀
作者曾经对东北和北京地区西洋参种子的带菌
情况进行了检测 o结果发现 o西洋参种子的带菌率较
高 o种胚带菌率为 ws h ∗ tss h o携带真菌类群有镰
刀菌属 Φυσαριυµ ¶³³q!链格孢属 Αλτερναρια ¶³³q等多
种真菌≈t  ∀但种子上分离到的优势真菌类群中 o究
竟哪些是种传病原真菌 o能够对西洋参幼苗致病尚
不明确 ∀作者对西洋参种子上分离出的 u个优势真
菌类群进行了苗期的致病性测定 o以明确对西洋参
致病的真菌种类 o为筛选供种子处理用的有效药剂
提供靶标菌株 ∀多菌灵作为一种比较广谱的苯并咪
唑类杀菌剂在生产上已经使用多年 ∀已检测到多种
植物病原菌对多菌灵的抗药性菌株 o如小麦赤霉病
菌 Φυσαριυµ γραµινεαρυµ 对多菌灵已出现高水平抗
≈收稿日期  ussv2st2us
≈基金项目  中药现代化研究与产业化开发项目k||2|u|2sv2
s|l
≈通讯作者  3张国珍 oר¯ }kstslyu{|vsuz o∞2°¤¬¯}½«¤±ª¦¤∏ƒ ¼¤2
«²²q¦²° q¦±
药性≈u  ∀虽然尚未见西洋参上的病原菌产生抗药性
的报道 o筛选新型高效安全的杀菌剂是生产上的迫
切需要 ∀而对种子进行药剂处理是解决种子带菌和
防治种传病害的有效途径 ∀本文以测定的 u种致病
菌株为靶标菌对 v种杀菌剂进行了室内生物测定 o
旨在筛选出对西洋参种子的致病菌具有较高抑菌活
性的新型杀菌剂 o为生产上进行种子的药剂处理或
种子包衣提供依据 o从而达到有效地控制苗期病害
的目的 ∀
1 材料与方法
1 q1 材料
供试真菌 从西洋参 Παναξ θυινθυεφολιυµ q种
子上分离到的优势真菌类群中选择其中的 u类 o镰
刀菌属 Φυσαριυµ ¶³q和链格孢属 Αλτερναρια ¶³q各 u
个菌株 ∀供试西洋参种子由天惠药业股份有限公司
提供 ∀
供试药剂 |z h多菌灵原药 o|z h施保克原药 o
u qx h适乐时悬浮种衣剂 o由中国农业大学种衣剂研
究中心提供 ∀
1 q2 方法 接种体的制备和致病性测定参照5植
病研究方法6≈v  ∀
1 q2 q1 接种体的培养和制备 玉米砂培养基的制
作 }玉米粉 t sss ªo细砂 t sss ªo水 t xss °o混合后
分装三角瓶中 otut ε 高压蒸气灭菌 t «∀将待测真
菌接种在玉米砂培养基上 oux ε 下培养 o每天摇动 t
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第 u|卷第 u期
ussw年 u月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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次 ∀菌丝和分生孢子长满培养基后准备接种 ∀
1 q2 q2 种子分离真菌的致病性测定 将培养好的
接种体与花盆中的灭菌土混匀k每花盆接 w ªo花盆
直径 ts ¦°l o选择健康饱满并裂口的西洋参种子播
种在已接菌的花盆土中 o每盆播种 ts粒种子 o每个
菌株接 v盆 ∀以不接菌的为对照 ∀播种后常规管
理 ∀注意观察出苗和幼苗生长情况 o记录发病和死
苗数 ∀
1 q2 q3 杀菌剂的生物测定 将致病性测定中测出
的强致病性的菌株作为杀菌剂药效测定的作用对
象 ∀先在 °⁄„平板培养基上培养 z §左右 o待用 ∀
以甲醇为溶剂 o将供试药剂分别配制成浓度为
x sss °ª#pt的母液k以有效成分计算l o按不同比
例加入到融化好的 °⁄„ 培养基中 o倒平板 o制成一
系列浓度的含药培养基 ∀用直径 w °°的打孔器在
培养好的菌落上打孔 o每一含药平板中央接一块菌
饼 o置于 ux ε 培养箱中培养 o定期测量菌落直径 ∀
以加溶剂和等量无菌水的处理为溶剂对照和空白对
照 o每处理重复 v皿 ∀计算药剂对菌丝生长的抑制
百分率 o将抑制百分率换算成几率值 o药剂浓度换算
成对数 o以浓度对数为横坐标 o几率值为纵坐标绘制
杀菌剂对病原菌菌丝生长抑制作用的毒力曲线 o最
后求出回归方程 !相关系数并计算 Œ≤xs ∀
2 结果与分析
2 q1 致病性测定结果
供试的 w个菌株对西洋参幼苗的致病性存在明
显的差异 ∀其中镰刀菌 x号菌株对西洋参苗具有很
强的致病性 o接菌的西洋参出苗后 u §就有半数的
幼苗萎蔫 o第 w天幼苗全部死亡 ∀链格孢菌 tv号菌
株的致病性比镰刀菌 x号菌株弱 o接菌的西洋参出
苗后第 y天有 yv qv h的幼苗死亡 ∀另外 u个菌株致
病性很弱或基本无致病性 o结果见表 t ∀
表 t 西洋参种子分离真菌对
西洋参幼苗的致病性测定结果
测定菌株
出苗后 u §
死苗
数r株
死苗
率r h
出苗后 w §
死苗
数r株
死苗
率r h
出苗后 y §
死苗
数r株
死苗
率r h
镰刀菌 x号 ty xv qv vs tss
镰刀菌 v号 t v qv u y qz v ts qs
链格孢 tv号 x ty qz tu ws t| yv qv
链格孢 z号 t v qv u y qz u y qz
对照 s s t v qv u y qz
注 }接菌株数均为 vs株
2 q2 杀菌剂对西洋参致病菌的生物测定
在致病性测定的基础上 o选择其中对西洋参致
病性强的 u种真菌即镰刀菌 x号菌株和链格孢菌 tv
号菌株进行了杀菌剂的室内生物测定 ∀
2 q2 q1 杀菌剂对镰刀菌菌丝生长的抑制作用 3
种杀菌剂中 o施保克对镰刀菌菌丝生长的抑制作用
最强 o在低浓度下就表现出了较强的抑制作用 o如在
浓度为 s qv °ª#pt时对菌丝生长的抑制率为 zz h o
而多菌灵和适乐时对镰刀菌菌丝生长的抑制率分别
为 vs h和 uz h ∀施保克对镰刀菌菌丝生长的Œ≤xs最
低 o仅为s qs|wu°ª#pt o多菌灵和适乐时分别为
s qwty ot qvty t °ª#ptk图 tl ∀
2 q2 q2 杀菌剂对链格孢菌菌丝生长的抑制作用 3
种杀菌剂对链格孢菌菌丝生长的抑制作用测定结果
表明 o同样是施保克的抑制作用最强 o其次是多菌灵
和适乐时 ∀在浓度 s qx °ª#pt时施保克对链格孢
菌菌丝生长的抑制率为 yv h o而多菌灵和适乐时的
抑制率分别为 ux h和 us h ∀施保克 !多菌灵和适乐
时对链格孢菌菌丝生长的 Œ≤xs分别是 s qwwu | ot qzxy
y和 w q{{t y °ª#ptk图 tl ∀
综合 v种杀菌剂对 u种致病菌的抑制作用来
看 ov种杀菌剂对 u种致病菌菌丝生长均有较强的
抑制作用 o且抑制作用的强弱表现趋势是一致的 o即
施保克对 u种致病菌的作用最强 o多菌灵次之 o适乐
时的抑制作用相对弱一些 ∀但同一种杀菌剂对 u种
致病菌的抑制作用强弱不同 o表现为每种杀菌剂对
镰刀菌的 Œ≤xs值均低于对链格孢菌的 Œ≤xs值 ∀例如
施保克对镰刀菌的Œ≤xs为 s qs|w u °ª#pt o对链格孢
菌的 Œ≤xs为 s qwwu | °ª#pt o说明试验中所用的 u种
致病菌对同一种杀菌剂的敏感性有所不同 ∀
3 结论与讨论
西洋参种子的带菌量和带菌率比较高 o经对分
离优势真菌的致病性测定 o其中一种镰刀菌对西洋
参幼苗有很强的致病性 o一种链格孢菌也有较强的
致病性 o它们可引起西洋参幼苗的枯萎和死亡 ∀施
保克是安万特作物科学公司k„√¨ ±·¬¶≤²qo·§ql开
发生产的新型咪唑类广谱杀菌剂 o通过种子处理对
禾谷类作物许多种传和土传真菌病害有较好的活
性≈w  ∀适乐时是先正达公司k≥¼±ª¨ ±·¤l新研制生产
的一种吡咯类非内吸性广谱杀菌剂 o种子处理剂主
要防治蔬菜和大田作物种传和土传病害≈w  ∀本试验
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图 t v种杀菌剂对 u种致病菌菌丝生长抑制作用的毒力曲线
„ q多菌灵对镰刀菌菌丝生长的抑制与浓度的关系 …q多菌灵对链格孢菌丝生长的抑制与浓度的关系
≤ q施保克对镰刀菌菌丝生长的抑制与浓度的关系 ⁄q施保克对链格孢菌丝生长的抑制与浓度的关系
∞q适乐时对镰刀菌菌丝生长的抑制与浓度的关系 ƒ q适乐时对链格孢菌丝生长的抑制与浓度的关系
的室内生物测定结果表明 o施保克对西洋参种子携
带的 u种致病菌有很强的抑制作用 o适乐时的抑菌
作用相对于施克保虽然弱一些 o但对镰刀菌的抑制
作用比较强 o多菌灵对 u种致病菌虽然也有较强的
抑制作用 o但由于它作为一种常规农药在生产上频
繁使用 o病原菌有可能产生了抗性 o生产上反映其防
治效果不太好 ∀因此 o施保克和适乐时 u种杀菌剂
可以作为有效的候选药剂供西洋参种子处理或种子
包衣使用 o替代使用多年的杀菌剂多菌灵 o用来防治
西洋参的苗期病害 ∀
≈参考文献 
≈t  张国珍 o张树峰 q东北和北京地区西洋参种子的带菌检测 q中
国中药杂志 oussu ouzk|l }yx{ q
≈u  周明国 o王建新 q禾谷镰孢菌对多菌灵的敏感性基线及抗药
性菌株的生物学性质研究 q植物病理学报 ousst ovtkwl }vyx q
≈v  方中达 q植病研究方法 q第 v版 q北京 }农业出版社 ot||{ q
≈w  刑 岩 o孟繁东 q最新进口农药使用技术 q沈阳 }辽宁科技出
版社 ousst qx q
Πατηογενιχιτψ οφ φυνγι ισολατεδ φροµ Αµεριχαν γινσενγ σεεδσ
ανδ βιοασσαψ οφ φυνγιχιδεσ αγαινστ τηε πατηογενιχ φυνγι
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«¤±ª Š∏²2½«¨ ±o«¤±ª≥«∏2©¨ ±ª
( ∆επαρτµεντ οφ Πλαντ Πατηολογψ, Χηινα Αγριχυλτυραλ Υνιϖερσιτψ, Βειϕινγ tsss|w , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε :⁄¨ ·¨¦··«¨ ³¤·«²ª¨ ±¬¦¬·¼ ²©©∏±ª¬¬¶²¯¤·¨§©µ²° „° µ¨¬¦¤± ª¬±¶¨±ª¶¨ §¨¶¤±§¶¨¯¨ ¦·±¨ º ©∏±ª¬¦¬§¨¶¤ª¤¬±¶··«¨
³¤·«²ª¨ ±¬¦¶¨ §¨2¥²µ±©∏±ª¬q Μετηοδ : ¬±²¦∏¯¤·¨·«¨ ¬¶²¯¤·¨¶·² „° µ¨¬¦¤± ª¬±¶¨±ª¶¨ §¨¯¬±ª¶·² §¨·¨¦··«¨ ³¤·«²ª¨ ±¬¦¬·¼o¤±§¶¨ §¨¨§·«¨ «¼³«¤¨
§¬¶®¤··«¨ ¦¨±·¨µ²©¤ª¤µ³¯¤·¨ ¦²±·¤¬±¬±ª¦«¨ °¬¦¤¯¶·²§²©∏±ª¬¦¬§¨ ¥¬²¤¶¶¤¼qΡεσυλτ : Φυσαριυµ σπ . ¬¶²¯¤·¨ x ¤±§ Αλτερναριασπ . ¬¶²¯¤·¨ tv «¤§
³¤·«²ª¨ ±¬¦¬·¼·² „° µ¨¬¦¤± ª¬±¶¨±ª¶¨ §¨¯¬±ªq≥³²µ·¤®«¤§·«¨ ¶·µ²±ª¨¶·¬±«¬¥¬·¬²±·²·«¨ ·º²¬¶²¯¤·¨¶o≤¤µ¥¨ ±§¤½¬° «¤§¥¨·¨µ¬±«¬¥¬·¬²± ¤±§≤ 2¨
¯¨ ¶·«¤§º ¤¨®¬±«¬¥¬·¬²±q Χονχλυσιον : ≥³²µ·¤®¤±§≤¨¯ ¶¨·¦²∏¯§¥¨ ∏¶¨§¤¶ ©¨©¬¦¤¦¬²∏¶¦¤±§¬§¤·¨ ¦«¨ °¬¦¤¯¶·²·µ¨¤·²µ¦²¤··«¨ „° µ¨¬¦¤± ª¬±2
¶¨±ª¶¨ §¨¶o¤±§¶∏¥¶·¬·∏·¨ ≤¤µ¥¨ ±§¤½¬° oº«¬¦««¤¶¥¨ ±¨ ∏¶¨§©²µ°¤±¼ ¼¨ ¤µ¶o·²¦²±·µ²¯ ·«¨ §¬¶¨¤¶¨¶²¦¦∏µµ¬±ª¬± ¶¨ §¨¯¬±ª¶·¤ª¨ ²© „° µ¨¬¦¤±
ª¬±¶¨±ªq
[ Κεψ ωορδσ] „° µ¨¬¦¤± ª¬±¶¨±ª~¶¨ §¨2¥²µ±©∏±ª¬~³¤·«²ª¨ ±¬¦¬·¼~©∏±ª¬¦¬§¨ ~¥¬²¤¶¶¤¼
≈责任编辑 袁桂京 
青银注射液指纹图谱实验研究
冯文宇 3 o邱华荣 o田 吉 o杜 军 o何 兵
k泸州医学院 o四川 泸州 ywysssl
≈摘要  目的 }建立青银注射液指纹图谱检测标准 ∀方法 }采用气相kŠ≤l !液相k‹°≤l色谱法 o分别检测青银
注射液所含挥发性及非挥发性化学成分 o以樟脑 !绿原酸对照品为参照物 o按/中药注射剂指纹图谱的技术要求0计
算相对保留时间及峰面积比值 o标定共有指纹峰 ∀结果 }在全面方法学研究的基础上 o先后对 tv批注射液供试品
进行检测分析 o从而建立了该注射液的 Š≤ o‹°≤ 指纹图谱 ∀结论 }Š≤ 指纹图 tx个共有峰 !‹°≤ 指纹图 y个共有
峰的相对保留时间及峰面积比值 o可作为青银注射液质量评价的重要依据之一 ∀
≈关键词  青银注射液 ~气相色谱 ~液相色谱 ~指纹图谱
≈中图分类号  • u{v qv ~• u{w qt ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswlsu2stwt2sy
青银注射液是/九五0国家科技攻关项目资助研
制的新药 o由中药青蒿 !金银花组方 o采用现代制备
工艺研制而成 ∀具有解热 !抗菌抗病毒作用 ∀临床
主要用于治疗上呼吸道感染 !肺炎等高热重症 ∀青
蒿主要有效成分为挥发油 o油中含樟脑 !桉油精 !蒿
酮等 ty个化学成分≈t  o本制剂采用/蒸馏法0提取挥
发油作为注射剂的中间体 ∀金银花主要有效成分为
绿原酸及异绿原酸 o亦含挥发性成分芳樟醇 !双花醇
等≈u  ∀本制剂主要提取非挥发性成分金银花提取物
k以绿原酸计l制备 o作者在对药材 !中间体及注射液
所含化学成分进行全面分析研究的基础上 o分别建
≈收稿日期  ussu2sw2us
≈基金项目  /九五0国家科技攻关项目k|y2|st2sx2susl
≈通讯作者  3冯文宇 oר¯ }ks{vslvtytyt|
立了青蒿 !金银花 o中间体青蒿油 !金银花提取物及
注射液的 Š≤ o‹°≤指纹图谱 o本实验着重介绍注射
剂指纹图的研究方法及其结果 ∀
1 试验材料
1 q1 样品 青银注射液 o共 tv批 o自制 ∀
药材 }青蒿 Αρτεµισια αννυα qo产地 }四川泸州
市 ~金银花 Λονιχεραϕαπονιχα ׫∏±¥qo产地 }山东平邑
县 ∀鉴定人 }税丕先 o主管药师 o泸州医学院药学院 ∀
1 q2 对照品 樟脑 !绿原酸 o均为中国药品生物制
品检定所提供 o批号分别为 }zwz p |tsw ~szxv p t||s ∀
1 q3 试剂 石油醚 !甲醇 !乙醇 !磷酸 o均为分析纯 ∀
2 仪器及色谱条件
2 q1 气相色谱 岛津 Š≤ p tw…oƒŒ⁄检测器 oŠ• p
z„³¯∏¶数据处理器 ∀石英毛细管柱 ≥∞ p vs os quu
°° ≅ ux ° ~柱温 }|s ε k保持 us °¬±l w ε #°¬±pt uss
#twt#
第 u|卷第 u期
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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