全 文 ：构菌发酵菌丝体化学成分的研究
康 洁 o陈若芸
k中国医学科学院 中国协和医科大学 药物研究所 o北京 tsssxsl
≈摘要 目的 }研究构菌 Φλαµ µ υλινα ϖελυτιπεσ发酵菌丝体的化学成分 ∀方法 }硅胶柱色谱分离纯化 o波谱法
进行结构鉴定 ∀结果 }分离得到 u个环二肽类化合物 !v个氨基酸及 u个核苷类化合物 o经理化及波谱数据分析鉴
定为 }环2 脯氨酸2亮氨酸≈¦¼¦¯²2k Ρ2³µ²2 Ρ2¯ ∏¨l ktl o环2 异亮氨酸2亮氨酸≈¦¼¦¯²2k Ρ2¬¶²¯ ∏¨2 Ρ2¯ ∏¨l kul o苯丙氨酸
k³«¨ ±¼¯ ¤¯¤±¬±¨ lkvl o丙氨酸k¤¯¤±¬±¨ lkwl o亮氨酸k¯ ∏¨¦¬±¨ lkxl o鸟嘌呤核苷kª∏¤±²¶¬±¨ lkyl o腺嘌呤核苷k¤§¨ ±²¶¬±¨ l
kzl ∀结论 }前 y个化合物为首次从构菌发酵菌丝体中得到 ∀
≈关键词 构菌 ~环二肽 ~核苷
≈中图分类号 u{w qt ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussvltt2tsv{2sv
构 菌 Φλαµ µ υλινα ϖελυτιπεσ k ≤∏µ·q} ƒµql
≥¬±ªqo又名金针菇 !朴菇 !冬菇 o是药食两用菌 o属伞
菌目 ª¤µ¬¦¤¯ ¶¨口蘑科 ×µ¬¦«²¯²°¤·¤¦¨¤¨ 小火焰属
Φλαµ µ υλινα真菌 ∀构菌广泛分布于中国 !日本 !俄
罗斯西伯利亚和小亚西亚以及欧洲 !北美洲 !澳大利
亚等地 ∀在我国 o北起黑龙江 o南至广东 o东起福建 o
西至四川的广大区域内 o均有构菌分布≈t ∀
构菌化学报道较少 o我们对构菌发酵物的菌丝
酒提物以及发酵液进行药理筛选 o发现两者均有抗
疲劳和改善学习记忆作用 o能明显延长小鼠断头后
喘息时间 ∀为此 o我们对构菌菌丝体 |x h乙醇提取
物的化学成分进行了研究共得到 us余个化合物 o已
报道了 x个甾体化合物 ot个核苷及 u个黄酮的结
构≈u ∀现报道 u个环二肽类化合物 !v个氨基酸及 u
个核苷类化合物的结构 ∀
1 仪器与材料
²¨ ·¬∏¶显微熔点测定仪 k未校正l ~ ° µ¨®¬±2
∞¯ ° µ¨2uwt型旋光仪 ~≥«¬°¤§½∏ ∂2uws型紫外光谱
仪 ~ ¤¥2uƒ 型 !¤¥¶³¨¦型质谱仪 ~
µ∏®¨ µ ° xss
型 !±²√¤xss型核磁共振仪 ∀薄层色谱硅胶 ƒuxw !
柱层色谱硅胶 为青岛海洋化工厂产品 ∀本课题
研究所用的构菌发酵菌丝体 o是本所王淑芳研究员
多年来在对多种构菌菌株进行筛选的基础上 o优选
≈收稿日期 ussv2sv2tx
≈基金项目 国家自然科学基金资助项目kvsszs|t{l
≈通讯作者 陈若芸 ר¯ } kstsl yvtyxvux ƒ¤¬} kstsl
yvstzzxz ∞2°¤¬¯}µ∏²¼∏±¦«¨ ± «²·°¤¬¯q¦²°
出具有高产和显著活性的菌株发酵而来 ∀
2 提取分离
构菌 Φ. ϖελυτιπεσ菌丝体 x ®ªo用 |x h乙醇加
热回流提取 o得浸膏 w{| ªo混悬于水后分别用醋酸
乙酯和正丁醇萃取 v次 o得醋酸乙酯部分 t|{ ªo正
丁醇部分 tsv ªo水液 utu ª∀醋酸乙酯部分经硅胶
柱层析分为氯仿 k{| ªl o醋酸乙酯kv{ ªl o丙酮 kts
ªl和甲醇 kx| ªlw个洗脱部分 ∀
氯仿部分 o用硅胶柱层析 o氯仿2甲醇k|zΒvl洗
脱 o得到化合物 tkux °ªl o化合物 ukus °ªl ∀正
丁醇部分 o用硅胶柱层析 o氯仿2甲醇kzΒvl洗脱 o得
到化合物yktws°ªl o化合物zkvss°ªl ~氯仿2甲醇
kyΒwl洗脱 o得到化合物 vkzws °ªl o化合物 wktws
°ªl o化合物 xkws °ªl ∀
3 结构鉴定
化合物 t 白色块晶k氯仿2丙酮l o °³ tyy ∗
ty{ ε o≈Α us⁄ p txv q|βk≤ os qux o¬± ∞· l o碘显色 ∀
∞2 ≥ µ / ζ }uttk n n t ousl ot|xkxl otyzkxl otxw
ktssl otuwkusl o{ykuxl ozskxsl ∀ k
µl¦°p t }
v u{s ou |ys ou {{s ot y|s ot yzs ot yvx ot wvs ∀
t 2 k≤⁄≤ v¯l ∆ }y qy{ kt o¥µ¶o2{l ow qtu ∗
w qttkt o° o2yl ow qst ∗ v q||kt o° o2|l o
v qys ∗ v qx{kt o° o2v¤l ov qxu ∗ v qxskt o° o2
v¥l ou qvw ∗ u qvvkt o° o2x¤l ou qsv ∗ u qsukt o° o
2x¥l ou qst ∗ u qsskt o° ots¤l ou qss ∗ t q||kt o
° o2w¤l ot q|s ∗ t q{{kt o° o2w¥l ot qzx ∗ t qxw
kt o° o2ttl ot qxv ∗ t qxskt o° o2ts¥l os q|z
kv o§oϑ y qv ½o2tvl os q|wkv o§oϑ y qv ½o
#{vst#
第 u{卷第 tt期
ussv年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o¶¶∏¨ tt
²√¨°¥¨µoussv
2tul ∀tv≤2 k≤⁄≤ v¯l∆}tzs qs{k≤2tl otyy qtxk≤2
zl ox| qssk≤2yl oxv qwzk≤2|l owx qw|k≤2vl ov{ qzwk≤2
tsl ou{ qtuk≤2xl ouw qzyk≤2ttl ouv qzvk≤2wl ouu qzv
k≤2tvl out quzk≤2tul ∀以上数据与 ¦¼¦¯²2k Ρ2³µ²2 Ρ2
¯¨ ∏l一致≈v o因此鉴定化合物 t为环2脯氨酸2亮氨酸
≈¦¼¦¯²2k Ρ2³µ²2 Ρ2¯ ∏¨l ∀结构见图 t ∀
化合物 u 白色针晶k氯仿2丙酮l o°³uws ∗ uwv
ε o≈Α us⁄ n xsβk≤ os qs| o¬± ≤⁄≤ v¯l o碘显色 ∀ ƒ
2
≥ µ / ζ }uuzk n n t os qxl otttktsl o|zkwsl o{v
kxxl oztkysl oxzktssl oxxk{sl owvk{xl ∀ k
µl
¦°p t }v uss ov sys ou |{s ou {{s ot yzs ot wxx ∀t 2
k≤⁄≤ v¯l∆}y quukt o¶ol oy qszkt o¶o
l ov q|{ ∗ v q|xkt o° o2yl ov q|v ∗ v q|ukt o° o
2vl ou qwt ∗ u qtxkt o° o2tχl ot q{| ∗ t q{zkt o
° o2tδ¤l ot qzz ∗ t qzxkt o° o2uδl ot qyt ∗ t qys
kt o ° o 2tδ¥l ot qx{ ∗ t qwxkt o° o2uχ¤l ot quu
∗ t quskt o° o2uχ¥l ot qsukv o§oϑ z qu ½o2
wχl os q|zkv o§oϑ y qv ½o2vδl os q|vkv o§oϑ
y qv ½o 2wδl os q|tkv o§oϑ z qu ½o2vχl ∀tv ≤2
k≤⁄≤ v¯l∆}ty{ qvsk≤2tl otyy qz{k≤2wl ox| qst
k≤2vl oxu qu|k≤2yl owv qysk≤2tδl ovz q{tk≤2tχl o
uw qu{k≤2uδl ouv qxsk≤2uχl ouv qstk≤2wδl out qztk≤2
vδl otw q|xk≤2wχl ott qy|k≤2vχl ∀以上数据与 ¦¼¦¯²2
k Ρ2¬¶²¯ ∏¨2 2¯ ∏¨l一致≈w o因此鉴定化合物 u为环2
异亮氨酸2亮氨酸≈¦¼¦¯²2k Ρ2¬¶²¯ ∏¨2 2¯ ∏¨l ∀结构见
图 t ∀
图 t 构菌中的 u个环二肽化合物的结构
q¦¼¦¯²2k Ρ2³µ²2 Ρ2¯ ∏¨l
q¦¼¦¯²2k Ρ2¬¶²¯ ∏¨2 Ρ2¯ ∏¨l
化合物 v 白色粉末 o °³ t|x ∗ t|z ε o碘显
色 ∀其薄层色谱和tv ≤2 谱与标准品一致 o因此
化合物 v鉴定为苯丙氨酸k³«¨ ±¼¯ ¤¯¤±¬±¨ l ∀
化合物 w 白色粉末 o °³ utv ∗ utw ε ∀其薄
层色谱和tv≤2 谱与标准品一致 o因此化合物 w
鉴定为丙氨酸k¤¯¤±¬±¨ l ∀
化合物 x 白色粉末 o °³ ut{ ∗ uus ε ∀其薄
层色谱和tv ≤2 谱与标准品一致 o因此化合物 x
鉴定为亮氨酸k¯ ∏¨¦¬±¨ l ∀
化合物 y 白色粉末 o°³uws ∗ uwv ε o紫外灯
下有暗斑 ∀ ƒ
2 ≥ µ / ζ }u{wk n n t otxl ousz
kwsl o t{xktssl o txuktsl o ttxkxsl ∀ k
µl
¦°p t }v v{{ ov tuu ot y|v ot w{v ot s{u o|sw ∀tv≤2
谱数据见表 t ∀以上数据与 ª∏¤±²¶¬±¨ 一
致≈x o因此鉴定化合物 y为鸟嘌呤核苷kª∏¤±²¶¬±¨ l ∀
化合物 z 白色粉末 o°³uwx ∗ uwy ε o紫外灯
下有暗斑 ∀ ƒ
2 ≥ µ / ζ }uy{k n n t ousl ouvu
k{sl ot{xk{xl o|v ktssl oxzkzxl ∀ k
µl¦°2t }
v vvt ov ttx ou |t{ ot yyw ot wzv ot sz{ o|sw ∀tv≤2
谱数据见表 t ∀以上数据与¤§¨ ±²¶¬±¨ 一致≈y o
因此鉴定化合物 z为腺嘌呤核苷k¤§¨ ±²¶¬±¨ l ∀
表 t 化合物 y oz的tv≤2 数据
² 化合物 y 化合物 z
u txv qyv txv qsx
w txt quy tw| qzx
x tty qyz tus qsx
y txy qyw txy q{x
{ tvx qxs tws qx|
tχ {y qvt {{ qx{
uχ zs qvv zt qvw
vχ zv qyx zw qts
wχ {x qtx {y qxz
xχ yt qvy yu qvx
≈参考文献
≈t 杨新美 q中国食用菌栽培学 q北京 }农业出版社 ot|{{ qw|s q
≈u ¬¨ o ²±ª ± • o ∏² ≠ ≤«q≥·∏§¬¨¶²±·«¨ ≤²±¶·¬·∏¨ ±·¶²©·«¨
¼¦¨ ¬¯¤ °µ²§∏¦¨§©µ²° ƒ µ¨° ±¨·¨§ ≤∏¯·∏µ¨ ²© Φλαµ µ υλινα ϖελυ2
τιπεσ k≤∏µ·q}ƒµql ≥¬±ªq±· §¨ ∏¶«ussv oxkwl }wsx q
≈v ¤§¨ ¬¯±¨ o ±§µ¨¤ o °«¬¯¯¬³ ≤ q ¨ º ¤±§ ±²º± ⁄¬®¨ 2
·²³¬³¨µ¤½¬±¨ ¶©µ²° ·«¨ ≤¤µ¬¥¥¨¤± ≥³²±ª¨ o ≤¤¯¼¬ ≤ ƒ q °²§¤·¼³¤q
¤·°µ²§ot||x ox{kul }ust q
≈w ×µ¬ª²¶ o ¼¨±¤≥ o µ¤¬¯¯ ·¨⁄q≤«¨ °¬¦¤¯ ≥·∏§¼ ²©¤ ƒ∏±ª∏¶≤∏¯2
·∏µ¨ ²© °«·²³·«²µ¤ ≤¬±±¤°²°¬q √¨ ≥²¦ ±∏¬° ¬¨o t||x ov|
kwl }t{w q
≈x 于德泉 o杨峻山 q分析化学手册 q第七分册 q北京 }化学工业出版
社 ot||| q|s{ q
≈y 徐文豪 o薛 智 o马建民 q冬虫夏草的水溶性成分 ) ) ) 核苷类化
合物的研究 q中药通报 ot||{ okwl }vw q
#|vst#
第 u{卷第 tt期
ussv年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o¶¶∏¨ tt
²√¨°¥¨µoussv
Στυδιεσ ον Χηεµιχαλ Χονστιτυεντσ οφ τηε Μψχελια φροµ
Φερµεντεδ Χυλτυρε οφ Φλαµ µ υλινα ϖελυτιπεσ
¬¨ o≤ ∞ ∏²2¼∏±
k±¶·¬·∏·¨ ²© ¤·¨µ¬¤ §¨¬¦¤o≤«¬±¨ ¶¨ ¦¤§¨ °¼ ²© §¨¬¦¤¯ ≥¦¬¨±¦¨¶
¤±§° ®¨¬±ª ±¬²± §¨¬¦¤¯ ≤²¯¯¨ ª¨ o
¨ ¬¬±ª tsssxs o≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ ¶·∏§¼ ·«¨ ¦«¨ °¬¦¤¯ ¦²±¶·¬·∏¨ ±·¶©µ²° ·«¨ °¼¦¨ ¬¯¤ ²© Φλαµ µ υλινα ϖελυτιπεσq Μετηοδ : × «¨ ¦²°2
³²∏±§¶º µ¨¨ ¬¶²¯¤·¨§ º¬·«¶¬¯¬¦¤ª¨¯¦²¯∏°± ¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¼ ¤±§·«¨¬µ¶·µ∏¦·∏µ¨¶º µ¨¨ ¨¯∏¦¬§¤·¨§²±·«¨ ¥¤¶¬¶²©¶³¨¦·µ¤¯ ¤±¤¯¼¶¬¶k o
∞2 ≥ oƒ
2 ≥ ot 2 otv≤2 l q Ρεσυλτ : ≥ √¨ ±¨ ¦²°³²∏±§¶ º µ¨¨ ¬§¨ ±·¬©¬¨§¤¶¦¼¦¯²2k Ρ2³µ²2 Ρ2¯ ∏¨l ktl o¦¼¦¯²2k Ρ2¬¶²¯ ∏¨2
Ρ2¯ ∏¨l kul o³«¨ ±¼¯ ¤¯¤±¬±¨ kvl o¤¯¤±¬±¨ kwl o¯¨ ∏¦¬±¨ kxl oª∏¤±²¶¬±¨ kyl o¤§¨ ±²¶¬±¨ kzl o Χονχλυσιον : × «¨ ¦²°³²∏±§¶t ∗ y º µ¨¨
¬¶²¯¤·¨§©µ²° ·«¨ °¼¦¨ ¬¯¤²© Φλαµ µ υλινα ϖελυτιπεσ©²µ·«¨ ©±¶··°¨q
[ Κεψ ωορδσ] Φλαµ µ υλινα ϖελυτιπεσ~¦¼¦¯¬¦§¬³¨ ³·¬§¨¶~±∏¦¯ ²¨¶¬§¨ ≈责任编辑 李 禾
海南狗牙花化学成分的研究
谭兴起 o陈海生 o徐从立 o柳润辉 o宣伟东
k第二军医大学 药学院 o上海 usswvvl
≈摘要 目的 }研究海南狗牙花根皮的化学成分 ∀方法 }柱色谱等方法进行分离 o 等波谱学方法进行结
构鉴定 ∀结果与结论 }分离得到 x个化合物 ok n l异落叶松脂醇 |2 Ο2Β2 ∆2葡萄糖苷 !环阿廷醇 !Β2香树脂醇乙酸酯 !
Β2谷甾醇 !胡萝卜苷 o均为首次从该植物中获得 ∀
≈关键词 海南狗牙花 ~化学成分 ~结构鉴定 ~环阿廷醇 ~k n l异落叶松脂醇 |2 Ο2Β2 ∆2葡萄糖苷
≈中图分类号 u{w qt ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussvltt2tsws2sv
海南狗牙花 Ερϖαταµια ηαινανενσισ ׶¬¤±ª的
根也叫单根木 !独根木 !山辣椒树 !艾角青 !鸡爪花
等 o分布于海南 !广东 !广西 !云南等地 ∀有清热解
毒 !降压 !消肿止痛之功效 o用于高血压病 !咽喉肿
痛 !风湿痹痛等疾病的治疗≈t ∀为了探究其药理作
用的物质基础及进一步挖掘其药用潜能 o我们对其
化学成分进行了研究 o现报道从中分离得到的 x个
化合物 ∀
1 仪器 !试剂与材料
天津分析仪器厂 ≠2u 型熔点仪 k温度未校
正 l ~∂¤µ¬¤± ∂ 2wss型核磁共振仪kt 2 o
tv≤2 均为 xss ½l ~ ¤·2 utu 磁式质谱仪
≈收稿日期 ussv2su2us
≈通讯作者 谭兴起 ר¯ }ksutluxszsv{z ∞2°¤¬¯}·¤±¬´ ¶²2
«∏q¦²°
k∞l ~±2ײ© °¬¦µ²质谱仪k∞≥l ~
µ∏®¨ µ ∂ ¦¨·²µuu
型红外光谱仪 ∀硅胶kuss ∗ vss目l为青岛海洋化
工厂产品 ~≥ ³¨«¤§¨ ¬2 us为 °«¤µ°¤¦¬¤公司产品 ~
反相硅胶 ≤t{为 µ¨¦®公司产品 ~其余试剂均为分析
纯 o购自上海化学试剂公司 ∀海南狗牙花由中国医
学科学院药用植物研究所海南分所药用植物室朱平
主任鉴定为 Ε . ηαινανενσισ的根皮 ∀
2 提取与分离
海南狗牙花根皮干燥粗粉kus 目lysx ªo以
|x h乙醇加热回流提取 o减压浓缩提取液得浸膏k{{
ªl o以 u h ≤¯捏溶 o过滤 o得沉淀 和酸水液 o酸水
液用氨水调至 ³ ts o过滤得沉淀
k总生物碱l和碱
水液 o碱水液用 u h ≤¯调至中性 o用正丁醇萃取后
浓缩 o合并沉淀 得非生物碱ku{ ªl ∀经硅胶 !≤t{
及 ≥ ³¨«¤§¨ ¬ 2us反复柱层析 o分离得到化合物 ´
#swst#
第 u{卷第 tt期
ussv年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o¶¶∏¨ tt
²√¨°¥¨µoussv