全 文 ：Μεδιχαλ Σχιενχεσ , Βειϕινγ Κεψ Λαβορατορψφορ Βραιν Αγινγ , Βειϕινγ , tsssxv , Χηιναl
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨·«¨ ©¨©¨¦·²©·«¨ ±¨ º ×µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨ ≤²°³²∏±§≥«¨ ±º∏ ≤¤³¶∏¯¨²±·«¨ §¤°¤ª¨ ²© ¼¯°³«²2
¦¼·¨ ⁄‘„ ¤±§ ¬¯³¬§³¨µ²¬¬§¤·¬²±¬± ³¨µ¬³«¨µ¤¯ ¥¯²²§²©µ¤·¶¬±§∏¦¨§¥¼ Β2¤°¼¯²¬§¬±­¨¦·¬²±q Μετηοδ : ׫¨ ¤±¬°¤¯ °²§¨¯ º¤¶°¤§¨ ¥¼¬±­¨¦·¬²±
²©Β2¤°¼¯²¬§uxp vx¬±·²«¬³³²¦¤°³∏¶²©µ¤·¶q⁄‘„ §¤°¤ª¨ ²© ¼¯°³«²¦¼·¨¶º¤¶° ¤¨¶∏µ¨§¥¼·«¨ ¶¬±ª¯¨¦¨¯¯ ª¨¯ ¨¯ ¦¨·µ²³«²µ¨¶¬¶k≥≤Š∞l ¦²°¥¬±¨ §
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≤¤³¶∏¯¨§¨¦µ¨¤¶¨§·«¨ µ¤·¨ ²©·«¨ ¦²° ·¨2¯¬®¨ ¦¨¯¯ o¦²° ·¨2¯¬®¨ ¦¨¯¯ ¯¨ ±ª«k×≤l o¤±§·¤¬¯ °²° ±¨·kאl ²© ¼¯°³«²¦¼·¨¶¬± ³¨µ¬³«¨µ¤¯ ¥¯²²§²©
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[ Κεψ ωορδσ] ×µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨ ≤²°³²∏±§~ „¯ ½«¨¬° µ¨. ¶§¬¶¨¤¶¨ ~Β2¤°¼¯²¬§~ ¼¯°³«²¦¼·¨ ⁄‘„ ~ ¬¯³¬§³¨µ²¬¬§¤·¬²±
≈责任编辑 古云侠 
水杉总黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用
王 芳t 3 o余恩欣u o刘惟莞v
kt q武汉大学 人民医院 药学部 o湖北 武汉 wvssys ~
u q湖北省药品检验所药理室 o湖北 武汉 wvssyw ~v q武汉大学 医学院 药理教研室 o湖北 武汉 wvssztl
≈摘要  目的 }观察水杉总黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用 ∀方法 }凝闭大鼠双侧椎动脉 w ∗ x «后 o夹
闭颈总动脉 vs °¬±o再灌注 |s °¬±o造成大鼠脑缺血再灌注损伤模型 o观察水杉总黄酮对脑组织中生化指标及脑电图
的影响 ∀结果 }缺血再灌注造成脑组织严重损伤 o脑组织中水 o‘¤n o ≤¤un含量及丙二醛k ⁄„l含量较对照组明显增
高 o而超氧化物歧化酶k≥’⁄l活力较对照组降低 o并伴有脑电图异常和脑组织结构病理性改变 ∀夹闭颈总动脉前 vs
°¬±¬³ux ∗ tss °ª#®ªp t水杉总黄酮能降低脑组织中水 o‘¤n o≤¤un含量及 ⁄„含量 o并提高 ≥’⁄活力 o对组织学检查及
脑电图也有所改善 ∀结论 }水杉总黄酮对脑缺血再灌注损伤具有保护作用 ∀
≈关键词  水杉总黄酮 ~脑缺血 ~再灌注损伤 ~≤¤un超载 ~超氧化物歧化酶
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswlsu2stz|2sv
近年来 o水杉作为一种药用资源开始受到重视 o
水杉总黄酮k·²·¤¯ ©¯¤√²±¨ ¶²© °¨ ·¤¶¨ ∏´²¶¬¤o׃l是从
杉科植物水杉k°¨ ·¤¶¨ ∏´²¶¬¤l叶中提得的有效成分 o
研究发现具有抗心律失常和抗心肌缺血 o抑制肥厚
心肌 ≤¤u n超载作用≈t ou  ∀已有研究显示 o脑缺血再
灌注损伤与细胞内 ≤¤u n超载 o氧自由基异常产生有
关≈v  ∀本实验旨在观察 ׃ 对急性脑缺血再灌注
损伤大鼠的保护作用 o并初步探讨其作用机制 o以期
对水杉的开发和临床应用提供实验依据 ∀
1 材料与方法
1 q1 药物及试剂 ׃ 是从杉科植物水杉叶中提
取的总黄酮k含量为 vu h l o由中国科学院武汉植物
≈收稿日期  ussv2sx2ts
≈通讯作者  3王芳 oר¯ }ksuzl{{swt|tt2{tyw o∞2°¤¬¯}¼∏±¬¤±¯¬±ƒ
¶²«∏q¦²°
研究所提供 o临用前以 x h 聚乙二醇配制成不同浓
度 ∀银杏叶提取物kª¬±®ª² ¥¬¯²¥¤ ¬¨·µ¤¦·o∞Š¥l o含银
杏黄酮 u| q{ h o银杏苦内酯 z qv h o购自四川广松制
药有限公司 ∀超氧化物歧化酶 k≥’⁄l !丙二醛
k⁄„l试剂盒购自南京建成生物制剂研究所 o批号
usstsvtt ∀
1 q2 实验动物 雄性 ≥⁄大鼠 o体重 uxs ∗ u{s ªo由
武汉大学医学院实验动物中心提供 ∀
1 q3 仪器 „„ p yzs原子分光光度计 o•  p yuss
型多道生理记录仪 o日本岛津公司 ∀
1 q4 模型的建立与给药 大鼠 50 只 o随机分为 x
组 o每组 ts只 }假手术组 ox h 聚乙二醇溶剂对照组 o
∞Š¥组 o׃ u个剂量组 ∀四血管结扎全脑缺血模
型的制备参考文献≈w  ∀大鼠 ¬³水合氯醛 wss °ª#
®ªpt后 o固定于立体定位仪 o电烧灼凝闭两侧椎动
#|zt#
第 u|卷第 u期
ussw年 u月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ u
ƒ ¥¨µ∏¤µ¼oussw
脉 o然后分离双侧颈总动脉并置套扣待用 ∀置电极
于大鼠额顶 o描记脑电图k∞∞Šl ∀手术后 w ∗ x «o待
大鼠完全清醒后 o试验动物分别¬³ ׃ ux otss °ª#
®ªpt o∞Š¥tss °ª#®ªpt或 x h聚乙二醇 ts °#®ªpt ∀
vs °¬±后扣闭两侧颈总动脉达 vs °¬±o松扣后再灌
注 |s °¬±∀假手术组同样手术 o但不阻断动脉 ∀
1 q5 检测指标 再灌注结束时迅速断头取出脑组
织 o去脑干和小脑 o将脑组织划/ n 0分为 w个部分 ov
份立即低温k p us ε l保存用于 ⁄„含量 !≥’⁄活性
和病理组织学检查 ot份用于测定脑组织水 o‘¤n o
≤¤un含量 ∀其中脑水分用干湿重法 o‘¤n o≤¤un含量
用火焰原子吸收分光光度法≈x  o邻苯三酚改良法≈y 
测定 ≥’⁄活性 o硫代巴比妥酸法≈z 测定 ⁄„含量 ∀
1 q6 统计学处理 实验数据以 ξ ? σ表示 o对 ∞∞Š
的影响采用 •¬§¬·分析 o其他采用组间 τ检验进行统
计学分析 ∀
2 结果
2 q1 ׃ 对脑缺血再灌注动物死亡率及 ∞∞Š的影
响 在整个缺血及再灌注期间 o溶剂对照组 !׃ ux
°ª#®ªpt组及 ∞Š¥tss °ª#®ªpt组分别有 u ot ot只动
物因缺血损伤引起动物死亡 ∀四血管结扎后大鼠
∞∞Š电压波幅变小 o脑电很快抑制变平 o按 ∞∞Š变
化程度分为 x级≈{  o即达到缺血前波幅 tss h 属 t
级 !zx h以上为 u级 ozx h ∗ ux h为 v级 oux h以下为
w级 o几乎呈等电位的为 x级 ∀其中溶剂对照组在夹
闭颈总动脉平均kvt ? tul ¶后 o∞∞Š变化均呈 x级 o
与此相对 o׃ ux otss °ª#®ªpt组以及 ∞Š¥tss °ª#
®ªpt组 ∞∞Š改变呈 x级的时间分别为kxu ? uvl ¶o
kx| ? utl¶和kxt ? tzl ¶o与溶剂组比较差异显著k Π
s qsx o或 Π s qstl o说明给药组缺血大鼠 ∞∞Š 变化
呈 x级出现较晚 ∀再灌注结束时 o溶剂组仍有 w只
大鼠 ∞∞Š电压在 x级 o而给药组中仅 ׃ ux °ª#
®ªpt有 t只大鼠的 ∞∞Š电压仍在 x级 o说明 ׃ 可
显著改善 ∞∞Š的恢复程度k见表 tl ∀
表 t ׃ 对大鼠脑缺血再灌注后 ∞∞Š幅度变化的影响k ξ ? σl
组别
剂量
r°ª#®ªpt
ν
缺血 vs °¬±
´ µ ¶ · ∏
再灌注 |s °¬±
´ µ ¶ · ∏
假手术组 p ts | t s s s ts s s s s
溶剂组 p { s s t w vtl s s t v wtl
׃ ux | s t w w sul s s x v tul
tss ts s u x v sul t x u u svl
∞Š¥ tss | s w u v sul s v v v sul
注 }与假手术组比较 tl Π s qst o与溶剂组比较 ul Π s qsx o vl Π s qst
2 q2 ׃ 对脑组织水 o‘¤n o≤¤un o⁄„含量及 ≥’⁄
活性的影响 再灌注后溶剂组脑组织水 o‘¤n o≤¤un o
以及 ⁄„含量均明显高于假手术组k Π s qsx o或
Π s qstl o׃ 组和 ∞Š¥组脑组织水 o‘¤n o≤¤u n o以
及 ⁄„含量明显低于溶剂组k Π  s qsx o或 Π 
s qstl∀而溶剂组脑组织 ≥’⁄活性低于假手术组k Π
 s qstl o׃ 和 ∞Š¥组脑组织 ≥’⁄活性明显高于溶
剂组k Π s qstl o与假手术组接近k见表 ul ∀
表 u ׃ 对大鼠脑缺血再灌注后生化指标变化的影响k ξ ? σl
组别
剂量
r°ª#®ªpt
ν 水r h
‘¤n
rΛ°²¯#ªpt
≤¤u n
rΛ°²¯#ªpt
⁄„
rΛ°²¯#ªpt
≥’⁄
r˜ #ªpt
假手术组 p ts zy qw ? u q| vt| ? v{ z qt ? t qx s qtx ? s qs| y qt ? t qv
溶剂组 p { {s qx ? u qtul wtx ? xtul ty qv ? w quul s quy ? s qtttl w qv ? t qtul
׃ ux | zz qt ? u q{wl vxy ? wtvl tt qx ? v q|vl s qt{ ? s qs| x qz ? t qtwl
tss ts zy q| ? v qtwl vv| ? v{wl ts qw ? v qywl s qtx ? s qs{vl y qu ? t qwwl
∞Š¥ tss | zz qu ? v qsvl vwv ? wxwl ts qu ? w qswl s qtx ? s qs|vl x q| ? t qvwl
注 }与假手术组比较 tl Π s qsx o ul Π s qst o与溶剂组比较 vl Π s qsx o wl Π s qst
2 q3 ׃ 对脑组织形态学改变的影响 缺血再灌
注造成神经元锥体细胞肿胀 o变形 o乃至核固缩 o核
溶解 o细胞坏死 o间质也变得疏松 ∀ ׃ 能显著减轻
这种损伤性改变 o使坏死细胞数目减少 o可见到较为
完整的锥体细胞 o间质也比较致密 ∀
3 讨论
脑缺血再灌损伤的发生机理涉及诸多方面 o
≤¤un超载与氧自由基的大量产生在其中扮演着重要
的角色 ∀本实验观察到脑缺血再灌注损伤后大脑皮
层 ≤¤u n累积 o⁄„含量增加 o与文献≈| 报道的结果
#s{t#
第 u|卷第 u期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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一致 o׃ 能明显降低缺血再灌注后脑组织的 ≤¤u n
和 ⁄„含量 o增强 ≥’⁄活性 o显示出抗 ≤¤u n超载及
抗氧自由基作用 ∀
脑水肿是脑缺血的主要并发症之一 o同时又是
加重脑缺血的原因 ∀由于缺血缺氧致使脑组织能量
耗竭 o细胞膜 ‘¤n2Žn泵功能障碍 o≤¤un2„×°酶活性
降低 o导致离子稳态失衡 o产生脑水肿 ∀ ׃ 能剂量
依赖性地减少缺血再灌注引起的钠 !水潴留 o减轻脑
水肿 o提示 ׃ 可能阻止脑缺血造成的细胞膜离子
转运紊乱 o从而防止细胞内的 ≤¤u n超载与细胞损伤 ∀
∞∞Š的变化及形态学检查也明确显示了 ׃ 对脑缺
血再灌注损伤的保护作用 o从而在电生理及形态学
方面证实了 ׃ 的脑保护作用 ∀
综上所述 o׃ 通过降低脑内 ≤¤u n含量 o减轻脑
水肿 o减少脂质过氧化反应 o改善脑电图 o缓解锥体
细胞的损伤坏死情况 o从多个方面显示了其对脑缺
血再灌注损伤的保护作用 o其机制与抗 ≤¤u n超载和
抗脂质过氧化作用有关 ∀此结果为临床应用 ׃ 防
治缺血性脑卒中提供了动物实验依据 ∀
≈参考文献 
≈t  程 虹 o刘惟莞 o陈 翔 o等 q水杉总黄酮抗实验性心律失常的
作用 q湖北医科大学学报 ot||| ousktl }u{ q
≈u  曾加雄 o刘惟莞 o石明健 o等 q水杉总黄酮对压力超负荷大鼠左
室肥厚的作用 q中国中药杂志 ousss ouxktsl }yuu q
≈v  ƒ¤µ¥¨µq׫¨ µ²¯¨²©¦¤¯¦¬∏°¬± ¦¨¯¯ §¨¤·«q Λιφε Σχι ot|{t ou|ktvl }
tu{| q
≈w  彭新琦 o可 君 q三重莨菪类药物在大鼠急性前脑缺血及再灌
注损伤中的作用 q中国药理学报 ot||u otvkwl }vxz q
≈x  赵卫国 o张天锡 o施爱芳 o等 q脑缺血脑水肿的实验研究 ) 钙在
脑缺血损伤中的作用 q中华神经精神科杂志 ot||t ouwktl }uz q
≈y  静天玉 o赵晓瑜 q用终止剂改进超氧化物歧化酶邻苯三酚测定
法 q生物化学与生物物理学进展 ot||x ouuktl }{w q
≈z  向 荣 q过氧化脂质硫代巴比妥酸分光光度法的改进 q生物化
学与生物物理学进展 ot||s otzkvl }uwt q
≈{  李盈盈 o王子灿 o李麟仙 q家兔急性不完全脑缺血模型和特点实
验研究 q中华神经精神科杂志 ot|{z ouskul }vst q
≈|  ≥¬¨°®²º¬¦½ ∞q …µ¤¬± ¬¨·µ¤¦¨¯¯∏¯¤µ¬²± ¦²°³²¶¬·¬²± ¤±§ ∞∞Š ¤¦·¬√¬·¼
©²¯ ²¯º¬±ª ts °¬±∏·¨¶ ¬¶¦«¨ °¬¤ ¬± ±²µ°² ¤±§ «¼³¨µª¯¼¦¨ °¬¦ µ¤·¶q
Στροκε ot|{t otukul }uvy q
Προτεχτιϖε εφφεχτσ οφ τοταλφλαϖονεσ οφ µετασεθυοσια ον χερεβραλ
ισχηεµια2ρεπερφυσιον ινϕυρψιν ρατσ
• „‘Š ƒ¤±ªt o ≠˜ ∞±2¬¬±u oŒ˜ • ¬¨2º¤±v
kt . ∆επτ οφ Πηαρµαχψ, Ρενµιν Ηοσπιταλ οφ Ωυηαν Υνιϖερσιτψ, Ωυηαν wvssys , Χηινα
u . ∆επτ οφ Πηαρµαχολογψ, ∆ρυγ Χοντρολ οφ Ηυβει , Ωυηαν wvssyw , Χηινα ;
v . ∆επτ οφ Πηαρµαχολογψ, Ωυηαν Υνιϖερσιτψ, Ωυηαν wvsszt , Χηιναl
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ²¥¶¨µ√¨·«¨ ³µ²·¨¦·¬√¨ ©¨©¨¦·¶²©·²·¤¯ ©¯¤√²±¨ ¶²© ° ·¨¤¶¨ ∏´²¶¬¤k׃l ²± ¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤2µ¨³¨µ©∏¶¬²±¬±­∏µ¼
¬±µ¤·¶q Μετηοδ : ׫¨ ¥¬¯¤·¨µ¤¯ √ µ¨·¨¥µ¤¯ ¤µ·¨µ¬¨¶²©µ¤·¶º µ¨¨ ²¦¦¯∏§¨§∏±§¨µ¤±¨ ¶·«¨¶¬¤o¤±§w ∗ x « ¤¯·¨µ·«¨ ¦¤µ²·¬§¤µ·¨µ¬¨¶²©µ¤·¶¬±·«¨
¦²±¶¦¬²∏¶¦²±§¬·¬²± º µ¨¨ ²¦¦¯∏§¨§©²µvs °¬±©²¯ ²¯º §¨¥¼ µ¨³¨µ©∏¶¬²±©²µ|s °¬±q׫¨ ©¨©¨ ¦·¶²©×ƒ ²±·«¨ ¦²±·¨±·¶²©º¤·¨µo‘¤n o≤¤u n ¬±
¦²µ·¨¬o °¤¯²±§¬¤¯§¨«¼§¨ k⁄„l ¦²±·¨±·¤±§¶∏³¨µ²¬¬§¨ §¬¶°∏·¤¶¨ k≥’⁄l ¤¦·¬√¬·¼¬± ¥µ¤¬± «¨ °¬¶³«¨µ¨¶o¤¶º¨¯¯ ¤¶·«¨ ∞∞Š ¤¦·¬√¬·¬¨¶º µ¨¨
²¥¶¨µ√ §¨q Ρεσυλτ : „©·¨µvs °¬±¬¶¦«¨ °¬¤¤±§|s °¬± µ¨³¨µ©∏¶¬²±o·«¨ ¦²±·¨±·¶²©º¤·¨µo‘¤n o≤¤un ¤±§ ⁄„ º µ¨¨ ¬±¦µ¨¤¶¨§o¤±§·«¨ ≥’⁄
¤¦·¬√¬·¼ º¤¶µ¨§∏¦¨§º¬·«¤¥±²µ°¤¯ ∞∞Š ¤¦·¬√¬·¼ ¤±§¬¶¦«¨ °¬¦¬±­∏µ¼¬±·«¨ ¥µ¤¬±·¬¶¶∏¨¶q׃ ux ∗ tss °ª#®ªp t¬³vs °¬± ¥¨©²µ¨ ·«¨ ¦¤µ²·¬§
¤µ·¨µ¬¨¶º µ¨¨ ²¦¦¯∏§¨§o§¨¦µ¨¤¶¨§·«¨ ¨¯ √¨¤·¨§º¤·¨µo‘¤n o≤¤un ¤±§ ⁄„ ¦²±·¨±·¶o¬±¦µ¨¤¶¨§·«¨ ≥’⁄¤¦·¬√¬·¼ oµ¨§∏¦¨§·«¨ ¬¶¦«¨ °¬¦¬±2
­∏µ¼ ²©¥µ¤¬±·¬¶¶∏¨ o¤±§³µ²°²·¨§·«¨ µ¨¦²√ µ¨¼ ²©∞∞Š ¤¦·¬√¬·¬¨¶qΧονχλυσιον : ׃ «¤¶¤³µ²·¨¦·¬√¨ ©¨©¨¦·²± ¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤2µ¨³¨µ©∏¶¬²±¬±2
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≈责任编辑 古云侠 
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