全 文 ：高效液相色谱法测定花蕾期茵陈中
vχ2甲氧基蓟黄素的含量
张启伟 o张永欣 o张 颖 o梁国刚
k 中国中医研究院 中药研究所 o北京 tsszss l
≈摘要 目的 }建立花蕾期茵陈中 vχ2甲氧基蓟黄素的含量测定方法 ∀方法 }样品用甲醇回流提取 o提取液经
聚酰胺小柱净化 ∀ ⁄≥ 柱 o甲醇2乙腈2s qx h醋酸水溶液kuwΒt|Βxzl为流动相 o检测波长 vwz ±° ∀结果 }vχ2甲氧
基蓟黄素获良好分离 os qt ∗ s q{ Λª线性关系良好kρ s q|||{l o加样回收率为 tst qv h o重现性为 v qsw h ∀结
论 }该方法可为花蕾期茵陈及其制剂的质量控制提供借鉴 ∀
≈关键词 花蕾期茵陈 ~vχ2甲氧基蓟黄素 ~高效液相色谱法
≈中图分类号 u{w qt ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukusstlst2ssuv2sv
茵陈为常用中药 o主要用于治疗黄疸及传染性
黄疸型肝炎 ∀t|{x年以前各版 5中国药典6仅收载
滨蒿 Αρτε µισια σχοπαρια • ¤¯§¶·q ετ ¬·q和茵陈蒿
Α . χαπιλλαρισ ׫∏±¥q的幼苗 ∀从 t||s 年版5中国
药典6一部又收入上述两个品种秋季花蕾长成时的
样品 ∀日本学者对花期样品进行了较深入的研究 o
但工作集中在茵陈蒿 t个品种≈t ∀滨蒿花期样品植
化和分析方面的工作报道较少≈u ov ∀因此 o我们对
滨蒿花蕾期样品进行了化学成分研究 o从中分离出
vχ2甲氧基蓟黄素 ~x ovχ owχ2三羟基2y oz o二甲氧基黄
酮 ~x oz owχ2三羟基2y ouχ oxχ2三甲氧基黄酮和蓟黄素 ∀
前 v个成分为首次从该植物中分离发现 ∀经药理实
验证明 o上述 w种成分对四氯化碳损伤的原代培养
大鼠肝细胞具有增强活力的作用 o有的还具有降低
谷丙转氨酶的作用 ∀在植化和药理工作基础上我们
建立了花蕾期样品中 vχ2甲氧基蓟黄素的含量测定
方法 ∀为茵陈花蕾期样品及其制剂质量控制提供可
借鉴的分析方法 ∀
1 仪器与试药
• ¤·¨µ¶yss型四元液相色谱泵 o||y型光电二极
管阵列检测器 o¬¯¯ ±¨±¬∏° usts色谱管理系统 ∀
生药样品 }x份于 t|||年 {月底至 |月初采集
于北京地区 o经本所生药室冯学锋鉴定为滨蒿
≈收稿日期 usst2su2us
≈基金项目 国家重点科技攻关项目k|y2|sv2su2sul
≈作者通讯 电话 }kstsl ywstwwtt2u{w{ 传真 }kstsl
ywstv||y
Αρτε µισια σχοπαρια • ¤¯§¶·q ετ ¬·q的干燥地上部
分 ~u份日本市售 o经谢宗万研究员鉴定为茵陈蒿
Α . χαπιλλαρισ ׫∏±¥q的花及茎 ∀
vχ2甲氧基蓟黄素 o从滨蒿花蕾样品中分离得到 o
经 ∂ o ≥ o t 确定结构 o且与文献报道一
致 ∀采用 °≤ 分离 o面积归一化法计算 vχ2甲氧基
蓟黄素含量为 || q|t h o可做定量之用 ∀
聚酰胺粉k柱层析用lvs ∗ ys目 o甲醇k l o乙
腈k°≤l o纯水 o其他试剂均为分析纯 ∀
2 方法与结果
2 q1 色谱条件 ²µ¥¤¬ ≥
2⁄≥ x Λ° w qy °° ≅
txs °° o柱温 vx ε o流动相为甲醇2乙腈2s qx h醋
酸水溶液kuwΒt|Βxzl o检测波长 vwz ±° o流速 s qz
°¯ #°¬±p t ~进样量 us Λ∀
在此条件下 vχ2甲氧基蓟黄素和样品 °≤ 图
谱见图 t o样品中 vχ2甲氧基蓟黄素峰经纯度检查符
合标准 ∀
2 q2 样品溶液的制备方法 取样品粉末kws目l
约 s qv ªo精密称定 ∀准确加入甲醇 tx °o称重 o水
浴回流 vs °¬±o取出 o放至室温 o补至原重 o混匀 o滤
过 ∀精密量取续滤液 u °置蒸发皿中 o加入聚酰胺
粉 s qx ª拌匀 o蒸干 ∀上至聚酰胺小柱ks qx ªo{ °°
≅ tx °°l o先用石油醚kvs ∗ ys ε lux °冲洗 o弃
去 ∀再用氯仿 ws °洗脱 o并将蒸发皿壁上用氯仿 o
必要时加少量甲醇 o洗净 o溶液加在柱上 ∀收集氯
仿洗脱液 o水浴蒸干 ∀用甲醇溶解 o定量转移 u °¯
量瓶中 o定容 o摇匀 o滤过 o即得 ∀
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第 uz卷第 t期
ussu年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²qt
¤±qoussu
图 t vχ2甲氧基蓟黄素和样品的高效液相色谱图
qvχ2甲氧基蓟黄素
q样品
2 q3 样品测定 将对照品溶液ktx Λª# °p tl和
样品溶液注入液相色谱仪 o采用外标一点法计算含
量 ∀测定了 z批样品 o结果见表 t ∀
表 t 花蕾期茵陈中 vχ2甲氧基蓟黄素测定结果k ν vl
批号 花蕾r h 茎r h 样品r h
||s{uz⁄ s qtsx s qstsz s qsw|{tl
||s{u{≠ s qsuzz s qssu|| s qstvztl
||s{vs≠ s qsxxw s qsswu| s qsvtttl
||s|su÷ s qs{t| s qsts| s qsxywtl
||s|su÷ × s qsxu| s qss{{w s qsvywtl
花k日本l s qsuy|
花和茎k日本l s qstzw
注 }tl样品中含量是根据花蕾和茎的含量及重量比计算得出
3 方法学考察
3 q1 精密度试验 对照品溶液连续进样 y次 o峰
面积分别为 tv|tv{x otvzwx|w otv{xtxx otvzvz|{ o
tv{xyzw otv{vuz{ o ≥⁄ s qxs h ∀
3 q2 线性范围考察 精密称取 3χ2甲氧基蓟黄素
u qsu °ªo加 w滴二甲基亚砜使溶解 o然后用甲醇稀
释分别配成每 °含x qsx ots qt ous qu ovs qv o
ws qw Λª的溶液 ∀分别进 us Λo以进样量为自变量
k Ξ) ,以峰面积为因变量( Ψl o求得回归方程为 } Ψ
wz|{sss Ξ n t{wss , ρ s q|||{ ∀说明对照品进
样量在 s qt ∗ s q{ Λªo进样量与峰面积呈线性 o且截
距很小 o采用外标一点法定量 ∀
3 q3 样品溶液的稳定性试验 样品溶液在 s ot o
u ov ow oy o{ «测定 o计算含量 ∀测定结果表明样
品溶液在 { «内稳定 ∀
3 q4 重现性试验 取一批样品称重 y份 o分别依样
品溶液制备方法操作 ∀测定结果为s qsxvx h o
s qsxws h os qsxux h os qsxvx h os qsxws h o
s qsw|{ h o ≥⁄ v qsw h ∀
3 q5 加样回收试验 称取已知含量样品 x份 o分
别加入 vχ2甲氧基蓟黄素 o依样品溶液制备方法操
作 ∀测定结果见表 u ∀
4 结果与讨论
4 q1 色谱条件的选择 有学者认为差 t个甲氧基
的黄酮极难分离≈w ∀为了将 vχ2甲氧基蓟黄素与蓟
表 u vχ2甲氧基蓟黄素加样回收试验结果
样品称量r°ª 样品中含量r°ª 测定量r°ª 回收率r h 平均回收率r h ≥⁄r h
tx| qty s qtyzt s qvutx tsu qv
twy qsz s qtxvw s qvs{v tsu qy
tx{ qw| s qtyyw s qvty{ || qy tst qv u qws
twz qxt s qtxw| s qvtut tsw qt
twy quv s qtxvx s qvsty |{ qt
注 }样品含量为 s qtsx h ~加入量均为 s qtxts °ª
黄素及干扰成分分离 o我们系统地筛选了甲醇2乙腈2
水三元体系的不同比例 o并考察了流动相酸碱性和
柱温的影响 o确立文中使用的色谱条件 ∀
4 q2 样品溶液的制备 根据 vχ2甲氧基蓟黄素的溶
解性质 o选择比较了甲醇 o丙酮 o乙醇 v种提取溶剂 o
并考察了回流提取和超声处理时间 o最终确立用甲
醇回流提取 vs °¬±的提取条件 ∀
为了排除其他成分对 vχ2甲氧基蓟黄素峰的干
扰 o采用聚酰胺柱进行样品溶液的净化 ∀考察了洗
脱溶剂种类和体积 o建立了样品净化的参数 ∀
vχ2甲氧基蓟黄素在茎中含量较低 o因此在含量
测定中采取增加称样量并增加柱上样体积的措施 ∀
4 q3 测定结果表明 }vχ2甲氧基蓟黄素在花蕾和茎
中含量差异较大 o花蕾中含量比茎枝中含量高约 y ∗
tu倍 o样品含量亦有一定差异 o最大者约差 v倍 ∀
≈致谢 谢宗万研究员 !冯学锋帮助鉴定药材 ~肖永庆
研究员指导鉴定结构 ~周钟鸣研究员 o熊玉兰副研究员提供
药理实验结果 ∀
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o²qt
¤±qoussu
≈参考文献
≈t 曾美怡 o张启伟 o姚三桃 o等 q茵陈的化学成分和质量评价研究 q
国外医学#中医中药分册 ot|{z o|kyl }t q
≈u 张德志 o王瑞检 q滨蒿化学成分研究 q广东药学院学报 o
t||z otvkvl }tww q
≈v 郑维发 o谭仁祥 o刘志礼 o等 q八种蒿属植物石油醚提取物中萜
类成分分析 q南京大学学报k自然科学l ot||y ovukwl }zsy q
≈w ∂ ≤¤¶·¨¨¯¨o ¬¨ª¨ µo ≤ ƒ ∂¤± ≥∏° µ¨¨ q ≥ ³¨¤µ¤·¬²± ²©
ƒ¯ ¤√²±²¬§¶ ¥¼ √¨ µ¨¶¨§2³«¤¶¨ ¬ª«2³¨ µ©²µ°¤±¦¨ ¬´∏¬§ ≤«µ²2
°¤·²ªµ¤³«¼ q ≤«µ²°¤·²ªµot|{u ouwsktl }{t q
∆ετερµινατιον οφ Χιρσιλινεολιν Ηερβα Αρτεµισιαε Σχοπαριαε
Χολλεχτεδ ιν Αυτυµ ν βψ ΗΠΛΧ
±¬2º ¬¨o ≠²±ª2¬¬±o ≠¬±ªo ∏²2ª¤±ª
k ±¶·¬·∏·¨ ²© ≤«¬±¨ ¶¨ ¤·¨µ¬¤ §¨¬¦¤ o≤«¬±¤ ¦¤§¨ °¼ ²© ×µ¤§¬·¬²±¤¯ ≤«¬±¨ ¶¨ §¨¬¦¬±¨ o
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε:ײ ¶¨·¤¥¯¬¶«¤ ∏´¤±·¬·¤·¬√¨ ° ·¨«²§©²µ§¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²©¦¬µ¶¬¯¬±¨ ²¯ ¬± µ¨¥¤ µ·¨°¬¶¬¤¨ ≥¦²³¤µ¬¤¨ ¦²¯¯¨ ¦·¨§
¬± ∏·∏°±q Μετηοδ : ≥¤°³¯¨ º¤¶ ¬¨·µ¤¦·¨§ º¬·« ° ·¨«¤±²¯ o¤±§ ¦¯ ¤¨±¨ § ∏³ º¬·« ³²¯¼¤°¬§¨ ¦²¯∏°± q ⁄≥ ¦²¯∏°± º¤¶∏¶¨§ º¬·«
° ·¨«¤±²¯2¤¦¨·²±¬·µ¬¯¨ 2s qx h ¤¦¨·¬¦¤¦¬§¶²¯∏·¬²± kuwΒt|Βxzl ¤¶°²¥¬¯¨ ³«¤¶¨ q ⁄¨ ·¨¦·¬²± º¤√¨¯ ±¨ª·« º¤¶vwz ±° q Ρεσυλτ : ≤¬µ¶¬¯¬±¨ ²¯
¬±¶¤°³¯¨¶²¯∏·¬²± º¤¶º¨¯¯¶¨³¤µ¤·¨§q¬±¨ ¤µ¬·¼ ²©¦¬µ¶¬¯¬±¨ ²¯ º¤¶ª²²§k ρ s q|||{ l¬±µ¤±ª¨ ²©s qt ∗ s q{ Λªq׫¨ ¤√ µ¨¤ª¨ µ¨¦²√2
µ¨¼ º¤¶tst qv h o ≥⁄ ²©µ¨³¨ ¤·¤¥¬¯¬·¼ º¤¶v qsw h q Χονχλυσιον : ׫¬¶ ° ·¨«²§¦¤± ¥¨ ∏¶¨§©²µ ∏´¤¯¬·¼ ¦²±·µ²¯ ²© µ¨¥¤ µ·¨°¬¶¬¤¨
≥¦²³¤µ¬¤¨ ¦²¯¯¨ ¦·¨§¬± ¤∏·∏°± ¤±§¬·¶³µ¨³¤µ¤·¬²±¶q
[ Κεψ ωορδσ] µ¨¥¤ µ·¨°¬¶¬¤¨ ≥¦²³¤µ¬¤¨ ¦²¯¯¨ ¦·¨§¬± ¤∏·∏°±~¦¬µ¶¬¯¬±¨ ²¯ ~ °≤
≈责任编辑 王康正
不同来源滇白珠中木脂素苷的含量测定
马小军t o赵 玲 o赵玉娟 3 o杜程芳t o郑俊华t o陈新滋u
kt q北京大学 药学院天然药物学系 o北京 tsss{v ~
u q香港理工大学 应用生物及化学科技学系l
≈摘要 目的 }测定滇白珠中木脂素苷的含量 o探讨评价滇白珠质量的方法 ∀方法 }高效液相色谱法 ∀色谱柱
为 µ²°¤¶¬¯ ≤t{ks qw ¦° ≅ ux ¦°l o流动相为甲醇2乙腈2水kvsΒxΒyxl o波长 uus ±° o外标法 ∀结果 }进样量与峰面积
线性关系良好k⁄t o⁄u o⁄w分别为 ρt s q|||z oρu s q||||和 ρw s q||||l ∀ ⁄t平均回收率为 |{ q| h o ≥⁄ u qy h ∀
不同产地药材木脂素苷k⁄l含量不同 o贵阳 !广西金秀县和昆明 ⁄平均测定值分别是 }us{ q{ otx{ qu otxw q{ °ª#
ktssªlp t ∀小范围采集样品 ⁄含量基本稳定 o其变化幅度明显小于不同分布地区的差异 ∀嫩茎比枯老茎 ⁄总
含量高 t倍 o采收时留嫩去老方可保证疗效 ∀结论 }此方法简便 !可靠 o可以作为评价滇白珠质量的参考方法 ∀
≈关键词 滇白珠 ~药材质量 ~比较
≈中图分类号 u{w qt ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukusstlst2ssux2sv
滇白珠 Γαυλτηεριαλευχοχαρπα √¤µq ψυννανενσισ
≈收稿日期 usst2s|2tx
≈作者通讯 电话 }kstslyu{|sy|u 传真 }kstslyu{|sy|u ∞2
°¤¬¯}¬°¤ ³∏¥¯¬¦q¥·¤q±¨ ·q¦±
3 中国林业科学院森林环境研究所 o北京 tsss|v
kƒµ¤±¦«ql × q q¶∏ i q≤ qƒ¤±ª是治疗风湿病的
民间药 o目前还没有评价质量的定量分析方法 o但已
进行过初步化学成分和药理活性追踪研究≈t ∗ w o发
现 k n l2¯ ¼²±¬µ¨¶¬±²¯2uΑ2 Ο2Α22¤µ¤¥¬±²³¼µ¤±²¶¬§¨
k⁄tl ok p l2xχ2甲氧基异落叶松树脂醇2uΑ22Β2⁄2吡
#xu#
第 uz卷第 t期
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¤±qoussu