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Λαρδιζαβαλαχεαε ©¤°¬¯¼ ¨qªq Ακεβιατριφολιατα k׫∏±¥ql ²¬§½q√¤µqαυστραλισk⁄¬¨ ¶¯l «¨§k× ∂l §²±. ·¦²±·¤¬± ¤µ¬¶·²¯²¦«¬¦¤¦¬§
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[ Κεψ ωορδσ] ∏·²±ª~©¤°¬¯¬¨¶~¦²°³¤µ¨
≈责任编辑 袁桂京
松果菊中有效成分菊苣酸的含量测定
王 弘 o刘文芝 o鲁晓蕾 o陈世忠 o艾铁民
k北京大学 药学院 o北京 tsss{vl
≈摘要 目的 }通过测定松果菊中菊苣酸的含量 !分析松果菊有效成分的变化规律 ∀方法 }采用反相 °≤
法测定 ∀结果 }松果菊根的菊苣酸含量是 x月的幼苗期最高 o花的菊苣酸含量是 z月中旬的盛花期最高 o茎的菊苣
酸含量普遍偏低 ~地上部分药材的菊苣酸含量是 z月中旬的盛花期最高 ∀结论 }建立了稳定 !可靠的菊苣酸的含量
测定方法 ∀松果菊中菊苣酸的含量变化规律对于确定药材的药用部位及最佳采收期具有指导意义 ∀
≈关键词 松果菊 ~菊苣酸 ~含量 ~ °≤
≈中图分类号 u{w qt ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukussulsy2swt{2sv
松果菊为菊科松果菊属 Εχηιναχεα植物松果菊
Ε . πυρπυεα ²¨ ±¦«的干燥地上部分 ∀原产北美
洲 o历史上是印地安人的传统药材 ∀近年来由于其
具有较好的免疫增强作用而在德国 !加拿大 !美国等
国家得到广泛应用 o成为国际草药市场十大流行草
药之一≈t ou ∀松果菊全草中含有菊苣酸成分 o具有
增强免疫功能 !抗炎作用 o并具有抑制透明质酸酶 o
保护胶原蛋白 ¶的作用≈v o是松果菊药材在国际市
场上评价其质量优劣的指标性成分≈w ∀我们通过
对国产松果菊的系统研究 o建立了简便 !快速 !稳定
可靠的菊苣酸的 °≤ 含量测定方法 o并对松果菊
中菊苣酸在植物体中不同器官及不同时期的含量变
化规律进行了研究 ∀该研究对于确定松果菊的药用
≈收稿日期 usst2s|2tt
≈基金项目 国家中医药管理局重大科技开发项目≈国中医药
发kusstlts号
≈通讯作者 电话 }kstslyus|txx| 传真 }kstslyus|uy{x
部位和最佳采收期具有十分重要的意义 ∀
1 仪器 !试剂 !样品
岛津 ≤2ts× ∂ °液相色谱系统 o≤2ts× ∂ °
泵 o≥°⁄2 ts ∂ 型二极管阵列紫外可见检测器 ∀
色谱柱 }≤±¶¨µ·¶¬¯ ⁄≥2v 柱kx Λ° ow qy °° ≅ uxs
°°l ∀
乙腈为色谱纯试剂 o超纯水k北京大学公卫学院
制备l o其他试剂为分析纯 ∀
菊苣酸对照品由本研究室分离纯化并鉴定结
构 o纯度 |{ h ∀
样品 usst2sx ∗ usst2s| 采自北京郊区的 u 年
生松果菊 Ε . πυρπυεαo经低温干燥粉碎过 ws目筛 o
标本由艾铁民教授鉴定 ∀
2 实验部分
2 q1 色谱条件 检测波长 }经参考文献及实验 o确
定菊苣酸在vuy±°处有最大吸收 ~流动相 }乙腈2
s qxx h磷酸溶液kv{Βyul ~流速 }t °# °¬±p t ~柱
温 }室温 ∀
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第 uz卷第 y期
ussu年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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2 q2 稳定性考察 精密称取菊苣酸对照品 u qs
°ªo用甲醇2s qx h磷酸kwΒtl溶解并定容于 ts °
容量瓶中 o于 s ot ou ow oy o{ ots «精密吸取 ts Λ注
入液相色谱仪 o按上述色谱条件进行测定 o峰面积积
分值的平均值为 tzztvwy o其 ≥⁄为 s qzw h ∀结果
表明菊苣酸在 { «内稳定性较好 ∀
2 q3 线性关系考察 精密称取菊苣酸对照品 u
°ªo置 ts °ª量瓶中 o用甲醇2s qx h磷酸kwΒtl溶解
并稀释至刻度 o精密吸取 w qs oy qs o{ qs ots qs otu qs
Λ注入液相色谱仪中 o按上述色谱条件测定峰面积
积分值 o以菊苣酸量为纵坐标 o以峰面积积分值为横
坐标 o绘制标准曲线 o计算回归方程 Ψ u .s ≅ tsp z
Ξ p s .ss{y , ρ s q|||| ∀试验表明菊苣酸在 s qty
∗ s qw{ Λª具有良好的线性关系 ∀
2 q4 精密度试验 精密吸取上述对照品溶液 o重复
进样 x次 o测定 ∀菊苣酸峰面积积分值的平均值为
t zzx ys| o其 ≥⁄为 s qu h ∀
2 q5 重现性试验 取相同的样品 x份 o精密称定 o
按供试品溶液制备方法制备样品溶液 o按上述色谱
条件测定 o平均含量为 t qtt h o其 ≥⁄为 v qv h ∀
2 q6 回收率试验 采用加样回收法 o取已知含量
的样品分别添加菊苣对照品 o按样品制备方法制备
供试液 o按上述色谱条件测定 o计算回收率 o结果见
表 t ∀
表 t 回收率测定结果k ν vl
样品量
r°ª
加入量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
r h
ξ
r h
≥⁄
r h
s quut{ s qtwst s qvyyv tsu qs
s quuuy s qtwst s qvywz tss q|
s quux| s qtwst s qvx{w |y qy || q| u qwx
s quutt s qtwst s qvyxz tsu qs
s quuvt s qtwst s qvx|s |{ qt
2 q7 供试品溶液的制备与测定 取各样品粉末约
s qw ªo精密称定 o置具塞三瓶中 o精密加甲醇2s qx h
磷酸kwΒtl溶液 xs °o称定重量 o超声提取 ws °¬±o
放冷 o再称定重量 o加提取溶剂补足减失的重量 o摇
匀 o滤过 o取续滤液 x °置 ts °量瓶中 o加提取
溶剂稀释至刻度 o摇匀 o用 s qwx Λ°微孔滤膜过滤 o
即得 ∀分别精密吸取上述各供试品溶液 x Λo注入
液相色谱仪 o测定峰面积积分值 o用外标法根据峰面
积积分值计算含量 o结果见表 u o图 t o图 u ∀
表 u 松果菊不同生长时间菊苣酸含量k ν vl h
采收日期
各部位含量
根 茎 叶 花
地上部分含量
sx2ut幼苗期 t qts t qy| t qy|
sy2sw幼苗期 s q{v s quv t qxw t qv{
sy2t{苗期 s q|z s qux t qyv t qu|
sz2sv初花期 s q{y t qtx s qtv t qz{ s qy|
sz2ty盛花期 s q|s s qwv t q{w u qtx t qsx
sz2vs花期 s q{s s qtw t qyt t q{v s q{y
s{2tv花后期 s qwz s qtw t qtt t qwt s qyw
s{2u{果期 s qxu s quv s q{t s qwt s qv|
s|2tu花枯期 s q|{ s quu s qz| s qv{
s|2u{花枯期 s qyu s qu{ s qzz s qwt
图 t 菊苣酸对照品 °≤ 图谱
t q菊苣酸k图 u 同l
图 u 松果菊地上部分药材的 °≤ 图谱
3 讨论
3 q1 在参考文献报道测定菊苣酸含量测定实验中 o
经常出现含量不稳定的问题 o经我们试验研究发现
菊苣酸在提取测定中如果处理不当极易分解 ∀通过
对松果菊的系统研究及菊苣酸含量测定方法学研究
解决了这一问题 o建立了稳定 !可靠的 °≤ 菊苣
酸含量测定法 ∀在研究中重点比较了甲醇 !甲醇2
水 !甲醇2磷酸溶液等不同溶剂的提取稳定性效果 o
结果以甲醇2磷酸溶液为溶剂提取 o菊苣酸稳定性最
好 o故本文选用甲醇2s qx h磷酸kwΒtl为提取溶剂 ∀
3 q2 对 v种不同提取方法 o即冷浸法 !超声提取法 !
回流提取法进行了考察 o结果证明以超声提取法提
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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取较完全 o提取率最高 ∀考察了提取溶剂用量和超
声提取时间对提取的影响 o其中以样品 s qw ªo加入
甲醇2s qx h磷酸kwΒtlxs °o超声提取 ws °¬±效果
较好 ∀
3 q3 在色谱条件选择试验中曾采用乙腈2s qux h
磷酸溶液kuuΒz{l !乙腈2s qxx h醋酸溶液kuxΒzxl !
乙腈2s qxx h磷酸溶液kv{Βyul等为流动相 o结果以
乙腈2s qxx h磷酸溶液kv{Βyul为流动相 o分离效果
好 !重现性强 o故被本文选用 ∀
3 q4 研究结果表明 o松果菊中菊苣酸含量随着生
长期不同呈规律性变化 ∀其中根的菊苣酸含量是 x
月的幼苗期最高 o花和叶菊苣酸含量是 z月中旬的
盛花期最高 ~茎的菊苣酸普遍偏低 ~地上部分药材的
含菊苣酸含量是 z 月中旬的盛花期最高 ∀有文献
≈x 报道松果菊根中菊苣酸含量较高 o叶和茎含量
少 o常以根入药 ∀经我们研究表明松果菊全草均含
有菊苣酸 o其中花和叶的含量较高 o尤以 z月盛花期
最高 ∀又如表 u结果所示 o其中 z月盛花期地上部
分药材菊苣酸含量最高 oy月地上部分中菊苣酸含
量也较高 o但因植株尚未长大 o产量过低 ∀由于该植
物为多年生草本 o进入冬季地上部分枯萎 o次生代谢
逐渐停止 o而地下部分菊苣酸逐渐累积增多 o次年萌
发新的地上部分 o可被多次采收 o因此药材来源应以
z月中旬的盛花期地上部分为主 ∀本试验用样品仅
为 u年生松果菊植株 o不同生长年限植株的菊苣酸
含量变化情况有待进一步研究 ∀
≈参考文献
≈t 肖培根 q国际流行的免疫调节剂 ) ) ) 紫锥菊及其制剂 q中草
药 ot||y ouzktl }wy q
≈u 陆顺芳 o刘 湘 q美国植物药市场概况 q国外医药2植物药分
册 ot||| ottkxl }uty q
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∆ετερµινατιον οφ Χιχηοριχ Αχιδ ιν Εχηιναχεα πυρπυεα
• ²±ªo • ±¨2½«¬o ÷¬¤²2¯ ¬¨o ≤ ∞≥«¬2½«²±ªo ׬¨2°¬±
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¦«²µ¬¦¤¦¬§q Μετηοδ : √¨ µ¨¶¨ °≤ ° ·¨«²§ º¤¶∏¶¨§q Ρεσυλτ : × «¨ °¤¬¬°∏° ¦¬¦«²µ¬¦¤¦¬§¦²±·¨±·²©·«¨ µ²²·¶²¦¦∏µ¨§¬± ¶¨ §¨¯¬±ª
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≈责任编辑 袁桂京
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